ВИДОВОЙ СОСТАВ БАКТЕРИЙ И ИХ АССОЦИАЦИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ТЕЛЯТ С РЕСПИРАТОРНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Ветеринарный врач. 2024. № 6. С. 34 - 38 The Veterinarian. 2024; (6): 34 - 38

Научная статья

УДК 619:636.2:616:2

DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_6_34

ВИДОВОЙ СОСТАВ БАКТЕРИЙ И ИХ АССОЦИАЦИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ТЕЛЯТ С РЕСПИРАТОРНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

Вера Николаевна Макарова, кандидат ветеринарных наук, [email protected] Оксана Борисовна Бадеева, [email protected] Ирина Николаевна Симанова, irina_simanowa@mail. ru Марина Вениаминовна Корюкина, marischka7786@mail. ru

Вологодский филиал Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И.Скрябина Я.Р.Коваленко Российской академии наук, Вологда, Российская Федерация

Автор, ответственный за переписку: Марина Вениаминовна Корюкина.

Аннотация. Анализ статистических данных показывает, что за последние пять лет в области ежегодно переболевает респираторными болезнями в среднем 123,6±3,4 тыс. голов крупного рогатого скота, в том числе 34,3±1,7 тыс. голов молодняка, или 52,9±1,9 % и 43,6±2,6% соответственно от имеющегося поголовья. Показатель заболеваемости, как взрослого поголовья крупного рогатого скота, так и молодняка довольно стабилен, по годам колебался незначительно, коэффициент вариации составил соответственно 7,9 % и 13,4 %. Респираторными болезнями переболевает 28-34 %, а из них гибнет 22-28 % телят. Из числа заболевших погибает в возрасте от рождения до 10 дней 27,2 % телят, от 10 до 30 дней - 23,2 %, от одного до трех месяцев - 16,6 % телят. В развитии бактериальных инфекций у телят, принимают участие три основных возбудителя - энтеропатогенные Escherichia coli, сальмонеллы и пастереллы, которые как самостоятельно (5,0 %, 13,1 %, 13,8 % соответственно), так и в ассоциации с другими микроорганизмами, такими как Enterococcus faecalis и Streptococcus bovis (стрептококки группы Д) выделяются соответственно в 28,6 %, 25,7 % и 31,4 % случаях от общего количества исследованных проб. По результатам серологических исследований установлено, что наиболее значимыми в эпизоотическом плане оказались серогруппы E.coli 0137 (22,9 %), 026 (16,4 %), 0115 и 0119 (11,5%), 086 (9,8%). Также были выделены бактерии рода Streptococcus pneumoniae в 2,9% и Staphylococcus aureus в 5,8 % случаев. В ассоциациях наиболее часто встречались: стрептококки и пастереллы (28,6 %), сальмонеллы и стрептококки (25,7 %), стрептококки и Гр+ и Гр- палочки (31,4 %). Выделенная микрофлора при респираторных заболеваниях телят, обладала чувствительностью к группе фторхинолонов в 80,0% случаев. Наличие устойчивости установлено к сульфаниламидам и цефалоспоринам в 60,0 - 70,0 % случаев.

Ключевые слова: молодняк КРС, ассоциации бактерий, патогенность, респираторные заболевания, колибактериоз

Для цитирования: Макарова В.Н., Бадеева О.Б., Симанова И.Н., Корюкина М.В. Видовой состав бактерий и их ассоциаций, выделенных от телят с респираторными заболеваниями//Ветеринарный врач. 2024. №6. С. 34 - 38. DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_6_34

SPECIES COMPOSITION OF BACTERIA AND THEIR ASSOCIATIONS ISOLATED FROM

CALVES WITH RESPIRATORY DISEASES

Vera N. Makarova, candidate of veterinary sciences, [email protected] Oksana B. Badeeva, [email protected] Irina N. Simanova, [email protected] Marina V. Koryukina, [email protected]

Vologda branch of the Federal Scientific Center - All-Russian Research Institute of Experimental Veterinary Medicine named after K.I. Skryabin Y.R. Kovalenko of the Russian Academy of Sciences, Vologda, Russian Federation

Corresponding author: Marina Veniaminovna Koryukina.

