CC BY
0
© Коллектив авторов, 2024
Сухова М.М.1' 2, Бязрова М.Г.1' 3, Банделюк А.С.4, Зубкова О.В.4, Михайлов А.А.1' 2, Прилипов А.Г.14, Шмаров М.М.4, Филатов А.В.12
Вектор-нейтрализующая активность сывороточных антител при ревакцинации аденовирусной вакциной «Спутник Лайт»
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства, 115522, г. Москва, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», 119234, г. Москва, Российская Федерация
3 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени П. Лумумбы» Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, 117198, г. Москва, Российская Федерация
4 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 123098, г. Москва, Российская Федерация
Резюме
Введение. В последние годы аденовирусные (Ad) вакцины прочно заняли свое место как одна из лидирующих платформ для создания новых вакцин. Наиболее ярко преимущества Ad-вакцин проявились недавно, во время пандемии COVID-19, которая была вызвана глобальным распространением коронавируса SARS-CoV-2. Вместе с тем у Ad-вакцин имеется одна особенность, которая не позволяет говорить о них как об абсолютно нейтральном носителе. Эта особенность связана с существованием и возможным влиянием на развитие иммунного ответа антивекторных антител. Существуют противоречивые данные о возможном влиянии антивекторных антител на успешность вакцинации с помощью Ad-вакцин.
Цель исследования - сравнить между собой два метода определения вектор-нейтра-лизующих антител.
Материал и методы. В исследование были включены 20 добровольцев (8 мужчин и 12 женщин в возрасте от 18 до 70 лет, медиана - 23,5 года). Все добровольцы с января по февраль 2021 г. были вакцинированы двумя дозами вакцины «Спутник V». Первая доза была на основе rAd26, за ней через 21 день следовала вторая доза - на основе rAd5. Примерно через 9 мес после первичной вакцинации была проведена ревакцинация с помощью вакцины «Спутник Лайт» на основе rAd26. Образцы сывороток собирали непосредственно перед бустерной вакцинацией (временная точка Т1), а также через 1 мес после нее (временная точка Т2).
В работе были использованы два варианта вектора rAd26. В одном варианте вектор содержал репортерный ген GFP, кодирующий зеленый флуоресцирующий белок GFP (rAd26-GFP), а в другом варианте - ген полноразмерного S-белка SARS-CoV-2 дикого типа (rAd26-Spike). В тесте вектор-нейтрализации в качестве клеток-мишеней были использованы клетки карциномы легких человека A549. Трансдукцию клеток под действием rAd26-GFP определяли подсчетом доли GFP+-клеток, а под действием rAd26-Spike - определением доли Spike+-клеток с помощью моноклонального антитела XR15 против S-белка.
Результаты. Прежде всего вектор-нейтрализующую активность измерили с использованием вектора rAd26-GFP. Сыворотки от вакцинированных добровольцев дозоза-висимым образом ингибировали проникновение вектора rAd26-GFP в клетки A549. Сыворотки, собранные перед бустерной вакцинацией, обладали заметной вектор-ней-трализующей активностью (медиана = 156), которая превышала базовые значения. После бустерной вакцинации уровень вектор-нейтрализующих антител заметно повышался относительно значений до ревакцинации (медиана = 606; T1 vs T2 p < 0,001).
При использовании вектора rAd26-Spike были получены результаты, которые во многом соответствовали данным, полученным с помощью rAd26-GFP. Обнаружена высокая корреляция между результатами, полученными с помощью векторов rAd26-GFP и rAd26-Spike, причем она еще более увеличивалась при блокировке анти^-антител с помощью препарата рекомбинантного S-белка.
Для корреспонденции
Филатов Александр Васильевич -доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией иммунохимии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-6460-9427
Заключение. Метод с применением вектора rAd26-GFP более простой, его результаты не зависят от присутствия в образце сыворотки антител против S-белка. Метод с использованием вектора rAd26-Spike более трудоемкий - требуется дополнительное блокирование антител против S-белка. Однако этот метод позволяет использовать вектор непосредственно из вакцинного препарата, а результаты, полученные этим методом, более соответствуют реальной ситуации.
Ключевые слова: аденовирусные вакцины; серотипы Ad; антивекторные антитела; вектор-нейтрализующие антитела; SARS-CoV-2; S-белок; COVID-19
Статья получена 05.09.2024. Принята в печать 28.09.2024.
Для цитирования: Сухова М.М., Бязрова М.Г., Банделюк А.С., Зубкова О.В., Михайлов А.А., Прили-пов А.Г., Шмаров М.М., Филатов А.В. Вектор-нейтрализующая активность сывороточных антител при ревакцинации аденовирусной вакциной «Спутник Лайт». Иммунология. 2024; 45 (5): 582-593. DOI: https://doi. org/10.33029/1816-2134-2024-45-5-582-593
Финансирование. Исследование выполнено при поддержке гранта Российского научного фонда № 24-1500266 (https://rscf.ru/project/24-15-00266/).
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Сбор и обработка материала - Сухова М.М., Бязрова М.Г., Банделюк А.С., Зубкова О.В., Михайлов А. А.; написание текста, редактирование - Прилипов А.Г., Шмаров М.М., Филатов А.В.; окончательный вариант и целостность текста - Шмаров М.М., Филатов А.В.
Sukhova M.M.1, 2, Byazrova M.G.1 3, Bandelyuk A.S.4, Zubkova O.V.4, Mikhailov A.A.1 2, Prilipov A.G.1 4, Shmarov M.M.4, Filatov A.V.1 2
Vector-neutralizing activity of serum antibodies during revaccination with adenovirus vaccine «Sputnik Light»
1 National Research Center - Institute of Immunology of the Federal Medical-Biological Agency, 115522, Moscow, Russian Federation
2 M.V. Lomonosov Moscow State University, 119234, Moscow, Russian Federation
3 Рeoples' Friendship University of Russia named after P. Lumumba, Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation, 117198, Moscow, Russian Federation
4 Federal Research Centre of Epidemiology and Microbiology named after Honorary Academician N.F. Gamaleya, Ministry of Health of the Russian Federation, 123098, Moscow, Russian Federation
Abstract
Introduction. In recent years, adenovirus vaccines have firmly established themselves as one of the leading platforms for creating new vaccines. The advantages of adenovirus vaccines have recently become most evident during the COVID-19 pandemic, which was caused by the global spread of the SARS-CoV-2 coronavirus. However, adenovirus vaccines have one feature that does not allow us to talk about these vaccines as an absolutely neutral carrier. This feature is associated with the existence and possible influence of anti-vector antibodies on the development of the immune response. There is conflicting data on the possible influence of anti-vector antibodies on the success of vaccination with adenovirus vaccines.
The aim of the study was to compare two methods for detecting vector-neutralizing antibodies.
