CC BY
1
Научная статья
УДК 634.11:581.143.6
doi: 10.47737/2307-2873_2023_43_35
ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РАЗМНОЖЕНИЯ КЛОНОВОГО ПОДВОЯ ЯБЛОНИ 54-118 НА ОСНОВЕ IN VITRO
©2023. Анна Викторовна Никитина
Удмуртский государственный аграрный университет, Ижевск, Россия [email protected]. ORCID 0000-0002-5926-3804
Аннотация. Садоводство - отрасль сельского хозяйства, главной задачей которой является получение биологически ценной высококачественной продукции. В настоящее время интенсивное и суперинтенсивное садоводство - это перспективное направление, позволяющее при высокой густоте посадки плодовых деревьев существенно поднять урожайность и снизить себестоимость продукции. Исследования в области питомниководства приобретают значимость в интенсификации садоводства, так как закладка интенсивных плодовых садов производится только высококачественным, выровненным посадочным материалом на клоновых подвоях, которые можно получить через культуру in vitro. В статье представлены результаты исследования технологического процесса клонального микроразмножения клонового подвоя яблони 54-118. Установлено, что лучшим сроком введения в культуру является период активного роста побегов. При двуступенчатой стерилизации жизнеспособных стерильных эксплантов получено 63 %. На этапе собственно микроразмножения оптимальной является среда Мурасиге - Скуга с добавлением 6-бензиламинопурина в концентрации 2 мг/л, на которой коэффициент размножения микрорастений составил - 6,0. Для элонгации яблони целесообразно концентрацию 6-бензиламинопурина снижать до 0,2 мг/л, а также добавлять в питательную среду гиббереллиновую кислоту 0,2 мг/л. На этапе ризогенеза предварительное замачивание микрочеренков в растворах стимуляторов роста ИМК 25 мг/л + ИУК 50 мг/л ускоряет развитие корневой системы микрочеренков до 81 %. Установлено, что микропобеги лучше адаптируются к условиям открытого грунта с применением кремнийсодержащего препарата силиплант: выход адаптированных микрорастений составил 76 %.
Ключевые слова: клональное микроразмножение, клоновый подвой яблони 54-118, стимуляторы роста
Введение. Яблоня - культура, занимающая ведущее место в многолетних насаждениях. Культура обладает рядом положительных биологических признаков и свойств и высокой устойчивостью к стрессам - засухе, морозу. Яблоня высокоурожайна, плоды её возможно хранятся долго, что увеличивает период потребления [1-4].
Повысить урожайность плодовых культур, в том числе яблони, возможно при помощи внедрения в производство оздоровлен-
ного высококачественного посадочного материала. Переход к безвирусному посадочному материалу имеет значимость в последние годы, на фоне широкого распространения в насаждениях вирусных инфекций [5-8].
Цель исследования - усовершенствование технологии клонального микроразмножения клонового подвоя яблони 54-118.
Методика. Технологию клонального микроразмножения подвоя яблони 54-118 реализовали согласно методическим рекомендациям О.В. Матушкиной и И.Н. Прониной [9].
Исследования проводились в течение 4 этапов клонального микроразмножения.
На этапе введения в стерильную культуру использовали побеги с вегетирующего растения в весенне-летний период [10]. Для удаления поверхностной загрязненности сегменты побегов промывали в мыльном растворе, затем - под проточной водой в течение 30 минут. В стерильных условиях ламинарного бокса обрабатывали спиртом этиловым 70 % (1 мин) с последующей обработкой диацидом 0,1 % (6 мин.). После экспланты промывали в стерильной дистиллированной воде. Культивировали 54-118 на питательной среде Мурасиге -Скуга (М8) с добавлением 0,5 мг/л 6-бензила-минопурина (6-БАП), никотиновой кислоты, тиамина, пиридоксина по 0,5 мг/л, аскорбиновой кислоты 1,0 мг/л, сахарозы 25 г/л, агар-агара 5,0 г/л; рН 5,6-5,8. Пересадку на свежие питательные среды осуществляли каждые 3035 сут.
