CC BY
16
Т. К. Наурызбаев, О. В. Королева, А. Н. Добрецов, В. И. Новиков, Ш. А. Алибаева ЖЫНЫСТЬЩ КЫЛМЫСТАР КЕЗ1НДЕГ1 ЦИТОЛОГИЯЛЫК ЗЕРТТЕУЛЕРДЩ Н6ТИЖЕЛ1Л1Г1 ТУРАЛЫ
Авторлар цитологиялык сараптаманыч MYMKiH акпараттырына карамастан, оныч нэтижелiлiгi мен нэтижелер^ч баралануы тиiстi заттай айрактар мен Yлгiлердi дурыс алу мен зертханара жолдаура, орын алран жардайдыч толык баяндалуы мен сарапшыныч алдына койылран мэселелердiч нактылырына рана емес, сонымен бiрге тексеруге алынран материалдыч сапасына да байланысты деген корытынды жасаран.
М. М. Тусупбекова, Л. И. Арыстан, З. Т. Шульгау
СРАВНИТЕЛЬНАЯ МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЛИЗИСТОЙ ЖЕЛУДКА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ АЦЕТАТНОЙ ЯЗВЕ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ ОКСИМОМ ПИНОСТРОБИНА И ЭКСТРАКТОМ КАПЕРСА КОЛЮЧЕГО
Карагандинский государственный медицинский университет, Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия» (Караганда)
Язвенная болезнь является частым заболеванием, которое поражает до 2% населения, в том числе молодого и среднего возраста, с хроническим рецидивирующим течением. По тяжести субъективного состояния, упорству течения и возможным осложнениям - это значительно более тяжелое заболевание, чем хронический гастрит.
Практика показывает, что применение лекарственных растений способствует повышению регенераторной возможности слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, улучшает микроциркуляцию, обеспечивает внешнюю защиту слизистых, оказывает антимикробное действие, регулирует секреторную функцию и моторику [1].
Цель исследования - изучение противоязвенной активности оксима пиностробина и экстракта каперса колючего.
Оксим пиностробина представляет собой полусинтетическое производное флавоноида пи-ностробина, выделенного из почек тополя бальзамического (Рори1и balsamifera L.), который в значительных объемах произрастает на территории Казахстана [2]. Каперс колючий (Саррагв spinosa Ь) изучали в виде густого спиртового экстракта из надземной части растения [3].
Изучение гастропротекторных свойств оксима пиностробина и экстракта каперса колючего на экспериментальной модели ульцерогене-за позволит расширить знания в области патогенеза, а также профилактики и фармакотерапии эрозивно-язвенных поражений желудочно-кишечного тракта.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Противоязвенную активность оксима пи-ностробина и экстракта каперса колючего изучали на модели хронической ацетатной язвы по А. А. Никулину и С. И. Буданцевой [4]. Эксперимент выполняли на 45 крысах-самках с исходной
массой 263±5 г. Под легким эфирным наркозом животным проводили лапаротомию по белой линии живота и в подсерозный слой передней поверхности желудка вводили 0,05 мл 5% уксусной кислоты. Рану ушивали послойно. Через сутки после операции начинали введение исследуемых соединений и препарата сравнения. Вещества вводили через зонд внутрижелудочно один раз в сут в течение 14 дней. Были сформированы 4 группы: I - контрольная, в которой крысы получали эквиобъемное количество растворителя - дистиллированную воду. Животные II группы получала препарат сравнения метилу-рацил в дозе 50 мг/кг. В Ill группе крысам вводили оксим пиностробина в дозе 150 мг/кг. В IV группе использовали экстракт каперса колючего в дозе 250 мг/кг.
После завершения эксперимента на крысах с воспроизведением у них хронической ацетатной язвы ткань желудка забирали на гистологическое исследование с целью проведения сравнительной морфологической характеристики в контрольной группе животных после лечения метилурацилом, оксимом пиностробина и экстрактом каперса колючего. Для морфологического исследования ткань желудка фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. После фиксации материал проводили по прописи общеизвестной методики гистологической техники для проводки, далее заливали в воск-парафин [5]. В последующем изготавливали парафиновые срезы толщиной 4-5 микрон, которые окрашивали гематоксилином и эозином для обзорного исследования и оценки характера морфологических процессов в разных группах эксперимента. Изготовленные микропрепараты просматривали на компьютеризованном комплексе («Leica microsystems» (Швеция) с микроскопом «Leica DM1000», специально предназначенным для изучения гистологических микропрепаратов при 100-, 200- и 400-кратном увеличении.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Зная особенности регенераторной реакции при заживлении хронического воспалительного процесса и анатомо-физиологические особенности строения и функционального состояния стенки желудка при сравнительной оценке гистологической картины при различных методах лечения, учитывали формирование и созревание грануляционной ткани, наличие воспалительной инфильтрации, восстановление и регенерацию покровного эпителия в зоне язвенного дефекта, а также формирование лимфоидных фолликулов, что
характерно при процессах заживления. Гистологическое изучение различных отделов стенки желудка показало, что наибольший интерес представляет состояние кардиального отдела желудка и малой кривизны.