Material and methods. The study included 20 volunteers (8 men and 12 women aged 18 to 70 years, median 23.5 years). All volunteers were vaccinated with two doses of the «Sputnik V» vaccine between January and February 2021. The first dose was rAd26-based, followed by the second dose 21 days later, based on rAd5. Approximately 9 months after the primary vaccination, revaccination was performed using the rAd26-based «Sputnik Light» vaccine. Serum samples were collected immediately before (time point T1) and one month after booster vaccination (time point T2).
Two variants of the rAd26 vector were used in the study. One variant contained the reporter gene GFP encoding the green fluorescent protein GFP (rAd26-GFP), and the other variant contained the gene of the full-length S-protein of the wild-type SARS-CoV-2 (rAd26-Spike). In the vector neutralization test, human lung carcinoma A549 cells were used as target cells. Trans-
For correspondence
Alexander V. Filatov -Dr.Sci., PhD, Prof., Head of the Immunochemistry Laboratory, NRC Institute of Immunology, FMBA of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-6460-9427
duction of cells by rAd26-GFP was determined by counting the proportion of GFP+ cells and by determining the proportion of Spike+ cells by rAd26-Spike using the monoclonal antibody XR15 against the S-protein.
Results. Vector-neutralizing activity was first measured using the rAd26-GFP vector. Sera from vaccinated volunteers dose-dependently inhibited the entry of the rAd26-GFP vector into A549 cells. Sera collected before booster vaccination had significant vector-neutralizing activity (median = 156), which was higher than the baseline values. After booster vaccination, the level of vector-neutralizing antibodies significantly increased relative to the values before revaccination (median = 606; T1 vs T2 p < 0.001). Using the rAd26-Spike vector results were obtained that were largely consistent with the data obtained using rAd26-GFP. A high correlation was found between the results obtained using the rAd26-GFP and rAd26-Spike vectors, which was further increased by blocking anti-Spike antibodies using a recombinant Spike protein preparation.
Conclusion. The method using the rAd26-GFP vector is simpler, and its results do not depend on the presence of anti-S-antibodies in the serum sample. The method using the rAd26-Spike vector seems to be more labor-intensive, requiring additional blocking of anti-S-antibo-dies. However, this method allows the use of the vector directly from the vaccine preparation, and the results obtained by this method are more consistent with the real situation.
Keywords: adenovirus vaccines; Ad serotypes; antivector antibodies; vector-neutralizing antibodies; SARS-CoV-2; Spike protein; COVID-19
Received 05.09.2024. Accepted 28.09.2024.
For citation: Sukhova M.M., Byazrova M.G., Bandelyuk A.S., Zubkova O.V, Mikhailov A.A., Prilipov A.G., Shmarov M.M., Filatov A.V. Vector-neutralizing activity of serum antibodies during revaccination with adenovirus vaccine «Sputnik Light». Immunologiya. 2024; 45 (5): 582-93. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2024-45-5-582-593 (in Russian)
Funding. The study was supported by the grant ofRussian Science Foundation (RSF) No. 24-15-00266, https://rscf. ru/project/24-15-00266/.
Conflict of interests. The authors declare no conflict of interests.
Authors' contribution. Collection and processing of material - Sukhova M.M., Byazrova M.G., Bandelyuk A.S., Zubkova O.V., Mikhailov A.A.; text writing, editing - Prilipov A.G., Shmarov M.M., Filatov A.V.; the final version of the text - Shmarov M.M., Filatov A.V.
Введение
В последние годы аденовирусные (Ad) вакцины прочно заняли свое место как одна из лидирующих платформ для создания новых вакцин [1]. Некоторые Ad-вакцины еще находятся на стадии клинических исследований, другие уже одобрены и нашли свое применение. Среди них можно отметить вакцины против заболеваний, вызываемых вирусом Зика [2], гриппа [3], Эбола [4] и некоторыми другими патогенами. Мощным толчком к созданию новых Ad-вакцин послужила недавняя пандемия СОУГО-19, которая была вызвана глобальным распространением коронавируса 8АЯ8-СоУ-2. За это время в рекордно короткие сроки были разработаны вакцины «Спутник V», Ad26.COV2.S, Ad5-nCoV и Л2Б1222 [5-8].
Ad-вакцины выгодно отличаются от традиционных вакцин сокращенными сроками разработки, возможностью создания вакцинных препаратов против новых и малоисследованных патогенов, безопасным и легко масштабируемым производством, а также легкостью последующей модификации [9]. Кроме того, Ad-векторы могут быть сконструированы для экспрессии сразу нескольких антигенов, потенциально обес-
печивая защиту от нескольких заболеваний в одной вакцине. Наряду с этим Ad-вакцины имеют высокий профиль безопасности и переносимости. Все это придает им универсальность. Вместе с тем у Ad-вакцин имеется одна особенность, которая не позволяет говорить о них как об абсолютно нейтральном носителе. Она связана с существованием и возможным влиянием на развитие иммунного ответа антивекторных антител, как предсущест-вующих, так и индуцированных самой вакцинацией.
Существуют противоречивые данные о возможном влиянии антивекторных антител на успешность вакцинации с помощью Ad-вакцин. Согласно одним исследованиям, антивекторные антитела снижают эффективность иммунизации [10-12]. Предсуществующие антивекторные антитела против Ad5 могут подавлять иммуногенность вакцин на основе этого серотипа у животных и людей [13, 14]. В других исследованиях утверждается, что предсуществующие анти-Ad26-анти-тела не влияют на уровень 8-специфических антител, образующихся при вакцинации Ad26.COV2.S [15]. Было также обнаружено, что гуморальный иммунный ответ на бустерную вакцинацию не зависит от уровня индуцированных антивекторных антител [16, 17].
При выборе оптимального режима вакцинации необходимо учитывать уровень антивекторных антител. Это указывает на необходимость более подробного изучения динамики антивекторных антител. В свою очередь, для этого требуется отработка тестов по определению антивекторных антител.
В настоящей работе мы сравнили два способа определения вектор-нейтрализующих антител, которые показали согласующиеся результаты по увеличению уровня антивекторных антител после ревакцинации Ad-вакциной «Спутник Лайт».
Материал и методы
Участники исследования. В исследование были включены 20 добровольцев (8 мужчин и 12 женщин в возрасте от 18 до 70 лет, медиана - 23,5 года). Все добровольцы с января по февраль 2021 г. были вакцинированы двумя дозами вакцины «Спутник V». Первая доза была на основе rAd26, за ней, через 21 день, следовала вторая доза - на основе rAd5. Примерно через 9 мес после первичной вакцинации была проведена ревакцинация с помощью вакцины «Спутник Лайт» на основе rAd26. Образцы сывороток добровольцев были собраны непосредственно перед ревакцинацией и через 1 мес после нее.
Исследование выполнено в соответствии с требованиями Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека в качестве испытуемого». От каждого участника исследования получено письменное информированное согласие. Протокол исследования рассмотрен и одобрен Этическим комитетом ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России (протокол № 12-1, 29 декабря 2020 г.).
