CC BY
40
Аграрный вестник Урала №4 (83), 2011 г.^^ЦЦ^-
Ветеринария "V
получавших как Омез®, так и Фамотидин®, отмечалось достоверное по сравнению с интактными животными и с соответствующей группой с НПВП-гастропатией увеличение размеров париетальных клеток на фоне недостоверного изменения средних размеров их ядер, что отразилось на изменении ядерно-цитоплазматического отношения в этих группах.
Выводы.
Развитие НПВП-гастропатии у экспериментальных животных проявляется формированием сосудистых расстройств,
аномальную пролиферацию эпителиоцитов в желудочных ямках и аномальную секрецию муцина MUC 5AC в эпителии желез.
Применение антисекреторных средств (ингибиторов протонной помпы и блока-торов Н2-рецепторов гистамина) способствует восстановлению целостности СОЖ, нивелированию сосудистых расстройств, нормализации зонального распределения муцинов, но приводит к гипертрофии париетальных клеток (особенно при использовании ингибиторов протонной помпы) и нарушению взаимоотношений в системе апудо-цитов.
Литература
1. Дроздов В. Н. Гастропатии, вызванные нестероидными противовоспалительными препаратами: патогенез, профилактика и лечение // Consilium medicum. 2005. Т. 7. № 1.
2. Осадчук М. А., Пахомова А. Л., Кветной И. М. Хронический гастрит с функциональной диспепсией: патогенетические особенности клинических проявлений // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 2002. № 5. С. 35-39.
3. Раскин Г. А. Онкоген HER2 в раке молочной железы: механизм влияния на поведение опухоли (сравнительное количественное иммуногистохимическое исследование) : автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Казань, 2007. 24 с.
4. Meddings JB., Kirk D., Olson ME. Noninvasive detection of nonsteroidal anti-inflammatory drug-induced gastropathy in dogs // Am J Vet Res. 1995. Aug. 56 (8). 977-81.
дистрофических изменений ямочного эпителия, увеличением количества париетальных клеток в дне желез фундального и кардиального отделов, появлением в собственной пластинке слизистой оболочки большого количества гладких миоцитов, увеличением средних показателей толщины СОЖ за счет увеличения ширины мышечной пластинки и статистически достоверным увеличением числа обкладочных клеток в эпителии желез.
Иммуногистохимические исследования выявили активацию процессов апоптоза,
ВЛИЯНИЕ СЕДИМИНА НА СОСТОЯНИЕ
перекисного окисления липидов
в организме коров
ПРИ ИСКУССТВЕННО СМОДЕЛИРОВАННОМ
стрессовом воздействии
т. в. СЕМЕНОВИЧ, аспирант, Уральская ГАВМ
457100, Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, д. 13
Ключевые слова: стресс, седимин, коровы, кровь, перекисное окисление липидов. Keywords: bload, cow, stress, peroxide oxidation of lipids.
В последние годы возрос интерес к клиническим аспектам исследования процесса свободнорадикального перекисного окисления липидов (ПОЛ). Это обусловлено тем, что дефект в указанном звене метаболизма способен снизить резистентность организма к воздействию на него неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды. Воздействие стрессовых факторов на организм животных связано с интенсивным образованием токсических перекисей в тканях, нарушением проницаемости клеточных мембран, снижением ряда ферментативных систем, обеспечивающих биока-талические процессы организма. В результате интенсификации процессов перекисного окисления липидов образуется значительное количество промежуточных (общие полиеновые и диеновые коньюгаты, кето-диены, малоновый диальдегид) и конечных (шиффовы основания) продуктов окисления.
Для ускоренного формирования приспособительной реакции организма в условиях стресса целесообразно применять препараты, обладающие адаптогенным и антиок-сидантным действием. Они способны регулировать уровень свободно-радикальных процессов и влиять на окислительный метаболизм. В ряду этих веществ наиболее перспективными являются соединения селена. Объектом наших исследований был выбран препарат «Седимин», который
представляет собой водную смесь соединений йода и селена на стабилизирующей основе железодекстранового комплекса.