Гистологическое исследование в контрольной группе при хронической ацетатной язве показало, что в кардиальном отделе слизистая желудка покрыта многослойным ороговевающим эпителием с ороговением, в зоне перехода слизистой выявляются участки дефекта с десквама-цией ее поверхностных слоев. Характерным признаком при хронических процессах является формирование в зоне собственной пластинки лим-фоидных фолликулов без центров размножения (рис. 1 а, б).
При этом в криптах наблюдалась рассеянная единичными лимфоцитами инфильтрация. Гистологическое исследование слизистой при хронической ацетатной язве из зоны малой кривизны желудка показало сохранение участков язвенного дефекта слизистой. Следует отметить, что с краев язвенного дефекта происходило наползание регенерирующего эпителия слизистой. В подслизистом слое наблюдалось образование и созревание грануляционной ткани, которая была представлена новообразующими сосу-
дами, среди которых встречались сосуды с пери-васкулярным склерозом. В строме отмечалась лимфоидно-макрофагальная инфильтрация, железы были расширены, некоторые кистозно изменены с несекретирующим эпителием (рис. 2 а, б, в).
В экспериментальной группе после лечения метилурацилом сохранялся язвенный дефект, где отмечалась регенерация эпителия с краев и формирование грануляционной ткани в подслизистом слое. В строме слизистой отмечался умеренный отек и лимфоидно-клеточная инфильтрация, полнокровие сосудов (рис. 3 а, б). В единичных наблюдениях после лечения метилу-рацилом не отмечалось положительного эффекта с сохранением зоны некроза и диффузной лим-фоидно-лейкоцитарной инфильтрации.
После лечения метилурацилом в кар-диальном отделе сохранялась зона язвенного дефекта и лимфоидная инфильтрация, полнокровие сосудов и очаги кровоизлияний. В подслизи-стом слое на фоне формирования грануляционной ткани отмечен фибриноидный некроз сосудистой стенки в виде однородной безъядерной структуры розового цвета (рис. 4 а, б).
В группе эксперимента с хронической ацетатной язвой и лечения животных экстрактом
Рис. 2. Хроническая ацетатная язва. Контроль: а) малая кривизна желудка с участками дефекта слизистой, с краев язвы отмечается регенерация эпителия; б) в подслизистом слое образование грануляционной ткани, железы расширены; в) созревание грануляционной ткани со склерозированными сосудами и лимфоидно-макрофагальной инфильтрацией. Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: а х100; б х200; в х400
а ■у Ць«/| Гт^1' ЧР ^ |' у' б
Рис. 3. Хроническая ацетатная язва. Лечение метилурацилом: а) сохраняется язвенный дефект с регенерацией эпителия с ее краев, формирование грануляционной ткани; 6) в подслизистом слое отек и лимфоидно-кпеточная инфильтрация. Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: а; 6 х200
а
б
Рис. 4. Хроническая ацетатная язва. Лечение метилурацилом: а) кардиальный отдел, зона острой язвы с лимфоидной инфильтрацией, полнокровными сосудами и очаговыми кровоизлияниями; б) фрагмент с фибриноидным некрозом сосудистой стенки. Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: а; б х200
каперса колючего при гистологическом исследовании в слизистом слое кардиального отдела желудка отмечалась васкуляризация стромы, полнокровие сосудов. Следует отметить, что при сравнительном анализе состояния слизистой желудка интактных крыс, где крипты были равномерны по высоте и железистые структуры располагались равномерно, в группе эксперимента с воспроизведением хронической ацетатной язвы и
лечения животных экстрактом каперса колючего после полного восстановления язвенного дефекта происходило формирование неравномерно распределенных и кистозно-расширенных желез, воспалительная инфильтрация не выявлялась (рис. 5 а, б, в).
При этом в подслизистом слое отмечалось созревание грануляционной ткани, представленное клубками сосудов, среди них хорошо просле-
а
Рис. 5. Хроническая ацетатная язва. Лечение экстрактом каперса колючего: а) в слизистом слое васкуляризация и полнокровие сосудов; 6) слизистая желудка интактной крысы, крипты равномерной высоты, железы расположены равномерно; в) после лечения хронической язвы экстрактом каперса колючего отмечается формирование неравномерно распределенных и кистозно расширенных желез.
живались крупные склерозированные сосуды, в строме - рассеянная лимфоидная инфильтрация и полнокровие капилляров собственной пластинки слизистой (рис. 6).
В группе экспериментальных животных с воспроизведением хронической ацетатной язвы и лечения оксимом пиностробина в подслизистом слое наблюдалось формирование лимфоидных фолликулов (рис. 7 а), формирование грубово-локнистой соединительной ткани со склерозиро-ванными сосудами, при этом воспалительная инфильтрация отсутствовала (рис. 7 б).
В подслизистом слое отмечалось созревание грануляционной ткани и лимфоидная инфильтрация с примесью эозинофилов (рис. 8 а) и формирование грубоволокнистой соединительной ткани со склерозированными сосудами и пе-риваскулярной инфильтрацией (рис. 8 б).
