CC BY
58
Процесс сушки осадков в приспособлении складывается из двух этапов: испарения влаги с поверхности осадка и диффузии влаги из внутренних слоев к поверхности. В результате исследований установлено, что в первом периоде удаляется 25-30% влаги. Во втором периоде происходит увеличение температуры осадка, удаляется остальная необходимая влага. При температуре 1300С за 12-15 мин сушки имеет конечную влажность 9-10%, при этом толщина слоя 120-150 мм. Чтобы сохранить белковую массу в неразрушенном состоянии, влажность осадка необходимо уменьшить до 5%.
Выводы. Таким образом, в результате исследований установлено, что предлагаемый доступный способ утилизации осадка ТСВ кокономотального производства позволяет решить вопросы не только энергосбережения, но и повышения экологической безопасности окружающей среды, обеспечить полную утилизацию осадка без образования отходов и дополнительной доход от реализации полученного продукта.
Эффективная сушка при низких температурах, простота эксплуатации, не требующая квалифицированного труда, соблюдение требований противопожарной и экологической безопасности можно достичь при автономии источника энергии. При этом снижается себестоимость переработки и повышается удобность доставки сырья за счет уменьшения массы сырья.
Библиографический список
1. Рубинов Э.Б. Технология шелка: учебник для вузов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1986. 391 с.
2. Юнусов Л.Ю. Физико-химические свойства натурального шелка в процессе переработке коконов. Ташкент: Наука, 1978. 146 с.
References
1. Rubinov E.B. Silk Technology: a textbook for high schools. M.: Light and Food Industries, 1986. 391 p.
2. Yunusov L.Y. Physico-Chemical Properties of Natural Silk in the Cocoon-Processing. Tashkent: Science, 1978. 146 p.
УДК 619: 578.831.31:636.1
ВИДОВАЯ И КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГРИБОВ АСПЕРГИЛЛ СЛИЗИСТЫХ ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ У ЛОШАДЕЙ
Species and Quantity Characteristics of Fungi Aspergillus Located in Upper Respiratory Tract (URT)
at Chronic Respiratory Diseases of Horses
Бовкун Г.Ф., кандидат ветеринарных наук, доцент Овсеенко Ю.В., кандидат биологических наук доцент Малявко И.В., кандидат биологических наук, доцент [email protected] Яковлева С.Е., доктор биологических наук, профессор Bovkun G.F., Ovseenko Yu.V., Malyavko I.V., Yakovleva S.E.
ФГБОУ ВО «Брянский государственный аграрный университет» Bryansk State Agrarian University
Аннотация. Установлена этиологическая значимость грибов аспергилл, устойчивых к фунги-цидным средствам при хронических респираторных заболеваниях у лошадей, протекающих с поражением трахеи, бронхов, легких.
Summary. The etiological significance of fungi Aspergillus, resistant to fungicidal agents at chronic diseases in horses, causing the affection of trachea, bronchial tubes, and lungs, has been established.
Ключевые слова: лошади, грибы аспергиллы, респираторные заболевания, фунгицидные средства.
Key words: horses, fungi Aspergillus, respiratory diseases, fungicidal agents.
Введение. Респираторные болезни, преимущественно вирусной этиологии, занимают ведущее место в патологии спортивных лошадей [1]. В литературе практически нет сведений о взаимосвязи респираторных болезней лошадей с особенностями биоценоза слизистой носоглотки и доминирующей роли ми-козного фактора. Тогда как в медицине исследования биоценоза слизистой носоглотки и установления
встречаемости отдельных видов и родов микроорганизмов имеет важное значение для установления их этиологиической значимости при хронических респираторных заболеваниях [2]. Зарубежные и отечественные ученые рассматривают микробиоценоз слизистой полости носа как динамичное состояние, композицию которого составляют множество микроорганизмов как постоянно персистирующих на слизистых оболочках дыхательных путей, так и случайно попадающих на слизистую верхних дыхательных путей с вдыхаемом воздухом [10], а воздушно-капельный путь передачи, сохранность в воздухе в течение длительного времени определяет их доминирующее место в популяционном аспекте [11].
