CC BY
20
УДК 616.995.132.5:599.824
Ключевые слова: микрофилярии, сердце, вегетативная нервная система
Key words: microfilariae, heart, vegetative nervous system
Чумасов Е. И., Белова Л. М., Петрова Е. С.
СЛУЧАЙ ОБНАРУЖЕНИЯ МИКРОФИЛЯРИй В СЕРДЦЕ ОБЕЗЬЯНЫ (MACACA MULATTA)
the case of microfilariae finding in the heart of monkey (macaca mulatta)
'ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» Адрес: 196084, Россия, ул. Черниговская, 5. Тел. +7 (812) 388-36-31
'Saint-Petersburg State Academy of Veterinary Medicine Address: 196084, Russia, Saint-Petersburg, Chernigovskaya str., 5. Tel. +7 (812) 388-36-31
2ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины» Адрес: 197376, Россия, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, 12. Тел. +7 (812) 234-68-68 2Institute of Experimental Medicine, Federal State Budgetary Scientific Institution Address: 197376, Russia, Saint-Petersburg, akad. Pavlov str., 12. Tel. +7 (812) 234-68-68
Чумасов Евгений Иванович, д. б. н., проф. каф. биологии, экологии и гистологии1
Chumasov Evgeny I., Doctor of Biological Sciences, Professor of the Dept. of Biology, Ecology and Histology1 Белова Лариса Михайловна, д. б. н., зав. каф. паразитологии1 Belova Larisa M., Doctor of Biological Sciences, Head of the Dept. of Parasitology1 Петрова Елена Сергеевна, к. б. н. ст. научн. сотрудник отдела общей и частной морфологии2 Petrova Elena S., Ph.D. in Biology Science, Senior Researcher of the Dept. of General and Special Morphology2
Аннотация. Описаны два случая обнаружения микрофилярий в сердце обезьян (Macaca mulatta) из Сухумского заповедника. Срезы тканей правого предсердия изучали с помощью метода импрегнации серебром по Бильшов-скому - Грос с целью изучения иннервации органа. Однако наряду с нервными сплетениями, ганглиями и рецеп-торными окончаниями были избирательно выявлены и микрофилярии. Они имеют размеры от 200 до 550 мкм и обнаружены в просветах мелких артерий, артериол, в венозных сосудах, а также внутри пучков рабочего миокарда. На основании полученных данных сделано предположение, что специфические белки тегумента или покрова круглых червей избирательно выявляются солями серебра. Они обладают аргентофильностью в той же степени, что и белки нейрофиламентов тканей нервной системы. Это служит подтверждением, что те и другие в процессе эволюции развиваются из первого зародышевого листка - эктодермы. Несмотря на тесные взаимоотношения паразитов с различными тканями сердца, никаких специфических патологических изменений в ответ на инвазию со стороны нервной системы не наблюдалось.
Summary. Two cases of microfilariaefinding in the heart of monkey (Macaca mulatta) from Sukhumi reserve are described. The right atrium tissue sections were studied with the help of Bilshovsky - Gros technique of silver impregnation to investigate the innervation of the organ. However, along with the nerve plexus, ganglia and receptor endings microfilariae were selectively identified also. They are 200 to 550 microns long. They were discovered in the lumen of the small arteries, arterioles, in the venous vessels and in the bundles of working myocardium. Based on the data obtained the supposition had been made that Nematoda tegument specific proteins were selectively detected by silver salt. They were argentophile to the same extent as the proteins of neurofilament of neural tissue. This confirms that both these proteins are developing from the first germinal layer (the ectoderm) during the evolution process. Despite the close relationship between the parasites and different heart tissues, no specific pathological changes in response to the invasion were observed in the nervous system.
Введение
По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) из 7 млрд населения планеты более 4 поражены различными видами гельминтов. Причем, если учесть, что многие из людей могут быть «носителями» сразу нескольких видов паразитов, то можно себе представить насколько важной является проблема изучения паразитарных болезней
человека и животных. По данным той же организации уровень заболеваемости гельмин-тозами в мире крайне распространен (третье место среди паразитарных болезней) и высока степень и частота заражения ими млекопитающих. Большая видоспецифичность паразитических червей, интенсивная половая репродукция, сложность циклов развития, связанных с чередованием личиночных
стадий, способность к миграции - все это позволяет паразитам адаптироваться к изменяющимся условиям среды и, таким образом, расширять ареал в различных системах тканей и органов [1-8]. Многие из них являются гемофагами - питаются кровью и лимфой, потребляют витамин В12, нарушают процессы всасывания в кишечнике, повреждают слизистую на значительной площади, приводят к потере крови и развитию анемии, тромбозу и геморрагиям сосудов. Продукты выделения их характеризуются высокой токсичностью не только по отношению к окружающим тканям, но и вызывают нарушения липидного и углеводного обмена веществ всего организма животного и человека.
В связи с этим представляет особый интерес изучение, описание и анализ морфологических особенностей паразитических червей, обнаруженных нами в тканях правого предсердия и межпредсердной перегородке сердца двух особей мужского пола макак-резус Macaca mulatta.
