CC BY
213
КЛИНИЧЕСКАЯ ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ
clinical gastroenterology
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ХЕЛИКОБАКТЕРНОЙ ИНФЕКЦИИ
Суханов А.В.1, Пикерский И.Э.2, Сайфутдинов Р.Г.3, Макаров А.А.2, Фролов С.В.2
1 Иркутский областной клинический консультативно-диагностический центр
2 Иркутский государственный университет, кафедра физической географии и геоэкологии
3 ГОУ ДПО Казанская государственная медицинская академия «КГМА Росздрава»
Пикерский Игорь Эдуардович
664033, Иркутск, ул. Лермонтова, 269-а
E-mail:[email protected]
РЕЗЮМЕ
Цель исследования. Было проведено сравнение наиболее распространенных методов диагностики инфекции Helicobacter pylori: гистологического, цитологического, метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) и дыхательного уреазного хелик-теста по методике фирмы АМА.
Материалы и методы. В исследование включено 1118 человек, в том числе 403 человека обследованы уреазным тестом и 50 — методом ПЦР. Результаты исследований сопоставлялись с помощью корреляционного и вариационного анализа.
Результаты. Показана хорошая сопоставимость гистологического, цитологического метода выявления Helicobacter pylori и метода ПЦР как между собой (коэффициенты корреляции 0,79, 0,34 и 0,53 соответственно), с показателями активности гастрита (коэффициенты корреляции 0,49, 0,52 и 0,37 соответственно). С другой стороны, результаты дыхательного уреазного хелик-теста не соответствовали ни одному из исследуемых показателей (коэффициенты корреляции 0,02, 0,05 и 0,09). Приведены возможные причины такого несоответствия, основанные на особенностях химических свойств аммиака. Кроме известной реакции нейтрализации с соляной кислотой, аммиак способен вступать в донорно-акцепторные взаимодействия и образовывать различные соединения с органическими веществами. Заключение. Уреазный дыхательный хелик-тест по методике фирмы АМА не может быть применен для определения инфицированности Helicobacter pylori.
Ключевые слова: диагностика Helicobacter pylori; корреляционный анализ; вариационный анализ. SUMMARY
Purpose of investigation. There has been conducted comparison of the most wide-spread methods of diagnosis of Helicobacter pylori infection: histologic, cytologic, method of polymerase chain reaction (PMCR) and respiratory urease Xelic-test on the method of AMA firm.
Materials and methods. 1118 patients participated in the investigation, 403 patients were investigated by urease test and 50 ones were investigated by method of PMCR. The results of investigations were compared by means of correlative and variational analysis.
Results. There has been shown fine comprison of histologic, cytologic methods of Helicobacter pylori revealing and PMCR method both between them (coefficients of correlation 0,79, 0,34 and 0,53 accordingly), and with indices of gastritis activity (coefficients of correlation 0,49, 0,52 and 0,37 accordingly). On the other hand the results of respiratory urease Xelic-test did not correspond to any of investigated indices (coefficients of correlation 0,02, 0,05 and 0,09). The possible causes of such discrepancy, based on features of chemical properties of ammonia have been defined. Except known reaction of neutralization with hydrochloric acid, ammonia able to show donor-acceptor interactions and form various compounds with organic substances. Conclusion. Urease respiratory Xelic-test on the method of AMA firm can not be used for definition of Helicobacter pylori infection.
Keywords: diagnosis of Helicobacter pylori; correlative analysis; variational analysis.
ВВЕДЕНИЕ
Среди болезней внутренних органов патология верхних отделов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) по-прежнему имеет значительную распространенность, наиболее часто встречаются гастриты и язвенная болезнь, которыми страдают до 60% населения. Известно, что наиболее частой причиной возникновения этих заболеваний является микроорганизм Helicobacter pylori (H. pylori) — спиралевидная, неспорообразующая, грамотрицательная бактерия. Для уточнения этиологии заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки необходимо установить наличие этого возбудителя. С этой целью были разработаны различные методы выявления H. pylori, основанные на морфологических и биохимических особенностях этого микроорганизма.
