CC BY
18
уровень экспрессии эстрогеновых рецепторов ß в ткани немелкоклеточного рака и метастазов
в легком
Б.Е. Полоцкий, Б.Б. Ахмедов, Е.А. Богуш, Е.А. дудко, Т.А. Богуш, м.м. давыдов
ФГБУ«Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России; Россия, 115478 Москва,
Каширское шоссе, 24
Контакты: Евгений Александрович Дудко [email protected]
Введение. Поиск патогенетически обоснованных подходов к лечению немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) является несомненно одной из первоочередных задач, так как результаты лекарственного лечения этого заболевания нельзя признать удовлетворительными. Открытие нового класса ядерных рецепторов — эстрогеновых рецепторов ß (3Pß), которые экспрес-сируются в ткани НМРЛ, послужило серьезным основанием для развития новой стратегии лечения НМРЛ — антиэстроге-новой терапии.
Цель исследования — получение ответа на клинически значимый вопрос, какое число пациентов с НМРЛ и с метастазами в легком опухолей другой первичной локализации являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии.
Материалы и методы. Проведена сравнительная количественная оценка частоты и уровня экспрессии ЭРß в ткани НМРЛ и метастазов в легком (суммарно 74 образца) при использовании иммунофлуоресцентного метода и проточной цитофлуори-метрии.
Результаты. Экспрессия ЭРß выявлена в подавляющем числе образцов НМРЛ и метастазов в легком (92 и 86 % соответственно). Средний уровень экспрессии ЭРß в ткани НМРЛ статистически значимо выше по сравнению с метастазами (42,0 % против 34,6 %, р = 0,03). Первичные опухоли с высоким (> 50 %) уровнем экспрессии ЭРß и суммарно с низким и умеренным (< 50 %) уровнем выявлены в 35 и 65 % случаев, а метастазы с аналогичными показателями экспрессии маркера — у 14 и 86 % пациентов соответственно.
Заключение. Экспрессия в опухоли ЭРß прогнозирует более благоприятное течение болезни, одной из причин этого может быть больший метастатический потенциал опухолевых клеток с низким уровнем экспрессии ЭРß. Около 70 % пациентов с НМРЛ и с метастатическим поражением органа являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии в адъювантном режиме.
Ключевые слова: BRCA1, рецепторы эстрогенов, рак молочной железы, проточная цитофлуориметрия, прогноз
DOI: 10.17650/1726-9784-2016-15-4-34-36
expression level of estrogen receptor p
in non-small cell lung cancer and lung metastsis
B.E. Polotsky, B.B. Akhmedov, E.A. Dudko, E.A. Bogush, T.A. Bogush, M.M. Davydov
N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center, Ministry of Health of Russia; 24 Kashyrskoe shosse, Moscow, 115478, Russia
Background. A search for pathogenetically grounded approaches to the treatment of non-small cell lung cancer is undoubtedly one of the top priorities, because of the results of its treatment cannot be regarded as satisfactory. Discovery of a new type of receptors, estrogen receptors fi, that expressed in non-small cell lung cancer, created the preconditions for the development of a new treatment strategy for non-small cell lung cancer, namely antiestrogen therapy.
Objective was to answer to the clinically significant question of how many patients with non-small cell lung cancer and lung metastases are potential candidates for antiestrogen treatment.
Materials and methods. A comparative quantitative estimation of the level and frequency of the estrogen receptors fi expression in non-small cell lung cancer tissues and also in lung metastases (74 in total) was carried out by flow cytometry.
Results. The estrogen receptors fi expression was detected in the majority of the investigated tumors and lung metastases, in 92 and 86 % of patients, respectively. The average level of estrogen receptors fi expression in non-small cell lung cancer tissue was higher then in metastases (42 % and 34.6 % respectively). The differences was statistically significant (p = 0.03). Primary tumors with a high and low+moderate estrogen receptors fi expression levels were detected in 35 % and 65 % of cases respectively and metastases with such expression levels — in 14 % and 86 % of cases respectively.