Немногочисленные источники и руководства [1,4,6] свидетельствуют о редком возникновении заболеваний органов дыхания взрослых млекопитающих микозной этиологии и персистировании в дыхательных путях грибов аспергилл.
В медицинской литературе [7, 5] грибы аспергиллы относят к возбудителям оппортунистических микозов, имеющих низкую патогенность и способных вызывать заболевания у больных с различными нарушениями иммунобиологической резистентности. Клинические проявления аспергиллезов представлены широким спектром заболеваний от аллергических реакций до диссеминированных форм с развитием гнойно-грануломатозного, фибринозного воспаления при бронхолегочной патологии [8].
Грибы аспергиллы широко распространены в природе, их много в почве, где в аэробных условиях они расщепляют клетчатку, всегда присутствуют на кормах, во влажном воздухе, воде. Известно более 200 видов грибов аспергилл, при патологии животных и человека выделяли не более 20 видов [4,6].
Аспергиллез - ведущее заболевание птенцов при содержании в помещениях с относительной влажностью выше 80%. Ведущий возбудитель аспергиллеза птенцов и млекопитающих гриб Aspergillus fumigatus, реже выделяют виды Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Aspergillus nidulans[4, 6], а в медицинских источниках сообщается о выделении при аспергиллезе человека видов Aspergillus niger, Aspergillus terreus [5,7].
Установление роли микозного этиологического фактора при хронических респираторных заболеваниях у лошадей, влияния микозной контаминации на гематологические, биохимические показатели крови больных животных, чувствительности выделенных грибов к фунгицидным препаратам являлось целью настоящей работы.
Материалы и методы. Было проведено клиническое обследование органов дыхания 23 лошадей конно-спортивных секций Брянской области, имеющих признаки респираторных заболеваний (кашель сухой и влажный, фырканье, одышка после умеренной физической нагрузки). Возможность вегетирования грибов исключали обследованием десяти клинически здоровых животных.
Клиническое обследование проводили общепринятыми методами, которые включали: термометрию, определение частоты, ритма, напряжения, наполнения пульса; осмотр грудной клетки, определение глубины и типа, частоты дыхания; пальпацию гортани; аускультацию трахеи, легких [3].
Материалом для микологического исследования служили стабилизированная кровь, смывы и выделения из носовой полости, забор которых проводили стерильным тампоном в 5°мл стерильного физраствора. Смывы и кровь в объеме 0,5 мл сеяли на среды Чапека и Сабуро в чашках Петри. Культивирование вели при 37 0С в течение 5 суток, затем при 25 0С в течение 5 суток. Выросшие колонии идентифицировали по культуральным и морфологическим свойствам, микроскопией препарата «раздавленной капли» из мицелия выросших колоний [6].
Принадлежность мицелия к роду Aspergillus определяли по наличию в препарате круглых конидий, конидиеносцев с головками, а вид аспергилл по цвету мицелия [6].
Количественное содержание выделенных микроорганизмов выражали в виде lg КОЕ/мл. Для выявления положения грибов в структуре микробиоценоза смывов использовали показатель постоянства - С [9], который определяли по формуле:
С= (п х 100) : N ,
где С - показатель постоянства, %; п - число выборок, содержащих грибы; N - общее число выборок.
Спектр чувствительности выделенных культур грибов к фунгицидным препаратам: флуконазо-лу (Фл), клиндамицину (Кл), амфотерицину (АМФ), нистатину (Не), кетаконазолу (КЛ), интракона-золу (ИТ) определяли диско-диффузионным методом, согласно МУК 4.2.1890-04 на среде Мюллера -Хинтона, используя диски с противогрибковыми препаратами.
Результаты и их обсуждение. По данным анамнеза у всех обследованных животные был кашель, усиливающийся после физической нагрузки. При обследовании в носовой полости обнаруживали слизисто-катаральные или слизисто-серозные выделения.