Железы были кистозно расширены, в под-слизистом слое - умеренная лимфоидная инфильтрация; в кардиальном отделе - формирование лимфоидных фолликулов (рис. 9 б).
Таким образом, на фоне хронической ацетатной длительно незаживающей язвы слизистой оболочки желудка введение метилурацила, окси-ма пиностробина и экстракта каперса колючего приводило к более быстрому заживлению язвы
Рис. 6. Хроническая ацетатная язва. Лечение экстрактом каперса колючего: в подслизистом слое созревание грануляционной ткани, представленной клубками сосудов, среди них хорошо прослеживаются
крупные склерозированные сосуды, в строме умеренная лимфоидная инфильтрация и полнокровие капилляров собственной пластинки слизистой. Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: х200
по сравнению с контрольной группой. Одним из возможных механизмов выявленного гастропро-текторного действия экстракта каперса колючего и оксима пиностробина является повышение защитной функции клеток эпителия слизистой обо-
Ы 1
а
Рис. 7. Хроническая ацетатная язва. Лечение оксимом пиностробина: а) в подслизистом слое формирование лимфоидных фолиукулов; б) формирование грубоволокнистой соединительной ткани со склерозированными сосудами, воспалительная инфильтрация отсутствует. Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: а х100; б х200
б
. V !,■ р " х ^___3 * -ш .«Ра »Д .Шпаг
Рис. 8. Хроническая ацетатная язва. Лечение оксимом пиностробина: а) в подслизистом слое созревание грануляционной ткани и лимфоидная инфильтрация с примесью эозинофилов; б) формирование грубоволокнистой соединительной ткани со склерозированными сосудами и периваскулярной инфильтрацией. Окраска: гематоксилином и эозином.
Ув.: а х100; б х200
nv м
г 1' uiH
W ¡'ДОЯ
И
^VivSWln tin ■ "■'■ J
'-.tfjr) '■>■■' £ 1
а
Рис. 9. Хроническая ацетатная язва. Лечение оксимом пиностробина: а) железы кистозно расширены, в подслизистом слое умеренная лимфоидная инфильтрация; б) в кардиальном отделе формирование лимфоидных фолликулов.
Окраска: гематоксилином и эозином. Ув.: а, б - х100.
лочки желудка за счет антиоксидантного и цито-протекторного действия флавоноидов. Полученные данные позволяют сделать вывод об анти-ульцерогенной активности оксима пиностробина и экстракта каперса колючего на модели хронической ацетатной язвы и свидетельствуют о целесообразности его дальнейшего экспериментального изучения в качестве перспективного средства профилактики и лечения язвенной болезни желудка.
ЛИТЕРАТУРА
1. Турищев С.Н. Фитотерапия язвенной болезни желудка и двенадца-типерстной кишки. Фармация 2002; 4: 47-48.
2. Поляков В.В. Биологически активные со-
единения растений рода Populus L. и препараты на их основе. Алматы: Гылым; 1999: 160.
3. Нурмаранбетов Ж.С. Тiкендi кеуел (Cappa-ris spinosa L.) еамдИнен стахидрин алкалоидын белу жэне оныч туындылары. К,азакстан химия журналы 2005; 3: 193-196.
4. Никулин А.А. Сравнительная оценка методов воспроизведения экспериментальных язв желудка. Фармакология и токсикология 1973; 36 (5): 564-567.
5. Тусупбекова М.М. Основы гистологической техники и методы гистологического исследования аутопсийного, операционо-биопсийного и экспериментального материала [Метод. рекомендации]. Караганда; 2007: 44.
M. M. Tusupbekova, L. I. Arystan, Zh. T. Shulgau
COMPARATIVE MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS IN CHRONIC ACETATE GASTRIC ULCER DURING TREATMENT WITH PINOSTROBIN OXIME AND EXTRACT OF CAPPARIS SPINOSA L
The obtained data allow the authors to conclude the anti-ulcer genic activity of the pinostrobin oxime and extract of prickly caper on a model of chronic ulcers and acetate showed the feasibility of further experimental studies as a promising means of preventing and treating stomach ulcers.
М. М. Тустбекова, Л. И. Арыстан, З. Т. Шульгау
СОЗЫЛМАЛЫ АЦЕТАТТЫ ЖАРА КЕЗ1НДЕГ1 ПИНОСТРОБИН ОКСИМ1МЕН ЖЭНЕ Т1КЕНЕК КАПЕРЫ ЭКСТРАКТЫМЕН ЕМДЕУ ФОНЫНДА С1ЛЕМЕЙЛ1 АСЦАЗАННЬЩ САЛЫСТЫРМАЛЫ МОРФО-ЛОГИЯЛЬЩ СИПАТТАМАСЫ
Авторлар алран мэлiметтер пиностробин oi<™Mi мен TiKeHeK Kanepci экстрактыныч созылмалы ацетаты жара модел^е антиульцeрогeндi бeлсeндiлiгi туралы корытынды жасаура мYмкiндiк бeрeдi жэне оны асаказанныч жарасы ауруын емдеу мен оныч алдын алура перспективалы дэру ре™де одан эрi экспери-менталды зeрттeудiч кажeттiгiн айрактайды.