Краткие сообщения
35
Conclusion. 1. The estrogen receptors ft expression in the tumor predicts a more favorable course of the disease. One of the reasons for this may be a greater metastatic potential of tumor cells with low estrogen receptors ft expression. 2. The group of potential candidates for carrying out the adjuvant antiestrogen therapy comprises about 70 % of patients with primary lung tumors and with metastatic lesions of lung.
Key words: BRCA1, estrogen receptors, breast cancer, flow cytometry, prognosis
Введение
Поиск патогенетически обоснованных подходов к лечению немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) является несомненно одной из первоочередных задач, так как результаты лекарственного лечения этого заболевания нельзя признать удовлетворительными. Поэтому открытие нового класса рецепторов — эстро-геновых рецепторов в (ЭРр), которые выявляются в солидных опухолях разных локализаций, служит серьезным основанием для развития новой стратегии лечения НМРЛ — антиэстрогеновой терапии.
По данным разных авторов, ЭРр выявляются в 60—80 % случаев НМРЛ [1—3]. Экспрессия маркера прогнозирует более благоприятное течение болезни [4, 5], а отсутствие ЭРр является независимым фактором, ухудшающим прогноз НМРЛ [6].
В настоящем исследовании проведена сравнительная количественная оценка частоты и уровня экспрессии ЭРр в ткани НМРЛ, а также метастазов в легком опухолей другой первичной локализации, чтобы ответить на клинически значимый вопрос, какое число пациентов с НМРЛ и с метастазами в легком опухолей другой первичной локализации являются потенциальными кандидатами на проведение анти-эстрогеновой терапии.
Материалы и методы
Исследование проведено количественным имму-нофлуоресцентным методом, разработанным и запатентованным авторами [7], с использованием моноклональных антител к ЭРр (Abcam, 14C8), изо-типических (Abcam, MG2a — 53) и вторичных антител, конъюгированных с флуоресцентным красителем FITC в конечном разведении 1:500 (Sigma, F2772).
Измерение флуоресценции проводили на проточном цитофлуориметре FACSCanto II (Becton Dickinson) с применением программного обеспечения FACSDiva 6.0. Количество специфически флуоресцирующих клеток (%, уровень экспрессии ЭРр) определяли с помощью теста Колмогорова—Смирнова, включенного в программу FlowJo 7.6, статистическую обработку проводили с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.0. Различия между группами сравнения оценивали по t-критерию Стью-дента. Для контроля активности антител использовали культуру клеток аденокарциномы молочной железы человека линии MCF-7. Суммарно исследовано
74 образца опухолей, полученных во время хирургических операций в РОНЦ им. Н.Н. Блохина (37 — первичные опухоли, 37 — метастазы).
Результаты и обсуждение
Экспрессия ЭРß выявлена в подавляющем числе исследованных образцов НМРЛ и метастазов в легком — в 92 и 86 % случаев соответственно.
Результаты сравнительной оценки уровня экспрессии ЭРß в ткани первичной опухоли и метастазов в легком представлены в таблице. Видно, что средний уровень экспрессии ЭРß в ткани НМРЛ составил 42 %, а в метастазах оказался статистически значимо ниже — 34,6 % (р = 0,03).
На рисунке представлено распределение исследованных образцов опухолей в зависимости от уровня
Частота эстрогеновыхрецепторов р в ткани немелкоклеточного рака легкого и метастазов в легком опухолей других первичных локализаций
Группы сравнения размер выборки Уровень экспрессии эрр, %* достоверность различия между группами
НМРЛ 37 42,0 ± 15,3 р = 0,03
МТС 37 34,6 ± 12,1
Примечание. НМРЛ — немелкоклеточный рак легкого; МТС — метастазы в легком; ЭРр —эстрогеновые рецепторы р. *Количество специфически флуоресцирующих клеток ± стандартное отклонение.
