Стимуляция иммунного ответа в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при болезнях копытец у коров голштино-фризской породы
А.Н. Безин, д.в.н., профессор, Д.В. Малов, к.в.н.,
Ю.В. Веряскина, аспирантка, Уральская ГАВМ
Анализ литературы и собственные данные последних лет подтверждают тот факт, что заболевания дистального отрезка конечностей у крупного рогатого скота занимают одно из ведущих мест в Российской Федерации, в том числе и на Южном Урале [1—3].
Основные исследования по изучению характера поражений при заболеваниях копытец у коров голштино-фризской породы, разработке мер профилактики и лечения проводили в ООО «Песчаное» Увельского района Челябинской области.
Особенностью заболеваний дистального отрезка конечностей у голштино-фризского скота явилось то, что заболевание протекало в тяжёлой форме и часто заканчивалось вынужденным убоем больных коров. При этом возбудитель некробактериоза выделен в 100% проб, а также в ассоциации с синегнойной палочкой (100% проб), энтерококками и клостридией перфрин-генс (42,8% проб).
Выделенные культуры и условно-патогенная микрофлора высокочувствительны только к ципрофлоксацину, умеренно — к гентамицину. К остальным антибиотикам культуры были слабо чувствительны или устойчивы.
В настоящее время в России есть три официально зарегистрированных вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота, опыт применения которых показал их невысокую профилактическую эффективность, особенно в тех
хозяйствах, которые являются длительное время неблагополучными по данному заболеванию [4].
Поэтому для повышения эффективности профилактической работы, особенно в хозяйствах, где названные вакцины применялись ранее, было решено использовать их в сочетании с другими препаратами (адаптогенами), повышающими их иммуногенность.
Одним из таких препаратов является трансфер-фактор, который использовался нами для стимуляции иммунного ответа организма при применении вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота.
Материал и методы. Трансфер-фактор получали по запатентованной нами методике, используя лимфоузлы крупного рогатого скота, переболевшего некробактериозом. В дальнейшем лимфоузлы подвергали специальной обработке.
Коровы 1-й контрольной группы (п=20) вакцинировали без предварительной стимуляции. Коровам 2-й опытной группы (п=20) за семь дней до введения вакцины подкожно вводили трансфер-фактор, в дозе 5 мл на 100 кг живой массы. В обеих группах животных использовали вакцину Нековак против некробактериоза крупного рогатого скота, производства ФГУП «Ставропольская биофабрика», ООО НПФ «Вентком-М».
С целью определения наличия сенсибилизации организма к Г. песго/огыш использовали антиген (очищенную, убитую, культуру Г. песго/огыш), который вводили подкожно через 14 дней после применения вакцины с последующим учётом
1. Результаты внутрикожной аллергической пробы с микробным антигеном (X±Sx; n=20)
Группы коров Сроки наблюдений
через 24 ч через 48 ч через 72 ч
Контрольная: (1-я): увеличение толщины кожной складки, мм 3,22±0,25 3,52±0,23 3,60±0,28
Опытная: (2-я): увеличение толщины кожной складки, мм 4,68±0,17 5,60±0,21 4,95±0,34
Р<0,05 Р<0,001 Р<0,01
2. Сравнительная характеристика показателей клеточного и гуморального иммунитета у коров (X±Sx; п=20)
Показатели 1-я гр. 2-я гр. Р1-3 Р2-4
через 14 дн. через 30 дн. через 14 дн. через 30 дн.
