Лечение и профилактика
УДК 619:576.893:63.22/28
ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ КРИПТОСПОРИДИОЗА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ СВИНЕЙ
Р.Т. МАННАПОВА доктор биологических наук
Российский государственный аграрный университет им. К.А. Тимирязева С.И. КАЛЮЖНЫЙ кандидат ветеринарных наук
Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова, 410600, г. Саратов, Театральная пл., 1, e-mail: [email protected]
Комплексное лечение криптоспоридиоза свиней химкокцидом, полимиксином, лактобифидом на фоне иммуностимуляции Т- и В-активинами или прополисом способствует восстановлению биохимических показателей и гормонального статуса организма животных.
Ключевые слова: криптоспоридиоз, терапия, иммуно-стимуляция, биохимические показатели, свиньи.
В последние годы значительно возрос удельный вес криптоспоридиозов свиней. Это вызвано трудностями борьбы с данной патологией, связанной с непродолжительностью приобретаемого иммунитета, большой репродуктивной способностью паразита, его устойчивостью к терапевтическим средствам, недостаточным ассортиментом препаратов и способностью кокцидий постепенно адаптироваться к ним. Цикл развития и биология криптоспори-дий достаточно хорошо изучены, предложено и исследовано ряд антикокци-дийных препаратов [1-5]. Однако, вопросы изучения биохимических изменений в организме больных животных остаются малоизученными.
В связи с вышеизложенным целью настоящей работы явилось: провести сравнительный анализ влияния криптоспоридиозной инвазии, а также комплексной антикокцидантной, антибиотико- и пробиотикотерапии и иммуно-стимуляции на динамику изменений биохимических показателей в организме свиней: содержания в крови и сыворотке крови гемоглобина, глюкозы, общего билирубина, креатинина, триглицеридов, холестерина и показателей ферментативного обмена (ЛДГ, АлАТ, АсАТ, щелочной фосфатазы и амилазы); динамику изменения содержания водо- и жирорастворимых витаминов в печени свиней (Вь В2, С, А и Е), а также установить изменения гормонального статуса в организме с учетом функциональной активности щитовидной железы, аденогипофиза, коры надпочечников и поджелудочной железы.
Материалы и методы
Опыты по изучению биохимических показателей проведены на 126 поросятах месячного возраста, разделенных на 7 групп. Животные 1-й группы служили контролем и были свободны от криптоспоридий. Поросята остальных групп (2-7) были заражены криптоспоридиями. Животных 2-й группы не лечили и они являлись контролем по отношению к здоровым и опытным группам. Поросят 3-й группы лечили химкокцидом в комплексе с полимиксином. Животным 4-й группы задавали химкокцид с полимиксином на фоне иммуностимуляции Т- и В-активином. Поросят 5-й группы лечили химкок-
цидом и полимиксином на фоне иммуностимуляции прополисом, 6-й группы - химкокцидом в комплексе с полимиксином на фоне иммуностимуляции Ти В-активином и пробиотикотерапии лактобифидом. Поросята 7-й группы получали химкокцид, полимиксин, прополис и лактобифид.
Химкокцид применяли из расчета 180 мг/кг живой массы с кормом в течение 10 сут, а затем из расчета 15-20 мг/кг в течение 30 сут, полимиксин -внутрь из расчета 10000 ЕД/кг с кормом в сутки в течение 30 сут, Т-активин вводили подкожно в дозе 2 мкг/кг 1 раз в сутки в течение 14 сут, В-активин (миелопид) - подкожно в дозе 50 мкг/кг, через день, 7 инъекций. Прополис использовали в виде прополисного молочка 2 раза в день в течение 30 сут в дозе 50 мл с питьевой водой. Лактобифид применяли согласно инструкции по применению. Кровь для биохимических исследований брали до начала опыта, а затем через 10, 20, 30, 45, 60 и 90 сут после начала эксперимента.