Наработка и очистка аденовирусов. В работе были использованы два варианта Ad-векторов, построенных на основе серотипа Ad26. В одном варианте вектор содержал репортерный ген GFP, кодирующий зеленый флуоресцирующий белок GFP (Ad26-GFP), а в другом варианте - ген полноразмерного S-белка SARS-CoV-2 дикого типа (Ad26-Spike). Ad26-GFP получали путем трансфекции соответствующей плазмиды в клетки пакующей линии HEK293 с использованием реагента Metafectene Pro (Biontex, Германия), как было описано ранее [18, 19].
Рекомбинантный Ad26-GFP накапливали в клетках HEK293 вплоть до развития цитопатического эффекта. Далее вектор очищали и концентрировали ультрацентрифугированием лизатов зараженных клеток в градиенте плотности хлористого цезия. Концентрацию Ad26-GFP в очищенном препарате определяли спектро-фотометрически, учитывая, что одна единица оптической плотности при 260 нм соответствует 1,12 • 1012 вирусных частиц в 1 мл. В качестве вектора Ad26-Spike использовали вакцинный препарат «Спутник Лайт».
Вирусная трансдукция. Сыворотки разводили в культуральной среде и готовили 6 последователь-
ных 5-кратных разведений. Разведенные сыворотки объединяли с равным объемом rAd26 и инкубировали в течение 1 ч. После инкубации 40 мкл смеси сыворотки с rAd-вектором добавляли в лунки, содержавшие 25 000 клеток-мишеней в объеме 40 мкл. Клетки с вирусом инкубировали в течение 24 ч в CO2-инку-баторе (37 °C, 5 % CO2), после чего клетки собирали, промывали и количественно определяли долю клеток, экспрессирующих репортерный трансген, как было описано ранее [20].
В части экспериментов анти^-активность в образцах сыворотки блокировали, добавляя к сывороткам препарат рекомбинантного S-белка (160 мкг/мл) и инкубируя смесь в течение 3 ч. Препарат S-белка был любезно предоставлен А.В. Боголюбовой-Кузнецовой. Заблокированные сыворотки использовали далее, как описано выше для неблокированных сывороток.
Проточная цитометрия. Долю трансдуцированных Spike+-клеток определяли непрямым иммунофлуорес-центным методом. Для этого клетки в течение 30 мин инкубировали с 5 мкг/мл мышиного МкАт против S-белка SARS-CoV-2 дикого типа (клон XR15 любезно предоставлен Ю.С. Лебединым). Далее клетки отмывали центрифугированием и окрашивали антителами козы против мышиного IgG, которые были коньюгированы с фикоэритрином (BioLegend, кат. № 405307, США). После инкубации в течение 30 мин при комнатной температуре в темноте клетки отмывали центрифугированием и анализировали. Долю трансдуцированных GFP+-клеток определяли с помощью проточного цитометра CytoFLEX S (Beckman Coulter, США). Клетки, окрашенные мышиным МкАт посторонней специфичности и соответствующим изотипом, использовали в качестве отрицательного контроля. Обработку цитофлуоримет-рических данных проводили при помощи программы FlowJo (Becton Dickinson, США).
Статистическая обработка данных. Полученные данные обрабатывали с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версия 8.4.3 (GraphPad, США). Значимость различий между выборками оценивали с помощью критерия Манна-Уитни. Различия сравниваемых параметров считали статистически значимыми при p < 0,05. На графиках показаны медианы (средняя линия), усы показывают 1,5-кратный межквар-тильный размах. Количественную оценку статистической связи между параметрами проводили, рассчитывая коэффициенты ранговой корреляции по Спирмену (г).
Результаты
Для определения уровня антивекторных антител в сыворотках добровольцев были использованы два альтернативных метода.
В качестве клеток-мишеней мы использовали клетки карциномы легких человека A549. Клетки инфицировали двумя вариантами rAd26: один из них нес репортерный ген зеленого флуоресцирующего белка (rAd26-GFP), а другой содержал ген полноразмерного S-белка SARS-CoV-2 (rAd26-Spike). Транс -
гла2б-сгр
^-►СГР
гЛа26-8р1ке
Г
Анти-8р1ке
э
100 п
(и
+ ' 50
Рч Рч
о
-©-Т1 -В-Т2
10 100 1000 10 000 Разведение сывороток
100 000
100
50
-©-Т1
"ЕЙ2
10 100 1000 10 000 100 000
Разведение сывороток
Рис. 1. Дизайн экспериментов по определению вектор-нейтрализующей активности сывороточных антител с использованием векторов rAd26-GFP и rAd26-Spike
А, Б - схематическое изображение теста по определению вектор-нейтрализующей активности антител с использованием векторов rAd26-GFP (А) и rAd26-Spike (Б). В левой части панелей А и Б изображена трансдукция в отсутствии вектор-ней-трализующих антител, в правой части - полная блокировка трансдукции вектор-нейтрализующими антителами; В, Г - сыворотки от вакцинированных добровольцев дозозависимым образом ингибировали проникновение векторов rAd26-GFP (В) и rAd26-Spike (Г) в клетки A549. Экспрессию Б-белка на поверхности клеток A549 проявляли с помощью обработки МкАт ХЯ15 против Б-белка с последующим окрашиванием поликлональными антителами козы против мышиного IgG, которые были конъюгированы с фикоэритрином.
дукцию клеток под действием rAd26-GFP определяли подсчетом доли GFP+-клеток, а во втором случае -определением доли Spike+-клеток с помощью МкАт ХЯ15 против S-белка (рис. 1А, Б). Дозы векторов rAd26-GFP и rAd26-S были подобраны таким образом, чтобы обеспечивать трансдукцию примерно 50 % клеток A549. В качестве источника антивекторных антител мы использовали сыворотки добровольцев, которые были вакцинированы двумя дозами «Спутника V», а затем через 9 мес получили бустерную вакцинацию на основе Ad26. Образцы сывороток собирали непосредственно перед бустерной вакцинацей (временная точка Т1), а также через 1 мес после нее (временная точка Т2).
Серийно разведенные образцы сывороток инкубировали с rAd26-GFP и rAd26-Spike и добавляли к клеткам-мишеням. Сыворотки от вакцинированных добровольцев дозозависимым образом ингиби-ровали проникновение вектора rAd26 в клетки A549 (рис. 1В, Г). Уровень вектор-нейтрализующих антител количественно определяли как разведение сыворотки, которое обеспечивало полумаксимальное нейтрализующее действие (Ш50).
