Влияние растительного экстракта «Фитоуросепт» на пролиферативную активность т- и В-лимфоцитов Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

что может косвенно указывать на противовоспалительное действие изучаемых образцов. При гистологическом исследовании легочных тканей морских свинок выявлен положительный эффект фитосбора на течение воспалительного процесса в бронхолегочной системе.

Анализ результатов исследования муколитических свойств фитосбора и спиртового экстракта фиалки одно-

цветковой показал меньшее количество приступов кашля при применении растительного сбора.

При исследовании острой токсичности травяного сбора выявлено, что данный настой в соотношении 1:1,5 с водой не обладает острой токсичностью при внутрижелудочном введении белым крысам.

ЛИТЕРАТУРА

1. Государственная фармакопея СССР. - Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. - XI изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.

2. Коржевский Д.Э. Краткое изложение основ гистологической техники для врачей и лаборантов-гистологов. - СПб.: Кроф, 2005. - 48 с.

3. Мартынов А.М., Чупарина Е.В. Содержание и состав полисахаридных комплексов, макро- и микроэлементов Viola uniflora (Violaceae) // Растительные ресурсы. - 2009. - Т.

45. Вып. 4. - С.67-73.

4. Мартынов А.М., Собенин А.М. Полифенольные соединения и аминокислоты надземной части Viola uniflora // Растительные ресурсы. - 2011. - Т. 47. Вып. 2. - С.118-122.

5. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA.

- М.: Медиа Сфера, 2002. - 312 с.

6. Руководство по экспериментальному изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У Хабриева. -2-изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.

Информация об авторах: Соседова Лариса Михайловна - д.м.н., профессор, заведующий лабораторией, e-mail: [email protected]; Мартынов Альберт Михайлович - к.ф.н., доцент кафедры, 664049, г. Иркутск, м-н Юбилейный, 100, ГБОУ ДПО ИГМАПО, кафедра фармации, тел. (3952) 46-53-26, e-mail: [email protected];

Капустина Елена Александровна - к.м.н., научный сотрудник лаборатории;

Титов Евгений Алексеевич - к.б.н., научный сотрудник

© ХОБРАКОВА В.Б., НИКОЛАЕВ С.М. - 2013 УДК: 615.322

ВЛИЯНИЕ РАСТИТЕЛЬНОГО ЭКСТРАКТА «ФИТОУРОСЕПТ» НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ Т- И В-ЛИМФОЦИТОВ

Валентина Бимбаевна Хобракова1, Сергей Матвеевич Николаев1-2 ('Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор - д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов; 2Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования, ректор - д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра клинической фармакологии, зав. - д.м.н., проф. Н.В. Верлан)

Резюме. Установлена иммуномодулирующая активность комплексного растительного средства - сухого экстракта «Фитоуросепт» в реакции пролиферации Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей в экспериментах in vitro. Показано, что испытуемое средство в концентрации 4,0 мкг/мл стимулирует пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов.

Ключевые слова: сухой экстракт «Фитоуросепт», иммуномодулятор, пролиферация, Т-лимфоцит, В-лимфоцит, митоген.

THE INFLUENCE OF THE PLANT EXTRACT “PHYTOUROSEPT" ON THE Т- AND В-LYMPHOCYTE PROLIFERATIVE ACTIVITY

V.B. Khobrakova1, S.M. Nikolaev1,2 ('Institute of General and Experimental Biology of SD RAS, Ulan-Ude;

2Irkutsk State Medical Academy of Continuing Education, Irkutsk, Russia)

Summary. The immunomodulating activity of the complex plant extract “Phytourosept” in the reaction of proliferation of T- and В-lymphocytes obtained from mouse spleen has been established in experiments in vitro. It has been shown that the dry extract “Phytourosept” in the concentration of 4,0 mkg/ml stimulates proliferative activity of T- and В-lymphocytes.

Key words: the dry extract “Phytourosept”, immunomodulator, proliferation, Т-lymphocyte, В-lymphocyte, mitogen.

