CC BY
32
8° ^tl ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА
'1 (102) май 2017 г. / том 2
ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИОННЫХ РАБОТ
УДК 616.74-009.17:612.014.464
О.В. ЛАПШИНА12, Е.А. АНТИПЕНКО2, К.Н. КОНТОРЩИКОВА2, А.В. БАРАНОВА3, Д.В. СЕДЫШЕВ1, А.В. ГУСТОВ2
Нижегородская областная клиническая больница им. Н.А. Семашко, 603126, г. Нижний Новгород, ул. Родионова, д. 190
Нижегородская государственная медицинская академия, 603005, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, д. 10/1
Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, 603022, г. Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 23
Влияние озонотерапии на окислительный гомеостаз пациентов с миастенией
Лапшина Ольга Валерьевна — врач-невролог 1 неврологического отделения, заочный аспирант кафедры неврологии, психиатрии и наркологии, тел. +7-908-232-11-31, e-mail: [email protected]
Антипенко Елена Альбертовна — доктор медицинских наук, доцент кафедры неврологии, психиатрии и наркологии, тел. +7-951-919-41-96, e-mail: [email protected]
Седышев Дмитрий Вадимович — кандидат медицинских наук, заведующий 1 неврологическим отделением, тел. +7-910-141-39-51, e-mail: [email protected]
Густов Александр Васильевич — доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой неврологии, психиатрии и наркологии, тел. +7-910-873-93-57, e-mail: [email protected]
Конторщикова Клавдия Николаевна — доктор биологических наук, профессор, заведующая кафедрой клинической лабораторной диагностики, тел. +7-903-055-71-99, e-mail: [email protected]
Баранова Алина Владимировна — студентка 4 курса Института биологии и биомедицины, тел. +7-960-180-16-73, e-mail: [email protected]
Активация свободнорадикального окисления, как типового патологического процесса, является важным звеном патогенеза ряда аутоиммунных заболеваний, в том числе миастении гравис. В работе представлено исследование окислительного гомеостаза у 20 пациентов с миастений. Продемонстрировано изменение окислительного гомеостаза у пациентов с миастенией по сравнению со здоровыми добровольцами. Проанализирована динамика показателей окислительных процессов и антиоксидантной активности при включении в терапевтический комплекс озонотерапии. Обнаружено положительное влияние озонотерапии на процессы свободно-радикального окисления, что позволяет считать озонотерапию патогенетически обоснованным методом лечения миастении. Ключевые слова: миастения гравис, озонотерапия, перекисное окисление липидов.
O.V. LAPSHINA12, E.A. ANTIPENKO2, K.N. KONTORSHCHIKOVA2, A.V. BARANOVA3, D.V. SEDYSHEV1, A.V. GUSTOV2
1Nizhny Novgorod Regional Clinical hospital named after N.A. Semashko, 190 Rodionov Str., Nizhniy Novgorod, Russian Federation, 603126
2Nizhny Novgorod State Medical Academy, 10/1 Minin and Pozarsky Square, Nizhny Novgorod, Russian Federation, 603005
3National Research Nizhny Novgorod State University named after N.I. Lobachevsky, 23 Gagarin Pr., Nizhny Novgorod, Russian Federation, 603022
The influence of ozone therapy on oxidative homeostasis in patients with myasthenia
Lapshina O.V. — doctor-neurologist of the 1st Neurology Department, correspondence postgraduate student of the Department of Neurology, Psychiatry and Narcology, tel. +7-908-232-11-31, e-mail: [email protected]
Antipenko EA — D. Med. Sc., Associate Professor of the Department of Neurology, Psychiatry and Narcology, tel. +7-951-919-41-96, e-mail: [email protected]
Sedyshev D.V. — Cand. Med. Sc., Head of the 1st Neurology Department, tel. +7-910-141-39-51, e-mail: [email protected] Gustov A.V. — D. Med. Sc., Professor, Head of the Department of Neurology, Psychiatry and Narcology, tel. +7-910-873-93-57, e-mail: [email protected]
Kontorshchikova K.N. — D. Med. Sc., Professor, Head of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics, tel. +7-903-055-71-99, e-mail: [email protected]
Baranova A.V. — 4th-year student of the Institute of Biology and Biomedicine, tel. +7-960-180-16-73, e-mail: [email protected]
Activation of free radical oxidation, as a typical pathological process, is an important link in the pathogenesis of several autoimmune diseases, including myasthenia gravis. In the study of oxidative homeostasis in 20 patients with myasthenia gravis, there were changes of oxidative homeostasis in patients with myasthenia as compared to healthy volunteers. The dynamics was analyzed of indicators of oxidation processes and antioxidant activity included into the therapeutic complex of ozone therapy. There was a positive influence of ozone therapy on the processes of free radical oxidation, which makes ozone therapy pathogenetically substantiated method of treatment of myasthenia gravis. Key words: myasthenia gravis, ozone therapy, lipid peroxidation.