Как известно, вакцинация приводит к появлению в сыворотке вакцинированных доноров антител против S-белка SARS-CoV-2. Анти^-антитела сыворотки будут связываться со S-белком на поверхности трансду-цированных клеток A549 и экранировать его от реак-
0
0
Без блокировки
э
С блокировкой
я Ч ъ
а ■■
а
я
0>
3
2
£
-
Я
а
«
ъ Я
ей
Еь
чо "В
100 ООО
10 ООО
1000
1ОО
10 -
Медиана
Э
100 000 п
10 000 -
1000 -
100 -
10
Медиана
156 Т1
606 Т2
Т1
0.8990
156
121
¿Г
100 000 п
10 000 -
1000 -
100
10 -
Медиана
100 000
10 000 -
1000 -
100 -
10
Медиана
121 Т1
1007 Т2
Т2
0.9950
606
1007
Рис. 2. Определение вектор-нейтрализующих антител с помощью вектора гЛё26-ОЕР
А, Б - Ю50 вектор-нейтрализующих антител во временных точках Т1 и Т2 с использованием блокировки с помощью рекомбинант-ного Б-белка (Б) и без блокировки (А); Г, Д - сравнение Ю50 вектор-нейтрализующих антител в условиях блокировки с помощью рекомбинантного Б-белка и без блокировки во временных точках Т1 (В) и Т2 (Г). Пунктирные линии обозначают порог позитивности.
ж**
ции с проявляющим антителом ХЯ15. Для того, чтобы предотвратить такое экранирование, тестируемые сыворотки перед смешиванием с rAd26 блокировали добавлением рекомбинантного 8-белка и инкубацией в течение 3 ч (рис. 1Б). Мы использовали подобранную ранее насыщающую концентрацию рекомбинантного 8-белка, которая полностью отменяла возможное связывание сывороточных анти-8-антител с поверхностью клеток Л549. В параллельных экспериментах сыворотки использовались без дополнительной блокировки с помощью рекомбинантного 8-белка.
В первую очередь вектор-нейтрализующая активность была измерена с использованием вектора МЛ26-
вБР (рис. 2). Обнаружено, что сыворотки, собранные перед бустерной вакцинацией, обладали заметной век-тор-нейтрализующей активностью (медиана = 156), которая превышала базовые значения. После бустерной вакцинации уровень вектор-нейтрализующих антител заметно повышался относительно значений до ревакцинации (медиана = 606; Т1 уз Т2 р < 0,001; рис. 2А). При блокировке сыворотки с помощью рекомбинантного 8-белка наблюдалось аналогичное увеличение активности антивекторных антител в результате ревакцинации (рис. 2А). Блокировка с помощью 8-белка заметно не влияла ни на пред-, ни на постбустерный уровень век-тор-нейтрализующих антител (р = 0,899, р = 0,995 для
л ч
ъ
а ■■
а
се 0>
э
2
£
-
с«
а
«
ъ
а
си &
!» чо "В
э
10 000 п
1000 -
100 -
10 -
1
Медиана
э
10 000
1000
100
10
1
Медиана
Без блокировки
А А А*
240 Т1
л>™
240 #
1759 Т2
Т1
68
э
10 000 п
1000 -
100 -
10 -
1
Медиана
10 000
1000
100
10 -
1
Медиана
С блокировкой
А А А А
68 Т1
IV
1759 #
452 Т2
Т2
452
с
Рис. 3. Определение вектор-нейтрализующих антител с помощью вектора rAd26-Spike
А, Б - Ю50 вектор-нейтрализующих антител во временных точках Т1 и Т2 с использованием блокировки с помощью рекомбинант-ного Б-белка (Б) и без блокировки (А); Г, Д - сравнение Ю50 вектор-нейтрализующих антител в условиях блокировки с помощью рекомбинантного Б-белка и без блокировки во временных точках Т1 (В) и Т2 (Г). Пунктирные линии обозначают порог позитивности.
А*
Т1 и Т2 соответственно, рис. 2В, Г). Прямое сравнение данных, полученных с блокировкой и без нее, показало, что она не влияет на активность антивекторных антител, определенных с помощью rAd26-GFP.
Далее мы определяли антивекторные антитела при использовании вектора rAd26-Spike. В этом случае результаты во многом соответствовали данным, полученным с помощью rAd26-GFP, однако они в заметной степени зависели от того, как выполнялись эксперименты: с использованием блокирующих концентраций рекомбинантного S-белка или без его добавления. В точке до бустерной вакцинации (Т1) наблюдался заметный уровень антивекторных антител
(медиана = 240 и 68 с блокировкой и без соответственно), который значительно повышался в результате бустерной вакцинации (медиана = 1759 и 452, Т1 уз Т2 р < 0,0001 и р < 0,0001 в экспериментах с блокировкой и без соответственно).
Прямое сравнение результатов, полученных в экспериментах с блокировкой и без нее, показало заметное снижение показателя ГО50 для антивекторных антител (без блокировки уз с блокировкой р < 0,001 и р < 0,001 для Т1 и Т2 соответственно, рис. 2В, Г).
Для того чтобы оценить взаимосвязь между результатами, полученными с помощью векторов rAd26-GFP и rAd26-Spike, мы провели корреляционный анализ
э
10 000
■Ö <
1000 -
100
10
Без блокировки
10
100
ID,
1000 10 000 , rAd26-GFP
О Т1 О Т2 r = 0,75 p < 0,0001
100 000
э
10 000
d Ad
1000 -
100
10 -I—8-
С блокировкой
о <?'
Q9% О
10
100
О Т1 О Т2 r = 0,87 p < 0,0001
1000 10 000 100 000
Рис. 4. Корреляционный анализ между значениями Ш50, полученными с помощью векторов гА(!26-ОЕР и гА(!26-8р1ке Корреляция в условиях блокировки с помощью рекомбинантного Б-белка (Б) и без блокировки (А).
ID50, rAd26-GFP
данных по антивекгорным антителам (рис. 4). Данные, полученные с использованием векторов rAd26-GFP и rAd26-Spike, хорошо коррелировали между собой. В экспериментах без блокировки наблюдалась хорошая корреляция между значениями ID50, полученными этими методами (r = 0,75, p < 0,0001). Еще более высокая корреляция между этими параметрами наблюдалась в экспериментах с блокировкой (r = 0,87, p < 0,0001).
Обсуждение
Исходно «Спутник V» был разработан как двухдозо-вая вакцина с использованием для первой и второй дозы двух Ad-серотипов. Такая схема была выбрана, для того, чтобы минимизировать влияние на иммунный ответ антивекторных антител. В первом компоненте «Спутника V» используется вектор на основе серотипа Ad26. Этот серотип характеризуется низкой распространенностью в европеоидной популяции, что снижает возможное влияние на иммунный ответ предсуществующих антивекторных антител. Второй компонент «Спутника V» основан на серотипе Ad5, серопревалентность которого в зависимости от географического региона доходит до 80 % [21]. Такая высокая серопревалентность могла бы повлиять на первичную вакцинацию, но поскольку Ad5 используется для второй дозы, то, по всей видимости, вторичный иммунный ответ против целевого антигена - S-белка - мало зависит от присутствия антивекторных антител [8], и при стандартной двухдозовой схеме иммунизации влиянием антивекторных антител можно пренебречь.