Результаты и обсуждение
Содержание гемоглобина в крови зараженных криптоспоридиями животных 2, 3, 5 и 7-й опытных групп в начале исследований было снижено по сравнению с показателем в 1-й контрольной группе на 31,17; 32,88; 32,2 и 33,22 % соответственно. К 60-дневному возрасту уровень гемоглобина в крови поросят 2-й группы снизился по сравнению с первоначальным на 12,0 г/л. Содержание гемоглобина в крови подсвинков 3, 5 и 7-й групп увеличилось по сравнению с их первоначальным значением по группе и с уровнем в крови поросят 2-й группы на 30,7 и 41,2; 38,5 и 49,6; 57,1 и 23,2 г/л.
В начале исследований у больных криптоспоридиозом поросят 2, 3, 5 и 7-й групп регистрировали снижение в крови уровня глюкозы на 37,5; 39,59; 35,42 и 41,67 % соответственно. Содержание глюкозы в крови животных 2-й группы, не подвергнутых лечению, продолжало снижаться и к 60-дневному возрасту подсвинков его значение было ниже первоначального уровня на 1,8 ммоль/л, а по сравнению с контрольным значением животных 1-й группы -на 3,8 ммоль/л. Уровень глюкозы в крови животных 3, 5 и 7-й групп имел тенденцию к повышению и к данному сроку опыта был выше его первоначального значения по группе и по сравнению с показателем животных 2-й группы на 0,9 и 2,6; 1,8 и 3,7; 2,5 и 4,1 ммоль/л.
Содержание общего билирубина по 2, 3, 5 и 7-й группам к началу исследований было выше, чем у животных 1-й контрольной группы, на 96,5; 100; 92,0 и 96,0 % соответственно. В последующем содержание общего билирубина в сыворотке крови подсвинков 2-й группы продолжало повышаться и превысило показатели животных 1, 3, 5 и 7-й групп на 3,3; 3,1; 4,1; 4,3 мкмоль/л. Описываемый показатель в сыворотке крови животных 3, 5 и 7-й опытных групп снизился на 2,1; 2,9 и 3,2 мкмоль/л.
Содержание креатинина в сыворотке крови больных поросят 2, 3, 5 и 7-й групп до опыта было выше, чем у контрольных животных 1-й группы на 42,2; 36,1; 45,8 и 44,4 % соответственно. К 60-дневному возрасту животных уровень креатинина у животных 2-й группы продолжал повышаться и превысил первоначальное значение на 85,1мкмоль/л, показатель контроля на 120,9 мкмоль/л, животных 3-й группы - на 97,6 мкмоль/л, 5-й группы - на 116,0 мкмоль/л, 7-й группы - на 128,1 мкмоль/л. К этому периоду уровень креати-нина в сыворотке крови подсвинков 3 и 5-й групп был выше, чем в контроле, на 23,3 и 4,9 мкмоль/л, а у животных 7-й группы его значение снизилось по сравнению с контрольным показателем на 7,2 мкмоль/л.
В сыворотке крови больных животных отмечали некоторое повышение активности триглицеридов. Первоначальный уровень данного показателя был выше, чем в контроле, по 2, 3, 5 и 7-й группам на 0,22; 0,24; 0,18 и 0,20 ммоль/л соответственно. К 60-дневному возрасту у животных 2-й группы значение триглицеридов повысилось на 0,60 ммоль/л, что превысило показа-
тель контроля на 0,785 ммоль/л, животных 3, 5 и 7-й опытных групп - на 0,815; 0,845 и 0,885 ммоль/л.
Уровень холестерина в сыворотке крови больных поросят 2, 3, 5 и 7-й групп до опыта был выше, чем в контроле, на 70,0; 83,5; 74,1 и 75,8 % соответственно. Данный показатель у животных 2-й группы имел тенденцию к дальнейшему повышению. К 60-дневному возрасту его значение увеличилось по сравнению с фоновым и контрольным уровнем на 0,6 и 1,73 ммоль/л, с данными животных 3, 5 и 7-й групп - на 1,57; 1,87 и 1,94 ммоль/л.