Цель и методика исследований.
Целью наших исследований было изучение влияния седимина на интенсивность процессов перекисного окисления липидов в организме коров и определение возможности использования препарата в качестве адаптогена.
Исследования проводили на базе
ООО «Ясные поляны» Троицкого района Челябинской области. Для этого из стресс-чувствительных коров, выявленных по методу А. И. Кузнецова, Ф. А. Сунагатуллина [4], по принципу аналогов были сформированы пять групп коров черно-пестрой породы, с живой массой 450-500 кг. Стрессовое состояние у всех опытных животных моделировали путем внутрикожного введения 0,1 мл медицинского скипидара с помощью безигольного инъектора в подлопаточную область [6].
Седимин вводили согласно следующей схеме:
1 группа — коровам по вышеназванной методике вводили скипидар;
2 группа — коровам за сутки до введения скипидара внутримышечно однократно вводили седимин, в дозе 10 мл на животное;
3 группа — коровам через 2 часа после введения скипи-д ара вн утри м ы шеч н о од н ократн о
вводили седимин, в дозе 10 мл на животное;
4 группа — коровам за сутки до и через
2 часа после введения скипидара вводили седимин по 5 мл на животное;
5 группа (контрольная) — коровам препараты не применяли.
Для диагностики липоперекисной патологии и оценки эффективности использования препарата у коров опытных групп были взяты пробы крови через 2 и 24 часа после действия стресс-фактора. В сыворотке крови определяли следующие показатели: малоновый диальдегид (МДА) — методом, модифицированным Э. Н. Коробейниковой (1987); диеновые коньюгаты (ДК) и диенкетоны (КД) в плазме крови —спектрофотометрическим методом
B. П. Гаврилова (с соавт.) в модификации
Э. Н. Коробейниковой (2002); активность супероксиддисмутазы (СОД) — методом
C. Чевари (с соавт.) (1985), соединения типа оснований Шиффа — по А. В. Архиповой (2004) [2]. Исследования проводились в биохимической лаборатории медицинской государственной академии г. Челябинска.
Статистическую обработку полученных результатов с вычислением биометрических констант проводили по
В. А. Серединой (2001).
Для определения степени влияния седимина на исследуемые показатели крови использовали однофакторный дисперсионный анализ [1, 3, 5].
___________________________Ветеринария "И#
Таблица 1
Изменение некоторых показателей ПОЛ и антиоксидантной системы крови коров после искусственно смоделированной стрессовой ситуации при различных схемах применения
седимина (х ± тх, п = 6)
Показатели Группы коров
II III IV V (контроль)
Через 2 часа после введения скипидара
Сод, Усл. ед./мл 0,96 ± 0,15* 0,99 ± 0,15* 1,12 ± 0,11*** 1,19 ± 0,17*** 0,53 ± 0,04
МДА, Мкмоль/л 4,78 ± 0,21*** 3,64 ± 0,19*** 3,42 ± 0,14*** 3,28 ± 0,11*** 2,35 ± 0,12
Общие полиеновые коньюгаты, Е220/мл 1,78 ± 1,16* 0,86 ± 0,15** 0,79 ± 0,13** 0,66 ± 0,12*** 1,37 ± 0,03
Диеновые коньюгаты, Е233/мл 1,98 ± 0,2* 1,87 ± 0,18* 1,75 ± 0,33 1,33 ± 0,15 1,31 ± 0,12
Кетодиены, Е278/мл 0,71 ± 0,09 0,32 ± 0,04* 0,25 ± 0,023* 0,21 ± 0,04** 0,68 ± 0,14
Основания Шиффа, Отн.ед./мл 0,66 ± 0,06*** 0,09 ± 0,03** 0,35 ± 0,05 0,45 ± 0,04** 0,28 ± 0,05
Через 24 часа после введения скипидара
Сод, Усл.ед./мл 1,01 ± 0,08** 1,12 ± 0,08** 1,21 ± 0 07*** 1,30 ± 0,08*** 0,54 ± 0,10
МДА, Мкмоль/л 4,33 ± 0,16*** 3,29 ± 0,27** 3,02 ± 0,28* 2,96 ± 0,23* 2,31 ± 0,13
Общие полиеновые коньюгаты, Е220/мл 0,88 ± 0,19* 0,76 ± 0,11*** 0,73 ± 0,13*** 0,50 ± 0,07*** 1,35 ± 0,06
Диеновые коньюгаты, Е233/мл 1,24 ± 0 07*** 1,16 ± 0,18*** 1,08 ± 0,06*** 1,04 ± 0,18** 0,33 ± 0,06
Кетодиены, Е278/мл 0,29 ± 0,07* 0,25 ± 0,06* 0,20 ± 0,06** 0,14 ± 0,04** 0,68 ± 0,14
Основания Шиффа, Отн.ед./мл 0,72 ± 0,16* 0,66 ± 0,12* 0,39 ± 0,09 0,19 ± 0,03** 0,30 ± 0,02
Примечание: * — р < 0,05; ** — р < 0,01; *** — р < 0,001.