На этапе пролиферации использовали минеральную основу сред М8 (контроль) и Драйвера - Каниюки (DKW). На этапе изучали концентрацию 6-БАП. Для элонгации побегов использовали среду М8 с добавлением 6-бен-зиламинопурина 0,2 мг/л. Исследовали гиббе-реллиновую кислоту (ГК) в различных концентрациях.
На этапе ризогенеза концентрация макросолей уменьшалась в два раза, сахароза - 20 г/л. В качестве индуктора корнеобразования использовали ауксины 4(индол-3ил)-масляной кислотой (ИМК) и 3-индолилуксусной кислотой (ИУК).
На этапе адаптации пробирочные микрорастения вначале промывали в растворе марганцовокислого калия. Затем, в конце марта - начале апреля их переносили в поч-вогрунт с использованием верхового торфа. После этого микрорастения пересаживали в микропарники, наполненные грунтом, который предварительно обрабатывали биофунгицидом «Триходерма вериде». На этапе адаптации к почвенным условиям молодые растения систематически опрыскивали водой и микроудобрением «Силиплант» в дозе 1,5 мл/л.
Повторность опытов трёхкратная, по 1530 шт. растений. Статистическая обработка полученных данных была проведена дисперсионным методом по Б.А. Доспехову [11]. Учитывали следующие параметры: длина микропобегов (см) и микрорастений (см), количество листьев (шт.), коэффициент размножения (шт.). Корневую систему оценивали по 4-х балльной шкале, от 0 до 3 баллов: 0 баллов -корни отсутствуют, 1 балл - корни развиты слабо, 2 и 3 балла - средне- и хорошо развитая корневая система, соответственно [12]. Успешность адаптации рассматривали как процентное соотношение адаптированных микрорастений к общему количеству высаженных в субстрат (%).
Результаты. Введение в культуру - существенный этап технологии клонального микроразмножения, целью которого является получение стерильной культуры и реализация морфогенетического потенциала меристема-тической ткани [13].
Срок введения в культуру является важным элементом технологии. Благоприятный период культивирования меристем подвоя яблони 54-118 выявлены -май и июнь [1]. Стерилизация этиловым спиртом (70 %, 1 мин) с последующей обработкой диацидом (0,1 %, 6 мин) способствовала получению 63 % жизнеспособных стерильных эксплантов (через 30 дней после введения в культуру in vitro). Ин-фицированность эксплантов составила 28 %, т. е. дезинфицирующий раствор не полностью справился с патогенами. Однако, количество погибших эксплантов составило 9 %, это указывает на то, что действие препарата на растительную ткань оказалось наиболее мягким.
В ходе исследований столкнулись с выделением продуктов метаболизма (фенолов) в питательную среду. Для снижения выделения фенолов экспланты выдерживались в 1-3 % стерильном растворе аскорбиновой кислоты, и проводились частые пересадки эксплантов на свежую питательную среду MS + 6-БАП в концентрации 0,5 мг/л. Пересадка считается
успешным методом в борьбе с негативным воздействием окисленных фенольных соединений
[13].
На этапе микроразмножения были использованы питательные среды Murashige -Skoog и Driver - Kuniyuki. Для индукции пролиферации пазушных меристем в среду вводят
вещества цитокининовой группы. Для подвоя 54-118 в среднем лучшей явилась контрольная среда по прописи Мурасиге - Скуга (таблица 1), на которой к четвертому пассажу коэффициент размножения был на 0,8 шт. больше, чем при культивировании на среде Драйвера - Ка-ниюки (контроль - 1,0; НСР05 - 0,5 шт.).
Таблица 1
Влияние состава питательных сред и концентрации 6-БАП на коэффициент размножения, шт.