К сожалению, способы определения H. pylori имеют свои недостатки, в связи с чем использование одного метода не всегда может удовлетворить практического врача, и поэтому в его работе желательно применять комплексную диагностику H. pylori-инфекции.
Известно, что H. pylori обладает выраженной уреазной активностью. Бактериальная уреаза разлагает мочевину до углекислого газа и аммиака. Эта особенность метаболизма, позволяющая бактерии выжить в агрессивной кислой среде желудка, легла в основу разработки различных неинвазивных косвенных методов определения H. pylori, получивших название «уреазные тесты». Широкое распространение в большинстве стран мира получили уреазные дыхательные тесты с мочевиной, меченной изотопами углерода 13С и 14С [1].
Существует и другой метод оценки уреазной активности H. pylori — регистрация аммиака, образующегося при гидролизе мочевины (хелик-тест).
Постановка задачи. Имея достаточное количество способов определения и визуализации H. pylori, можно адекватно оценить выраженность инфекционного начала и тактику проведения эрадикацион-ной терапии. Одновременно столь широкий набор методов может ввести врача в заблуждение, когда, ориентируясь преимущественно на какой-то один способ диагностики, он может прийти к неверным выводам и соответственно назначить неадекватное лечение.
Учитывая вышесказанное, возникает вопрос: какие методы и в каком сочетании являются наиболее информативными при обследовании пациента? При сравнении различных методик необходимо выбрать «точку отчета». Общеизвестно, что гистологическое исследование СОЖ является «золотым стандартом» в оценке ее поражения. Поэтому и в нашей работе сравнения велись именно с ним.
Целью настоящего исследования является сравнительное изучение информативности некоторых методов идентификации H. pylori.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование проводилось на базе Иркутского областного клинического консультативно-диагностического центра (ИОККДЦ).
В исследование было включено 1118 пациента, обратившихся в ИОККДЦ с различными диспептическими жалобами. Всем обследуемым проводился общеклинический осмотр, эндоскопическое исследование с забором как минимум двух биоптатов слизистой оболочки желудка из антрального отдела и тела желудка на цитологическое и гистологическое исследование. В гистологических срезах помимо наличия H. pylori определялась активность воспалительного процесса (активность гастрита). У 50 человек методом ПЦР изучено наличие ДНК H. pylori. Уреазный дыхательный тест с использованием расходных материалов и оборудования фирмы АМА (Санкт-Петербург) был проведен 403 пациентам. Возраст обследуемых пациентов варьировался от 13 до 74 лет и составлял в среднем 40,5 ± 16 лет.
Основной диагноз, установленный в ходе эндоскопического и морфологического обследования, — хронический поверхностный гастрит — встречался у 987 пациентов (88,3%), у остальных 131 (11,7%) больных диагностирована язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки. Для удобства математической обработки результатов общепринятым «описательным» морфологическим способам (или индикаторам болезни) была присвоена балльная система. Выраженность гастрита в баллах: отсутствие воспалительных изменений — 0, слабоактивный гастрит — 1, гастрит с умеренной активностью — 2, высокоактивный гастрит — 3. В гистологических и цитологических препаратах оценивалась степень обсемененности H. pylori: H. pylori не обнаружен — 0, H. pylori в незначительном количестве — 1, H. pylori в умеренном количестве — 2, большое количество H. pylori — 3.
Уреазная активность H. pylori оценивалась по величине изменения цвета индикатора, измеренной в миллиметрах. Тест оценивался как отрицательный — если не было разницы между выраженностью окрашивания индикатора до и после приема мочевины (0 баллов), слабоположительный — если разница составляла 1-2 мм (1 балл), положительный — при разнице 3-10 мм (2 балла) и резко положительный — при разнице более 10 мм (3 балла).