Результаты исследований.
Процессы перекисного окисления в организме находятся под контролем ферментов — антиоксидантов, к которым относится СОД.
Результаты исследований показали, что при первом исследовании (через 2 часа) в крови подопытных коров наблюдалось повышение активности СОД (табл. 1). Так, в крови коров 1 группы, где не вводили седимин, активность СОД повысилась на 81,13 % по сравнению с показателями контрольной группы. Введение седимина вызвало повышение активности СОД в крови коров опытных групп в среднем на 3,13-23,96 % по сравнению с показателями 1 группы. В крови животных 3 группы, где селенсодержащий препарат вводили после действия стресс-фактора, активность антиоксидантного фермента была на 13,13 % выше по сравнению с аналогичными данными во 2 группе, где препарат вводили до дозированного применения раздражителя. В группе, где препарат вводили дважды, до и после стрессового воздействия, активность фермента была высокая и составила 1,19 ± 0,17 усл. ед./мл против 0,99 ± 0,15 и 1,12 ± 0,11 усл. ед./мл во 2 и 3 группах соответственно. Результаты дисперсионного анализа показали, что наибольшая и достоверная доля влияния седимина на концентрацию СОД наблюдалась в 3 группе и составила 71,03 %.
Результаты повторного исследования активности СОД в крови через сутки показали, что у коров 1 группы активность была в пределах 1,01 ± 0,08 усл. ед./мл против 0,54 ± 0,10 усл. ед./мл в контроле. Применение препарата седимин привело к дальнейшему увеличению активности СОД, причем более выраженными были изменения в 4 группе. Однофакторным дисперсионным анализом установлено достоверное и значительное влияние препарата седи-мин на изменение активности СОД в крови опытных групп.
Содержание продуктов перекисного окисления липидов в организме имеет определенный уровень и накопление первичных (общие полиеновые, диеновые коньюгаты и кетодиены) и вторичных — (МДА) продуктов ПОЛ может быть свидетельством развития патологических изменений. Результаты исследований показали, что через 2 часа после введения скипидара содержание МДА в крови опытных коров значительно изменялось. Так, в крови коров 1 группы, где животным не вводили седимин, наблюдали повышение концентрации МДА на 103,40 % по сравнению с показателями контрольной группы. Введение седимина вызвало понижение уровня МДА в крови в среднем на 23,85-31,38 % по сравнению с показателями 1 группы, хотя по сравнению с контрольными данными его содержание было выше на 39,57-54,89 % соответственно. Менее болезненно процесс стабилизации уровня МДА проходил в крови коров 4 группы, в которой седимин вводили за 24 часа до и через 2 часа после введения стрессового агента. Дисперсионный анализ показал, что влияние седимина на изменение концентрации МДА в крови коров было наиболее значительно в 4 группе и составило 76,85 % ^р > FT).