Abstract. Analysis of statistical data shows that over the past five years in the region, an average of 123.6 ± 3.4 thousand heads of cattle suffer from respiratory diseases annually, including 34.3 ± 1.7 thousand heads of young animals, or 52, 9±1.9% and 43.6±2.6%, respectively, of the available livestock. The incidence rate of both adult cattle and young cattle is quite stable, fluctuating slightly over the years, the coefficient of variation was 7.9% and 13.4%, respectively. 28-34% suffer from respiratory diseases, and 22-28% of calves die. Of the sick, 27.2% of calves die between birth and 10 days, 23.2% from 10 to 30 days, and 16.6% from one to three months. Three main pathogens take part in the development of bacterial infections in calves - enteropathogenic Escherichia coli, salmonella and pasteurella, which both independently (5.0%, 13.1%, 13.8%, respectively) and in association with other microorganisms such both Enterococcus faecalis and Streptococcus bovis (group D streptococci) were isolated in 28.6%, 25.7% and 31.4% of cases, respectively, of the total number of samples studied. According to the results of serological studies, it was established that the most significant in epizootic terms were E. coli serogroups 0137 (22.9%), 026 (16.4%), 0115 and 0119 (11.5%), 086 (9.8%) . Bacteria of the genus Streptococcus pneumoniae were also isolated in 2.9% and Staphylococcus aureus in 5.8% of cases. The most common associations were: streptococci and pasteurella (28.6%), salmonella and streptococci (25.7%), streptococci and Gr+ and Gr-bacilli (31.4%). The isolated microflora for respiratory diseases of calves was sensitive to the group of fluoroquinolones in 80.0% of cases. The presence of resistance to sulfonamides and cephalosporins was established in 60.0 - 70.0% of cases.

Keywords: young cattle, bacterial associations, pathogenicity, respiratory diseases, colibacillosis

Введение. Респираторные болезни телят в эпизоотологическом и экономическом отношении являются наиболее значимой проблемой в условиях промышленного скотоводства. Причины возникновения респираторных болезней довольно разнообразны и остаются недостаточно выясненными [3, 4, 5, 9]. Как правило, из пораженных легких телят, больных бронхопневмонией, выделяют культуры условно-патогенных микроорганизмов, комменсалов верхних дыхательных путей в различных ассоциациях, что создает особый микробный фон.

Значимость смешанных инфекций возрастает в условиях концентрации большого поголовья животных, а наиболее уязвимым при этом оказывается молодняк. Особенностью течения этих заболеваний на животноводческих комплексах и крупных фермах является то, что они в короткий срок охватывают большие группы животных и изоляция больных становится практически невозможной [5, 6, 7, 8]. На этом фоне развиваются многие секундарные инфекции, обусловленные различной микрофлорой.

Длительное неконтролируемое применение антибиотиков для подавления патогенной и условно-патогенной микрофлоры при лечении болезней незаразной этиологии еще более усугубляет проблему, приводит к образованию лекарственной устойчивости бактерий [1, 2, 10].

Несмотря на значительное разнообразие видов микроорганизмов, выделяющихся от телят при смешанных респираторных инфекциях, этиологическое и эпизоотологическое значении большинства из них остается неизученным. Исследования в указанном направлении по-прежнему актуальны.

Материалы и методы. В работе использованы эпизоотологический, бактериологический и статистический методы исследований. Для бактериологических исследований отобрано 156 проб биоматериала от павших и больных телят до 4-х месячного возраста из пяти животноводческих хозяйств Вологодской области.

Для получения первичных культур использовали следующие питательные среды: МПБ, МПА, МПБ с глюкозой, Эндо, ВСА. Первичный отбор культур проводили на основании особенностей роста на средах и микроскопии препаратов из отдельных колоний. У выделенных культур изучали морфологические, культуральные, биохимические свойства по общепринятым схемам. Видовую принадлежность выделенной микрофлоры определяли с помощью определителя бактерий (Bergey, 1997).