Содержание 6-БАП (фактор В) Культивируемая с реда (фактор А) Фактор В
MS (контроль) DKW Среднее Отклонение
Б/Г (контроль) 1,0 1,0 1,0 -
6-БАП 1 мг/л 3,7 2,7 3,2 2,2
6-БАП 2 мг/л 6,0 4,0 5,0 4,0
6-БАП 3 мг/л 3,0 3,0 3,0 2,0
Фактор А Среднее 3,4 2,7 -
Отклонение - -0,8
НСР05 частных различий 1,0
НСР05 главных эффектов 0,5 | 0,7
Установлено, что все изучаемые концентрации 6-БАП по сравнению с безгормональным контролем способствовали существенному повышению эффективности размножения. Однако наибольший коэффициент размножения в среднем отмечен на средах с содержанием 6-БАП в концентрации 2 мг/л и составил 5,0 шт. (контроль - 1,0; НСР05 - 0,7 шт.). Повышение концентрации 6-БАП от 1 до 3 мг/л приводило к увеличению коэффициента
размножения, но к уменьшению оптимальной длины для укоренения, что согласуется с данными О.В Матушкиной и И.Н. Прониной [9]. Анализируя рисунок 1, наблюдаем, что микропобеги, пригодные к укоренению, формировались на среде Мурасиге - Скуга. Питательная среда MS с содержанием 6-БАП в концентрации 1 и 2 мг/л способствовала получению микропобегов длиной 2,3-2,5 см.
DKW
Содержание 6-БАП в среде, мг/л Рис 1. Влияние состава питательных сред и концентрации 6-БАП на среднюю длину побега Fig. 1. Effect of the composition of nutrient media and 6-BAP concentration on the average shoot length
Удлинение побега происходило на среде Мурасиге - Скуга с содержанием 6-БАП в концентрации 0,2 мг/л. Добавление в питательную
среду гиббереллиновой кислоты, которая активизирует рост клеток путём растяжения, оказало существенное влияние на количество (таблица 2) и длину микропобегов.
Таблица 2
Влияние концентраций гиббереллиновой кислоты на среднее количество побегов на среде
для элонгации, шт.
Стимулятор роста Количество побегов Длина побегов
ГК 0,1 мг/л (контроль) 1,0 2,0
ГК 0,2 мг/л 4,0 3,5
ГК 1 мг/л 3,0 3,3
ГК 2 мг/л 1,0 2,7
Среднее 2,3 2,9
НСР05 1,0 0,5
Количество хорошо развившихся побегов, пригодных для укоренения, формируется у подвоя 54-118, и в среднем на один черенок и составляет 2,3 побега. При добавлении в среду гиббереллиновой кислоты в концентрации 0,2 и 1 мг/л отмечалось существенное увеличение числа побегов, соответственно, на 3,0 и 2,0 шт. (контроль - 1,0 шт., НСР05 - 1,0 шт.). Исследования показали, что максимальная длина микропобегов формируется при включении в питательную среду ГК в концентрации 0,2 мг/л 3,5 см, что существенно выше, чем в контрольном варианте на 1,5 см (контроль -2,0 см; НСР05 = 0,5 см). Индуктором ризогенеза в условиях in vitro является ауксин, который
Последействие ауксинов на количество
оказывает положительное действие на заложение корневых зачатков. Однако на рост корней ауксины действуют ингибирующе, что способствует каллусообразованию - воздействовию ауксинов на микрочеренки в течение небольшого периода времени [9, 14, 15].
В опыте укоренение подвоя на безгормональной питательной среде не отмечено. Замачивание микропобегов в растворе ауксинов привело к существенному стимулирующему действию на количество корней и их длину. С применением ауксинов количество корней у подвоя составило соответственно от 2 до 5 шт. (таблица 3), что существенно выше контрольного варианта (контроль - 0,0 шт.).
Таблица 3
|рней и качество корневой системы, шт.
Стимулятор роста Количество корней, шт. Средняя длина корней, см Качество корневой системы, балл
Без гормонов (контроль) 0,0 0,0 0
ИМК 25 мг/л 2,0* 1,5* 2
ИУК 50 мг/л 4,0* 2,1* 2
ИМК 25 мг/л + ИУК 50 мг/л 5,0* 2,9* 2
Примечание: *существенно при 5 % уровне значимости.
Средняя длина корней, в зависимости от варианта опыта, варьировала от 1,5 до 2,9 см (таблица 3). Добавление к питательной среде ИМК в различных концентрациях оказало существенное влияние на среднюю длину корней подвоя 54-118. Наибольшая длина корней получена в варианте ИМК 25 + ИУК 50 мг/л - 2,9 см. Корневая система характеризовалась как среднеразвитая - 2 балла.