Спонтанная РБТЛ РБТЛ к стаффилококку РБТЛ к F necroforum Титр антител к F. necroforum, Log,? 2,12±0,08 12,72±0,98 12,44±1,18 4,65±0,12 2,25±0,10 13,10±1,14 13,58±1,34 7,85±0,35 2,64±0,20 13,54±1,22 20,69±2,38 7,98±1,16 2,33±0,16 14,10±1,88 19,64±2,24 10,25±0,45 >0,5 >0,5 <0,01 <0,01 >0,5 >0,5 <0,01 <0,01
Р1-3 — достоверность различий между группами через 14 дней Р2-4 — достоверность различий между группами через 30 дней
реакции в виде увеличения толщины кожной складки через 24, 48 и 72 часа. Параллельно определяли наличие сенсибилизации иммуннокомпетентных клеток в реакции бласттранс-формации лимфоцитов (РБТЛ) и титр антител к Г. нвего/отт в реакции агглютинации (РА), используя этот же антиген.
Результаты исследований. В результате проведённых исследований установлено (табл. 1), что развитие аллергической реакции на внутри-кожное введение антигена у обеих групп коров нарастало постепенно, достигнув максимальных значений через 48 часов. Причём уже через 24 часа кожная реакция была более выражена у коров, которым вводили трансфер-фактор. Так, толщина кожной складки у коров опытной группы через 24 часа превышала показатель контрольной на 21,20%, через 48 часов эта разница увеличилась и составила 37,15% (Р<0,01). Через 72 часа после введения антигена толщина кожной складки стала уменьшаться, однако у коров опытной группы она продолжала достоверно превышать показатель контрольной на 27,28% (Р<0,05).
Данный факт говорит о том, что на фоне введения трансфер-фактора развивается повышенная сенсибилизация организма коров к бактериальному антигену (Г. нвсго/огыт), что косвенным образом подтверждает предположение о возможном переносе иммунологической памяти от животных, больных или переболевших некробактериозом, здоровым.
Подтверждением этого являются результаты динамики изменения РБТЛ и РА (реакции агглютинации), выявленные через 14 и 30 дней после введения вакцины (табл. 2).
Сравнивая результаты РБТЛ у коров контрольной и опытной групп через 14 (время пика иммунного ответа) и 30 дней после вакцинации, можно отметить, что сенсибилизация лимфоци-
тов к микробному антигену у коров 2-й группы выражена в большей степени, чем у коров 1-й группы, и превышает показатель последней на 39,88 и 30,86% (Р<0,01) соответственно.
Необходимо отметить, что в обеих исследуемых группах в целом сохранена способность лимфоцитов к бластированию, что подтверждается данными изучения спонтанной бласттранс-формации, а также наличием сенсибилизации к такому бактериальному аллергену, как стафилококковый аллерген.
При изучении гуморального ответа иммунной системы установлено, что средний титр антител (log2) у коров опытной группы через 14 дней превышал показатель коров контрольной на 41,73% (Р<0,01), а через 30 дней — на 23,42% (Р<0,01).
Заключение. Полученные результаты подтверждают, что применение трансфер-фактора стимулирует иммунный ответ на введение вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота. Это позволит в определенной степени снизить затраты на проведение профилактических и лечебных мероприятий при заболеваниях копытец у импортного скота.
Литература
1. Безин А.Н. Влияние эраконда на течение гнойно-некротических процессов копытец у коров и северных оленей // Загрязнённость экологических систем токсикантами и фармако-клиническая характеристика эраконда: мат. I конф. Троицкого науч. общ. фармакологов. Троицк, 1994. С. 16—17.
2. Молоканов В.А., Безин А.Н. Показатели естественной резистентности, иммунологического и биохимического статуса у коров с гнойно-некротическими поражениями копытец // Актуальные проблемы интенсификации животноводства и подготовки кадров: мат. науч. и методич. конф., посвящ. 60-летию Троицкого ветеринарного института. Троицк, 1990. С. 94-95.
3. Тимофеев С.В., Гимфаков В.В. Этиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика болезней в области пальцев у крупного рогатого скота. Уфа, 2008. 104 с.
4. Сидорчук А.А., Панасюк С.Д. Проблемы борьбы с некробак-териозом крупного рогатого скота в России // Актуальные проблемы ветеринарной хирургии: труды межд. науч.-практ. конф., посвящ. 75-летию УГАВМ Троицк, 2004. С. 149-150.