CC BY
21
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
37
2,5 и 5,0 мг/кг реализовался с высоким уровнем достоверности (р < 0,0001). Высоко достоверными (р < 0,0001) были различия при сравнении групп ЦП 2,5 мг/кг и ЦП 2,5 мг/кг + Диг, а также между группами ЦП 2,5 мг/кг + Диг и ЦП 5,0 мг/кг независимо от того, с каким «контролем» проводили сравнение — мыши с опухолью без воздействия или при введении Диг.
Заключение. Диг повышает противоопухолевое действие ЦП более чем в 2 раза в пересчете на дозу цитостатика, что превышает эффект от ЦП, достижимый на использованной экспериментальной модели при монотерапии цитостатиком.
Поддержано грантами РФФИ № 15-04-06991-а и № 16-34-01049 мол-а.
Е.А. Дудко, М.В. Родионова, О.М. Рябинина, А.Н. Гришанина, С.Д. Коломийцев, Н.О. Вихлянцева, Е.А. Богуш, В.Ю. Кирсанов, И. К. Воротников, Т.А. Богуш СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ И ИММУНОГИСТОХИМИИ В ОПРЕДЕЛЕНИИ ЭКСПРЕССИИ ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ АЛЬФА
ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Эстрогеновые рецепторы альфа (ЭРа) — клеточная мишень, которая положила начало развитию современной таргетной терапии, а тамоксифен — первый таргет-ный препарат, который с 1977 г. до наших дней занимает лидирующую позицию в адъювантной гормональной терапии рака молочной железы (РМЖ). На лечение тамоксифеном отвечают до 20 % пациентов с ЭР-негативными опухолями, а при наличии в опухоли ЭР в 20 % случаев положительный результат терапии отсутствует. Возможным объяснением этого факта могут быть эффекты антиэстрогена, не связанные с его взаимодействием с ЭР, а также ошибки при определении статуса ЭР в опухоли иммуногистохимическим (ИГХ) методом, который рутинно используется в клинике.
Цель исследования — сравнить информативность нового количественного иммунофлуоресцентного метода, ассоциированного с проточной цитофлуориметрией (ПЦФ), со стандартным ИГХ-анализом экспрессии ЭРа.
Материалы и методы. Оценка экспрессии ЭРа проведена в хирургических образцах РМЖ (n = 60). Использованы антитела к ЭРа — SP1, ab27614, вторичные — ab98510. Уровень экспрессии ЭРа (количество специфически окрашенных клеток относительно показателя при инкубации с вторичными антителами) анализировали с помощью программы FlowJo 10.0 и статистического критерия Колмогорова-Смирнова. Градация уровня экспрессии маркера: высокий — количество окрашенных клеток в опухоли > 40 %; низкий — < 40 %.
Результаты. 1. В целом по группе при использовании ИГХ-метода и ПЦФ показано совпадение показателей частоты встречаемости ЭРа-негативных (27 %) и ЭРа-позитивных (73 %) опухолей.
2. ИГХ-методом только у 20 % ЭРа-позитивных опухолей выявлен низкий уровень маркера, а у остальных уровень экспрессии ЭРа был более 70 %.
3. При оценке методом ПЦФ у 43 % опухолей уровень экспрессии ЭРа был < 40 % (33,6 ± 4,7 %), а у остальных — > 40 % (53,1 ± 8,8 %).
4. При сравнении экспрессии ЭРа по каждому из образцов показано, что среди опухолей, отнесенных по результатам ИГХ-исследования в группу ЭРа-негативных, методом ПЦФ в 33 % случаев выявлены ЭРа с уровнем экспрессии от 23 до 60 % (43,4 ± 18,3 %), а среди ЭРа-позитивных опухолей, напротив, в 12,5 % случаев ЭРа не определялись.
Заключение. Выявлена дискордантность показателей экспрессии ЭРа в опухоли при оценке ИГХ-методом и ПЦФ. Поскольку статус ЭРа в опухоли является важнейшим ориентиром при выборе тактики лечения РМЖ, а ПЦФ в отличие от полуколичественного ИГХ-анализа позволяет строго количественно определять экспрессию маркера, использование ПЦФ в клинике следует признать предпочтительным, а для верификации молекулярного диагноза при получении отрицательного результата при ИГХ-иссле-довании — необходимым.
Поддержано РФФИ (гранты №№ 15-04-06991-а и 16-34-01049 мол-а).
Н.П. Ермакова, О.И. Коняева, Н.Ю. Кульбачевская, В. А. Чалей, А. А. Сергеев, К. А. Сережин, В.М. Бухман ИЗУЧЕНИЕ АЛЛЕРГИЗИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ОРМУСТИНА НА МОРСКИХ СВИНКАХ. ОЦЕНКА АНАФИЛАКТОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Новый препарат класса нитрозомочевин — Ормустин синтезирован в ИОС им. И.Я. Постовского УрО РАН. В лаборатории разработки лекарственных форм РОНЦ им. Н.Н. Блохина создана лиофилизированная лекарственная форма Ормустина и проводится ее доклиническое изучение.
Цель исследования — изучение аллергизирующих свойств Ормустина.
Материалы и методы. Исследования проведены на 60 морских свинках-самках массой тела 230—250 г. Ормустин вводили в суммарных дозах: 1 терапевтическая доза (ТД) — 67 мг/кг; 10ТД — 670 мг/кг; 2ТД — 134 мг/кг для морских свинок, пересчитанных с ТД для мышей. Режим и путь введения сенсибилизации: 1-й день — подкожно, 3-й и 5-й дни — внутримышечно. Для сенсибилизации препарат вводили 1 группе животных в разовых дозах, равных 1/3 ТД = 22,3 мг/кг, и 2 другим группам животных в разовых дозах 1/3 10ТД = 223 мг/кг через день. После введения сенсибилизирующей дозы, в 10 раз превышающей терапевтическую, наблюдали гибель всех морских свинок на 3—5-е сутки после последнего введения на фоне проявлений нефротоксичности (граница между корковым и мозговым слоями почек значительно увеличена, вишневого цвета). Поэтому была дополнительно введена группа животных с сенсибилизирующей разовой дозой Ормустина, равной 1/32ТД = 44,66 мг/кг. После сенсибилизации в этой группе наблюдали гибель 3 из 10 морских свинок на 4, 5 и 6-й дни. Для разрешения Ормустин вводили в суммарных дозах 1ТД и 2ТД/кг массы тела морской свинки. Препарат применяли в концентрации 2,45 % в 5 % растворе глюкозы. Разрешение проводили внутрисердечно на 18-й день после окончания сенсибилизации. В качестве контроля использовали 5 % раствор глюкозы и сыворотку крупного рогатого скота. Объемы
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
