CC BY
98
Лукьянова А. С.1, Зотова Е. В.1, Вальчук М. А.1, Ригер И.2, Котлярчук К. Б.1, Кароль Ю. С.1, Корольчук О. С.1, Лукавецкий Л. М.1, Логинский В. Е.1, Пеньковска-Греля Б.2, Масляк З. В.1
1 ГУ «Институт патологии крови и трансфузионной медицины НАМН Украины», г. Львов.
2 Онкологический центр — Институт им. М. Склодовской-Кюри, г. Варшава.
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ АБЕРРАЦИИ, ПРИВОДЯЩИЕ К УВЕЛИЧЕНИЮ КОЛИЧЕСТВА КОПИЙ ГЕНА BCRJABL ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ МИЕЛОЕЙКОЗЕ
Введение. Хронический миелолейкоз (ХМЛ) — клональное миелопролиферативное заболевание, характеризующееся наличием специфической хромосомной аномалии — t(9;22)(q34;q11) — филадельфийской (Ph) хромосомы. Результатом этой транслокации является появление химерного гена BCR/ABL, продукт которого вызывает неконтролируемую пролиферацию клеток ми-елоидного ряда. Увеличение количества копий Ph-хромосомы и, как следствие, количества копий химерного гена, является одним из проявлений клональной эволюции и может являться одной из причин резистентности к терапии ингибиторами тирозинкиназы (ИТК).
Цель исследования — проанализировать частоту и характер аномалий, приводивших к увеличению количества копий гена BCR/ABL.
Материал и методы. Обследовано 285 больных с клинически и цитогенетически подтвержденным диагнозом ХМЛ. Цитогенетическое исследование клеток костного мозга было проведено по стандартной методике. При проведении метода флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) использована метка BCR/ABL DC DF (Vysis, США). Все FISH-исследования проведены в лаборатории цитогенетики Онкологического центра — Института им. М. Склодовской-Кюри (Варшава, Польша). При кариотипировании анализировали 20 метафазных пластинок, при FISH-исследовании — не менее 200 интерфазных ядер. При анализе и описании кариотипа руководствовались критериями International System for Human Cytogenetic Nomenclature — ISCN, 2009.
Результаты. Из 285 больных ХМЛ клональная эволюция в Ph-позитивных клетках была обнаружена в 50 случаях (17,5 % обследованной группы). Среди этих 50 больных цитогенетические аномалии, приводившие к увеличению количества копий гена BCR/ABL, были выявлены у
29 (58 % случаев клональной эволюции). Данная группа из 29 больных была разделена на 2 подгруппы в зависимости от характера аберраций.
В первой подгруппе (25 больных, 86 % больных с увеличением количества копий гена BCR/ ABL) представлены случаи с увеличением количества копий Ph-хромосомы без изменения ее структуры. У 23 больных были обнаружены нормальная и измененная хромосомы 9, нормальная копия хромосомы 22 и от 2 до 5 копий Ph-хромосомы. В 1 случае анализ кариотипа показал наличие двух измененных вследствие транслокации t(9;22)(q34;q11) хромосом 9 и 22 без наличия их нормальных копий. В последнем случае выявлены клетки с нормальными хромосомами 9 и 22 и двумя измененными вследствие транслокации t(9;22)(q34;q11) хромосомами 9 и 22.
К подгруппе 2 (4 больных, 14 %) отнесли случаи, в которых наблюдали изменение структуры производной хромосомы 22. У 3 больных был обнаружен изодериват Ph-хромосомы в количестве 1-2 копий. В 1 случае выявлен изодицен-трический дериват Ph-хромосомы в количестве 1-5 копий.
Во всех случаях наличие и характер выявленных нами аберраций были подтверждены с помощью метода FISH на метафазных пластинках. Количество копий гена BCR/ABL в описанных случаях составляло 2-10 копий, в зависимости от характера аберраций.
Из 29 больных с описанными аберрациями терапию ИТК (иматиниб) получали 24. Из них в
2 случаях после обнаружения дополнительных аномалий был назначен нилотиниб, в 1-дазати-ниб. У одного больного (с одной дополнительной копией Ph-хромосомы) после назначения нилоти-ниба был достигнут полный цитогенетический и молекулярный ответ. У двух остальных больных цитогенетический ответ после смены лечения от-
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ,, том IX, № 2, 2013
сутствовал, а дополнительные аномалии сохранялись. Все остальные пациенты являлись резистентными к терапии ИТК, а смертность в описанной группе составила 62 % (18 случаев из 29).