В отличие от вышеперечисленных методов ПЦР-диагностика выдает отрицательные или положительные результаты, которые выражались в баллах: 0 или 1 соответственно.
Значения вышеуказанных параметров и их балльные значения приведены в табл. 1. Статистическое описание изменчивости
Б >
о О 2
С Я
< S oü
Я й
Q о
I- В
I с
Ш тз
О
а
I-и га i_ к га
ü ш т S X
S
<
контролируемых характеристик как независимых переменных приведено в табл. 2.
Для изучения взаимосвязанности контролируемых характеристик были применены методы корреляционного и регрессионного анализа. Вычисление коэффициентов корреляции, оценка их точности и статистической значимости проводились по стандартным формулам [2] с помощью программы Excel из пакета Microsoft Office 2000.
Для оценки поведения условных средних (регрессий) их зависимость от своих аргументов аппроксимировалась кусочно-линейными кривыми. Для этого область изменчивости аргументов разбивалась на несколько равных интервалов и в каждом из них вычислялись среднее значение аргумента и функции. Далее через точки, задаваемые такими средними значениями, проводились соответствующие ломаные линии. Все необходимые вычисления и построения графиков выполнялись с помощью оригинальной программы [3]. Статистически значимое изменение средних на области изменения их аргументов позволяет судить о наличии и приблизительной структуре регрессионной зависимости между соответствующими переменными.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ
Его задачей является проверка гипотез о наличии взаимосвязей линейного характера между исследуемыми характеристиками. Для решения этой задачи были оценены коэффициенты корреляции между всеми переменными и их вариабельность. Результаты расчетов приведены в табл. 3. Полученные данные позволяют говорить о существовании выраженной линейной взаимосвязи между переменными Х1 и Х2 и менее сильной, но заметной взаимозависимости между переменными Х1 и Х4, Х2 и Х4, Х2 и Х5. Значимой, но еще меньшей степенью связности обладают характеристики Х1 и Х5, Х4 и Х5.
В тех парах переменных, где одним из сравниваемых показателей является уреазный тест (Х3), а другим — остальные исследуемые показатели (Х1, Х2, Х4, Х5), статистически значимой корреляционной (линейной) связи не наблюдается.
Коэффициент корреляции лишь частично и из-за этого не всегда правильно описывает взаимосвязанность переменных. Поэтому для подтверждения и уточнения выводов, сделанных на основе корреляционного анализа, был проведен их взаимно-регрессионный анализ, задачей которого является проверка гипотез о наличии парных взаимозависимостей между оцениваемыми параметрами и взаимосвязей линейного характера между исследуемыми характеристиками.
РЕГРЕССИОННЫЙ АНАЛИЗ
Результаты регрессионного анализа парных взаимозависимостей между оцениваемыми параметрами
в виде графиков условных средних, построенных в соответствии с описанной выше методикой, помещены в табл. 4. Следует отметить, что из этой таблицы исключен столбец зависимостей от переменной Х5 (наличия ДНК H. pylori, определенной методом ПЦР), так как эта характеристика имеет всего два различимых значения и график зависимости от нее других переменных всегда является прямой линией, проведенной через две точки: Х5 = 0 (ДНК H. pylori не выявлена) и Х5 = 1 (ДНК H. pylori обнаружена). Такая информация не добавляет ничего нового в дополнение к результатам корреляционного анализа.
Приведенные данные демонстрируют, что все регрессии, кроме Х3 (Xi), i = 3, 4, 6 и Xi (X3), i = 1, 2, 4, 5, являются статистически значимыми и подтверждают наличие близких к линейным парных взаимосвязей между характеристиками гастрита: X1 (H. pylori в срезах), Х2 (H. pylori в мазке) и Х4 (активность гастрита).
