Циркулюючі імунні комплекси при субклінічному маститі у корів Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:618:636.2

Левшвська Н.Д., кандидат вет. наук, асистент ® Лье1еський нацюнальний утеерситет еетеринарног медицины та бютехнологт

¡мет С.З. Гжицького

ЦИРКУЛЮЮЧ1 1МУНН1 КОМПЛЕКСИ ПРИ СУБКЛ1Н1ЧНОМУ

МАСТИТ У КОР1В

У статт1 наведено р1еень циркулюючих гмунних комплексе е сироеатц кроеI корге, хеорих маститом з субклШчним переб1гом.

Ключовi слова: мастит, циркулюючг ¡мунш комплекси, фагоцитоз.

Вступ. 1мунна система тварин перша реагуе на вплив рiзних бютичних i абютичних факторiв. II роль полягае перш за все у видаленш iз органiзму екзо- i ендогенних антигешв, в якостi яких можуть бути бактери, вiруси, власнi бiлки та iн. Одним iз механiзмiв виведення антигену iз органiзму е утворення iмунного комплексу [1,2,3,4]. 1мунш комплекси (антиген-антитiло) е одним iз продуктiв формування iмунноI вiдповiдi, це - фiзiологiчний, процес, який перманентно здшснюеться в органiзмi тварин i людини та направлений на тдтримання гомеостазу.

У невеликiй концентраци iмуннi комплекси постiйно присутнi в сироватщ кровi здорових тварин яка вважаеться як нормальна, це е наслщком постшно! стимуляци iмунноI системи. Проте, в окремих випадках механiзм виведення ТЦТК порушуеться, що призводить до надмiрного накопичення циркулюючих iмунних комплекЫв i обумовлюе патологiю [5,6].

Доведено, що ТЦТК мають невеликий розмiр, якi утворювалися при надлишку антигену, i вони не активують комплемент i не викликають запальний процес. ТЦТК швидко фагоцитуються i мають невелику патогеннiсть якi утворилися при надлишку антитш, хоч i здатш активувати комплемент, i мають великий розмiр. Найбiльш патогенними е ТЦТК середнiх розмiрiв, якi утворюються при незначному надлишку антигену, здатнi активувати комплемент i слабко елiмiнуються. Проблемi вивчення iмунних комплексiв в даний час придшяеться багато уваги, тому що постшно зростае кшьккть захворювань, в патогенезi яких вони вдаграють суттеве значення [7].

Метою нашо! роботи було вивчити рiвень циркулюючих iмунних комплексiв в сироватцi кровi корiв, хворих маститом з субклмчним перебiгом.

Матерiал i методи дослщження. Робота виконувалась в ДП «Молочш рки» ТзОВ «Правда» Бродiвського району ЛьвiвськоI областi. Дослiджували корiв украшсько! чорно-рябо1 породи. Корiв роздiлили на двi групи: перша — здоровi (контрольна група) — 5 тварин; друга — хворi маститом з субклмчним перебiгом — 10 корiв. Об'ектом дослiдження був загальний рiвень циркулюючих iмунних комплексiв та опсоно-фагоцитарно! реакци.

Кров у тварин брали iз яремно! вени вранцi до початку годiвлi. Для отримання сироватки пробiрки з кров'ю ставили в термостат на 2 години при

® Левшвська Н.Д., 2010

183

37°С. Шсля ретракци згустку центригували при 1000 об/хв. протягом 10 хвилин. Свiжу сироватку використовували для визначення концентраци iмунних комплексiв.

Вмiст Ц1К у сироватщ кровi визначали методом осадження в полiетиленглiколi молекулярною масою 6000 дальтон (ПЕГ прециштаци). Для проведення реакци готували два розчини. Розчин №1 - це 0,1 М буратний буфер з рН 8,4. Для цього брали 3,410 г борно! кислоти i 4, 275 г бури i розчиняли в дистильованш водi, доводячи об'ем до лiтра. Розчин №2 готували шляхом розчинення 10 г реактиву полiетиленглiколь-6000 дальтон в 240 мл розчину №1.

В сироватщ кровi визначали крупш iмуннi комплекси з використанням 2,5% розчину ПЕГ-6000; для середшх комплексiв - 3,75% ПЕГ-6000, а для дрiбних iмунних комплексiв - 7% розчин ПЕГ-6000. При дослщженш у пробiрку вносили по 0,3 мл дослщно! сироватки кровi, до не! додавали 0,6 мл розчину №1 i ретельно перемшували. 1з ще! пробiрки по 0,3 мл вмюту переносили у двi пробiрки. В одну iз них додавали 2,7 мл розчину №1 (контроль), а в другу - 2,7 мл розчину №2 (дослщ). Вмкт пробiрок ретельно перемшували i залишали на 60 хв при юмнатнш температурi. Пiсля цього визначали оптичну щiльнiсть на спектрофотометрi в кюветах 1^1 см при 450 нм. Вираховували рiзницю показникiв оптично! щшьноси, а отриманi результати перемножували на 1000. Отриманий результат показуе кшькють П1К в 100 мл сироватки умовних одиниць.