Через сутки наблюдений уровень МДА, который является наиболее токсичным продуктом перекисного окисления липидов, снижался. Так, в крови коров 1 группы содержание МДА составило 4,33 ± 0,16 Мкмоль, а после применения седимина концентрация МДА в крови коров была достоверно ниже в среднем на 24,02-31,64 %. Наибольший процент снижения малонового диальдегида был отмечен при применении селеносодержащего препарата до и после стрессового воздействия. Так, в крови животных 4 группы содержание МДА через 2 и 24 часа было в среднем на 31 % меньше по сравнению с данными 1 группы при достоверной доле влияния препарата на концентрацию МДА. Однако через 24 часа содержание МДА в крови опытных коров все еще было выше аналогичного показателя в контроле.
Использование селеносодержащего препарата снижало содержание первичных продуктов ПОЛ (общих полиеновых коньюгатов) в крови коров опытных групп
уже через 2 часа на 37,23-51,82 % по сравнению с контрольными показателями. Одновременно в 2,1-3,2 раза понизилось содержание кетодиенов, а содержание диеновых коньюгатов оставалось высоким. Так, в крови коров, которым не применяли седи-мин, через 2 часа наблюдалось увеличение концентрации диеновых коьюгатов на 51,15 %. Уровень ДК через 2 часа в крови коров 2-4 опытных групп составил 1,87 ± 0,18; 1,75 ± 0,33; 1,33 ± 0,33 Е233/мл соответственно, что на 5,56-32,83 % ниже показателей 1 группы, но по сравнению с контролем уровень этих токсинов был выше на 1,53-42,75 %.
Постепенное снижение концентрации общих полиеновых, диеновых коньюгатов и кетодиенов в крови опытных коров зависело от введения препарата и наиболее было выражено в группе, где применяли седимин дважды: до и после дозированного применения стресс-раздражителя.
Конечными продуктами ПОЛ являются соединения типа оснований Шиффа (ОШ),
•*#
Ветеринария "V
которые обладают высокой реактивной способностью и токсичностью, производя меж-молекулярные «сшивки», нарушения структур и функции биомембран. Содержание в сыворотке крови коров 1 группы оснований Шиффа при первом исследовании достоверно повысилось и составило 0,66 ± 0,06 отн. ед./мл, что на 135,71 % выше контрольных показателей. Действие седимина на данный показатель в сыворотке крови 2-4 опытных групп не было однозначным. Введение селеносодержащего препарата за 24 часа до воздействия стресс-фактора (2 группа) снизило концентрацию оснований Шиффа на 86,36 % по сравнению с показателями 1 группы и на 67,86 % — по сравнению с контролем. Использование селеносодержащего препарата через 2 часа после введения скипидара (3 группа) снижало концентрацию ОШ в сыворотке крови коров в меньшей степени — на 46,97 %. В 4 группе коров, где седимин применяли с профилактической и лечебной целью при первом исследовании концентрация ОШ в сыворотке крови была высокой и
составляла 0,45 ± 0,04 отн. ед./мл, но на 31,82 % меньше, чем в крови коров 1 опытной группы.
Через 24 часа концентрация ОШ в крови коров 1 опытной группы продолжала увеличиваться и была на 140,00 % выше по сравнению с аналогичными показателями в контроле. В крови коров 2-4 опытных групп наблюдалось значительное снижение ОШ на 8,33-73,61 % по сравнению с данными
1 группы. Причем наибольшее изменение наблюдалось в 4 группе, где седимин применяли с профилактической и лечебной целью. Так, концентрация ОШ в сыворотке крови коров 4 группы составила 0,19 ± 0,03 отн. ед./мл, что на 73,61 % ниже показателей 1 группы, в то время как в группах, где седимин применяли однократно с лечебной и профилактической целью, концентрация ОШ составляла 0,39 ± 0,09 и 0,66 ±
0,12 отн. ед./мл соответственно. Доля влияния препарата на изменения концентрации ОШ наиболее была выражена в 4 группе и составила 60,00 % ^р > FT).
Выводы.