Зависимость Х5 (ДНК H. pylori, определенной методом ПЦР) от других показателей, за исключением Х3 (уреазного теста), существенно отклоняется от линейной. Наблюдаемая нелинейность отражает то, что частота обнаружения ДНК H. pylori методом ПЦР низка при отсутствии других трех признаков гастрита, затем она сильно возрастает уже при появлении минимальных положительных значений аргументов (небольшое количество H. pylori или минимальная активность гастрита, то есть соответствующие 1 баллу) и далее при их последующем росте меняется незначительно.
Наконец, данные табл. 4 снова подтверждают вывод об отсутствии соответствия между уреазным тестом (Х3) и другими показателями патологического процесса, такими как количество H. pylori в срезах (Х1), в мазках (Х2), активность гастрита (Х4), полученными методами как корреляции, так и вариационной статистики. Подобная демонстрация отсутствия связей нелинейного характера и корреляции показывает низкую диагностическую информативность уреазного теста.
СОПОСТАВИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ИЗУЧЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ H. PYLORI
1. Гистологический и цитологический методы. Известно, что в процессе приготовления препарата для гистологического исследования часть слизи (а зачастую и вся слизь) вместе с имеющимися H. pylori может быть потеряна, что приведет с неверной оценке степени обсемененности данным возбудителем. Поэтому было предложено параллельно исследовать и мазки-отпечатки, содержащие нативную слизь с H. pylori. При сравнительной оценке этих методов были получены результаты, свидетельствующие, что степень обсемененности слизистой оболочки желудка H. pylori в гистологических препаратах существенно ниже, чем в мазках-отпечатках [4]. Однако в данной работе было исследовано всего 5 образцов слизистой оболочки желудка, что, на наш взгляд, не позволяет однозначно высказаться
об информативности того или другого метода в силу недостатка исследуемого материала. При изучении инфекции H. pylori в зависимости от внешних факторов было исследовано 286 пациентов [5]. Мы попытались решить подобную задачу, обследовав 1118 пациентов для создания более значительного статистического массива.
Результаты корреляционного анализа (табл. 3) показывают хорошее соответствие между количеством H. pylori, определяемым в срезах и мазках (r= 0,79). Это вполне логично, так как для обоих видов анализа используются одни и те же кусочки слизистой оболочки желудка (СОЖ) и достоверный коэффициент сильной корреляции свидетельствует о хорошем соотношении гистологического и цитологического методов диагностики H. pylori.
Результаты вариационной статистики хорошо согласуются с данными корреляционного анализа и подтверждают тесную связь этих методов. Полученные данные (табл. 4) позволяют утверждать о существовании ярко выраженной линейной взаимосвязи между исследуемыми параметрами. Данная линейная зависимость дополнительно свидетельствует об эквивалентности гистологического и цитологического методов в отношении определения H. pylori. В дальнейшем мы будем объединять гистологический и цитологический методы (как дающие близкие результаты) под названием «морфологические методы».
2. Морфологические методы и активность гастрита. В литературе имеется значительное число работ по исследованию «взаимоотношений» активности гастрита и степени обсемененности H. pylori. Помимо чисто морфологических наблюдений картин активности, которые показали, что степень активности гастрита напрямую зависит от степени обсемененности и «адгезии» H. pylori слизистой оболочки желудка, имеются и экспериментальные объяснения этого феномена [6; 7]. При активном хроническом гастрите наблюдается инфильтрация эпителия собственной пластинки слизистой как плазматическими клетками и лимфоцитами, так и полиморфно-ядерными лейкоцитами. Последняя индуцируется как самой H. pylori, так и цитокинами, вырабатываемыми эпителием желудка под влиянием возбудителя [8]. Какие факторы способны привлекать нейтрофилы в СОЖ? Это прежде всего выработка желудочным эпителием под влиянием H. pylori интерлейкина-8, а также продукты жизнедеятельности самой H. pylori, поступающие в СОЖ: уреаза, фактор активации пластинок, липополисахариды, порины [9; 10]. Очевидно, что подобная патогенетическая связь между количеством H. pylori и активностью гастрита может быть оценена математически.