Результаты исследований динамики изменения показателей ферментативного обмена в организме свиней приведены в таблице.
Таблица
Динамика изменения показателей ферментативного обмена
Ферменты и срок Группы
исследования 1 2 3 5 7
ЛДГ, ЕД/л до 440,49± 516,45± 520,94± 540± 528,68±
опыта 7,05 4 60*** 3,63*** 9 49*** 2,51**
на 60-е 410,26± 896,93± 484,62± 410,55± 405,35±
сутки 5,83 10,78*** 6 46*** 3 45*** 3,36***
АлАТ, до 9,4±0,14 25,48± 25,84± 23,65± 24,93±
ЕД/л опыта 1 29*** 0 47*** 1,08*** 0,95***
на 60-е 7,2±0,13 56,75± 9,48± 7,84± 6,42±
сутки 143*** 0,22*** 0,35** 0,24**
АсАТ, до 36±1,0 48,76± 50,14± 51,62± 49,48±
ЕД/л опыта 0 40*** 2,25** 1 59*** 153***
на 60-е 34,6±0,51 124,3± 30,8±0,86* 27,3± 20,8±
сутки 2 07*** 0 97*** 1 07***
Щелочая до 69,7±0,77 87,4± 85,2± 86,3± 87,0±
фосфатаза, опыта 117*** 0,86*** 0 77*** 1,05***
ЕД/л на 60-е 74,3±0,45 99,3± 71,0±1,41 69,7± 62,4±
сутки 2 87*** 0 94*** 1,33***
Амилаза, до 1859,9± 2940,4± 2889,8± 2920,6± 2905,7±
ЕД/л опыта 50,03 20,98*** 33,88*** 2114*** 38,98***
на 60-е 1960,5± 3378,7± 1962,5± 1740± 1570,6±
сутки 12,2 35 44*** 8,19 11,64* 9 72***
Примечание . * - Р > 0,95; ** - Р > 0,99; *** - Р > 0,999 по сравнению с показателями животных 1-й контрольной группы.
В связи с тем, что в сыворотке крови свиней существенные изменения регистрировали в отношении ферментов, являющихся показателями ее физиологической и биохимической активности, нами были проведены исследования содержания уровня витаминов в печени животных при криптоспори-диозе и после терапии.
Содержание витамина В1, являющегося составной частью ферментов, катализирующих декарбоксилирование кетакислот в тканях, в печени свиней 2, 3, 5 и 7-й групп к началу исследований было значительно ниже их уровня в печени здоровых животных 1-й контрольной группы: на 3,1; 2,9; 3,1 и 3,0 мкг/г соответственно. К 60-му дню исследований уровень витамина В1 в печени животных 2-й группы был на 0,9 мкг/г ниже его первоначального значения и на 4,9 мкг/г ниже контрольного показателя. Содержание витамина В1 в печени животных 3, 5 и 7-й опытных групп увеличилось и к 60-му дню превысило первоначальное значение на 0,8; 2,4 и 2,9 мкг/г, у животных 2-й группы - на 1,9; 3,3 и 3,9 мкг/г.
Содержание витамина В2, участвующего в окислительно-восстановительных процессах и синтезе аденозинтрифосфорной кислоты - главного переносчика энергии в клетке, способствующего улучшению гликогенофикси-рующей, синтетической, антитоксической функции печени, повышению чувствительности печеночных клеток к действию инсулина, способствующей инкреции инсулина, нормализации уровня билирубина в крови, в печени свиней 2, 3, 5 и 7-й групп, больных криптоспоридиозом, к началу исследований было ниже, чем у животных 1-й контрольной группы на 19,7; 20,7; 19,4 и 21,2 мкг/г соответственно. В организме животных 2-й группы процесс снижения активности витамина В2 прогрессировал и его уровень снизился к 60-му дню опыта по сравнению с первоначальным значением на 14,3 мкг/г, с показателем контроля - на 47,6 мкг/г. Содержание витамина В2 в печени животных 3, 5 и 7-й опытных групп к 60-му дню исследования повысилось по сравнению с первоначальным значением на 9,8; 23,6 и 35,8 мкг/г, с показателем в печени свиней 2-й группы - на 23,1; 38,2 и 48,6 мкг/г. При этом уровень витамина В2 в печени животных 3-й группы был ниже, чем в контроле, на 24,5 мкг/г, 5-й группы - на 9,4 мкг/г, 7-й группы - соответствовал ему.