Выводы. Частота клональной эволюции в обследованной группе пациентов превысила 17 %. Цитогенетические аномалии, вследствие которых увеличивалось количество копий гена BCR/ ABL, были обнаружены в 58 % всех случаев клональной эволюции. Наиболее частым (86 % случаев) механизмом увеличения количества копий гена BCR/ABL было появление дополнительных
копий РИ-хромосомы без изменений ее структуры. В то же время, в 14 % случаев обнаружены изодериваты РИ-хромосомы различного характера. Обнаружение подобных аномалий является прогностически неблагоприятным и требует незамедлительной коррекции лечения, поскольку увеличение количества копий гена BCR/ABL является одной из причин неудовлетворительности терапии ИТК. Описанные аберрации также могут представлять интерес с точки зрения исследования механизмов клональной эволюции и патогенеза ХМЛ.
Лямкина А. С., Поспелова Т. И.
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения России.
РОЛЬ ГЕНЕТИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ И МОНИТОРИНГЕ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА В НОВОСИБИРСКЕ
Актуальность. Появление ингибиторов ти-розинкиназы (ИТК) значительно изменило прогноз у больных хроническим миелолейкозом (ХМЛ). Благодаря проведению современных цитогенетических и молекулярных методов исследования с целью диагностики и мониториро-вания эффективности терапии ингибиторами ти-розинкиназы, широкому диапазону доступных в настоящее время подходов к терапии ХМЛ, стало возможным эффективно контролировать ранее неизлечимое заболевание.
Цель. Оценить восьмилетние результаты терапии хронического миелолейкоза ингибиторами тирозинкиназы в г. Новосибирске с помощью современных цитогенетических и молекулярных методов исследования.
Методы. С января 2004 г. по настоящее время в Городском гематологическом центре г. Новосибирска наблюдались 76 больных ХМЛ: в хронической фазе (ХФ) 65 человек, фазе акселерации (ФА) 7 человек и фазе бластного криза (БК) 5 человек. Из 76 пациентов было 29 мужчин (38,2 %) и 47 женщин (61,8 %), возраст варьировал от 16 до 78 лет, средний возраст составляет 44,7 ± 15,17 года. У всех пациентов диагноз был подтвержден с помощью цитогенетического исследования костного мозга (РИ-хромосома) и молекулярного метода исследования периферической крови (ген Ьег/е-аЫ). В анализ вошли 82,9 % пациентов (63 человека): 56 человек в хронической фазе, 5 — в фазе акселерации и 2 в фазе
бластного криза. Больные в хронической фазе начали принимать ИТК в первые 6 месяцев с момента диагностики ХМЛ. Больным в фазе акселерации и бластного криза диагноз был установлен до 2003 года, эти больные были значительно предлеченны различными цитостатическими препаратами. Все пациенты в настоящее получают терапию различными ингибиторами тирозинкиназы (иматиниб в дозе 400-800 мг в сутки,
3 пациента — нилотиниб в дозе 800 мг в сутки, из них 2 — как терапию первой линии, 2-дазатиниб 100-140 мг в сутки). На фоне терапии ингибиторами тирозинкиназы всем пациентам, согласно международным рекомендациям ELN (European Leukemia Net), проводилось цитогенетическое исследование костного мозга через 6 и 12 месяцев от начала терапии, после достижения полного цитогенетического ответа — 1 раз в год; молекулярное исследование периферической крови — каждые 3 месяца от начала терапии. При недостижении оптимального ответа по данным цитогенетических и молекулярных методов исследования проводилось повышение дозы ИТК или замена препарата. Умерли 13 пациентов (17,1 %): 8 больных в хронической фазе по причинам, не связанным с гемобластозом, 2 больных в фазе акселерации и 3 пациентов в фазе бластного криза из-за прогрессирования основного заболевания (6,6 %).
Результаты. На фоне монотерапии ИТК у больных в хронической фазе полная клинико-ге-