С появлением мутантных вариантов SARS-CoV-2, в первую очередь дельта и омикрон, для повышения протекции против COVID-19 возникла необходимость в 3-кратном и даже в многократном введении вакцин «Спутник V» или «Спутник Лайт». В этом случае необходимо учитывать возможное влияние антивекторных антител.
Проблема антивекторных антител существует и в отношении других Ad-вакцин. Так, например, вакцина Ad26.COV2.S, разработанная компанией Janssen
Pharmaceuticals, изначально предполагалась для однократного введения, однако позднее для усиления защиты также было предложено использовать ее в 2-дозовом режиме [22].
Вакцина Vaxzevria, производимая компанией Oxford-AstraZeneca, основанная на нереплицирующемся аденовирусе шимпанзе Y25, в стандартном варианте используется в 2-дозовом режиме, однако недавно сообщалось также о 3-дозовой вакцинации [23].
В этих условиях проблема антивекторных антител возникает с новой силой. Для выбора оптимальной схемы вакцинации необходимо отслеживать образование антивекторных антител. Мы сравнили два альтернативных метода их определения. В этих методах используются два различных вектора: rAd26-GFP и rAd26-Spike. Следует отметить, что каждый метод имеет свои преимущества и недостатки. Метод с применением вектора rAd26-GFP является более простым, его результаты не зависят от присутствия в образце сыворотки антител против S-белка. Однако вектор rAd26-GFP является модельным по отношению к вектору, используемому в вакцине. Метод с использованием вектора rAd26-Spike более трудоемкий - требуется проводить дополнительное блокирование антител против S-белка. Однако этот метод позволяет использовать вектор непосредственно из вакцинного препарата, и результаты, полученные этим методом, более соответствуют реальной ситуации. Мы обнаружили высокую корреляцию между результатами, полученными обоими методами, которая еще более увеличивается при блокировке анти^-антител с помощью препарата рекомбинантного S-белка.
Оба метода дали согласующиеся результаты, которые показывают, что как первичная, так и бустерная вакцинация приводит к повышению уровня антивекторных антител. Это находится в хорошем соответствии с более ранними исследованиями [16, 24]. Ранее нами также было показано, что отмеченное повышение уровня антивекторных антител не приводит к снижению последующего гумо-
рального ответа. Это касается как уровня S-специфичес-ких, так и SARS-CoV-2-нейтрализующих антител [16].
Антивекторные антитела имеют еще один аспект, связанный с так называемым эффектом антителозависи-мого усиления (antibody-dependent enhancement, ADE) инфекции. Это явление было описано для ряда вакцин, разработанных против РСВ-инфекции, гриппа и лихорадки денге, а также для случаев вторичных инфекций [25, 26]. Разработанные нами методы также могут быть полезны при изучении механизма ADE.
■ Литература
1. Custers J., Kim D., Leyssen M., Gurwith M., Tomaka F., Robertson J., Heijnen E., Condit R., Shukarev G., Heerwegh D., van Heesbeen R., Schuitemaker H., Douoguih M., Evans E., Smith E.R., Chen R.T. Vaccines based on replication incompetent Ad26 viral vectors: Standardized template with key considerations for a risk/benefit assessment. Vaccine. 2021; 39 (22): 3081-101. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.09.018
2. Salisch N.C., Stephenson K.E., Williams K., Cox F., Van Der Fits L., Heerwegh D. A double-blind, randomized, placebo-controlled phase 1 study of Ad26.ZIKV.001, an Ad26-vectored anti-Zika virus vaccine. Ann. Intern. Med. 2021; 174 (5): 585-94. DOI: https://doi. org/10.7326/M20-5306
3. Coughlan L., Sridhar S., Payne R., Edmans M., Milicic A., Ven-katraman N. Heterologous two-dose vaccination with simian adenovirus and poxvirus vectors elicits long-lasting cellular immunity to influenza virus A in healthy adults. EBioMedicine. 2018; 29: 146-54. DOI: https:// doi.org/10.1016/j.ebiom.2018.02.011
4. Volkmann A., Williamson A.-L., Weidenthaler H., Meyer T.P.H., Robertson J.S., Excler J.-L. The Brighton Collaboration standardized template for collection of key information for risk/benefit assessment of a Modified Vaccinia Ankara (MVA) vaccine platform. Vaccine. 2021; 39: 3067-80. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.08.050
5. Zhu F.-C., Li Y.-H., Guan X.-H., Hou L.-H., Wang W.-J., Li J.-X. Safety, tolerability, and immunogenicity of a recombinant adenovirus type-5 vectored COVID-19 vaccine: a dose-escalation, open-label, nonran-domised, first-in-human trial. Lancet. 2020; 395: 1845-54. DOI: https:// doi.org/10.1016/S0140-6736(20)31208-3
6. Bos R., Rutten L., Van Der Lubbe J.E.M., Bakkers M.J.G., Hardenberg G., Wegmann F. Ad26 vector-based COVID-19 vaccine encoding a prefusion-stabilized SARS-CoV-2 Spike immunogen induces potent humoral and cellular immune responses. NPJ Vaccines. 2020; 5: 91. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-020-00243-x
7. Voysey M., Clemens S.A.C., Madhi S.A., Weckx L.Y., Fole-gatti P.M., Aley P.K. Safety and efficacy of the ChAdOx1 nCoV-19 vaccine (AZD1222) against SARS-CoV-2: an interim analysis of four randomized controlled trials in Brazil, South Africa, and the UK. Lancet. 2021; 397: 99-111. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)32661-1
8. Logunov D.Y., Dolzhikova I.V., Shcheblyakov D.V., Tukh-vatulin A.I., Zubkova O.V., Dzharullaeva A.S., Kovyrshina A.V., Lubenets N.L.,Grousova D.M., Erokhova A.S., Botikov A.G., Izhaeva F.M., Popova O., Ozharovskaya T.A., Esmagambetov I.B., Favor-skaya I.A., Zrelkin D.I., Voronina D.V., Shcherbinin D.N., Semikhin A.S., Simakova Y.V., Tokarskaya E.A., Egorova D.A., Shmarov M.M., Nikitenko N.A., Gushchin V.A., Smolyarchuk E.A., Zyryanov S.K., Bori-sevich S.V., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. Safety and efficacy of an rAd26 and rAd5 vector-based heterologous prime-boost COVID-19 vaccine: an interim analysis of a randomised controlled phase 3 trial in Russia. Lancet. 2021; 397: 671-81. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21)00234-8
9. Седова Е.С., Первойкина К.А., Щербинин Д.Н., Шма-ров М.М. Генетические конструкции, выполняющие функции адъ-ювантов, в составе вакцин на основе аденовирусных векторов. Иммунология. 2022; 43 (1): 5-17. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-5-17
10. Barouch D.H., Pau M.G., Custers J.H.H.V., Koudstaal W., Kostense S., Havenga M.J.E. Immunogenicity of recombinant adenovi-rus serotype 35 vaccine in the presence of pre-existing anti-Ad5 immu-
Заключение
Метод с применением вектора rAd26-GFP более простой, его результаты не зависят от присутствия в образце сыворотки антител против S-белка. Метод с использованием вектора rAd26-Spike более трудоемкий - требуется дополнительное блокирование антител против S-белка. Однако этот метод позволяет использовать вектор непосредственно из вакцинного препарата, и результаты, полученные им, более соответствуют реальной ситуации.