Миастения — хроническое аутоиммунное заболевание, характеризующееся нарушением нервно-мышечной передачи вследствие образования аутоантител к различным аутоантигенным эпито-пам периферического нейромышечного аппарата, клинически проявляющееся слабостью и патологической мышечной утомляемостью [1, 2]. Распространенность миастении колеблется от 4,8-20,0 на 100 000 человек. Тяжесть заболевания, приводящая к инвалидизации пациентов, и частота летальных исходов определяют высокую актуальность поиска наиболее эффективных методов лечения этой патологии.
Активация свободнорадикального окисления, как типового патологического процесса, является важным звеном патогенеза ряда аутоиммунных заболеваний, в том числе миастении гравис. Повышенное содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), обусловленное избытком аутоантител, а также нарушением процессов их элиминации, приводит к активации свободнорадикальных процессов и, в первую очередь, перекисного окисления липидов (ПОЛ), вследствие взаимодействия ЦИК с мембранным аппаратом клетки [3]. Активация ПОЛ в значительной степени усугубляет течение заболевания [4, 5].
Озонотерапия — один из немедикаментозных методов лечения, использующийся в различных областях медицины: терапии, хирургии, акушерстве и гинекологии, дерматологии, косметологии, стоматологии, неврологии, гастроэнтерологии и других [6]. Озон обладает более выраженными окислительными свойствами по сравнению с кислородом, что обуславливает его взаимодействие с различными органическими и неорганическими соединениями. Несмотря на высокую реакционную способность, установлено селективное действие озона на органические молекулы, содержащие двойные связи: аминокислоты, пептиды, белки, нуклеиновые кислоты, полиненасыщенные жирные кислоты, входящие в состав билипидного слоя мембран клеток и липопротеидов плазмы крови. Селективность озона обусловлена особенностями строения молекулы, а именно наличием поляризованного атома кислорода, придающего всей молекуле электрофильный характер. В биологических системах преобладает взаимодействие озона с ненасыщенными жирными
кислотами с образованием промежуточных продуктов — озонидов (соединений с различным количеством атомов кислорода) [6-10].
Цель исследования — изучение показателей процессов свободнорадикального окисления у пациентов с миастенией и их динамика под влиянием озонотерапии.
Материал и методы исследования
Проведено исследование процессов перекис-ного окисления липидов в сыворотке крови у 20 пациентов с миастенией. Среди пациентов было 6 мужчин, 14 женщин. Средний возраст составил 48,4 лет (от 29 до 77 лет). У всех пациентов имелась генерализованная форма миастении. Все пациенты получали стандартное лечение, включавшее пульс-терапию дексаметазоном, антихолинэстеразные препараты, препараты калия, калийсберегающие диуретики. Пациенты первой группы (10 человек) получали только стандартную терапию. Пациенты второй группы (10 человек) на фоне стандартной терапии получали внутривенные инфузии озонированного физиологического раствора в количестве 6 процедур через день в концентрации 2.2-2.4 мг/л. Рандомизация по группам проводилась случайным образом с использованием таблицы случайных чисел.