60
Низкий Средний Высокий
Уровень экспрессии ЭРр
I | В ткани НМРЛ ЩЩ В ткани метастазов
Распределение больных в зависимости от уровня экспрессии эстрогеновых рецепторов р в клетках немелкоклеточного рака легкого и метастазов в легком опухолей других первичных локализаций. НМРЛ — немелкоклеточный рак легкого; ЭРр — эстрогеновые рецепторы р
4'2016 том 15 | VOL. 15
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSIAN JOURNAL OF BiOTHERAPY
экспрессии ЭРр в опухолевой ткани: низкий уровень — ЭРр выявлены менее чем в 30 % клеток, умеренный — в 30—49 %, высокий — в 50 % и более.
Видны значительные различия в числе больных с высоким уровнем экспрессии ЭРр в ткани НМРЛ и метастазов — 35 % против 14 % случаев соответственно (р = 0,03). Суммарное число опухолей с низким и умеренным уровнем экспрессии ЭРр у больных НМРЛ составило 65 %, а у пациентов с метастазом в легком было статистически значимо выше — 86 % случаев (р = 0,03).
Чем вызвано выявленное снижение уровня и частоты экспрессии ЭРр в метастазах по сравнению с первичной опухолью? Если опустить возможный вклад гистологической разнородности метастазов, наиболее вероятной причиной этого может быть больший метастатический потенциал опухолевых клеток с низким уровнем экспрессии ЭРр, что согласуется с данными ряда авторов о прогностически
благоприятной значимости экспрессии в опухоли ЭРр [4-6].
Заключение
Таким образом, в настоящем исследовании продемонстрирован клинически важный факт. Показано, что значительное число пациентов с НМРЛ и с метастазами в легком опухолей другой первичной локализации являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии. По аналогии с раком молочной железы речь может идти об адъювантном применении антиэстрогенов у радикально оперированных больных с первичным или метастатическим поражением легкого с положительным статусом ЭРр в опухоли, и в первую очередь - с высоким уровнем экспрессии рецепторов.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ (№№ 15-04-06991-а, 16-34-01049-мол-а) и гранта Президента РФ МК-7709.2016.7.
ЛИТЕРА
1. Raso M.G., Behrens C., Herynk M.H. et al. Immunohistochemical expression of estrogen and progesterone receptors identifies a subset of NSCLCs and correlates with EGFR mutation. Clin Cancer Res 2009;15(17):5359-68. DOI: 10.1158/1078— 0432. CCR-09-0033. PMID: 19706809.
2. Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е., Жураев Э.Э. и др. Особенности клинического течения и прогноза периферического рака легкого у женщин. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН 2011;22(3):47-54.
3. Шатурова А.С., Богуш Т.А.,
Дудко Е.А. и др. Экспрессия эстрогено-
ТУРА / R E F
вых рецепторов ß и ß1 в ткани немелкоклеточного рака легкого человека. Антибиотики и химиотерапия 2012;57(5—6):11—7.
4. Wu C.T., Chang Y.L., Shih J.Y.,
Lee Y. C. The significance of estrogen receptor beta in 301 surgically treated non-small cell lung cancers. J Thorac Cardiovasc Surg 2005;130 (4):979-86. DOI: 10.1016/ j.jtcvs.2005.06.012. PMID: 16214508.
5. Kawai H., Ishii A., Washiya K. et al. Combined overexpression of EGFR and estrogen receptor alpha correlates with a poor outcome in lung cancer. Anticancer Res 2005;25 (6C): 4693-4698. PMID: 16334162.
R E N C E S
6. Kawai H., Ishii A., Washiya K. et al. Estrogen receptor alpha and beta are prognostic factors in non-small cell lung cancer. Clin Cancer Res 2005;11(14):5084-9. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-05-0200. PMID: 16033821.
7. Богуш Т.А., Шатурова А. С., Дудко Е.А. и др. Количественная иммунофлуоресцентная оценка
с использованием проточной цитофлуориметрии экспрессии эстрогеновых рецепторов р в солидных опухолях человека. Вестник Московского университета, сер. 2, Химия 2011;52(4):305-12.
