CC BY
14
liiC. I II IIi' ВДНЗУ «Украгнсъка жедична стожатологЬчна акадежШ»
Summary
PECULIARITIES OF HARD TISSUE ALTERATIONS IN HUMAN PERMANENT TEETH UNDER CONTACT CARIES Kostylenko Yu.P., Petrenko A.I.
Keywords: premolar teeth, contact caries, enamel, dentine, enamel sequester, "dead tracts".
On the basis of manufacturing epoxide plate-like microsections of premolar teeth affected with contact caries, and their staining in the chelating agent and further staining with methylene blue it has been established that under the above mentioned caries the pathomorphologic picture in hard tissue alteration considerable differs from that with carious defect of open surfaces in a dental crown. The basic morphological signs of contact caries is the accumulation in the sequestered enamel lesion centre, presence of slot-like spaces between it and dentine surface layer, and also its pigmentation and alteration of all dentine depth in a form of radiating "dead tracts" damaged enamel from the wall of the pulp chamber to the basal layer.
УДК: 615.37 : 531/534 : 616-001 : 616-003.231 : 616.31
СТАН МУКОЗАЛЬНОГО 1МУН1ТЕТУ ХВОРИХ НА ХР0Н1ЧНУ МЕХАН1ЧНУ ТРАВМУ СЛИ30В01 0Б0Л0НКИ П0Р0ЖНИНИ РОТА
Кулигта В. М., Горай М. А.
ВЫницький нацюнальний медичний университет ¡меж М. I. Пирогова
Проведено досл{дження мукозалъного iмуттету хворих з хротчною мехатчною травмою слизо-eói оболочки порожнини рота. Встановлено, що локалъний викид прозапалъних цитотшв IJI-lß, ФНП-а, 1Ф-у перетворюе захист мехатзми слизовог оболочки порожнини рота в патолог{чт i викликае пошкодження та розвиток хротчного запалення. При досл{джент специф{чного гуморального iMyuimemy слизовог оболонки порожнини рота встановлено зниження eMicmy slgA та тдвищення mlgA i IgG у хворих на хронгчну механгчну травму, що може бути обумовлене ви-снаженням iмунног системи при тривалому nepeöizy захворювання, зниженням peaKmueuocmi оргатзму та вшом хворих. Визначено doemoeipue зниження концентраци лактоферину в рото-eiü piduui, що може розглядатися як специф{чний маркер хротчного мехашчного пошкодження слизовог оболонки порожнини рота.
KnK)40B¡ слова: цитоини, мукозальний умужтет, лактоферин, хроннна механична травма слизовоТ оболонки порожнини рота.
Вступ
Хрожчна механична травма - найбтьш поши-рена причина пошкодження слизовоТ оболонки порожнини рота. Незважаючи на те, що значна роль у виникненж хрожчних мехажчних травм слизовоТ оболонки порожнини рота належить мь сцевим травмуючим факторам, в л1тератур1 зу-стр1чаються поодиною роботи, в яких визначеж ¡мунж порушення [9] у цих хворих.
Вщомо, що ¡муноцитокши (1Л-1(3, 1ФН-у, ФНП-а) виконують функци регулятор1в ¡мунноТ' системи \ мають велике значения в процесах регенераци тканин [1]. Це диктуе необхщнють вивчення стану цитокшовоТ' регуляци слизовоТ оболонки порожнини рота при ТТ хрожчному мехажчному пошкодженж та вивчення впливу виявлених по-рушень на характер та переб1г локального пато-лопчного процесу в тканинах.