Индикация и идентификация 138 микроорганизмов проводилась в соответствии с «Методическими указаниями по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями» (утв. Департаментом

ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия РФ, 1999 г); «Микробиологическая диагностика бактериальных болезней животных» (2005 г.).

Чувствительность к антибиотикам определяли стандартным диско-диффузионным методом согласно методическим указаниям МУК 4.2.1890-04 (утв. гл. государственным санитарным врачом РФ 04.03.2004).

Для определения патогенных свойств бактерий использовали агаровые культуры микроорганизмов: E. coli, Proteus, Citrobacter, Staphylococcus. С каждой из двух культур одного вида бактерий готовили смывы стерильным физиологическим раствором. Устанавливали взвесь бактерий в концентрации 1 млрд. микробных клеток/см3 (по оптическому стандарту мутности), после чего их смешивали в равной пропорции. Взвесями культур каждого вида бактерий заражали по 3 белые мышки массой 14-15 гр. внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл. Культура признается патогенной в случае гибели двух и более мышей в течение трех суток после заражения. Полученные результаты обработаны с использованием программы Microsoft Office, Exel, 2007 г.

Результаты исследований и их обсуждение. В Вологодской области интенсивно развивается молочное животноводство. Успешное развитие его предусматривает формирование высокопродуктивных стад из здоровых животных. Однако анализ состояния поголовья крупного рогатого скота за последние пять лет показал, что в области ежегодно переболевает в среднем 123,6±3,4 тыс. голов крупного рогатого скота, в том числе 34,3 тыс. голов молодняка, или 52,9 % и 43,6 % соответственно от имеющегося поголовья. Показатель заболеваемости как взрослого поголовья крупного рогатого скота, так и молодняка довольно стабилен, в целом по годам колебался незначительно, коэффициент вариации составил соответственно 7,9 % и 13,4 %. Респираторными болезнями переболевает 28-34 %, а из них гибнет 22-28 % телят.

Доля инфекционных заболеваний в общей патологии молодняка составляет лишь 4,9...5,5 %. Среди инфекционных болезней молодняка наиболее часто встречаются эшерихиоз (колибактериоз), сальмонеллез, пастереллез. Из числа заболевших погибает в возрасте от рождения до 10 дней 27,2 % телят, от 10 до 30 дней - 23,2 %, от одного до трех месяцев - 16,6 % телят.

Результаты бактериологических исследований, проведенных нами в пяти животноводческих хозяйствах, показали, что из патологического материала культуры различных микроорганизмов выделяются в 98,8 % случаев, чаще в ассоциациях. Видовой состав бактериальных возбудителей, выделенных из патологического материала от павших телят, при бактериальных инфекциях представлен на графике.

Рисунок 1 - Видовой состав микроорганизмов, выделяемых из патологического материала от телят

30 25 20 15 10 5 0

Приведенные данные свидетельствуют о том, что в развитии бактериальных инфекций у телят принимают участие три основных возбудителя - энтеропатогенные Escherichia coli, сальмонеллы и пастереллы, которые как самостоятельно (5,0 %, 13,1 %, 13,8 % соответственно), так и в ассоциации с другими микроорганизмами, такими как Enterococcus faecalis и Streptococcus bovis

I Ассоциации Streptococcus Pasteurella Salmonella

Не идентифицированны

Staphylococcus

E. Coli

Proteus

Citrobacter

Streptococcus pneumoniae I грибы рода Candida

(стрептококки группы Д), выделяются соответственно в 25,7 %, 31,4 % и 28,6 % случаях от общего количества исследованных проб.

Частота выявления Enterococcus faecalis (стрептококк группы Д) в ассоциациях с другими бактериями была высокой и составила 85,7 % случаев. Являясь условно-патогенной микрофлорой, стрептококки выступают в качестве осложняющего фактора при инфекционных заболеваниях различной этиологии. Также были выделены бактерии рода Streptococcus pneumoniae в 2,9 % и Staphylococcus aureus в 5,8 % случаев.