nity. J. Immunol. 2004; 172: 6290-7. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmu-nol.172.10.6290
11. Casimiro D.R., Chen L., Fu T.-M., Evans R.K., Caulfield M.J., Davies M.-E. Comparative immunogenicity in rhesus monkeys of DNA plasmid, recombinant vaccinia virus, and replication-defective adenovi-rus vectors expressing a human immunodeficiency virus type 1 gag gene. J. Virol. 2003; 77: 6305-13. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.77.11.6305-6313.2003
12. Santra S., Seaman M.S., Xu L., Barouch D.H., Lord C.I., Lif-ton M.A. Replication-defective adenovirus serotype 5 vectors elicit durable cellular and humoral immune responses in nonhuman primates. J. Virol. 2005; 79: 6516-22. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.79.10.6516-6522.2005
13. Shiver J.W., Emini E.A. Recent advances in the development of HIV-1 vaccines using replication-incompetent adenovirus vectors. Annu. Rev. Med. 2004; 55: 355-72. DOI: https://doi.org/10.1146/annurev. med.55.091902.104344
14. Catanzaro A.T., Koup R.A., Roederer M., Bailer R.T., Enama M.E., Moodie Z. Phase 1 safety and immunogenicity evaluation of a multiclade HIV-1 candidate vaccine delivered by a replication-defective recombinant adenovirus vector. J. Infect Dis. 2006; 194: 1638-49. DOI: https://doi.org/10.1086/509258
15. Le Gars M., Sadoff J., Struyf F., Heerwegh D., Truyers C., Hendriks J. Impact of preexisting anti-adenovirus 26 humoral immunity on immunogenicity of the Ad26.COV2.S coronavirus disease 2019 vaccine. J. Infect Dis. 2022; 226: 979-82. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiac142
16. Byazrova M.G., Astakhova E.A., Minnegalieva A.R., Suk-hova M.M., Mikhailov A.A., Prilipov A.G., Gorchakov A.A., Filatov A.V. Anti-Ad26 humoral immunity does not compromise SARS-COV-2 neutralizing antibody responses following Gam-COVID-Vac booster vaccination. NPJ Vaccines. 2022; 7: 145. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-022-00566-x
17. Khan S., Salisch N.C., Gil A.I., Boedhoe S., Boer K.F., Ser-royen J. et al. Sequential use of Ad26-based vaccine regimens in NHP to induce immunity against different disease targets. NPJ Vaccines. 2022; 7: 146. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-022-00567-w
18. Рогожин В.Н., Логунов Д.Ю., Щебляков Д.В., Шмаров М.М., Ходунова Е.Е., Гальцева И.В., Белоусова Р.В., Народицкий Б.С., Гинцбург А. Л. Эффективный способ доставки гена интерлейкина-2 в гемопоэтические клетки человека с использованием рекомбинантного аденовируса с модифицированным фибером. Acta Naturae. 2011; 3 (3): 103-10. eLIBRARY ID: 17704753
19. Багаев А.В., Пичугин А.В., Лебедева Е.С., Лысенко А.А., Шмаров М.М., Логунов Д.Ю., Народицкий Б.С., Атауллаханов Р.И., Хаитов Р.М., Гинцбург А.Л. Влияние TLR-агонистов на экспрессию в антиген-презентирующих клетках целевого белка-антигена, закодированного в аденовирусном векторе. Иммунология. 2015; 36 (4): 18895. eLIBRARY ID: 24324492
20. Сухова М.М., Бязрова М.Г., Банделюк А.С., Михайлов А.А., Шмаров М.М., Филатов А.В. Трансдукция В-лимфоцитов человека с помощью аденовирусных векторов различных серотипов. Иммунология. 2024; 45 (4): 435-45. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2024-45-4-435-445
21. Amosova I.V., Timoshicheva T.A., Kadyrova R.A., Zabrods-kaya Y.A., Vakin V.S., Grudinin M.P., Dzytseva V.V., Khmelevsky M.S., Lioznov D.A. The investigation of the dynamics of changes in neutrali-
zing antibody titers against type 5 adenovirus in the context of vaccination against a new coronavirus infection. Virology. 2024; 594: 110051. DOI: https://doi.org/10.1016Zj.virol.2024.110051
22. Sablerolles R.S.G., Rietdijk W.J.R., Goorhuis A., Postma D.F., Visser L.G., Geers D. Immunogenicity and reactogenicity of vaccine boosters after Ad26.COV2.S priming. N. Engl. J. Med. 2022; 386: 951-63. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMoa2116747
23. Munro A.P.S., Janani L., Cornelius V., Aley P.K., Babbage G., Baxter D. Safety and immunogenicity of seven COVID-19 vaccines as a third dose (booster) following two doses of ChAdOx1 nCov-19 or BNT162b2 in the UK (COV-BOOST): a blinded, multicentre, randomised, controlled, phase 2 trial. Lancet. 2021; 398: 2258-76. DOI: https://doi. org/10.1016/S0140-6736(21)02717-3
24. Tukhvatulin A.I., Dolzhikova I.V., Shcheblyakov D.V., Zub-kova O.V., Dzharullaeva A.S., Kovyrshina A.V., Lubenets N.L., Grousova D.M., Erokhova A.S., Botikov A.G., Izhaeva F.M., Popova O., Ozharovskaia T.A., Esmagambetov I.B., Favorskaya I.A., Zrelkin D.I.,
Voronina D.V., Shcherbinin D.N., Semikhin A.S., Simakova Y.V., Tokar-skaya E.A., Shmarov M.M., Nikitenko N.A., Gushchin V.A., Smolyar-chuk E.A., Zubkova T.G., Zakharov K.A., Vasilyuk V.B., Borisevich S.V., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. An open, non-randomised, phase 1/2 trial on the safety, tolerability, and immunogenicity of singledose vaccine «Sputnik Light» for prevention of coronavirus infection in healthy adults. Lancet Reg. Health. Eur. 2021; 11: 100241. DOI: https:// doi.org/10.1016/j.lanepe.2021.100241
25. George J.A., Kim S.B., Choi J.Y., Patil A.M., Hossain F.M.A., Uyangaa E. TLR2/MyD88 pathway-dependent regulation of dendritic cells by dengue virus promotes antibody-dependent enhancement via Th2-biased immunity. Oncotarget. 2017; 8: 106050-70. DOI: https://doi. org/10.18632/oncotarget.22525
26. Kelly H., Mercer G., Cowling B.J. The association of seasonal influenza vaccination with pandemic influenza H1N1 2009 infection. Vaccine. 2012; 30: 2037-8. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.11.060
■ References
1. Custers J., Kim D., Leyssen M., Gurwith M., Tomaka F., Robertson J., Heijnen E., Condit R., Shukarev G., Heerwegh D., van Heesbeen R., Schuitemaker H., Douoguih M., Evans E., Smith E.R., Chen R.T. Vaccines based on replication incompetent Ad26 viral vectors: Standardized template with key considerations for a risk/benefit assessment. Vaccine. 2021; 39 (22): 3081-101. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.09.018