Действительно, нами установлено положительное корреляционное взаимодействие средней силы (r = 0,49 и r = 0,52) между показателями обсемененности СОЖ H. pylori в срезах и мазках соответственно и активностью гастрита. Это взаимодействие хорошо соотносится и с методами вариационной
статистики, в ходе которых выявлена близкая к линейной взаимосвязь этих параметров. Данные результаты еще раз подтверждают, что инфекция H. pylori является фактором, способствующим развитию воспаления в СОЖ, и персистирование этой бактерии на эпителиальных клетках поддерживает патологический процесс.
3. Морфологические методы и метод ПЦР. Метод ПЦР-диагностики может применяться для первичного определения H. pylori, а также для оценки полноты эрадикации. К сожалению, в литературе отсутствуют сведения о сопоставлении результатов ПЦР-диагностики как с количеством H. pylori в морфологических препаратах, так и с активностью гастрита. При оценке корреляционного соответствия между данными ПЦР и количеством H. pylori в морфологических препаратах нами получены данные, говорящие о том, что имеется заметная, хотя и не очень выраженная, связь между этими показателями. Последнее объясняется тем, что балльная система ПЦР имеет всего 2 возможных значения (0 и 1), поэтому нет возможности выявить более тонкие соотношения между этими результатами. С другой стороны, при использовании методов вариационной статистики зависимость результатов ПЦР от других показателей (кроме результатов уреазного теста) становится более сложной. При отсутствии H. pylori в морфологических препаратах и низкой активности гастрита ПЦР-анализ отрицательный, что вполне закономерно, но стоит появиться даже небольшому числу бактерий в СОЖ, как результаты ПЦР-диагностики сразу становятся положительными и в дальнейшем не зависят от количества инфекционного агента.
Следует отметить, что том случае, если имеется картина гастрита, а морфологически H. pylori не выявляется, определение ДНК возбудителя в СОЖ может оказаться исключительно полезным в диагностике. Подобные случаи возможны, например, после использования антисекреторных или антибактериальных препаратов, когда возбудитель переходит в кокковую форму [11].
4. Метод ПЦР и активность гастрита. Представлялось интересным выявить взаимосвязь между результатами ПЦР и лейкоцитарной инфильтрацией, которая, как указывает С. И. Пиманов (2000), в свою очередь, коррелирует со степенью обсемененности H. pylori [12].
При проведении этого фрагмента исследования мы столкнулись с некоторыми затруднениями по оценке результатов. Дело в том, что итоги ПЦР-исследования можно выразить лишь двумя числовыми значениями (0 — ДНК H. pylori отсутствует и 1 — ДНК H. pylori определяется), тогда как активность гастрита — величина более вариабельная (имеющая четыре степени), отражающая степень инфильтрации СОЖ нейтрофилами.
Б >
о
о 2
С Я
< S се
Я й
Q о
I- В
I с
Ш тз
О
а
I-и га i_ к га
ü ш т S X
S
<
На ограниченном числе пациентов (50 человек) выявлена статистически достоверная связь между этими параметрами (r = 0,39). Наличие подобной неярко выраженной, но положительной корреляции свидетельствует о роли персистирующей инфекции H. pylori в развитии и поддержке патологического процесса в СОЖ.
5. Уреазный тест и другие исследуемые показатели. Зависимость результатов уреазного теста от других исследованных показателей не прослеживается. По нашим данным, его выраженность не коррелирует ни с количеством H. pylori в срезах и мазках, ни со степенью активности гастрита, ни с данными результатов ПЦР-диагностики.
При проведении регрессионного анализа также выяснено, что нет никакой связи между выраженностью уреазного теста и другими показателями. В литературе мы не обнаружили развернутых, достаточно аргументированных работ по изучению хелик-теста независимыми исследователями, кроме патента и статей его авторов [13-15].
Отсутствие какой-либо связи между результатами уреазного теста и другими общепринятыми методами диагностики инфекции H. pylori удивило и побудило более тщательно разобраться в самой сути методики проведения хелик-теста.
