Влияние HLA-С-лигандов для KIR-рецепторов на выживаемость больных острыми миелоидными лейкозами после аллогенной трансплантации гемопоэтичесих стволовых клеток Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

382

Вопросы онкогематологии

Е. Г. Хамаганова, Е. Н. Паровичникова, Л. А. Кузьмина, Е. П. Кузьминова, А. А. Юшкова, В. Г. Савченко

Влияние HLA-C-лигандов для KIR-рецепторов на выживаемость больных острыми миелоидными лейкозами после аллогенной трансплантации гемопоэтичесих стволовых клеток

ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России, г. Москва

Целью аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) является излечение больного. Острые ми-елоидные лейкозы (ОМЛ) являются основным показанием к выполнению трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК). Алло-ТГСК ассоциирована с самым низким риском развития рецидива, что в основном обусловлено развитием реакции трансплантат против лейкоза. Однако рецидивы заболевания до сих пор являются одной из основных причин смертности пациентов после ТГСК [Савченко В. Г. и соавт. 2007, 2014].

Среди заболеваний, в терапию которых входит алло-ТГСК, миелоидные лейкозы наиболее чувствительны к действию натуральных киллерных (NK) клеток. Натуральные киллерные (NK) клетки - первая популяция лимфоцитов по времени восстановления после аллогенной ТГСК. NK-клетки лизируют клетки со сниженной экспрессией HLA-молекул класса 1, подобных собственным, без предварительного контакта и развития иммунного ответа. Гены KIR (killer cell immunoglobulin like receptors - киллерные иммуноглобулинподобные рецепторы) кодируют рецепторы, посредством которых NK-клетки распознают HLA-молекулы класса 1. KIR-гены картируются на хромосоме 19 и наследуются независимо от генов HLA, располагающихся на хромосоме 6. Функционально компетентными (лицензированными) становятся NK-клетки с KIR-рецепторами, для которых имеется соответствующий HLA-лиганд в геноме собственного организма.

Влияние HLA-С-лигандов для KIR-рецепторов на выживаемость ...

383

Ингибиторные KIR-рецепторы распознают полиморфные эпитопы HLA-молекул класса 1 (С1, С2 и Bw4), что опосредует их толерантность к клеткам, которые экспрессируют подобные HLA-молекулы. HLA-С аллели с аспарагином в позиции 80 пептидсвя-зывающей бороздки относятся к группе HLA-d и являются лигандами KIR2DL2/3; аллели, несущие лизин, относятся к группе HLA^2 и являются лигандами KIR2DL1 и KIR2DS1. Молекулы HLA-Bw4 - лиганды KIR3DL1. Отсутствие HLA-лиганда для ингибиторного KIR-рецептора сопровождается развитием аллореактивности NK-клеток и уменьшением частоты рецидива после алло-ТГСК как гаплоидентичных, так и полностью совместимых. У больных с HLA-C2 лигандами чаще развивается рецидив после трансплантации по сравнению с больными с HLA-^лигандами [Giebel S. e.a., 2005; Venstrom J.M. e.a., 2013; Cooley S. e.a., 2014].

Цель работы - изучить влияние HLA-лигандов для KIR-рецепторов на бессобытийную выживаемость у больных ОМЛ после аллогенной ТГСК.

Материалы и методы

В исследование были включены 30 больных ОМЛ, которым в 2010-2014 гг. в отделении трансплантации костного мозга Гематологического научного центра была выполнена аллогенная ТГСК. 18 больным алло-ТГСК выполнена от HLA-идентичного родственного донора, 12 пациентам - от HLA-совместимого неродственного донора (совпадение по генам HLA на уровне высокого разрешения 10/10). Категории риска развития рецидива после трансплантации - стандартная и высокая. Стандартный риск - больные ОМЛ с ТГСК в первой ремиссии, n=19. Высокий риск -больные ОМЛ с ТГСК вне первой ремиссии, трансплантация у больных «вторичным» ОМЛ, связанным с терапией предшествующего онкологического заболевания (n=11). Возраст пациентов от 19 до 60 лет (медиана - 37). Период наблюдения после алло-ТГСК 5-56 мес. При родственной ТГСК HLA-идентичность больного и сиблинга устанавливалась HLA-типированием генов HLA-A*-B*-C* при среднем разрешении (которое дополнялось типирова-нием с высоким разрешением в случаях гомозиготности) и генов HLA- DRB1*- DQB1 с высоким разрешением методом PCR-SSP, с праймерами “Olerup” (Sweden) в соответствии с рекомендациями производителя. При неродственной ТГСК HLA-типирование донора и больного проводилось методом PCR-SBT (sequence based typing) c высоким разрешением на наборах “Protrans” S4 (Germany). KIR-генотипирование проводилось наборами KIR Genotyping SSP Kit (Invitrogen, USA) в соответствии с рекомендациями производителя. Общая и бессобытийная выживаемость

384

Вопросы онкогематологии

рассчитывались по методу Каплана-Мейера. Значимые события: для общей выживаемости (ОВ) - летальный исход, для бессобытийной (БСВ) - рецидив (как молекулярный, так и гематологический) и летальный исход. Для оценки статистической значимости различий выживаемости использовали лог-ранговый критерий.

Результаты

Трехлетняя ОВ больных составила 58%, БСВ - 48%. Основным фактором, влияющим на выживаемость после алло-ТГСК была группа риска развития рецидива, к которой относился больной перед трансплантацией. У больных из группы стандартного риска 3-х летняя ОВ и БСВ составляли соответственно 85% и 65%, все больные из группы высокого риска погибли в течение 20 месяцев после алло-ТГСК.

У пациентов из группы стандартного риска было оценено влияние присутствия HLA-лигандов для KIR-рецепторов на БСВ после алло-ТГСК. Установлено, что больные, гомозиготные по HLA-Cl-лигандам (лиганд для KIR2DL2/3) имели тенденцию к увеличению БСВ по сравнению с больными-носителями HLA-C2-лигандов (лиганды для KIR2DL1) - HLA-C1/C2+HLA-C2/C2 - 87% vs 53%, p=0,1.

У больных с отсутствием HLA-Bw4-лигандов (для KIR3DL1) также была выявлена тенденция к повышению БСВ по сравнению с больными-носителями HLA-Bw4-эпитопа (87% vs 53%, p=0,1).

Таким образом, наше исследование в общем подтвердило наблюдения о более благоприятном влиянии HLA-d-лигандов на результаты аллогенной ТГСК у больных миелоидными лейкозами. Предполагаемые гипотезы: 1) KIR2DL1/HLA-C2 - более сильная ингибиторная комбинация, чем KIR2DL3/HLA-C1, что препятствует эффективному распознаванию и элиминации бластных клеток NK-клетками у больных с данной комбинацией KIR/HLA; 2) из-за меньшей специфичности рецептора KIR2DL2/3 по сравнению с KIR2DL1 - в отсутствии HLA-d-лигандов KIR2DL2/3-рецептор может распознавать и блокироваться HLA-C2-лигандами, что приводит к ингибиции NK-клеток у носителей HLA-C2. Благоприятный эффект отсутствия HLA-Bw4 может быть связан с развитием аллореактивности NK-клеток с KIR3DL1.

Вероятно, что накопление большего объема данных будет способствовать выявлению более точных взаимосвязей между изученными показателями и исходом аллогенных ТГСК у больных ОМЛ.