Первая и вторая группы были сопоставимы по возрасту, полу и клинической картине заболевания. Также была сформирована группа здоровых добровольцев (14 человек), сопоставимая с группами пациентов по возрастно-половым характеристикам. Анализировали показатели окислительных процессов с использованием метода индуцированной биохемолюминесценции (БХЛ) до начала лечения у больных миастенией в сравнении с показателями у здоровых добровольцев. Также оценивали динамику показателей пациентов с миастенией в первой и второй группах. Определение уровня продуктов ПОЛ (диеновых конъюгат, триеновых конъюгат, оснований Шиффа) проводили методом Волчегорского И.А. (1989). Для регистрации индуцированной биохемилюминесценции использовали аппарат биохемилюминометр (бхЛ-07), сопряженный с компьютером ШМРС/ДТ в диалоговом режиме. Анализировали следующие показатели: индекс
82_ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА_'1 (102) май 2017 г. / том 2
Таблица 1.
Показатели окислительных процессов у больных миастенией и здоровых добровольцев
Показатели Пациенты с миастенией Здоровые добровольцы Уровень достоверности различий р
I , мВ тах' 386,8±62,3 54,4±2,5 р=0,023
S, мВ 1666,2±223,1 233,4±9,7 р=0,042
Z 4,7±0,3 4,5±0,2 р=0,028
^(-2а) 184,5±32,2 23,3±1,5 р=0,032
ДК, отн. ед. 0,2632±0,0029 0,2268±0,0126 р=0,035
ТК, отн. ед. 0,2600±0,0114 0,2383±0,0274 р=0,041
ОШ, отн. ед. 58,2046±5,6970 31,8513±1,3673 р=0,025
ОШ/ (ДК+ТК) 108,7250±8,7136 73,4842±4,4201 р=0,022
Таблица 2.
Динамика показателей окислительных процессов у больных миастенией
Показатели Первая группа (стандартная терапия) Вторая группа (стандартная терапия+озонированный физиологический раствор) Уровень достоверности различий р
I , мВ тах' 354,1±98,5 154,3±47,4 р=0,026
S, мВ 1523,7±396,2 836,8±301,6 р=0,032
Z 5,0±0,3 5,4±0,4 р=0,031
tg(-2a) 168,2±49,2 62,8±20,0 р=0,045
ДК, отн. ед. 0,2575±0,0074 0,2641±0,0012 р=0,017
ТК, отн. ед. 0,2437±0,0200 0,2448±0,0110 р=0,022
ОШ, отн. ед. 67,3022±13,2723 45,9685±7,9720 р=0,028
ОШ/ (ДК+ТК) 136,2095±26,0463 88,7769±13,9451 р=0,025
1тах (мВ) — максимальная интенсивность свечения, показывающая потенциальную способность биологического объекта к свободнорадикальному окислению, индекс S (мВ) — светосумма хемилюминес-ценции за 30 секунд — величина, соответствующая обрыву цепи свободнорадикального окисления, и поэтому обратно пропорциональная антиоксидант-ной активности сыворотки крови, tg(-2a) — показатель антиоксидантной системы защиты, характеризующий скорость ее восстановления, индекс Z — отношение индексов S/Imаx, характеризующий уровень антиоксидантной защиты.
Статистическая обработка материала осуществлялась с помощью пакета программ Statistica. При описании результатов исследования количественные данные представлены в виде М (±а), где М — среднее арифметическое, а — стандартной отклонение. Расчет доверительного интервала (ДИ) проводился откорректированным методом Вальда, уровень доверия 95%. Сравнение групп при двух измерениях на протяжении периода наблюдения
проводилось с использованием критерия Вилкок-сона.