Почему уреазный тест с мочевиной нормального изотопного состава (по технологии АМА) в отличие от уреазных тестов с изотопно обогащенной мочевиной дает показания биохимической активности H. pylori, которые не коррелируют с данными других методов диагностики H. pylori?
Как мы считаем, ответ необходимо искать в химизме протекающих процессов. Известно, что в водной среде под действием уреазы H. pylori мочевина разлагается: NH2 — CO — NH2 >теаза 2NH3 + CO2.
Когда уреазный тест проводится по общепринятой в мировой практике схеме с изотопно обогащенной мочевиной 13С или 14С, то степень обсе-мененности H. pylori определяется по количеству образовавшегося меченого СО2. Углекислый газ инертен, не вступает в химические реакции в организме и полностью выделяется через легкие и, таким образом, фиксируется количественно, однозначно свидетельствуя о уреазной активности. Если уреаз-ная активность, определенная изотопным тестом, пропорциональна обсемененности и определяется по времени, то ее можно представить в виде некой функции:
fUa =
(1)
где Д[С] = [С] - [С] , [С] — стехиометрическое
L -*опред L -*исх i
количество исходного меченого углерода, [С]опред — количество углерода, определенного аналитическими методами. При максимальной обсемененности H. pylori [С]опред ^ [С]исх и fUa ^ 0, напротив, при отсутствии H. pylori [С]опред = 0 и fUa max.
Уреазный тест по методике фирмы АМА основан на определении количества выделившегося аммиака. Отмечено, что во время проведения теста общее количество зафиксированного аммиака
всегда значительно ниже «стехиометрически возможного». Поэтому возникает вопрос: что может влиять на степень выделения аммиака?
На наш взгляд, существует не один, как утверждают авторы метода [13], а целый ряд факторов [16].
Во-первых, в желудке практически всегда имеется стехиометрически избыточное количество соляной кислоты, следовательно, обязательна реакция нейтрализации, протекающая с большой скоростью: NH + HCl ^ NH.Cl.
3 4
Во-вторых, необходимо учитывать, что аммиак, имеющий свободную электронную пару, способен кроме химического вступать и в донорно-акцепторные взаимодействия и образовывать различные соединения с органическими веществами, в избытке имеющимися в желудке.
Таким образом, дополнительно к предыдущему могут иметь место следующие реакции с участием аммиака: а) с карбонильными группами с образованием иминов или б) оснований Шиффа, в) с кар-боновыми кислотами с образованием аммонийных солей, г) с аминокислотами с образованием аммонийных солей, д) с липидами, с частичным гидролизом, е) с фосфолипидами без гидролиза, ж) с частичным гидролизом, з) с гидрохлорной кислотой (см. рис.).
Учитывая вышесказанное, становится понятным, что на количество аммиака, выделяемого при уре-азном тесте с мочевиной нормального изотопного состава, влияет гораздо большее число факторов, чем на регистрируемый углекислый газ при уреаз-ном дыхательном тесте с изотопно обогащенной мочевиной.
Это подтверждает и анализ рассматриваемой функции fUa. Для регистрируемого аммиака она выглядит так:
fua = Л№з]^ (2)
где A[NH3] = - [NH3Up. HCl - [NH3]
m , [NH] — стехиометрическое количество
n L З-'исх l
исходного аммиака, [NHJ „ HCl — количе-
L З-'неитр.
ство аммиака, нейтрализованного HCl, а [NH3]
mn = [NHJt - [NH^ - [NH3]3 - [NH3P4 - [NH3]2S -
[NH3]56 — количество аммиака, израсходованного по реакциям, с органическими веществами в степени соответствующих стехиометрических коэффициентов (см. рис.).
При максимальной обсемененности H. pylori ^f ^ 0, а концентрации образовавшегося при гидролизе мочевины и суммарно определенного аммиака должны быть равны ([NH ] = [NH ] ).