При совместном применении ауксинов отмечается существенное увеличение длины побега на 0,7 см (контроль - 2,0 см; НСР05 - 0,4 см; таблица 4). Замачивание в ИУК 50 мг/л и ИМК 25 мг/л + ИУК 50 мг/л существенно увеличило облиственность побега, соответственно, на 1,0 и 2,0 шт. (контроль - 5,0 шт.; НСР05 - 1,0 шт.).
Таблица 4
Последействие ауксинов на морфометрические показатели микрочеренков на этапе ризогенеза
Стимулятор роста Средняя длина побега, см Количество листьев, шт.
Без гормонов (контроль) 2,0 5,0
ИМК 25 мг/л 2,0 5,0
ИУК 50 мг/л 2,2 6,0
ИМК 25 мг/л + ИУК 50 мг/л 2,7 7,0
НСР05 0,4 1,0
Продолжительность укоренения микрочеренков составила 30 суток (рисунок 2). Начало корнеобразования микрочеренков зафиксировано через 10 дней после посадки на питательную среду, при этом процент укореняемости варьировал от 29 до 41 %.
Спустя 20 дней после посадки, укоренение составило 81 % в варианте с 4(индол-3ил)-масляной кислотой (25 мг/л) + 3-индолилуксус-ной кислотой (50 мг/л; рисунок 3). В контрольном варианте корнеобразование не отмечено.
ИУК 50 ИМК 25+ИУК 50 Концентрация ауксинов, мг/л
Рис 2. Укореняемость клонового подвоя 54-118 в зависимости от использования стимулятора
роста, %
Fig. 2. Rooting capacity of clonal rootstock 54-118 depending on the use of growth additives, %
1
2
3
Рис 3 Внешний вид клонового подвоя яблони 54-118
1. Нормально развивающиеся микропобеги после введения в культуру in vitro; 2. Микропобеги при добавлении в питательную среду ГК 0,2 мг/л; 3. Микрочеренок укоренённый на питательной среде с добавлением в среду
ИМК+ИУК
Fig. 3. Appearance of clonal apple tree rootstock 54-118
1. Normally developing microshoots after introduction into invitro culture; 2. Microshoots when HA 0.2 mg/l is added to the nutrient medium; 3. Microcutting rooted on the nutrient medium with the addition of IBA + IAA to the medium
Процесс адаптации растений зависит от различных факторов: срока высадки растений, почвенного субстрата, влажности воздуха, температурного и светового режимов [15, 16].
На этапе адаптации использовали субстрат на основе верхового торфа и растения высаживали в микропарники. Высокая влажность в микропарниках поддерживалась опрыскиванием растений водой два раза в сутки, полив проводился по мере необходимости. После двух-трехнедельной адаптации в микропарниках постепенно уменьшали влажность, прово-
дили проветривание. В дальнейшем для дора-щивания микрорастения пересаживали в стаканчики объемом 0,5 л для подращивания (рисунок 4). С целью повышения адаптации нами проводилась некорневая обработка растений в микропарниках кремнийсодержащим микроудобрением «Силиплант», в качестве контрольного варианта использовалась вода. Кремний является одним из важных элементов, который формирует механизм защиты от неблагоприятных факторов. Одна из функций кремния - стимуляция развития корневой системы [17].
Рис 4 Внешний вид клонового подвоя яблони 54-118 Fig. 4. Appearance of clonal apple tree rootstock 54-118
В опыте при опрыскивании силиплан-том, который способствовал существенному выходу адаптированных, составило 60 %, что на 15 % выше, чем при опрыскивании водой (45 %). Таким образом, с целью повышения приживаемости микросаженцев опрыскивание следует проводить микроудобрением «Силиплант».
Выводы. На этапе введения в стерильную культуру in vitro клонового подвоя яблони 54-118 лучшим сроком является период активного роста побегов. В условиях Среднего Пре-дуралья этот период приходится на конец мая - начало июня. При использовании стерилизующего агента - этилового спирта (70 %, 1 мин) с последующей обработкой диацидом (0,1 %, 6 мин) получено 63 % жизнеспособных стерильных эксплантов.