Враховуючи значения хрожчно'Г мехажчно'Г травми слизовоТ оболонки в розвитку передра-кових захворювань, вивчення вмюту лактоферину в ротовш рщиж можуть бути корисними в про-гнозуванж переб^у захворювання. Р1зномажт-нють фактор1в ¡мунного захисту слизовоТ оболонки порожнини рота вщ дм р1зних патогежв обу-мовлюе вивчення тих ланок, яю недостатньо ви-евппенж в лп"ературк
Матср1али та методи
Для визначення ¡мунолопчних аспекпв розвитку мехажчних пошкоджень
слизовоТ оболонки
порожнини рота нами було проведено комплек-сне ¡мунолопчне дослщження ротовоТ' рщини хворих на хрон1чну мехажчну травму, BiKOM вщ 50 до 75 роюв, у 30 здорових oci6 з вщеутнютю ураження слизовоТ оболонки, та у 110 хворих Tie'1'ж BiKOBO'i категори. 3 них 35 oci6 з травматичною ерп"емою, 13 - з декубп"альними виразками, 19-з хрожчною травматичною ероз1ею: 37 - з плоскою формою лейкоплакм, 6 - з верукозною лейкоплашю слизовоТ оболонки порожнини рота. Вмют 1Л-1(3, ФНП-а, 1Ф-у в ротовш рщиж ви-значали за допомогою реагешчв РгоСоп росшсь-кого виробництва (Протешовий контур, С.Петербург). Кшькюний BMiCT лактоферину в ротовш piflHHi визначали за допомогою реагешчв ЛАКТОФЕРИН-1ФА-БЕСТ методом твердофазного ¡муноферментного анал1зу з використанням полклональних антитт до лактоферину. Визначення результате дослщження проводили за допомогою автоматичного фотометра при дов-жиж хвил1 450 нм. з використанням кал1бровоч-ноТ' криво!'.
BMiCT slgA, mlgA, IgG ¡муноглобулш1в визначали методом рад1альноТ' ¡мунодифузи в гел1 за Mancini у модифкаци Simmons з використанням антисироваток проти slgA, mlgA, IgG росшського виробництва (Медична ¡мунолопя, Москва) i MiK-ропланшет1в ф1рми Hyland (США) проводили безграф1чним методом [11] розрахунок концентраци ¡муноглобулш1в патогежв. Статистичну об-робку результате проводили за критер1ем Стьюдента.
Результати та обговорення
Приведен! дан1 свщчать про неоднозначно змн ни дослщжуваних показниш при р1зних проявах хроычних мехаычних пошкоджень слизовоТ обо-лонки порожнини рота.
Анал1з показниш м1сцевого гуморального ¡муштету слизовоТ оболонки порожнини рота у хво-рих з хроычними травматичними запально-деструктивними захворюваннями слизовоТ оболонки порожнини рота встановив достов1рне зниження э1дА пор1вняно з практично здоровими донорами аналопчного в1ку. Р1вень э1дА у хворих з хроычною травматичною ероз1ею скпав 0,24±0,0306 мг/мл (проти 0,408±0,004 мг/мл у здорових оаб контрольно'!' групи р<0,001). Май-же однаков1 значения р1вня даного ¡муноглобулн ну в зм1шанш слиы виявлеш у хворих з хроыч-ною травматичною ероз1ею \ декубп"альною ви-разкою (вщповщно 0,24±0,0306 мг/мл \ 0,22±0,004 мг/мл), що достов1рно вщр1зняеться вщ таких групи конторолю з в1рогщнютю р1зниц1 вщ 99% до 99,9%. Так1 змши вказують на недо-статнють мукозального ¡муштету порожнини рота, обумовленоТ' тривалим переб1гом патолопч-ного процесу \ можливим розщепленням димер-ноТ' молекули э1дА ферметами м1крооргашзм1в, активнють яких пщвищуеться при даних захво-рюваннях [5]. Це пщтвержуеться стшкою тенде-нц1ею до збтьшення його мономерноТ' форми (т1дА) в ротовш рщиж обстежених хворих. Так вмют т1дА у зм1шанш слит хворих з хроычною травматичною ерп"емою слизовоТ оболонки порожнини рота склав 0,22±0,01 мг/мл, з хроычно'Г травматично!' ерози - 0,31 ±0,00047 мг/мл, з де-кубп"альною виразкою - 0,55±0,037 мг/мл, що з високим ступенем достов1рносп (99-99,9%) вщ-р1знялись вщ аналопчних значень групи контролю. На напруження захисноТ' лапки м1сцевого гу-