З-'образ. L З-'сумм. определен/
Для этого в желудке, пищеводе и ротовой полости необходимо создать условия, сходные с химической колбой, в которой среда нейтральная, отсутствуют влага и любые органические соединения. Понятно, что выполнить подобные условия невозможно, а следовательно, уреазный тест, основанный на определении аммиака в воздухе ротовой полости, не может быть рекомендован для диагностики инфекции H. pylori.
ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ, ПРОТЕКАЮЩИЕ С УЧАСТИЕМ АММИАКА И ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ
1. с карбонильными группами с образованием иминов или оснований Шиффа:
>
с=о + H-Isf
н
N-C—ОН
• Н— N- С Н20
2. с карбоновыми кислотами с образованием аммонийных солей:
,Р ,0
R—С
\
NH3
R—С
ОН
O'NH^
R-C^-COOH + NH3 NH2
R-CH-COÖ'NHf
NH,
4. с липидами, с частичным гидролизом:
CH2O-CO—Ri CH2-OH R, - COO"NH4+
¿HO-CO-R2 + 3NH3 +3H£>—» ¿H - OH + R2 - COO~NH4+ CH2O-CO-R3 ¿H2-OH R3 - COO"NH4+
5. с фосфолипидами без гидролиза:
СНгО-СО-Ri
CHO -CO-R2 + 5NH3 + ЗН2О-
CH2O -P-OH
ОН Ъ
СНг-ОН Ri-COO"NH4+ ¿H ОН + R2 COO"NH4+ ¿Нг-ОН (NHJaPOi
6. с фосфолипидами с частичным гидролизом:
3. с аминокислотами с образованием аммонийных солей:
он
RCH20-P=0 + 2NH3
I
он
O'NHi rch2o-p=o onhJ
7. с гидрохлорной кислотой (HClO), генерируемой нейтрофилами, с образованием цитотоксичных гидроксиамина (NH2OH) и монохлорамина (NH2Cl) [25]:
2NH, + НСЮ
NH2C1 + NH2OH
Б >
о
о 2
С Я
< S С £
Я й
Q о
I- в
I с
Ш тЗ
О а
I-и га
L Б
га
ü ш т S X
S
<
Таблица 1
ОБОЗНАЧЕНИЯ, НАИМЕНОВАНИЯ И ЕДИНИЦЫ ИЗМЕРЕНИЯ ПЕРЕМЕННЫХ
Обозначение Наименование Единицы измерения (баллов)
Xj Количество H. pylori в срезах 0, 1, 2, 3
Х2 Количество H. pylori в мазке 0, 1, 2, 3
Х3 Результат уреазного теста 0, 1, 2, 3
Х4 Активность гастрита 0, 1, 2, 3
Х5 ПЦР H. pylori 0 — не обнаружена, 1 — обнаружена
Таблица 2
СТАТИСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КОНТРОЛИРУЕМЫХ ХАРАКТЕРИСТИК У ПАЦИЕНТОВ
Переменная Число измерений Среднее значение Стандартное отклонение
Xj 1118 1,25 1,07
Х2 1118 1,49 1,15
Х3 403 1,39 0,83
Х4 940 1,66 0,97
Х5 50 0,7 0,46
Таблица 3
КОЭФФИЦИЕНТ КОРРЕЛЯЦИИ (ВЫШЕ ДИАГОНАЛИ) И ЕГО КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ (НИЖЕ ДИАГОНАЛИ) ДЛЯ КАЖДОЙ ПАРЫ ИССЛЕДОВАННЫХ ПЕРЕМЕННЫХ
Наименования и обозначения переменных Обозначения переменных
Х1 Х2 Х3 Х4 Х5
H. pylori в срезах Х1 0,79* 0,02 0,49* 0,34*
H. pylori в мазке X 2 0,02 0,52* 0,53*
Уреазный тест Х3 335 297 0,05 0,09
Активность гастрита Х4 7 6* 118 0,37*
ПЦР H. pylori Х5 28 13* 158 25*
Примечание: звездочкой обозначены результаты, имеющие статистическую достоверность (р < 0,05).