На этапе собственно микроразмножения оптимальной является среда Мурасиге - Скуга
с добавлением 6-БАП в концентрации 2 мг/л, на которой коэффициент размножения микрорастений составил 6,0. Для элонгации яблони целесообразно концентрацию 6-БАП снижать до 0,2 мг/л и добавлять гиббереллиновую кислоту в концентрации 0,2 мг/л, что стимулирует рост и обеспечивает выход микропобегов длиной 3,5 см. На этапе ризогенеза предварительное замачивание микрочеренков в растворах стимуляторов роста 4(индол-3ил)-масляной кислоты (25 мг/л) + 3-индолилуксусной кислоты (50 мг/л) ускоряет развитие корневой системы микрочеренков: через 30 дней укореня-емость существенно превысила контрольный вариант, составив у подвоя 54-118 - 81 %.
Установлено, что микропобеги лучше адаптируются к условиям открытого грунта с применением кремнийсодержащего препарата Силиплант: выход адаптированных микрорастений составил 76 %.
Список источников
1. Минаков И. А., Азжеурова М. В. Стратегия пространственного развития садоводства России // Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. 2019. № 4(59). С. 135-140.
2. Jeberean M. G. Results regarding the effect of cutting length on the rooting percentage with campsis radicans // Nano, bio and green- technologies for a sustainable future Albena. Bulgaria, 02-08 July. 2018. Р. 549-556.
3. Матушкина О. В., Пронина И. Н. Особенности размножения сортов яблони in vitro // Научные труды СевероКавказского зонального научно-исследовательского института садоводства и виноградарства. 2015. Т. 8. С. 110-114.
4. Wang M. R. Cryobiotechnology of apple (malus spp.): development, progress and future prospects // Hyperlink. 2018. Т. 37. №5. Р. 689-709.
5. Бунцевич Л. Л., Винтер М. А. Производство исходного посадочного материала косточковых культур in vitro, особенности технологии // Вестник АПК Ставрополья. 2017. № 2(26). С. 177-180.
6. Кухарчик Н. В. Получение посадочного материала плодовых и ягодных растений in vitro // Наука и инновации. 2019. № 6 (196). С. 17-21
7. Упадышев М. Т. Донецких В. И., Упадышева Г. Ю., Бъядовский И. А. Особенности оздоровления от вирусов клоновых подвоев семечковых и косточковых культур // Плодводство и ягодоводство России. 2013. №2. С. 270-275.
8. Shamshin I. N. Assessment of fire blight resistance in apple clonal rootstocks using molecular markers, proceedings on applied botany // Genetics and breeding. 2020. Т.118. №4. P. 185-191.
9. Матушкина О. В., Пронина И. Н. Технология клонального микроразмножения яблони и груши (методические рекомендации) // Мичуринск : ВСТИСП. 2008. 32 с.
10. Никитина А. В., Ленточкин А. М., Леконцева Т. Г., Федоров А. В. Влияние способа стерилизации и срока введения в культуру in vitro на жизнеспособность эксплантов клонового подвоя яблони 54-118 // Вестник Удмуртского университета. Серия Биология. Науки о Земле. 2020. Т. 30. № 4. С. 411-416.
11. Доспехов Б. А. Методика полевого опыта: (с основами статистической обработки результатов исследований) - 5-е изд. перераб. и доп. Москва : Колос, 1985. 351 с.
12. Леконцева Т. Г., Федоров А. В. Совершенствование технологии размножения винограда in vitro // Аграрный вестник Урала. 2020. № 09 (200). С. 55-62.
13. Беседина Е. Н., Бунцевич Л. Л. Усовершенствование технологии клонального микроразмножения подвоев яблони на этапе введения в культуру in vitro // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2015. №111. С. 1716-1734.
14. Муратова С. А. Биотехнологические аспекты размножения плодовых и ягодных культур // Сборник научных трудов государственного Никитского ботанического сада. 2017. Т. 144-2. С. 84-89.
15. Акимова С. В., Киркач В. В., Аладина О. Н., Деменко В. И., Стрелец В. Д., Паничкин Л. А., Воскобойников Ю. В., Скрипицына Е. К. Применение препаратов "Силиплант" и "Экофус" на этапе адаптации к нестерильным условиям клонового подвоя яблони 54-118 / С. В. Акимова, В. В. Киркач, О. Н. Аладина [и др.] // Плодоводство и ягодоводство России. 2019. Т. 59. С. 11-18.