Показатель уровня аскорбиновой кислоты, участвующего в цикле Креб-са, необходимого для синтеза белка соединительной ткани - коллагена, гликогена и ряда гормонов, к началу исследований в печени свиней 2, 3, 5 и 7-й групп был ниже, чем в контроле, на 4,22; 4,58; 4,17 и 4,43 мкг/г соответственно. К 60-му дню опыта уровень витамина С в печени животных 2-й группы имел тенденцию к дальнейшему снижению: по сравнению с первоначальным уровнем на 3,34 мкг/г, с показателем контроля - на 9,86 мкг/г. Содержание витамина С в печени животных 3, 5 и 7-й групп в процессе опыта увеличилось и к 60-му дню превысило первоначальный уровень на 3,58; 5,87 и 8,63 мкг/г, показатель животных 2-й группы - на 6,56; 9,26 и 11,76 мкг/г. При этом содержание витамина С в печени свиней 3-й группы было ниже, чем в контроле, на 3,3 мкг/г, 5-й группы - соответствовал контролю, 7-й группы - превысил контрольные значения на 1,9 мкг/г.
Уровень витамина А в печени больных криптоспоридиозом поросят 2, 3, 5 и 7-й групп в начале исследований был ниже, чем у животных 1-й контрольной группы на 3067,0; 2934,0; 3045,0 и 3098 МЕ/г соответственно. У животных 2-й группы не подвергнутых лечению, содержание витамина А в печени продолжало снижаться и к 60-му дню исследований уступало первоначальному уровню на 2317,0 г, показателю контроля - на 6964,0 МЕ/г. Содержание витамина А в печени животных 3, 5 и 7-й опытных групп к данному сроку исследований увеличилось по сравнению с его первоначальным уровнем на 954,0; 3285,0 и 4443 мкг/г, с показателем животных 2-й группы -на 3404,0; 5624,0 и 6729,0 МЕ/г.
Содержание витамина Е (токоферола) в печени животных 2, 3, 5 и 7-й групп в начале исследования было ниже, чем в контроле, на 0,088; 0,083; 0,092 и 0,089 мг% соответственно. К 60-дню опыта его уровень был ниже первоначального значения на 0,042 мг%, контрольного - на 0,255 мг%. Содержание витамина Е в печени животных 3, 5 и 7-й опытных групп изменялось в сторону увеличения.
При организации лечебно-профилактических мероприятий при паразитарных заболеваниях, в том числе и криптоспоридиозе, необходимо знать функциональное состояние эндокринного аппарата, регулирующего обменные процессы в организме больного животного.
Исследования концентрации гормонов щитовидной железы, аденогипо-физа, коры надпочечника и поджелудочной железы проводили у животных 1, 2, 3, 5 и 7-й групп 30, 60 и 100-дневного возраста.
Содержание трийодтиронина в сыворотке крови животных 2-й группы в эти периоды исследований было ниже по сравнению с контрольным значением на 51,1; 36,0 и 35,4 % соответственно.