Таблица 4
ЛИНИИ ВЗАИМНОЙ РЕГРЕССИИ МЕЖДУ ИНДИКАЦИОННЫМИ ХАРАКТЕРИСТИКАМИ ГАСТРИТА
Аргументы
Х1 (H. pylori в срезах)
Х2 (H. pylori в мазках)
Х3 (уреазный тест)
Х4 (активность гастрита)
Х
Х
s
S
дц
а
X
^
е
Х
Х
Х
ЛИТЕРАТУРА
1. Atherton J. C. Non-endoscopic test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection // Aliment. Pharmacol. Ther. — 1997. — Vol. 11, № 1. — P. 11- 20.
2. Корн Г., Корн Т. Справочник по математике. — М.: Наука, 1978.
3. Игнатов А. В. Опыт вероятностного моделирования и анализа взаимозависимости многомерных географических данных // География и природные ресурсы. — 1996. — № 4. — С. 149-158.
4. Морозов И. А. Проблемы морфологической диагностики инфекции Helicobacter pylori в желудке // Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии/Ивашкин В. Т., Мегро Ф., Лапина Т. Л. — М.: Триада-Х, 1999.
5. Battaglia G., DiMario F., Pasini M. et al. Helicobacter pylori infection, cigarette smoking and alchogol cunsumption. A histological and clinical study on 286 subjects // Italian J. Gastroenterol. — 1993. — Vol. 25, № 8. — P. 419-424.
6. Khulusi S, MendallM. A., Patel P. Helicobacter pylori infection density and gastric inflammation in duodenal ulcer and non-ulcer subjects // Gut. — 1995. — Vol. 37. — P. 319-324.
7. Лруин Л. И. Исаков В. А. Метод оценки обсемененности слизистой оболочки желудка H. pylori // Арх. патол. — 1995. — № 3. — С. 75-76.
8. Аруин Л. И., Капуллер Л. Л., Исаков В. А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. — М.: Триада-Х, 1998.
9. Ивашкин В. Т., Лапина Т. Л. Хронический гастрит: современные представления, принципы диагностики и лечения // Рус. Мед. Журн. Болезни органов пищеварения. — 2001. — Т. 3, № 2. — С. 54.
10. Crabtree J. Gastric mucosal inflammatory responses to Helicobacter pylori // Aliment. Pharmacol. Ther. — 1996. — Vol. 10, № 1. — P. 29-37.
11. Баранская Е. К. Язвенная болезнь и инфекция Helicobacter pylori // Рус. Мед. Журн. Болезни органов пищеварения. — 2000. — Т. 2, № 1. — С. 8.
12. Пиманов С.И. Эзофагит, гастрит и язвенная болезнь: Руководство для врачей. — М.: Мед. книга, Н. Новгород: НГМА, 2000. — 380 с.
13. КорниенкоЕ. А., Милейко В. Е. Способ неинвазивной диагностики хеликобактера ин виво // RU 2100010 С1
14. Корниенко Е. А., Дмитриенко М. А., Клочко О. Г. и др. Непрерывная регистрация концентрации аммиака в воздухе ротовой полости в диагностике инфекции Helicobacter pylori // РЖГГК. — 2003. — Т. 5, № 21. — С. 159.
15. Оценка информативности и рациональный выбор методов выявления Helicobacter pylori при хронических болезнях органов пищеварения у детей. Глава 5 // Хеликобактериоз и болезни органов пищеварения у детей/Корсунский А. А., Щербаков П. Л., Исаков В. А. — М.: ИД Медпрактика-М, 2002. — С. 105-124.
16. Тюкавкина Н. А., Бауков Ю. И. Биоорганическая химия: Учебник для вузов. — 7-е изд. — М.: Дрофа, 2008.