Все обследованные животные имели нормальную температуру тела (37,5-37,7°). Частота пульса у большинства животных была 24-29 ударов в минуту, наполнение артерии (пульсовая волна) была средняя, состояние артериальной стенки умеренно напряженное, что соответствовало норме. Тахикардию отмечали у шести лошадей, частота пульса от 58 до 62 удара в минуту. У этих же животных пальпацией подчелюстной артерии обнаруживали экстрасистолии, напряжение и наполнение пульса - слабые.
У большинства обследуемых животных тип дыхания был смешанный (грудо-брюшной), а частота дыханий 10-16 в минуту. У шести больных отмечали абдоминальный тип дыхания, при частоте дыхания 5-6 в минуту, при выдохе напряжение межреберных мышц, без деформации грудной клетки. Показатели клинического обследования лошадей представлены в таблице 1.
Таблица 1 -Клинические показатели обследуемых лошадей
№/№ Вид патологии Клинические признаки Количество больных
1 Хронический бронхит Слизисто-катаральный экссудат, хрипы в легких 10
2 Трахеит Серозно-слизистый экссудат, хрипы в трахеи 7
3 Эмфизема Слизисто-катаральный экссудат, ослабленное везикулярное дыхание, хрипы в легких, напряжение межреберных мышц при вдохе, тахикардия, экстрасистолии 6
4 Здоровые Нет экссудата, хрипов, везикулярное дыхание в легких 10
Клиническим обследованием 33 спортивных лошадей установлены респираторные заболевания: хронический бронхит у 10 голов, трахеит у 7, выявлено 6 лошадей, больных эмфиземой, 10 животных были клинически здоровы. При хроническом бронхите у больных отмечали выделение слизи-сто-катарального носового экссудата, хрипы в легких, при трахеите - выделение серозно-слизистого экссудата, хрипы в трахеи. Животные, больные эмфиземой, имели напряженность межреберных мышц при выдохе, поверхностное, редкое, ослабленное везикулярное дыхание, хрипы в легких, выделение слизисто-катарального экссудата. У этих же животных были признаки легочно-сердечной недостаточности: тахикардия, экстрасистолии, пульс слабого напряжения и наполнения.
Микологическим исследованием экссудата и смывов слизистой носовой полости больных животных были выделены грибы аспергиллы, показатель постоянства их выделения у больных хроническим бронхитом и эмфиземой составил 100 %, при трахеите -85,7 %, что подтверждает этиологическую значимость аспергилл при респираторной патологии лошадей. Из исследуемого материала от здоровых животных микроскопические грибы не выделяли, в смывах у одной лошади содержались гнилостные бациллы, которые всегда присутствуют в воздухе. Показатель постоянства гнилостных бацилл составлял 10 %, что свидетельствует о принадлежности к случайной микрофлоре, не подлежащей анализу.
Таблица 2 - Спектр, концентрация микрофлоры больных лошадей ^ КОЕ/мл М±м, % выделения
№/№ Вид микрофлоры Xp.бронхит п=10 Трахеит n=7 Эмфизема n =6 Здоровые n =6
1. Aspergillus fumigatus 3,2±0,42/40 - - -
2. Aspergillus parasiticus Aspergillus fumigatus 2,76±0,15/30 - - -
3. Aspergillus fumigatus Aspergillus niger 2,23±0,4/30 - - -
4. Aspergillus parasiticus Aspergillus flavus - 1,96±0,21/57,1 5,04±0,31/50 -
5. Aspergillus flavus Aspergillus niger - 2,14±0,13/42,8 - -
6. Aspergillus flavus - - 5,07±0,26/50 -
7. Гнилостные бациллы - 1/14,2 - 1/10
От больных лошадей выделяли один или несколько видов аспергилл, концентрация которых была различной. Самую высокую плотность аспергилл обнаруживали в смывах больных эмфиземой лошадей 5,04±0,31 -5,07 ±0,26 lg КОЕ/мл, наименьшую при трахеите 1,96±0,21 - 2,14±0,13 lg КОЕ/мл, при бронхите плотность спор составляла 2,23±0,47 - 3,2±0,42 lg КОЕ/мл.