Значение уровня Т3 гормона в организме животных 3, 5 и 7-й опытных групп к 30-дневному возрасту было снижено и находилось примерно на уровне его по 2-й группе животных, уступая контрольному значению подсвинков 1-й группы на 59,2, 55,4 и 44,1 %. В последующие возрастные периоды уровень гормона Т3 в сыворотке крови животных описываемых опытных групп имел тенденцию к повышению, но еще продолжал уступать контрольным цифрам свиней 1-й группы к 60 и 90-му дням опыта по 3-й группе на 21,9 и 34,3 %, по 5-й группе - на 7,9 и 13,5 %. Содержание Т3 гормона в сыворотке крови подсвинков 7-й группы превысило контрольный уровень в эти возрастные периоды, на 13,5 и 9,7 %. При этом уровень Т3 гормона в организме подсвинков 3,5 и 7-й опытных групп увеличился по сравнению с его содержанием у животных 2-й группы, не подвергнутых лечению, к 60 и 90-дневному возрасту: по 3, 5 и 7-й группам на 21,9 и 16,9 %, на 43,9 и 32,0 % и на 65,8 и 69,8 %.
Концентрация тироксина (Т4) в сыворотке крови у 30-дневных животных 2, 3, 5 и 7-й групп была ниже, чем в контроле на 53,78; 56,54; 55,44 и 56,0 % соответственно. В последующие сроки опыта содержание Т4 гормона в организме подсвинков 2-й группы продолжало снижаться и уступало контролю у 60 и 90-дневных животных на 33,1 и 77,69 %. Уровень Т4 гормона в организме свиней 3,5 и 7-й опытных групп в последующие возрастные периоды (60 и 90-дневные) увеличился и превысил данные свиней 2-й группы на 13,6 и 26,1; 39,9 и 52,6 и 45,1 и 59,2 нмоль/л.
Содержание тиреотропного гормона (ТТГ) в сыворотке крови 30-дневных больных животных 2, 3, 5 и 7-й групп был снижен по сравнению с его уровнем у подсвинков 1-й группы на 26,79; 29,47; 32,15 и 28,58 % соответственно. В последующие возрастные периоды значение описываемого показателя в сыворотке крови свиней 2-й группы уменьшалось, а у животных 3, 5 и 7-й групп имело тенденцию к повышению. Показатель ТТГ в сыворотке крови свиней 3, 5 и 7-й групп в 60 и 90-дневном возрасте был выше, чем у подсвинков 2-й группы на 0,27 и 0,53; 0,38 и 0,89; 0,71 и 0,96 мед/л.
Концентрация соматотропного гормона (СТГ) в сыворотке крови животных 2, 3, 5 и 7-й групп было ниже по сравнению с контрольной цифрой на 51,0; 53,15; 49,52 и 49,04 % соответственно. В последующие сроки исследования уровень СТГ в сыворотке крови свиней 2-й группы снижался, а показатели подсвинков 3, 5 и 7-й групп повышались. При этом значения СТГ у животных 60 и 90-дневного возраста были выше значений животных 2-й группы на 18,1 и 16,2; 30,7 и 33,5; 34,8 и 36,4 пг/мл.
Криптоспоридиоз вызывал у поросят выраженное угнетение выработки в фолликулостимулирующего гормона (ФСТГ), содержание которого в сыворотке крови животных 2, 3, 5 и 7-й групп к 30-дневному возрасту животных снижалось по сравнению с показателем в 1-й контрольной группе на 56,67; 51,67; 50,0 и 53,34 мед/л соответственно. В последующие сроки опыта (60 и 90-дневные) уровень ФСТГ в сыворотке крови свиней 2-й группы еще более значительнее уступал его значению в контроле: на 63,05и 63,48 %. Содержание ФСТГ в сыворотке крови подсвинков 3, 5 и 7-й опытных групп, подвергнутых разным методам терапии, имело тенденцию к повышению.