морального ¡муштету при хрошчних травматич-них запально-деструктивних захворюваннях слизовоТ оболонки порожнини рота мехашчного пошкодження вказувала достов1рна р1зниця по-казниш вмюту специф1чних антитт - 1дС, в ротовш рщиш хворих вщносно здорових оаб контрольно'!' групи. Пщвищення даного показника у хворих з хрошчною травматичною ер1темою, ероз1ею, виразкою ( вщповщно в 5, 3 \ 3,6 раз1в) вщносно «чистого контролю» свщчить про акти-вацш клону 1дС - продукуючих протизапальних кл1тин у слизовш оболонц1, що спостер1гаеться при порушены епп"ел1ального шару [2]. На вщмн ну вщ хрошчних запально - деструктивних за-хворювань слизовоТ оболонки порожнини рота переб1г плоскоТ' та верукозноТ' лейкоплаки слизовоТ' оболонки ротовоТ' порожнини не супроводжу-валось вираженими змшами у систем! гуморального ¡муштету, на що вказувала вщсутнють достов1рноТ' р1зниц1 багатьох його показниш по-р1вняно з групою контролю (р > 0,05). Лише у хворих з верукозною формою лейкоплаки слизовоТ' оболонки порожнини рота значения вмюту 1дС в ротовш рщиш перевищувало аналопчний показник контрольно'!' групи у 7 раз1в. Можливо, значне порушення диференц1ровки та злущу-вання ештелш слизовоТ оболонки при цш форм1 лейкоплаки пов'язане з порушеннями ¡мунолоп-чноТ' регуляци названих процеав ¡, як наслщок, посилення напруженосп даноТ' ланки м1сцевого ¡муштету з пщвищеною продукц1ею цього антитн ла.
Останшм часом звертають на себе увагу ендо-генш мед1атори - цитокши, як1 вщ1грають вели-чезну ¡мунобюлопчну роль. Цитокши е продуктами ¡мунокомпетентних кл1тин, \ в той же час ¡мунокомпетентш кл1тини е объектами для дм ци-томшв [8].
Таблиця.
Результати /мунолоячного досл!дження мукозального /муштету у хворих на хрон1чну мехашчну травму слизовоТ оболонки
порожнини рота
Групи дослщжуваних хворих Показники мукозального ¡муштету
1Л-1 р (пг/мл) |ф- у (пг/мл) ФНП-а (пг/мл) Лактоферин (нг/мл) т!дА (мг/мл) з1дА (мг/мл) |дЗ (мг/мл)
Контроль п = 30 4.66+0,94 11,33+0,92 6,47+0,63 4780+192,91 0,17+0,012 0,408+0,004 0,03+0,001
Хрошчна травматична ерггема п = 35 34,23+7,22 18,94+1,44 12,29+1,11 3615,29+267,061 0,22+0,01 0,12+0,01 0,15+0,03
Р<0,01 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,01 Р<0,001 Р<0,001
Хрошчна травматична ероз1я п = 19 10,73+2,21 19,78+6,27 15,36+1,407 2672,1+43,67 0,31+0,0004 7 0,24+0,0306 0,09+0,02
Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,01
Декуб1 -тальна виразка п = 13 21,61+3,36 54,15+10,37 26,38+1,33 2753,84+32,45 0,55+0,037 0,22+0.004 0.107+0,03
Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,01 Р<0,05
Лейкоп - лаюя плоска форма п = 37 22,1+2,1 13,18+2,57 5,45+0,9 1897,07+96,49 0,2+0,016 0,318+0,019 0,02+0,004
Р<0,001 Р>0,05 Р>0,05 Р<0,001 Р>0,05 Р<0,05 Р>0,05
Лейкоп -лаш веру-козна форма п = 6 23,8+4,24 20,5+8,08 8,33+0,49 3251,66+308,57 0,102+1,67 0,48+0,055 0,21+0,044
Р<0,001 Р>0,05 Р>0,05 Р<0,001 Р>0,05 Р>0,05 Р<0,001
Прим1тка: Р-достов1рнють р/зниц/' м'ж показниками основноТ
Вщомо що прозапальш цитокши 1Л-1(3, ФНП-а, |ф-у вщ1грають провщну роль у розвитку хрошч-ного запалення. Змши в цитокшовому фош при
контрольноГ групи.