Было выделено четыре вида грибов аспергилл, в том числе ведущий возбудитель аспергиллеза Aspergillus fumigatus и другие виды: Aspergillus niger, Aspergillus flavus, указанные в литературных источниках как реже встречаемые [4,7]. Выделяли и Aspergillus parasiticus, который, по литературным данным[4,5,6], является продуцентом афлатоксинов, вызывающих острые интоксикации у животных и человека с поражением печени, почек, центральной нервной системы и осложнениями: циррозом, печеночно-клеточной карциномой.
Наибольшую этиологическую вероятность возникновения хронического бронхита отмечали от проникновения нескольких видов аспергилл, среди которых доминировал Aspergillus fumigatus, показатель постоянства 100% в чистой культуре и в смеси с Aspergillus parasiticus, который выделяли от 70% больных ..
У лошадей, больных трахеитом доминировали Aspergillus parasiticus и Aspergillus flavus, показатель постоянства - 57,1%, что позволяет отнести аспергиллы этих видов к постоянной микрофлоре, обусловливающей заболевание.
При эмфиземе выделяли ассоциации аспергилл видов Aspergillus parasiticus и Aspergillus flavus, а также чистую культуру Aspergillus flavus. Частота встречаемости ассоциаций аспергилл -50% и чистой культуры Aspergillus flavus - 50%, что свидетельствовало о постоянном значении выделенных видов аспергилл в этиологии эмфиземы.
Патогенез аспергиллеза легких, изученный на лабораторных животных [8], свидетельствует о развитие периваскулярных и перибронхиальных инфильтратов с последующим формированием абсцессов в легких, заполненных некротическими массами и мицелием, пневмонии. Диссеминирование аспергилл в организме медленно формирует тяжелый токсикоз [8].
Таблица 3- Чувствительность выделенных культур аспергилл к фунгицидным препаратам Д мм/чувствительность
Культуры Фл Кл АМФ He Кет КЛ ИТ
Aspergillus fumigatus 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 12/пром 0/уст
Aspergillus niger 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 12/пром 0/уст
Aspergillus flavus 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 12/пром 0/уст
Aspergillus parasiticus 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 0/уст 22/чув 0/уст
Примечание: 0/уст - отсутствие зоны задержки роста/ устойчив; 12/пром- зона задержки роста -12 мм, чувствительность промежуточная; 22/чув- зона задержки роста 22 мм, чувствительный.
Выделенные культуры были устойчивы к флуконазолу, амфотерицину, нистатину, кетаконазо-лу, итраконазолу, среди перечисленных ингибиторов грибов ведущими являются амфотерицин и итраконазол, но к ним выделенные культуры были устойчивы.
Промежуточную чувствительность установили к клотримазолу у Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Aspergillus niger, т.е. лечебное ингибирующее действие могло быть от применения повышенных доз препарата.
Aspergillus parasiticus был чувствителен к клотримазолу, но этот препарат применяют только местно, инъекционные формы не разработаны
На отсутствие специфических, эффективных средств лечения аспергиллеза указывают общепризнанные руководства [4,6,7].
Заключение. Грибы аспергиллы, устойчивые к фунгицидным средствам, занимали ведущее место в биоценозе секрета слизистой носа лошадей с признаками хронических респираторных заболеваний. Показатель постоянства их выделения при хроническом бронхите и эмфиземе 100%, при трахеите - 85,7%, что подтверждало их этиологическую значимость при указанной патологии.
Видовая и количественная характеристика аспергилл свидетельствовала о вегетировании при хроническом бронхите Aspergillus fumigatus и его ассоциации с Aspergillus parasiticus, при трахеите -ассоциации Aspergillus parasiticus и Aspergillus flavus, при эмфиземе - ассоциации видов Aspergillus parasiticus и Aspergillus flavus, а также чистой культуры Aspergillus flavus.
