Використання середовища «Вінтуб» для виявлення адаптивних форм збудника туберкульозу Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:576.8.078:616-025

Власенко В.В.*, Власенко 1.Г.,**Войцщька О.М.*©

*В1нницъкий нацюналъний аграрнийутеерситет **Вшницъкии торг1велъно-економ1чнииутверситет КНТУ

ВИКОРИСТАННЯ СЕРЕДОВИЩА «В1НТУБ» ДЛЯ ВИЯВЛЕННЯ АДАПТИВНИХ ФОРМ ЗБУДНИКА ТУБЕРКУЛЬОЗУ

У дангй cmammi розглядаетъся одна гз причин реагування на туберкулт великог рогатог худоби в благополучних стадах та шляхи прискореного виявлення латентно! туберкулъозног тфекцп у тварин з використанням середовища В1НТУБ i моноспециф1чного набгру антисироваток.

Ключое1 слова: туберкулъоз, середовище В1НТУБ, моноспециф1чш антисироватки, алерг1я.

Протягом тривалого перюду вивчення збудниюв туберкульозу ссавщв були накопиченш даш про значний пол1морф1зм мжобактерш. Однак через складност1 культивування, i виявлення змшених форм збудника туберкульозу щ даш не знайшли достойного практичного застосування. Завдяки дослщженням В.В. Власенко (1998) i розробщ поживного середовища ВКГ з'явилась можливкть культивування i виявлення збудника туберкульозу 3i зниженою життездатшстю i ферментативною актившстю [1]. Встановлено, що на поживному середовищ1 ВКГ мжобактери туберкульозу проходять декшька морфолопчно ввдмшних стадш розвитку - фшьтрувальш форми, шаропод1бш, амебопод1бш утворення, коки i пол1морфш палички, яю не фарбуються по Цшь-Ншьсену. При несприятливих умовах даш структури можуть утворювати протопласти i riraHTCbKi кл1тини, а при сприятливих - синтезувати щось под1бне ВОСКОВО-ЛШЩНШ 0б0Л0НЩ, ЩО робить i'x П0м1тними при МЖрОСКОПИ у вигляд1 диплокоюв.

Особливий штерес представляв отримання росту на середовищ1 ВКГ препарата, шактивованих автоклавуванням i тих, що м1стять до 0,5% фенола. Встановлено, що автоклавована культуральна рщина M. bovis 8 давала на середовищ1 ВКГ picT др1бних кокопод1бних колонш. В мазках виявляли поодиною, подовжеш i «над1рваш» рубшово-червош палички на фош сишх пол1морфних паличок та коюв [2]. Под1бний picT давали Bei дослщжуваш препарати туберкулмв для ссавщв в1тчизняних та заруб1жних виробниюв. Таким чином, д1я високих температур в режим! автоклавування не викликае повно1 стерил1зуючо! ди на мжобактерп, що м1стяться в культуральнш рщиш M. bovis 8. Метою наших дослщжень було вивчення ймов1рносп шфжування тварин життездатними структурами, що знаходяться в туберкулт при його д1агностичному введенш тваринам, з використанням нового поживного середовища В1НТУБ i д1агностичного набору антисироваток в пластинчастш реакци аглютинаци.

© Власенко В.В., Власенко 1.Г., Войцщька О.М., 2013

39

Матер1али та методи. Об'ектом дослщження послужив ППД туберкулш для ссавщв виробництва Курсько! бюфабрики cepii' 29, який теля шкубаци в cyMimi i3 стимулятором росту в термостат! при 37°С протягом 48 годин, виавали в чашки Петр1 i3 середовищем В1НТУБ. PicT на середовищ1 В1НТУБ спостер1гали на 2-7 добу у Bcix пробах у вигляд1 суцшьного воскопод1бного нальоту. При фарбуванш за Цшь-Ншьсеном переважали сит палички та коки, зустр1чались також червош палички з синьою зернистютю, сиш палички з червоною зернистктю та rnmi морфолопчш форми. В мазках виготовлених i3 25 денно! культури, виявляли класичш по морфологи палички. При переЫванш отриманих культур ¿з середовища В1НТУБ на середовище Гельберга через 45 дшв був отриманий характерний для M. bovis picT. В мазках пофарбованих по Цшь-Ншьсену, виявлеш тонк1, шжш палички яскраво-рожевого кольору на фош сишх паличок та коюв.

Не менш важливий штерес представили результати бюпроби на п'яти морських свинках. Морським свинкам ввели суспенз1ю мжрооргашзм1в знятих i3 середовища В1НТУБ теля nocißy туберкулшу, приготовлену на мшеральному масл1 в доз1 1 мл пщшюрно. Протягом двох мюящв вели щоденне спостереження за станом здоров'я морських свинок. Пщ кшець другого мюяця провели туберкулшову пробу. 3 щею метою im вводили 0,1 мл стандартного розчину ППД туберкул1ну для ссавщв Курсько! бюфабрики cepii' 29 з актившстю 100 МЕ. Облж реакци проводили через 24 години.