16. Деменко В.И., Шестибратов К. А., Лебедев В. Г. Укоренение - ключевой этап размножения растений in vitro // Известия ТСХА. 2011. С. 60-71.
17. Матыченков В. В., Бочарникова Е. А., Кособрюхов А. А., Биль К. Я. О подвижных формах кремния в растениях // Доклады Академии наук. 2008. Т. 418. № 2. С. 279-281.
TECHNOLOGICAL ASPECTS OF PROPAGATION OF APPLE CLONAL ROOTSTOCK 54-118 BASED ON IN VITRO
©2023. Anna Viktorovna Nikitina
Udmurt State Agrarian University, Izhevsk, Russia, [email protected], ORCID 0000-0002-5926-3804
Abstract.Horticulture is a branch of agriculture, the main task of which is to obtain biologically valuable high-quality products. Currently, intensive and super-intensive horticulture is a promising direction that can significantly increase yields and reduce production costs at a high planting density of fruit trees. Nursery research is gaining importance in the intensification of horticulture, since the establishment of intensive fruit orchards is carried out only with high quality, leveled planting material on clonal rootstocks, which can be obtained through in vitro culture. The article presents the results of the study of the technological process of clonal micropropagation of apple clonal rootstock 54-118. It has been established that the best time for introduction to in vitro culture is the period of active growth of shoots. Two-stage sterilization made it possible to obtain 63% of viable sterile explants. Murashige-Skoogamedium with the addition of 6-benzylaminopurine at the concentration of 2 mg/l is optimal at the stage of micropropagation. The multiplication factor of microplants on this medium was 6.0. For the elongation of the apple tree, it is advisable to reduce the concentration of 6-benzylaminopurine to 0.2
mg/l, and also add gibberellic acid 0.2 mg/l to the nutrient medium. Preliminary soaking of microcut-tings at the stage of rhizogenesis in solutions of growth additives (indolyl-butyric acid 25 mg/l + indolyl-acetic acid 50 mg/l) accelerates the development of the root system of microcuttings up to 81%. It has been established that microshoots adapt better to open ground conditions with the use of a silicon-containing preparation siliplant: the yield of adapted microplants was 76%.
Key words: clonal micropropagation, apple clonal rootstock 54-118, growth additives
References
1. Minakov I. A., Azzheurova M. V. StrategijaprostranstvennogorazvitijasadovodstvaRossii (Strategy for the spatial development of horticulture in Russia) (// VestmkMchrninskogogosudar-stvennogoagramogoumversiteta. 2019. № 4(59). S. 135-140.
2. Jeberean M. G. Results regarding the effect of cutting length on the rooting percentage with campsis radicans // Nano, bio and green- technologies for a sustainable future Albena. Bulgaria, 02-08 July. 2018. R. 549-556.
3. Matushkina O. V., Pronina I. N. Osobennostirazmnozhenijasortovjabloni in vitro (F eatures of invito propagation of apple tree varieties) // Nauchnye trudy Severo-Kavkazskogo zonal'nogonauchno-issledovaterskogoinstitutasadovodstvaivinogradarstva. 2015. T. 8. S. 110-114.
4. Wang M. R. Cryobiotechnology of apple (malus spp.): development, progress and future prospects // Hyperlink. 2018. T. 37. №5. R. 689-709.
5. Buncevich L. L., Vinter M. A. Proizvodstvoishodnogoposadoch-nogomaterialakostochkovyhkul'tur in vitro, osobennosti tehnologii (Invito production of initial planting material for stone fruit crops, technology features) // Vestnik APK Stavropol'ja. 2017. № 2(26). S. 177-180.
6. Kuharchik N. V. Poluchenieposadochnogomaterialaplodovyhijagodnyhrastenij in vitro (Obtaining planting material for fruit and berry plants) // Nauka iinnovacii. 2019. № 6 (196). S. 17-21
7. Upadyshev M. T. Doneckih V. I., Upadysheva G. Ju., B#jadovskij I. A. Osobennostiozdorovlemjaotvirusovklono-vyhpodvoevsemechkovyhikostochkovyhkul'tur (Features of recovery from viruses of clonal rootstocks of pome and stone fruit crops) // Plodvodstvoijagodovod-stvoRossii. 2013. №2. S. 270-275.