На основании результатов исследований можно сделать вывод, что процессы перекисного окисления липидов в организме коров значительно ингибируются в результате применения комплексного селеносодержащего препарата седимин. Это подтверждается снижением первичных, вторичных и конечных токсических продуктов ПОЛ в крови животных, повышением активности СОД. Наиболее выраженное адаптивное влияние седимина на организм коров наблюдалось при следующей схеме его назначения: по 5 мл седимина в/м за 24 часа до и через 2 час после прогнозируемого стресс-индуцированного повреждения.
Рекомендации.
Седимин изменяет интенсивность протекания свободнорадикальных процессов в организме коров при воздействии стресс-фактора. Для этого наиболее целесообразно вводить седимин двукратно по 5 мл в/м за 24 часа до и через 2 часа после стрессовых воздействий.
Литература
1. Елисеева И. И., Юзбашев М. М. Общая теория статистики. М. : Финансы и статистика, 2002. С. 117, 184.
2. Коробейникова Э. Н., Зурочка А. В., Евдокимова Е. В. Показатели липидного обмена в сыворотке крови практически здорового населения, проживающего в Южно-Уральском регионе в условиях адаптации к климатическим и техногенным воздействиям : методические указания. Челябинск. : Чел. ГМА, 2002. 50 с.
3. Переяслова И. Г., Колбачев Е. Б. Основы статистики. Ростов-на-Дону : Феникс, 1999. С. 101-111.
4. Кузнецов А. И., Сунагатуллин Ф. А. Патент № 1653680 СССР. Способ определения стрессовой чувствительности свиней [Текст]. № 923485; заявл.23.05.88 ; опубл.07.06.91; бюл. № 21. 4 с.
5. Середина В. А. Биометрическая обработка опытных данных в ветеринарной медицине // Вестник ветеринарии. 2001. № 8.
С. 79.
6. Устинов Д. А. Стресс-факторы в промышленном животноводстве. М. : Россельхозиздат, 1976. 166 с.
ИЗУЧЕНИЕ АБОРТОгЕННых СВОйСТВ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНОй ВАКЦИНы ИЗ ШТАММА B. ABORTUS 75/79-АВ
в организме северных оленей
Е. С. СлЕПЦов, доктор ветеринарных наук, заведующий лабораторией бруцеллеза и туберкулеза животных, н. в. виноКуров, ведущий специалист, Г. Г. Евграфов, младший научный сотрудник, якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства в. и. Федоров, кандидат ветеринарных наук, заведующий кафедрой акушерства, патанатомии и ветсанэкспертизы, якутская ГСХА 1 .
677007, Республика Саха (Якутия), г. Якутск, ул. Красильникова, д.15
Ключевые слова: инфекционный процесс, иммунитет, штамм, эпизоотический процесс, вакцина. Keywords: Infection process, immunity, strain, epizootic process, vaccine.
Цель и методика исследований.
Новая противобруцеллезная вакцина из слабоагглютиногенного штамма B. abortus 75/79-АВ, сконструированная Алтайской НИВС и ВГНКИ, при апробации в производственных условиях показала, что ее применение в общем комплексе противобруцел-лезных мероприятий позволяет резко ослабить напряженность эпизоотического процесса и в течение 12-18 месяцев добиться ликвидации эпизоотических очагов бруцеллеза крупного рогатого скота.
В связи с этим в 2001-2005 гг. нами в благополучных по бруцеллезу оленеводческих стадах № 2 и № 6 фактории «Томпо» Томпонского улуса были изучены антигенные, вирулентные и иммуногенные свойства вакцины из слабоагглютиногенного штамма B. abortus 75/79-АВ в экспериментальных условиях [2].
Результаты изучения реактогенных свойств вакцины из штамма B. abortus 75/79-АВ свидетельствуют о том, что показатели физиологического состояния организма при
подкожной иммунизации зависят от дозы препарата (реактогенность менее выражена при введении 25 и 50 млрд. м. к.) [1].
Анализ данных по изучению приживаемости показывает, что при подкожном методе введения культура вакцинного штамма B. abortus 75/79-АВ в дозах 25, 50 и 100 млрд. м. к. на 15 день хорошо расселяется в организме и вызывает развитие доброкачественного генерализованного процесса.
При убое животных в более отдаленные