В настоящее время лечение заболеваний, в патогенез которых вовлекается иммунная система, остается сложной задачей. Применяемые методы терапии либо недостаточно эффективны, либо сопровождаются развитием тяжелых побочных реакций. Использование препаратов природного происхождения представляется перспективным направлением дальнейшего развития и совершенствования методов иммунокоррекции и иммунореабилитации. В последние годы значительно возрос интерес к средствам из лекарственных растений, для большинства из которых характерно отсутствие выраженных побочных эффектов и низкая токсичность благодаря содержанию в них комплекса биологически активных веществ [1,2,3]. Многокомпонентные растительные сборы привлекают внимание гармоничным сочетанием биологически активных веществ, широким спектром их фармакологического действия. Объектом настоящего исследования явился сухой полиэкстракт «Фитоуросепт» (условное название) (зарегистрирован как БАД к пище «Арура-Тан №4»), пред-

ставляющий собой сухой экстракт из травы горца птичьего (Polygonum aviculare L.), листьев толокнянки обыкновенной (Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng.), брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L.), крапивы двудомной (Urtica dioica L.) и цветков календулы лекарственной (Calendula officinalis L.) в соотношении 3,0:2,0:2,0:1,5:1,5 масс. частей. В состав полиэкстракта входит сумма экстрактивных веществ, представленных комплексом веществ полифенольной природы (флаво-ноиды: апигенин, лютеолин, кверцитин, рутин, гиперозид, мирицетин; фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая, галловая; фенологликозид арбутин). Содержание флавоноидов в пересчете на гиперозид - не менее 2%, фенологликозидов в пересчете на арбутин - не менее 12%.

Целью настоящего исследования явилось определение влияния сухого полиэкстракта «Иммунополифит» на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей in vitro.

Материалы и методы

Влияние исследуемого средства на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей линии СВА оценивали in vitro в реакции бластной трансформации в присутствии митогенов: конканавалина А (Кон А) и липо-полисахарида (ЛПС) по включению 3Н-тимидина с использованием сцинтилляционного счетчика. Клетки селезенки мышей в концентрации 1х106 клеток/мл вносили по 100 мкл в лунки плоскодонных культуральных микропланшет. Митогены КонА и ЛПС вносили в лунки в концентрации 10 мкг/мл. Дополнительно вносили исследуемое средство в концентрациях 0,4, 4,0 и 40 мкг/мл. Клетки инкубировали в среде RPMI-1640 в течение 48 час. при 370С в атмосфере воздуха с 5% СО2. Синтез ДНК в культуре клеток оценивали по включению 3Н-тимидина, вносимого на последующие 18 час. инкубации из расчета 37 Кбк на лунку. Клетки переносили на бумажные фильтры и отмывали. Счет радиоактивности проводили в бета-счетчике. Уровень синтеза ДНК оценивали в импульсах в 1 минуту [4].

После проверки распределения на нормальность полученные результаты обработаны статистическим методом с помощью t-критерия Стьюдента [5]. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез p=0,05.

Результаты и обсуждение

Ранее нами сообщалось об иммуномодулирующем действии сухого экстракта «Фитоуросепт» при экспериментальной азатиоприновой иммуносупрессии [7]. В данной работе показано, что исследуемый экстракт в экспериментальнотерапевтической дозе 40 мг/кг способен ослаблять супрессивное действие цитостатика азатиоприна на клеточноопосредованную иммунную реакцию (гиперчувствительность замедленного типа), антителогенез и фагоцитоз перитонеальных макрофагов в отношении Staphylococcus aureus, что выражается в восстановлении иммунологических показателей (индекса реакции гиперчувствительности замедленного типа, абсолютного и относительного количества антителообразующих клеток, фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа) до уровня таковых у интактных животных. В настоящей работе представляло интерес исследовать влияние сухого экстракта «Фитоуросепт» на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей in vitro в реакции бластной трансформации в присутствии митогенов Кон А и ЛПС по включению 3Н-тимидина.

При оценке влияния «Фитоуросепт» на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей in vitro использовали его в концентрациях 0,4; 4,0 и 40,0 мкг/мл. Результаты исследований представлены в таблицах 1 и 2.