8. Shamshin I. N. Assessment of fire blight resistance in apple clonal rootstocks using molecular markers, proceedings on applied botany // Genetics and breeding. 2020. T.118. №4. P. 185-191.
9. Matushkina O. V., Pronina I. N. Tehnologija klonal'nogo mikrorazmnozhenija jabloni i grushi (Technology of clonal micropropagation of apple and pear trees) (metodicheskierekomendacii) // Michurinsk : VSTISP. 2008. 32 s.
10. Nikitina A. V., Lentochkin A. M., Lekonceva T. G., Fedorov A. V. Vlijaniesposobasterilizaciiisrokavvedenija v kul'turu in vitro nazhiznesposobnost' jeksplantovklonovogopodvojajabloni 54-118 (The influence of the sterilization method and the timing of introduction into in vitro culture on the viability of explants of clonal apple rootstock 54-118) // VestnikUdmurtskogouniversiteta. SerijaBi-ologija. Nauki o Zemle. 2020. T. 30. № 4. S. 411-416.
11. Dospehov B. A. Metodika polevogo opyta: (s osnovami statisticheskoj obrabotki rezul'tatov issledovanij) (Methodology of field experience: (with the basics of statistical processing of research results) - 5-e izd. pere-rab. i dop. Moskva : Kolos, 1985. 351 s.
12. Lekonceva T. G., Fedorov A. V. Sovershenstvovanietehnologiirazmnozhenijavinograda in vitro (Improving invitro grape propagation technology ) // AgrarnyjvestnikUrala. 2020. № 09 (200). S. 55-62.
13. Besedina E. N., Buncevich L. L. Usovershenstvovanietehnolo-giiklonal'nogomikrorazmnozhenijapodvoevja-bloninajetapevvedenija v kul'turu in vitro (Improving the technology of clonal micropropagation of apple tree rootstocks at the stage of introduction into invitro culture) // Politematicheskijsetevojjelek-tronnyjnauchnyjzhurnalKubanskogogosudarstvennogoagrar-nogouni-versiteta. 2015. №111. S. 1716-1734.
14. Muratova S. A. Biotehnologicheskieaspektyrazmnozhenijaplodovyhijagodnyhkurtur (Biotechnological aspects of propagation of fruit and berry crops) // Sborniknauchnyhtrudovgosu-darstvennogoNikitskogobotanicheskogosada. 2017. T. 144-2. S. 84-89.
15. Akimova S. V., Kirkach V. V., Aladina O. N., Demenko V. I., Strelec V. D., Panichkin L. A., Voskobojnikov Ju. V., Skripi-cyna E. K. Primeneniepreparatov "Siliplant" i "Jekofus" najetapeadaptacii k nesteril'nymuslovijamklonovogopodvoja jab-loni 54-118 (The use of preparations "Siliplant" and "Ecofus" at the stage of adaptation to non-sterile conditions of clonal apple rootstock 54-118) / S. V. Akimova, V. V. Kirkach, O. N. Aladina [i dr.] // PlodovodstvoijagodovodstvoRossii. 2019. T. 59. S. 11-18.
16. Demenko V.I., Shestibratov K. A., Lebedev V. G. Ukorenenie - kljuchevojjetaprazmnozhenijarastenij in vitro (Rooting is a key stage in invitro plant propagation) // Izvestija TSHA. 2011. S. 60-71.
17. Matychenkov V. V., Bocharnikova E. A., Kosobrjuhov A. A., Bil' K. Ja. O podvizhnyh formah kremnija v rastenijah (About mobile forms of silicon in plants) // Doklady Akademii nauk. 2008. T. 418. № 2. S. 279-281.
Сведения об авторах
А. В. Никитина - ассистент.
ФГБОУ ВО Удмуртский государственный аграрный университет, 426033, г. Ижевск, ул. Кирова, 16
Information about the author
А. V. Nikitina - Assistant.
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Udmurt State Agrarian University, 16, Kirova St., Izhevsk, Russia, 426033
одобрена после рецензирования 23.06.2023; принята к публикации 04.09.2023 The article was submitted 20.05.2023; approved after reviewing 23.06.2023; acceptedfor publication 04.09.2023