Патогенность E.coli и Salmonella подтверждена результатами серологических исследований, в частности РА. По результатам серологических исследований установлено, что наиболее значимыми в эпизоотическом плане оказались серогруппы E. coli 0137 (22,9 %), 026 - (16,4 %), 0115 и 0119 (11,5%), 086 (9,8%). В 56,7 % проб патологического материала, взятого от больных и павших телят, одновременно обнаружили два и более чисел О-серогрупп бактерий. У выделенных культур рода Salmonella были определены патогенные сероварианты: S. lagos, S. aberdeen, S. langenhorn.

Патогенные свойства других культур, а также рода Escherichia, не типируемых по О -антигену, определяли в биопробе на белых мышах. Наибольшей патогенностью обладали штаммы культур рода Citrobacter - они вызывали гибель всех животных в течение двух суток после заражения. Ассоциативное воздействие Staphylococcus и E. coli, а также Proteus и Citrobacter вызывало гибель всех мышей в течение двух суток.

Помимо патогенных бактерий, указанных выше, из патологического материала от телят изолированы Pasteurella multocida (4,4%), Pasteurella haemolitica в (9,4 %), Citrobacter freundii (2,9%), Proteus vulgaris (5,0%). В ассоциациях наиболее часто встречались: стрептококки и пастереллы (28,6 %), сальмонеллы и стрептококки (25,7 %), стрептококки и Гр+ и Гр- палочки (31,4%).

В настоящее время антибиотики используют при лечении животных с тяжелым течением болезней, вызванных в основном грамотрицательными бактериями и особенно резистентными штаммами. Успех терапии во многом зависит от правильного выбора антибиотика, что возможно лишь при наличии раннего бактериологического диагноза, дополненного результатами определения чувствительности выделенного возбудителя к антимикробным средствам. Нами проведено определение чувствительности выделенных микроорганизмов к антибиотикам по стандартной методике диффузии в агар с бумажными дисками. Оказалось, что микрофлора изолированная от телят, обладала чувствительностью к 1 - 4 препаратам, при этом наибольшее процентное соотношение чувствительности было отмечено по отношению к группе фторхинолонов (марбофлоцин) - в 80,0 % случаев, затем к макролидам (лексофлон) - в 60,0 % случаев. Также исследования показали, что у изолированных микроорганизмов от телят установлено наличие устойчивости к сульфаниламидам (детрим), пенициллинам (амоксисан) и цефалоспоринам (кобактан) в 60,0 - 70,0 % случаев.

Заключение. Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что доминирующая роль в возникновении респираторных заболеваний телят принадлежит патогенным бактериям, таким как сальмонеллы, пастереллы, эшерихии. Необходимо также отметить, что наряду с патогенной микрофлорой в патологическом процессе участвуют и различные условно-патогенные микроорганизмы, в том числе цитробактеры, протеи, стрептококки, чаще всего в ассоциации. Полученные данные необходимо учитывать при проведении профилактических мероприятий в животноводческих хозяйствах области, что позволит значительно снизить заболеваемость и отход телят от респираторной патологии.

Список источников

1. Веремей Э.И. Жолнерович М.Л. Современные взгляды на антибиотикотерапию больных животных // Ветеринария.1999. №1. С.43-47

2. Ефанова Л.И. Чувствительность микроорганизмов к антибактериальным препаратам при смешанных инфекциях животных/ Л.И. Ефанова, А.С. Транькова, В.В. Давыдова // Материалы первого съезда ветеринарных фармакологов 21-23 июня 2007 года. Воронеж. 2007. С.280-285.