Как видно из таблицы 1, внесение фитоэкстракта в мо-

ЛИТЕРАТУРА

1. Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш., Писарев В.М. и др. Иммуномодуляторы растительного происхождения // Химико-фармацевтический журнал. - 1993. - №8. - С.43-47.

2. Лазарева Д.Н., Плечев В.В., Моругова Т.В., Самигуллина Л.И. Растения, стимулирующие иммунитет. - Уфа, 2005. -96 с.

3. Мельникова Т.И., Николаев В.О. Сравнительная им-мунофармакологическая оценка растительных экстрактов с полифенольными и полисахаридными комплексами // Фармация в 21 в.: инновации и традиции: Тез. докл. между-нар. науч. конф. - СПб., 1999. - С.179.

4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000.

дельную систему в концентрации 4,0 мкг/мл приводило к увеличению пролиферативной активности Т-лимфоцитов в 1,3 раза по сравнению с данными в контрольной группе. Испытуемое средство в концентрациях 0,4 и 40,0 мкг/ мл не оказывало значимого влияния на пролиферацию Т-лимфоцитов.

Таблица 1

Влияние сухого экстракта «Фитоуросепт» на пролиферацию Т-лимфоцитов селезенки мышей in vitro

Группы Доза, мкг/мл Кол-во имп. в мин.

Контрольная (Кон А) 15 17003±1025

Опытная («Фитоуросепт» + Кон А) 0,4 17296±1700

4,0 22068±1803*

40,0 16212±1534

Примечание: здесь и далее * - означает, что разница существенна (р<0,05) по сравнению с контролем.

При оценке влияния экстракта «Фитоуросепт» на пролиферацию В-лимфоцитов установлено, что исследуемое средство в концентрации 4,0 мкг/мл стимулирует пролиферативную активность В-лимфоцитов в 1,5 раза по сравнению с данными в контрольной группе. В концентрациях 0,4 и 40

Таблица 2

Влияние сухого экстракта «Фитоуросепт» на пролиферацию В-лимфоцитов селезенки мышей in vitro

Группы Доза, мкг/мл Кол-во имп. в мин.

Контрольная (ЛПС) 15 1549±106

Опытная («Фитоуросепт» + ЛПС) 0,4 1886±102

4,0 2266±114*

40,0 1745±143

мкг/мл экстракт не оказывает существенного влияния на пролиферацию В-лимфоцитов (табл. 2).

Таким образом, сухой экстракт «Фитоуросепт» в концентрации 4,0 мкг/мл стимулирует пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов.

Эффективность данного средства, по-видимому, обусловлена большим разнообразием входящих в его состав биологически активных веществ, преимущественно, поли-фенольными соединениями (флавоноиды, фенологликози-ды, фенолкарбоновые кислоты), обладающими иммуномодулирующими свойствами [1,2,3,6,8].

Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что сухой полиэкстракт «Фитоуросепт» является эффективным иммуномодулирующим средством, что позволяет рекомендовать его для дальнейшего изучения с целью создания новых растительных иммуномодулирующих препаратов.

- 398 с.

5. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. - М., 2006. - 256 с.

6. Толкачев О.Н., Шипулина Л.Д., Шейченко О.П. Новые растительные полифенолы - активные противовирусные агенты и иммуномодуляторы // Int. J. Immunorehabil. - 1999.

- №14. - С.9.

7. Хобракова В.Б., Николаев С.М. Иммунокорригирующие свойства сухого экстракта «Фитоуросепт» при экспериментальном иммунодефиците // Российский иммунологический журнал. - 2008. - Т. 2 (11). №2-3. - С.205.

8. Berg P.A., Daniel P.T. Effects of flavonoid compounds on the immune response // Piod. Clin. Biol. Res. - 1988. - Vol. 280.

- P.157-171.

Информация об авторах: Хобракова Валентина Бимбаевна - к.б.н., доцент, с.н.с., тел. (3012) 434743, факс: (3012) 43-30-34, e-mail: [email protected]; Николаев Сергей Матвеевич - д.м.н., профессор кафедры, г.н.с. лаборатории,

e-mail: [email protected]