хрошчному переб^у запального процесу характеризуются утворенням взаеморегулюючих ан-тагонютичних та агон1стичних зв'язюв м1ж ними,
В1СНИК ВДНЗУ «Украгнсъка жедична стожатологЬчна акадежШ»
визначаються взаемопригшчуюч1 вщносини, що ведуть до бтьш локального \ менш ¡нтенсивного переб1гу запальноТ' деструктивно'!' реакци в сли-зовш оболонц1 порожнини рота, та гпдвищенню репаративних процеав [10].
Проведене нами вивчення вмюту цитомшв в ротовш рщиш хворих з хрошчною мехашчною травмою слизовоТ оболонки порожнини рота показало |'х значш змши пор1вняно з вщповщними показниками «чистого контролю». Вмют проза-пального цитокшу 1Л-1р, який е ¡нщ1атором запуску цитокшового каскаду в тканинах слизовоТ оболонки порожнини рота, що пщсилюе як влас-ну продукцш, так \ синтез ¡нших цитомшв (ФНП-а, 1Ф-у), у хворих з хрошчною травматичною ерн темою збтьшуеься в 7 раз1в (р<0,001) у пор1в-нянш з особами з ¡нтактною слизовою оболон-кою. Пщсилення активносп дослщжуваного цитокшу, який секретуеься моноцитами, макрофагами, стромальними \ епп"ел1альними кл1тинами, обумовлено напевно м1крооргашзмами \ Т'х продуктами життед1яльносп в вогнищ1 запалення осктьки ц1 кл1тини забезпечують першу лшш протшнфекцшного захисту, що вщ1грае роль фундаменту для р1зних форм ¡мунноТ вщповщ1 [ 7 ].
Разом з цим, вщм1чаеься зменшення р1вня цього цитокшу у хворих на лейкоплакш, що мо-же свщчити про зниження локально'!' ¡мунореак-тивносп у цих хворих.
Р1вень другого прозапального цитокшу ФНП-а поступово збтьшуеться по м1р1 пщсилення мю-цевого патолопчного процесу в тканинах слизовоТ' оболонки. Так, у хворих з хрошчною травматичною ерп"емою концентрац1я ФНП-а в ротовш рщиш склала 12,29±1,11пг/мл, хрошчною травматичною ероз1ею - 15,36+1,407пг/мл, декубп"альною виразкою - 26,38±1,33 пг/мл, що з високим ступе-нем достов1рносп (р<0,001) вщр1зняеься вщ оаб контрольно'!' групи. Стшка тенденц1я до зростання вмюту ФНП-а вказуе на його провщну роль в патогенез! тканинного пошкодження та виражену м1сцеву прозапальну дш. Разом з тим, показних концентрацП' даного богатофункцюнального цитокшу в зм1шанш слиш хворих з кератозом слизовоТ' оболонки достов1рно вщр1зняеться вщ та-коТ' групи контроля: 5,45±0,9 пг/мл - при плоскш форм1, 8,33±0,49 пг/мл - при верукознш (р>0,05). Отримаш результати свщчать про незначну бюло-пчну активнють кштин макрофагальноТ' системи, яю активно продукують даний цитокш, що обумовлено нешфекцшним характером кератотичних процеав слизовоТ оболонки порожнини рота.
Другу антигенспециф1чну лУю ¡мунного захисту здшснюють цитокши, продуценти л1мфоцит1в, одним з яких е 1Ф-У [4]. При хрошчних мехашчних пошкодженнях слизовоТ оболонки порожнини рота вмют цього цитокшу в ротовш рщиш хворих теж мав стшку тенденцш до збтьшення при по-пршенш патолопчного процесу в тканинах: при хрошчнш травматичнш ерп"ем1 - 18,94±1,44 пг/мл, хрошчнш травматичнш ерозП' - 19,78±6,27 пг/мл, при декубп"альних виразках - 54,15±10,37пг/мл,
при достов1рносп 99,9%. Виявлеш недостов1рш змши концентрацП' 1Ф-у в ротовш рщиш хворих з лейкоплашю слизовоТ оболонки порожнин рота пщкреслюють специф1чнють мехашзму активаци л1мфоцит1в до послщовного продукування цього цитокшу, менш пов'язаною з процесами зрого-вшня тканин.