Уровень кортизола в сыворотке крови 30-дневных животных 2, 3, 5 и 7-й групп был выше по сравнению в контрольным значением поросят 1 -й группы на 55,3, 58,8, 63,2 и 61,46 % соответственно. В последующие возрастные периоды содержание данного гормона в организме животных 2-й группы возрастало, превышая контроль в 60 и 90-дневном возрасте на 56,9 и 73,6 %. Показатели уровня кортизола в сыворотке крови подсвинков 3,5 и 7-й опытных групп к 60 и 90-дневному возрасту имели тенденцию к снижению по сравнению с их значением у животных 2-й группы на 20,7 и 28,3; 34,2 и 46,5; 35,7 и 54,0 нмоль/л. При этом в эти сроки уровень кортизола, также как и ФСТГ, в
сыворотке крови животных 5-й группы приблизился к контрольному показателю, а 7-й группы - соответствовал ему.
Содержание инсулина в сыворотке крови подсвинков 2,3,5 и 7-й групп, больных криптоспоридиозом, к 30-му дню опыта было выше, чем в контроле, на 71,4; 98,7; 101,7 и 80,5 %. В 60-дневном возрасте данный показатель в сыворотке крови подсвинков 3, 5 и 7-й групп был ниже его значения у животных 2-й группы на 22,0; 48,5 и 58,0 мк ед/л. При этом описываемый показатель у животных этих групп превышал контрольный уровень у свиней 1 -й группы на 37,5; 11,0 и 1,5 мк ед/л. К 100-дневному возрасту свиней содержание инсулина в сыворотке крови животных 3, 5 и 7-й групп снизилось, по сравнению с его уровнем у животных 2-й группы, на 60,0; 77,5 и 95 мк ед/л. Значение описываемого показателя в сыворотке крови подсвинков этих групп в данном возрастном периоде по 3 и 5-ой группам было выше, чем в контроле, на 28,6 и 11,1 мк ед/л, а по 7-й группе - ниже контрольной цифры на 6,4 мк ед/л.
Таким образом, криптоспоридиоз свиней приводит к нарушениям биохимических реакций организма, сопровождающимся гипогликемией, повышением уровня общего билирубина, креатинина, триглицеридов, холестерина, ЛДГ, АлАТ, АсАТ, щелочной фосфатазы и амилазы; снижением в печени содержания витаминов В1, В2, С, А и Е; угнетением функциональной активности щитовидной железы и аденогипофиза, проявляющееся снижением выработки трийодтиронина, тироксина, тиреотропного, саматотропного и фол-ликулостимулирующего гормонов, активизации коры надпочечников и инсу-лярного аппарата поджелудочной железы (повышение концентрации корти-зола и иммунореактивного инсулина). Антикокцидантная и антибиотикоте-рапия на фоне иммуностимуляции и пробиотикотерапии способствуют восстановлению биохимических показателей и функционального состояния эндокринной системы.
Литература
1. Васильева В.А., Малахов Н.С. Динамика активности аминотрансфераз при криптоспоридиозе в сыворотке крови поросят после курса лечения цико-статом и аватеком // Матер. докл. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 2006. - Вып. 7. -С.87-89.
2. Никитин В.Ф. Рекомендации по копрокопической диагностике крип-тоспоридиоза животных // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - 2003. - Т. 39. - С. 345-353.
3. Никитин В.Ф. // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - 2005. - Т. 41. - С. 262-270.
4. Тайчинов У.Г. Эпизоотология и терапия криптоспоридиоза телят // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - 1996. - Т. 32. - С. 95-105.
5. Тайчинов У.Г. Особенности эпизоотического процесса при криптоспо-ридиозе телят // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - 1997. - Т. 33. - С. 147-156.
The influence of the complex therapy of cryptosporidiosis on biochemical
parameters of pigs
R.T. Mannapova, S.I. Kalyuzhny
Complex therapy of pigs suffering from cryptosporidiosis by chimcoccidium, polymyxin and lactobifid in addition to immunostimulation by Т-асйутит and В-activinum or propolis leads to the restitution of biochemical factors and hormones in the organism of the animals.
Keywords: cryptosporidiosis, therapy, immunostimulation, biochemical parameters, pigs.