Библиографический список
1. Андросик Н.Н., Финогенов А.Ю. Инфекционные болезни лошадей. Минск: Техноперспекти-ва, 2009. 256 с.
2. Батуро А.П., Романенко Э.Е. Доминирование St.aureus в микробиоценозе полости носа у детей и взрослых с инфекционным и аллергическим ринитом // Журнал микробиологии. 2015. № 1. С. 72-74.
3. Беляков И.М. Диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1976. С 24-55.
4. Инфекционные болезни животных / Б.Ф. Бессарабов, А.А. Ватутин, Е.С. Воронин и др.; под ред. А.А. Сидорчука. М.: КолосС, 2007. С. 492-498.
5. Классификация микроорганизмов - возбудителей инфекционных заболеваний человека, простейших, гельминтов и ядов биологического происхождения по группам патогенности. СП 1.3. 131803: приложение 1 к приказу №В-ОД от 11.01.2009г. 18с.
6. Кузнецов А.Ф. Ветеринарная микология. М.: Юрайт, 2016. 417с.
7. Медицинская микробиология /под ред. В.И. Покровского. 3-е изд. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. С 519-522.
8. Морозов В.Л., Альджамбаев И.Ш. Экспериментальная модель аспергиллеза легких // Журнал микробиологии. 1989. № 1. С. 14-17.
9. Bern C., Martines J. The magnitude of the geobal problem of diarrheal disease // Vale J.Biol.Med. 1988. 51: 505-512.
10. Forman A. Wormald P. Different biofilms, different disease.A clinic outcomes study // Lari-goscop. 2010.120: P.1701.
11. Maged M., Tarek M., Zeinab A. Immunological role of nasal St.aureus carriage in patients with persistent allergic rhinitis // Pap.African Medical J. 2008. 1: P.3.
References
1. Androsik N.N., Finogenov A. Yu. Infektsionnye bolezni loshadey. Minsk: Tekhnoperspektiva, 2009. 256 s.
2. Baturo A.P., Romanenko E.E. Dominirovanie St.aureus v mikrobiotsenoze polosti nosa u detey i vzroslykh s infektsionnym i allergicheskim rinitom // Zhurnal mikrobiologii. 2015. № 1. S. 72-74.
3. Belyakov I.M. Diagnostika vnutrennikh nezaraznykh bolezney sel'skokhozyaystven-nykh zhivotnykh. M.: Kolos, 1976. S 24-55.
4. Infektsionnye bolezni zhivotnykh /B.F. Bessarabov, A.A. Vashutin, E.S. Voronin i dr.; pod red. A.A. Sidorchuka. M.: KolosS, 2007. S. 492-498.
5. Klassifikatsiya mikroorganizmov - vozbuditeley infektsionnykh zabolevaniy cheloveka, prostey-shikh, gel'mintov i yadov biologicheskogo proiskhozhdeniya po gruppam patogennosti. SP 1.3. 1318-03: prilozhenie 1 kprikazu №V-OD ot 11.01.2009g. 18s.
6. Kuznetsov A.F. Veterinarnaya mikologiya. M.: Yurayt, 2016. 417s.
7. Meditsinskaya mikrobiologiya /pod red. V.I. Pokrovskogo. 3-e izd. M.: GEOTAR-Media, 2005. S 519-522.
8. Morozov V.L., Al'dzhambaev I.Sh. Eksperimental'naya model' aspergilleza legkikh // Zhurnal mikrobiologii. 1989. № 1. S. 14-17.
9. Bern C., Martines J. The magnitude of the geobal problem of diarrheal disease // Vale J.Biol.Med. 1988. 51: 505-512.
10. Forman A. Wormald P. Different biofilms, different disease. A clinic outcomes study // Larigoscop. 2010.120: P.1701.
11. Maged M., Tarek M., Zeinab A. Immunological role of nasal St.aureus carriage in patients with persistent allergic rhinitis // Pap.African Medical J. 2008. 1: P.3.