Для виявлення можливого впливу елемент1в, що м1стяться в туберкулш1, здатних до репродукци в оргашзм1 тварин, провели дослщ на 100 коровах р1зного вжу i ф1зюлопчного стану. Для цього вщ цих Kopie вщбирали кров до i теля туберкулмзаци (через 72 години), i проводили noeiß кров1 на поживне середовище В1НТУБ з дослщженням в реакци аглютинаци.

В результат! проведеного дослщу був отриманий слщуючий результат:

Таблиця 1

Результат дослщження на морських свинках_

№ п/п Вага свинок до заражения, г Вага свинок теля заражения,г. Результат туберкулшово! проби,розм1р еритеми вмм.

1 720 700 22

2 310 285 27

3 350 330 0

4 370 345 0

5 380 354 0

1з таблиц! 1 видно, що дв1 морсью свинки, заражен! суспенз1ею м1крооргашзм1в знятих i3 середовища В1НТУБ теля поЫву туберкулшу, приготовленою на мшеральному масл1 в доз1 1 мл пщшюрно, були сенсибшзоваш, i при введенш im д1агностично! дози туберкулшу на мющ введения утворилась ч1тко виражена еритема.

40

Таблиця 2

Результат дослщження на коровах._

№ п.п 1нвертарний номер До туберкулшзацп Шсля туберкулшзацп

PicT на середовищ1 В1НТУБ РА с.а.с. M.Bovis PicT на середовищ1 В1НТУБ РА с.а.с. M.Bovis

Дшш

1 6293 - - + +++

2 6274 - - - -

Сухостшш

3 6201 - - - -

4 6680 - - - -

5 7957 - - + ++++

6 6574 - - - -

Нетел1

7 6153 - - + +++

8 6189 - - + +++

9 6114 - - - -

10 6248 - - - -

ИТОГО - - 4 (40%) 4 (40%)

Примака:

A.c.* - антисироватка

1з таблиц! 2 видно, що при nocißi кров! велико1 рогато! худоби, взято! до туберкулмзаци, росту на середовищ! ВШТУБ i иозитивних реакцш не спостер!галось. В той же час при дослщженш проб кров! вщ тих же Kopie через 72 години теля введения д1агностично! дози туберкулшу, на середовищ! В1НТУБ спостер1гався характерний picT у вигляд! суцшьного cipo-öinoro воскопод1бного нальоту i у вигляд! окремих колонш S-форми, блискучих, cipo-бшого кольору. В пластинчатш реакци аглютинац1!, i3 застосуванням моноспециф1чно! сироватки до м1кобактер1й M. bovis 8, з культурами, що виросли, був отриманий ч1ткий крупнозернистий аглютинат, з повним просв1тленням р1дини, з оцшкою ++++.

П1сля туберкул1н1зац!!, у 40% ¿з числа досл1джених Kopie був виявлений picT на середовищ1 ВШТУБ, що свщчить про те, що, можливо, планове поголовне алерг1чне дослщження тварин ¿з застосуванням ППД туберкулшу являеться одн1ею з причин персистування збудника туберкульозу у тварин i пост1йного виявлення реагуючих тварин в благополучних стадах.

KpiM того, отримаш результати вказують на ймов1рн1сть кнування адаптивних форм збудника туберкульозу, стшких до дй' високих температур, i доц1льн1сть застосування середовища В1НТУБ для отримання культур цих форм вщ р1зних 61олог1чних об'ект1в, в тому числ1 i i3 кров! тварин.

Висновки:

1. Адаптивн! форми туберкульозу стшю до впливу високих температур, збер^аючи свою життед!яльн!сть.

2. Планове поголовне алерпчне досл!дження тварин ¿з застосуванням ППД туберкул!ну, можливо, являеться одшею з причин персистування збудника туберкульозу у тварин.

41

3. Середовище ВШТУБ i д1агностичний Ha6ip анти сироваток з високою в1рогщшстю визначають наявшсть адаптивних форм збудника туберкульозу в pÍ3HHx бюлопчних об'ектах.

Л1тература

1. Власенко В.В. Микробиология туберкулеза в фокусе проблем современности. - Винница: «Гипанис». - 1999 - 224 с.

2. А.П. Лысенко, В.М. Безгин, В.Е. Козлов, А.Н. Притыченко. Получение високоактивного и специфичного аллергена для массовой диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота с помощью ультрафильтрации // Ветеринарная медицинаБеларуси. - 2001-2002. - №4-1. - С. 12-14.

Summary

In given article rates one of the reasons of occurrence of reacting cattle in safe herds, and as ways of the accelerated revealing of the latent tubercular infection at animals with application of VINTUB environment and a monospecific set of antiwheys is considere.

Key words: tuberculosis, medium VINTUB, monospecificantiwheys, allergy.

Рецензент - д.б.н., професор Маслянко Р.П.

42