Результаты и обсуждение
При исследовании окислительных процессов у пациентов с миастенией до лечения обнаруживалось значительное повышение показателей индуцированной БХЛ по сравнению с таковыми у здоровых добровольцев. Так, 1тах была повышена в 7,1 раза, tg(-2a) — в 7,9 разаТчто указывало на повышение процессов свободнорадикального окисления у пациентов с миастенией. Показатели окислительных процессов у пациентов с миастенией и здоровых добровольцев представлены в таблице 1.
Динамика показателей окислительных процессов при проведении стандартной терапии и в группе с использованием озонированного физиологического раствора представлена в таблице 2. Во второй группе (получавшей озонированный физиологический раствор) значения 1тах, S, tg(-2a) после лечения значимо снижались, а значения Z увели-
чивались, что указывало на повышение антиокси-дантной способности плазмы крови при включении в терапевтический комплекс озонированного физиологического раствора. Во второй группе отмечалось снижение активности свободнорадикаль-ных процессов, что проявлялось однонаправленной тенденцией к уменьшению продуктов пОл. В первой группе подобной динамики показателей окислительных процессов не отмечено.
Таким образом, выявленное повышение показателей индуцированной биохемилюминесценции и уровня продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови больных миастенией свидетельствует о нарушении процессов свободнорадикаль-ного окисления, сопровождающихся снижением работы и скорости восстановления антиоксидантной системы защиты, повышением продукции свободных радикалов, а также накоплением первичных и конечных продуктов перекисного окисления ли-пидов. Это подтверждает значимость оксидантно-го стресса в патогенезе заболевания. Включение в терапевтический комплекс озонотерапии является патогенетически обоснованным, поскольку способствует восстановлению окислительного гомеостаза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Санадзе А.Г. Миастения и миастенические синдромы. — М.: ЛитТерра, 2012. — 255 с.
2. Конькова Д.Ю. История исследования миастении: от описания симптомов доизучения патогенеза // Дальневосточный медицинский журнал. — 2015. — №1. — С. 103-107.
3. Лобзин С.В., Чухловина М.Л., Руденко Д.И., Косачев В.Д. Способ прогнозирования осложнений тимэктомии у больных миастенией // Иммунология. — 1981. — №3. — С. 55-58.
4. Васильева Е.М., Баканов М.И. Биохимические изменения при неврологической патологии // Биомедицинская химия. — №6. — С. 581-602.
5. Di Dalmazi G., Hirshberg J., Lyle D., Freij J.B., Caturegli P. Reactive oxygen species in organ-specific autoimmunity // Autoimmunity Highlights. — Vol. 7 (1). http://link.springer.com/ artide/10.1007%2Fs13317-016-0083-0#artide-dates-history
6. Миненков А.А., Филимонов Р.М., Покровский В.И., Змызгова А.В., Побединский Н.М. Основные принципы и тактика озонотерапии. Пособие для врачей. — М., 2001. — 37 с.
7. Масленников О.В., Конторщикова К.Н. Практическая озоно-терапия. Пособие. — Нижний Новгород: Вектор - ТиС, 2003. — 52 с.
8. Алекберов Д.Г., Потанин В.П., Белопухов В.М. Биологические механизмы озонотерапии и эффективность его применения в медицине // Пермский медицинский журнал. — 2007. — Т. 14, №4. — С. 138-141.
9. Малахов В.А., Джанелидзе Т.Т. Озонотерапия в неврологии // Международный неврологический журнал. — 2008. — №2. — С. 152-159.
10. Куликов А.Г. Озонотерапия — эффективный физический метод лечения и реабилитации // Медиаль. — 2013. — №4 (9). — С. 8-9.
ПОДПИСНОЙ ИНДЕКС ЖУРНАЛА «ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА»
В КАТАЛОГЕ «ПРЕССА РОССИИ» АГЕНСТВА «КНИГА-СЕРВИС» 37140
С ИХИАТРИ Я