Враховуя даш л1тератури про антибактер1альну актившсь бтка лактоферину, а також регуляцш системи ¡муштету реактивносп кштин, вщповща-льних за фагоцитоз [3], проведено вивчення його вмюту в ротовш рщиш хворих з хрошчною мехаш-чною травмою слизовоТ оболонки порожнини рота. 3 наведених у таблиц даних видно, що найбтьш високий вмют лактоферину в ротовш рщиш вияв-лений у практично здорових донор1в, який скпав 4780±192,91 нг/мл. В той же час уах трупах хворих спостер1гали достов1рне (р<0,001) зниження цього показника. При хрошчнш травматичнш ерп"ем1 вш склав 3615,29±267,061пг/мл, хрошчнш травматичнш ерози - 2672,1 ±43,67 пг/мл, декубп"альнш виразц1 - 2753,84±32,45 пг/мл. При плоскш форм1 лейкоплакП' - 1897,07±96,49 пг/мл, при верукознш 3251,66±308,57 пг/мл.
Отримаш даш свщчать, про значну роль лактоферину у розвитку як хрошчного запального процесу в слизовш оболонц1 порожнини рота, так \ предракових змшах ештелш, на що вказу-ють дослщження автор1в [10].
Висновок
Таким чином, проведен! дослщження свщчать, що локальний викид прозапальних цитоюшв пе-ретворюе захисш механ1зми слизовоТ оболонки порожнини рота в патолопчш \ викликае м1сцеве пошкодження тканин та розвиток хрошчного запалення. Пщвищення вмюту цитоюшв та актива-ц1я цитокшово'Г системи у хворих з хрошчними механ1чними травмами слизовоТ оболонки порожнини рота необхщно розглядати як показник активности прогресування захворювання, вплив в патолопчний процес ¡мунноТ' системи та ТТ роз-балансування. Встановлене достов1рне зниження концентрацП' лактоферину в ротовш рщиш як при запальних, так \ пперпластичних процесах може розглядатися як специф1чний маркер хрошчного мехашчного пошкодження слизовоТ оболонки порожнини рота.
При дослщженш специф1чного гуморального ¡мунутету слизовоТ оболонки порожнини рота встановлене зниження вмюту з1дА та пщвищення т1дА \ 1дС у хворих на хрошчну механ1чну травму може бути обумовлене виснаженням ¡мунноТ' системи при тривалому переб1гу захворювання, зниженням реактивносп оргашзму та вком хворих.
Отже, значн1 порушення в робот1 основних ланок ¡мунноТ' системи порожнини рота, пригшчен-ня неспециф1чного захисту \ специф1чного ¡муш-тету негативно впливае на переб1г хрон1чних ме-хан1чних травм слизовоТ оболонки порожнини рота та потребуе вщповщно'Г корекци.
JliTepaTvna пов Н Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - №6. -
r J г С.27-28.
Бочарова О. А. Мезенцева Роль адгезивных нарушений в пато- 7 Симбирцев А. С. Биология семейства интерлейкина -1 человека
генезе лейкоплакии и возможности их коррекции иммуномоду- / А.С.Симбирцев//Иммунология. - 1998. - №3. - С.9-17.
лятором / О.А.Бочарова, М.М.Пожарицкая, Т.Л.Чекалина [и др. 1 „ - _ г, . .. .
// Иммунология - 2004 - №1 - С 36-43 8- Симбирцев А. С. Цитокши-новая система регуляции защитных
' „ _ реакций организма. / А.С.Симбирцев // Цитокини и воспаление.