3. Глотов А.Г., Терентьева Т.Е., Нефедченко А.В.. Гетерогенность пастерелл, выделенных от крупного рогатого скота на молочных комплексах. //Ветеринария. 2014. №12. С. 23-26

4. Глотов А.Г., Глотова Т.И., Нефедченко А.В. и др. Этиологическая структура массовых респираторных болезней молодняка крупного рогато скота в хозяйствах, занимающихся производством молока // Сиб. вестн. с.-х. науки. 2008. №3. С.72-78

5. Гутова М.О., Петрова О.Г. Анализ эпизоотической ситуации при респираторных заболеваниях крупного рогатого скота инфекционной этиологии в сельскохозяйственных предприятиях Нижегородской области // Международный аграрный научный журнал «Молодежь и наука-2016». 2016. №4

6. Петрова О.Г., Барашкин М.И. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота и проблемы профилактики на региональном уровне//Аграрный вестник Урала. 2014. № 6 (124). С. 40-42

7. Петрова О.Г., Кушнир Н.И., Хаматов М.Ф. и др. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота. Екатеринбург. 2007. 278 с.

8. Субботин В.В. Сальмонеллезы - актуальная проблема ветеринарной медицины // Журнал» Ветеринария и кормление». 2013. №4. С.59-61

9. Титова М.А., Шкиль Н.А., Шадрина М.Н. Частота выделения микроорганизмов рода Streptococcus при ассоциативных инфекциях молодняка сельскохозяйственных животных.// Мат. 2 Сибирского ветеринарного конгресса. Новосибирск. 2010. С. 370-372

10. Шахов А.Г. Влияние иммунного статуса на возникновение и развитие респираторных болезней у телят в условиях специализированных хозяйств / А.Г.Шахов с соавт. // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2012. №3 (15). С. 19-25

References

1. Veremey E.I. Zholnerovich M.L. Modern views on antibiotic therapy for sick animals // Veterinary Medicine. 1999. No. 1. P.43-47

2. Efanova L.I. Sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs in mixed infections of animals / L.I. Efanova, A.S. Trankova, V.V. Davydova // Materials of the first congress of veterinary pharmacologists June 21-23, 2007. Voronezh. 2007. P.280-285.

3. Glotov A.G., Terentyeva T.E., Nefedchenko A.V.. Heterogeneity of Pasteurella isolated from cattle at dairy complexes. //Veterinary medicine. 2014. No. 12. pp. 23-26

4. Glotov A.G., Glotova T.I., Nefedchenko A.V. etc. Etiological structure of mass respiratory diseases of young cattle on farms engaged in milk production // Sib. Vestn. agricultural Sciences. 2008. No. 3. P.72-78

5. Gutova M.O., Petrova O.G. Analysis of the epizootic situation with respiratory diseases of cattle of infectious etiology in agricultural enterprises of the Nizhny Novgorod region // International Agrarian Scientific Journal "Youth and Science-2016". 2016. No. 4

6. Petrova O.G., Barashkin M.I. Acute respiratory diseases of cattle and problems of prevention at the regional level // Agrarian Bulletin of the Urals. 2014. No. 6 (124). pp. 40-42

7. Petrova O.G., Kushnir N.I., Khamatov M.F. and others. Acute respiratory diseases of cattle. Ekaterinburg. 2007. 278 p.

8. Subbotin V.V. Salmonellosis is a pressing problem in veterinary medicine // Journal of Veterinary Medicine and Feeding. 2013. No. 4. P.59-61

9. Titova M.A., Shkil N.A., Shadrina M.N. Frequency of isolation of microorganisms of the genus Streptococcus during associative infections of young farm animals. // Mat. 2nd Siberian Veterinary Congress. Novosibirsk 2010. pp. 370-372

10. Shakhov A.G. The influence of immune status on the occurrence and development of respiratory diseases in calves in specialized farms / A.G. Shakhov et al. // Current issues in veterinary biology. 2012. No. 3 (15). pp. 19-25

Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.

Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с

написанием статьи.

All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.

The authors declare that there is no conflict of interest.

Принята к публикации / accepted for publication 27.05.2024;

© Макарова В.Н., Бадеева О.Б., Симанова И.Н., Корюкина М.В. 2024