Опоно-фагоцитарну реакцш проводили за методикою Карпутя 1.М., з використанням тест-культури Staph.aureus штам 209Р.

Результати дослщжень. Запальний процес в органiзмi корiв характеризуеться змiнами iмунобiологiчних реакцiй, спрямованих на знешкодження та видшення збудника. Високий рiвень П1К у сироватцi кровi спостерiгаеться при запальних процесах. Значення циркулюючих iмунних комплексiв в патогенезi запальних захворювань полягае в !х здатностi активiзувати клiтиннi i гуморальнi фактори iмунноl системи, що сприяе формуванню захисних або патолопчних процесiв. Показники П1К у корiв, хворих маститом з субклiнiчним перебiгом, визначали за рiвнем циркулюючих iмунних комплексiв та фагоцитарно! активност нейтрофiлiв кровi порiвняно зi здоровими. Результати наведенi в таблиц 1.

Результати дослiджень концентраци П1К у кровi корiв, хворих на субклiнiчний мастит, показали, що у корiв, хворих маститом, вiдмiчаеться тдвищений рiвень П1К переважно за рахунок найбшьш патогенних середнiх iмунних комплекЫв. При субклiнiчному перебiгу маститу у корiв в сироватцi кровi найбшьше було середнiх П1К. 1х кшькють у 11,7 раза перевищувала показники здорових тварин. Дрiбних П1К було бшьше у 1,1 раза. Фагоцитарна актившсть нейтрофiлiв кровi корiв, хворих маститом з субклмчним перебiгом, була вщповщно на 10,2% вищою порiвняно з контрольними. 1ндекс фагоцитозу в корiв, хворих на субклiнiчний мастит, мав тенденцш до пiдвищення.

184

Таблиця 1.

Показники циркулюючих iмунних комплексе та фагоцитарно? активного нейтрофьшв KpoBi Ropie, хворих маститом з субкшшчним переб1гом

Група кор1в Концентращя Ц1К, од. ФА % М±т Ф1 М±т

крупш М±т середш М±т др1бно-молекулярш

Контрольна група - корови здоров1 n=5 15,0±1,52 56,9±9,7 201,5±7,5 45,0±2,1 8,2±1,7

Дослщна група -корови, хвор1 маститом n=10 312,3±2,84* 668±25,5* 231±12,4* 55,2±2,4* 8,5±2,1

Примiтка:*— Р<0,001

Наведеш даш свщчать про пригшчення захисних сил оргашзму кор1в, хворих на субклмчний мастит. Др1бш Ц1К мктять велику кшькють антигену, мало антитш i практично позбавлеш комплементу. У такому вигляд1 вони майже не уловлюються фагоцитами. Велика кшьккть патогенних Ц1К вказуе на неефективну функцiю систем, яю контролюють рiвень П1К ( у першу чергу систему комплементу i фагоциив).

Висновки

Субклiнiчний мастит у корiв характеризуеться зростанням в кровi Ц1К, пiдвищуeться концентрацiя середньо молекулярних П1К Накопичуючись у тканинах молочно! залози, вони ускладнюють патологiчний процес. Це вiдбуваеться на фонi низько! активностi фагоцитарного захисту.

Лiтеpатуpа

1.Маслянко Р.П. Основи имунобиологи / Р.П. Маслянко — Львiв: Вертикаль, 1999.—472 с.

2.Яблонський В., Желавський М. Рiвень циркулюючих iмунних комплексiв при гншно-катаральному маститi у корiв / В. Яблонський, М. Желавський // Ветеринарна медицини Украши. —2005.—№12. — С.33-34.

3.Караулов А.В., Балашов К.Е. Клеточный иммунитет при аутоиммунных заболеваниях (Обзор) // Терапевтический архив. — 1991. — №4. — С. 147-150.

4.Методи iмунологiчних дослщжень у лабораторiях ветеринарно! медицини / В.М. 1вченко, М.С. Павленко, О.1. Горбатюк, В.В. Шарандак. — Бiла Церква, 2003. — 83с.

5.Лебедев К.А. Иммунограмма в клинической практике // К.А. Лебедев, И.Д. Понякина // М.: Наука, 1990. - 224 с.

6.Krapf F.E. Circulating immune complexes in HIV - infected persons / F.E. Krapf // Klin Wochenschr. - 1990. - № 3. - 68(6).- Р. 299-302.

7. Система иммунитета при заболевании внутренних органов // Под ред. М.Ганджи.—К.: Здоров'я, 1985.—180 с.

Summary

In the article the level of circulating immune complex is resulted in the whey of blood of cows patients subclinic mastitis.

Стаття надшшла до редакцИ 24.03.2010

185