Булкина О. 3. Клинико-иммунологическая характеристика боль- _ 2002 - т 1 - N°1 - 2002
ных с круглогодичным аллергическим ринитом с очагами хро- „...'!,' ~ '
нической инфекции рото- и носоглотки / О.З.Булкина, Т. П. Map- 9- Чекалша Т. Л. Возможности повышенияэффективности ком-
кова II Иммунология - 2007 - №1 - С 46-49 плексного лечения больных леикоплакиеи слизистои оболочки
„ . .. . полости рта при использовании комплексного растительного
ДюгеевА.Н. Структура и функции человеческого лактоферрина: препарата Фитомикс - 40 / Т.Л.Чекалша, М.М.Пожарицая,
перспективы изучения в акушерстве / А.Н.Дюгеев, А.Н.Шипулин // Акушерство и гиникология. -1991. - №1. - С.6 - 9.
О.А.Бочарова // Стоматология. - 2004. - №5. - C.24-30. 10. Чумакова Ю. Г. Роль цитокинов в регуляции воспаления тканей
4. Ковальчук Л.В. Роль цитокинов в развитии хронического воспа- ' п^радонта у ' больных генерализованым парадонтитом / ления в тканях парадонта / Л.В.Ковальчук Л.В.Ганковская, Ю.Г.Чумакова II Современная стоматология. -2004. - №4. -М.А.Рогова [и др. ] // Иммунология. - 2000. - №6. - С.24-26. q gg.g2
5. Мельников О. Ф. Диагностика иммунодефицитов при патологии ^ Manchini G. Immunochemical quantitation of antigens dy single слизистои оболочки на основе определения иммуноглобулинов radia| immunodiffusion / G.Manchini, A.O.Garbonara, в секретах / О. Ф. Мельников, Д.И. Заболотнии. - К., - 2003. - S.F.Heremans II Immunochemistry -1965. - V.2. - №.6 - Р.234-235.
г- ' п п п ^ 12. Mantovani A. Cytokine regulati on of endothelial cell functionfrom
6. Осипов В.Д. Диагностическое значение содоржания белка лак- molecular level to the bed side / A.Mantovani, F.Bussolino, тоферрина при предраковых заболеваниях гортани / В.Д. Оси- M.lntroma // Immunol. Today.- 1997.-V.18. - Р.231-239.
Реферат
СОСТОЯНИЕ МУКОЗАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМОЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА Кулигина В.М., Горай М.А.
Ключевые слова: цитокины, мукозальный имунитет, лактоферрин, хроническая механическая травма слизистой оболочки полости рта.
Проведено иследование больных с хронической механической травмой слизистой оболочки полости рта. Установлено, что локальный выброс прозапальных цитокинов ИЛ-1р, ФНО-а, ИФ-у превращает защитные механизмы слизистой оболочки полости рта в патологические и вызывает повреждение и развитие хронического воспаления. При иследовании специфического гуморального иммунитета слизистой оболочки полости рта установлено снижение содержания slgA и повышение mlgA и IgG у больных с хронической механической травмой, что может быть обусловлено истощением иммунной системы при длительном течении заболевания, снижением реактивности организма и возрастом пациентов. Определено достоверное снижение концентрации лактоферрина в ротовой жидкости, что может рассматриваться как специфический маркер хронического механического повреждения слизистой оболочки полости рта.
Summary
STATE OF MUCOSAL IMMUNITY IN PATIENTS WITH CHRONIC MECHANICAL TRAUMAS OF ORAL MUCOSA Kulygina V.M., Horay M.A.
Key words: cytokines, mucosal immunity, lactoferrin, chronic mechanical trauma of oral mucosa.
We investigated the mucosal immunity of patients with chronic mechanic trauma of oral mucosal membrane. It was found out that the local release of proinflammatory cytokines (IL-1p, TNF-a, IF-y) modified protective mechanisms of oral mucosal membrane into pathological ones and led to the damages and chronic inflammation. During the investigation of specific humoral immunity of oral mucosal membrane of oral there was determined the decrease of slgA and the increase of mlgA and IgG level in patients with chronic mechanic trauma of oral mucosa that could be caused by the exhausting of immune system during the long-lasting course of the disease or by the decreasing of reactivity and by the age of the patient. It was found out the concentration reliable decrease of lactoferrin concentration in oral liquid that may be considered as a specific marker of chronic mechanical trauma of oral mucosa.