2. Salisch N.C., Stephenson K.E., Williams K., Cox F., Van Der Fits L., Heerwegh D. A double-blind, randomized, placebo-controlled phase 1 study of Ad26.ZIKV.001, an Ad26-vectored anti-Zika virus vaccine. Ann Intern Med. 2021; 174 (5): 585-94. DOI: https://doi.org/10.7326/ M20-5306
3. Coughlan L., Sridhar S., Payne R., Edmans M., Milicic A., Ven-katraman N. Heterologous two-dose vaccination with simian adenovirus and poxvirus vectors elicits long-lasting cellular immunity to influenza virus A in healthy adults. EBioMedicine. 2018; 29: 146-54. DOI: https:// doi.org/10.1016/j.ebiom.2018.02.011
4. Volkmann A., Williamson A.-L., Weidenthaler H., Meyer T.P.H., Robertson J.S., Excler J.-L. The Brighton Collaboration standardized template for collection of key information for risk/benefit assessment of a Modified Vaccinia Ankara (MVA) vaccine platform. Vaccine. 2021; 39: 3067-80. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.08.050
5. Zhu F.-C., Li Y.-H., Guan X.-H., Hou L.-H., Wang W.-J., Li J.-X. Safety, tolerability, and immunogenicity of a recombinant adenovirus type-5 vectored COVID-19 vaccine: a dose-escalation, open-label, nonran-domised, first-in-human trial. Lancet. 2020; 395: 1845-54. DOI: https:// doi.org/10.1016/S0140-6736(20)31208-3
6. Bos R., Rutten L., Van Der Lubbe J.E.M., Bakkers M.J.G., Hardenberg G., Wegmann F. Ad26 vector-based COVID-19 vaccine encoding a prefusion-stabilized SARS-CoV-2 Spike immunogen induces potent humoral and cellular immune responses. NPJ Vaccines. 2020; 5: 91. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-020-00243-x
7. Voysey M., Clemens S.A.C., Madhi S.A., Weckx L.Y., Fole-gatti P.M., Aley P.K. Safety and effi cacy of the ChAdOx1 nCoV-19 vaccine (AZD1222) against SARS-CoV-2: an interim analysis of four randomized controlled trials in Brazil, South Africa, and the UK. Lancet. 2021; 397: 99-111. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)32661-1
8. Logunov D.Y., Dolzhikova I.V., Shcheblyakov D.V., Tukh-vatulin A.I., Zubkova O.V., Dzharullaeva A.S., Kovyrshina A.V., L ubenets N.L.,Grousova D.M., Erokhova A.S., Botikov A.G., Izhaeva F.M., Popova O., Ozharovskaya T.A., Esmagambetov I.B., Favorskaya I.A., Zrel-kin D.I., Voronina D.V., Shcherbinin D.N., Semikhin A.S., Simakova Y.V., Tokarskaya E.A., Egorova D.A., Shmarov M.M., Nikitenko N.A., Gushchin V.A., Smolyarchuk E.A., Zyryanov S.K., Borisevich S.V., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. Safety and efficacy of an rAd26 and rAd5 vector-based heterologous prime-boost COVID-19 vaccine: an interim analysis of a randomised controlled phase 3 trial in Russia. Lancet. 2021; 397: 671-81. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21)00234-8
9. Sedova E.S., Pervoykina K.A., Shcherbinin D.N., Shmarov M.M. Genetic constructs as adjuvants in vaccines based on adenoviral vectors. Immynologiya. 2022; 43 (1): 5-17. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-5-17 (in Russian)
10. Barouch D.H., Pau M.G., Custers J.H.H.V., Koudstaal W., Kostense S., Havenga M.J.E. Immunogenicity of recombinant adenovi-rus serotype 35 vaccine in the presence of pre-existing anti-Ad5 immunity. J Immunol. 2004; 172: 6290-7. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmu-nol.172.10.6290
11. Casimiro D.R., Chen L., Fu T.-M., Evans R.K., Caulfield M.J., Davies M.-E. Comparative immunogenicity in rhesus monkeys of DNA plas-mid, recombinant vaccinia virus, and replication-defective adenovirus vectors expressing a human immunodeficiency virus type 1 gag gene. J Virol. 2003; 77: 6305-13. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.77.11.6305-6313.2003
12. Santra S., Seaman M.S., Xu L., Barouch D.H., Lord C.I., Lif-ton M.A. Replication-defective adenovirus serotype 5 vectors elicit durable cellular and humoral immune responses in nonhuman primates. J Virol. 2005; 79: 6516-22. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.79.10.6516-6522.2005
13. Shiver J.W., Emini E.A. Recent advances in the development of HIV-1 vaccines using replication-incompetent adenovirus vectors. Annu Rev Med. 2004; 55: 355-72. DOI: https://doi.org/10.1146/annurev. med.55.091902.104344
14. Catanzaro A.T., Koup R.A., Roederer M., Bailer R.T., Enama M.E., Moodie Z. Phase 1 safety and immunogenicity evaluation of a multiclade HIV-1 candidate vaccine delivered by a replication-defective recombinant adenovirus vector. J Infect Dis. 2006; 194: 1638-49. DOI: https://doi.org/10.1086/509258
15. Le Gars M., Sadoff J., Struyf F., Heerwegh D., Truyers C., Hendriks J. Impact of preexisting anti-adenovirus 26 humoral immunity on immunogenicity of the Ad26.COV2.S coronavirus disease 2019 vaccine. J Infect Dis. 2022; 226: 979-82. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiac142
16. Byazrova M.G., Astakhova E.A., Minnegalieva A.R., Suk-hova M.M., Mikhailov A.A., Prilipov A.G., Gorchakov A.A., Filatov A.V. Anti-Ad26 humoral immunity does not compromise SARS-COV-2 neutralizing antibody responses following Gam-COVID-Vac booster vaccination. NPJ Vaccines. 2022; 7: 145. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-022-00566-x
17. Khan S., Salisch N.C., Gil A.I., Boedhoe S., Boer K.F., Ser-royen J., et al. Sequential use of Ad26-based vaccine regimens in NHP to induce immunity against different disease targets. NPJ Vaccines. 2022; 7: 146. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-022-00567-w
18. Rogozhin V.N., Logunov D.Y., Shchebliakov D.V., Shma-rov M.M., Khodunova E.E., Galtseva I.V., et al. An efficient method for the delivery of the interleukin-2 gene to human hematopoietic cells using the fiber-modified recombinant adenovirus. Acta Naturae. 2011; 3: 100-6. PMID: 22649700
19. Bagaev A.V., Pichugin A.V., Lebedeva E.S., Lysenko A.A., Shmarov M.M., Logunov D.Yu., Naroditsky B.S., Ataullakhanov R.I., Khai-tov R.M., Gintsburg A.L. Influence of TLR-agonists on expression by antigen-presenting cells of the target protein antigen encoded in adenoviral vector. Immunologiya. 2015; 36 (4): 188-95. eLIBRARY ID: 24324492. (in Russian)
20. Sukhova M.M., Byazrova M.G., Bandelyuk A.S., Mikhailov A.A., Shmarov M.M., Filatov A.V. Transduction of human B lymphocytes using adenoviral vectors of various serotypes. Immunologiya. 2024; 45 (4): 43545. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2024-45-4-435-445
21. Amosova I.V., Timoshicheva T.A., Kadyrova R.A., Zabrods-kaya Y.A., Vakin V.S., Grudinin M.P., Dzytseva V.V., Khmelevsky M.S., Lioznov D.A. The investigation of the dynamics of changes in neutralizing antibody titers against type 5 adenovirus in the context of vaccination against a new coronavirus infection. Virology. 2024; 594: 110051. DOI: https://doi.org/10.1016/j.virol.2024.110051
22. Sablerolles R.S.G., Rietdijk W.J.R., Goorhuis A., Postma D.F., Visser L.G., Geers D. Immunogenicity and reactogenicity of vaccine boosters after Ad26.COV2.S priming. N Engl J Med. 2022; 386: 951-63. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMoa2116747
23. Munro A.P.S., Janani L., Cornelius V., Aley P.K., Babbage G., Baxter D. Safety and immunogenicity of seven COVID-19 vaccines as a third dose (booster) following two doses of ChAdOx1 nCov-19 or BNT162b2 in the UK (COV-BOOST): a blinded, multicentre, randomised, controlled, phase 2 trial. Lancet. 2021; 398: 2258-76. DOI: https://doi. org/10.1016/S0140-6736(21)02717-3
24. Tukhvatulin A.I., Dolzhikova I.V., Shcheblyakov D.V., Zub-kova O.V., Dzharullaeva A.S., Kovyrshina A.V., Lubenets N.L., Grou-
■ Сведения об авторах
Сухова Мария Михайловна - мл. науч. сотр. лаб. иммунохимии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России; асп. каф. иммунологии биол. факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-4572-1878
Бязрова Мария Георгиевна - науч. сотр. лаб. иммунохимии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России; асп. каф. иммунологии биол. факультета МГУ им. М.В. Ломоносова; ассистент каф. иммунологии Медицинского института ФГАОУ ВО «РУДН им. П. Лу-мумбы» Минобрнауки России, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-9858-7596
Банделюк Алина Сергеевна - мл. науч. сотр. лаб. молекулярной биотехнологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8453-797X
Зубкова Ольга Вадимовна - канд. биол. наук, вед. науч. сотр. лаб. иммунобиотехнологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-7893-8419
Михайлов Артем Андреевич - лаборант лаб. иммунохимии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России; студент каф. иммунологии биол. факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8356-8077
sova D.M., Erokhova A.S., Botikov A.G., Izhaeva F.M., Popova O., Ozharovskaia T.A., Esmagambetov I.B., Favorskaya I.A., Zrelkin D.I., Voronina D.V., Shcherbinin D.N., Semikhin A.S., Simakova Y.V., Tokarskaya E.A., Shmarov M.M., Nikitenko N.A., Gushchin V.A., Smolyarchuk E.A., Zubkova T.G., Zakharov K.A., Vasilyuk V.B., Borise-vich S.V., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. An open, non-randomised, phase 1/2 trial on the safety, tolerability, and immunogenicity of single-dose vaccine «Sputnik Light» for prevention of coronavirus infection in healthy adults. Lancet Reg Health Eur. 2021; 11: 100241. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lanepe.2021.100241
25. George J.A., Kim S.B., Choi J.Y., Patil A.M., Hossain F.M.A., Uyangaa E. TLR2/MyD88 pathway-dependent regulation of dendritic cells by dengue virus promotes antibody-dependent enhancement via Th2-biased immunity. Oncotarget. 2017; 8: 106050-70. DOI: https://doi. org/10.18632/oncotarget.22525
26. Kelly H., Mercer G., Cowling B.J. The association of seasonal influenza vaccination with pandemic influenza H1N1 2009 infection. Vaccine. 2012; 30: 2037-8. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.11.060
■ Authors' information
Maria M. Sukhova - Technician of the Immunochemistry Lab., NRC Institute of Immunology, FMBA of Russia; Student of Immunology Chair, Biology Faculty, M.V. Lomono-sov MSU; Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-4572-1878
Maria G. Byazrova - Researcher of the Immunochemistry Lab., NRC Institute of Immunology, FMBA of Russia; PhD Student of Immunology Chair, Biology Faculty, M.V. Lomonosov MSU; Assistant of Immunology Chair of the Medical Institute of RUDN named after P. Lumumba of the MSHE of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-9858-7596
Alina S. Bandelyuk - Junior Researcher of the Molecular Biotechnology Lab., N.F. Gamaleya FRCEM of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8453-797X
Olga V. Zubkova - PhD, Leading Researcher of the Molecular Biotechnology Lab., N.F. Gamaleya FRCEM of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-7893-8419
Artem A. Mikhailov - Technician of the Immunochemistry Lab., NRC Institute of Immunology, FMBA of Russia; Student of Immunology Chair, Biology Faculty, M.V. Lomonosov MSU, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8356-8077
Прилипов Алексей Геннадьевич - д-р биол. наук, зав. лаб. молекулярной генетики ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8755-1419
Шмаров Максим Михайлович - д-р биол. наук, зав. лаб. молекулярной биотехнологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-5268-1296
Филатов Александр Васильевич - д-р биол. наук, проф., зав. лаб. иммунохимии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России; проф. каф. иммунологии биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-6460-9427
Alexei G. Prilipov - Dr. Sci., PhD, Head of the Molecular Genetics Lab., N.F. Gamaleya FRCEM of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation; E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8755-1419
Maksim M. Shmarov - Dr. Sci., Head of the Molecular Biotechnology Lab., N.F. Gamaleya FRCEM of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-5268-1296
Alexander V. Filatov - Dr. Sci., PhD, Prof., Head of the Immunochemistry Lab., NRC Institute of Immunology, FMBA of Russia; Prof. of Immunology Chair, Biology Faculty, M.V. Lomonosov MSU, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-6460-9427