Материал и методы
В 60-70-х годах прошлого столетия на базе Института физиологии им. И. П. Павлова в Колтушах по заданию Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи (ныне Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи) было сделано несколько серий опытов по проверке одного из штаммов вакцины против вируса паратита. Исследования проводились на половозрелых обезьянах самцах макак-резус M. mulatta (Сухумский заповедник) при участии нескольких институтов, в том числе и лаборатории нейроморфологии (зав. проф. Ю. М. Жаботинский) отдела патологической анатомии Научно-исследовательского института экспериментальной медицины СССР, возглавляемой проф. М. В. Войно-Ясенецким. Объектами исследования служили не только ЦНС (головной и спинной мозг), ВНС (ганглии и периферические нервы), но и сердце, печень и другие органы животных. Основная цель исследования состояла в обнаружении аутоиммунных демие-
линизирующих процессов у этих животных. Они были разделены на две группы: подопытные (привитые) и контрольные (условная норма). Для определения демиелиниза-ции нервных волокон были использованы нейрогистологические методы (Марки, импрегнация азотнокислым серебром по Биль-шовскому - Грос) и гематоксилин-эозин. Часть нейрогистологических препаратов, импрегнированных серебром, от контрольных животных, в том числе и срезы сердца, осталась в лаборатории в виде коллекции, которую предполагалось использовать в качестве демонстрации для студентов. Однако недавняя ревизия и тщательный анализ этих препаратов сердца послужили поводом для написания данной работы совместно с паразитологами.
Результаты исследований
Благодаря высокой избирательности метода импрегнации серебром на данных препаратах была отчетливо выявлена картина иннервации тканей сердца. В эпикарде правого предсердия видно широкопетлистое сплетение из нервных пучков различного диаметра, по ходу и внутри которых нередко встречаются небольшие скопления нейронов - микроганглии (рис. 1а). От него вглубь миокарда отходят многочисленные нервные стволики и пучки, образующие более плотное узкопетлистое сплетение вокруг микрососудов и тяжей миокардиоцитов. Среди этих нервных сплетений нам удалось также обнаружить паразитических червей, выяснить их строение и локализацию в тканях. Они имеют нитчатую, округлую форму, длина их колеблется от 200 до 550 мкм, а поперечный диаметр, в зависимости от части тела, составляет от 0,5 до 10 мкм. Тело червя имеет ровные контуры и в нем выделяются три части: короткий головной отдел, плавно переходящий в средний, наиболее продолжительный, и хвостовой - постепенно истончающийся. В головном отделе отсутствует какая-либо морфологически выраженная специализация. По своему диаметру этот отдел тела чуть тоньше (буквально на несколько микрон) среднего и имеет вид ровно срезанной капиллярной трубочки. Рассмотреть вну-
тренние детали строения переднего конца головного отдела червя не представляется возможным из-за интенсивной импрегнации серебром в черный цвет. Средний отдел самый протяженный и имеет более просветленные контуры. В нем удалось проследить при больших увеличениях микроскопа очень частую поперечную исчерченность на поверхности тела, различить в просветленных участках внутренней полости ар-гентофильные глыбки (возможно, продукты перевариваемой пищи), располагающиеся в виде цепочки. В каудальном направлении интенсивность аргентофилии тела червя возрастает, и хвостовой отдел, как и головной, становится интенсивно черного цвета. Любопытно отметить, что хвостовой отдел тела паразита легко идентифицируется от остальных перечисленных отделов не только по выраженному признаку истончения, но и по характерной извилистости самого кончика в виде крючка (вероятно, у самцов). Возникает предположение, что описанный вид червей так же, как и нервные структуры ткани сердца, избирательно выявляются азотнокислым серебром. По этой причине их бывает порой трудно отличить на срезах ткани от фрагментов толстых миелинизи-рованных аксонов, тонких нервных пучков и сплетений.
Однако, привыкнув к характерным особенностям червей, мы вскоре научились дифференцировать их от нервных структур и обнаружили в препаратах сердца в достаточно большом количестве исследованных случаев. Чаще всего они встречаются среди нервно-сосудистых сплетений либо по отдельности (в виде одиночных экземпляров), либо в виде небольших групп (из 5-6 особей), находящихся на незначительном расстоянии друг от друга в одном поле зрения микроскопа (рис. 1б). При максимальном увеличении эти микроскопические черви обнаружены в просветах мелких артерий, артериол, в расширенных венозных сосудах и капиллярах. Нередко они выявляются непосредственно в пучках миокардиоцитов передней стенки правого предсердия и меж-предсердной перегородки, а также залегают в соединительной ткани между капилляра-
ми и пучками мышечных волокон (рис. 2). Обращает на себя внимание необычное пространственное положение некоторых особей. Иногда видно, что часть тела червя - средний или хвостовой отдел - находится в просвете сосуда или внутри мышечного волокна, в то время как передний отдел (головной) находится вне сосуда, в окружающей соединительной ткани или эндомизии. Все это свидетельствует о динамике активной миграции особей в пределах окружающих тканей. В некоторых местах, на значительном протяжении артериального сосуда, приходилось наблюдать одновременно по нескольку червей, располагающихся в виде цепочки (хвост - головка) и следующих по просвету сосуда в одном направлении среди массы эритроцитов (рис. 3). Интересно отметить также, что вокруг червей, найденных нами между миокардиоцитами, в рыхлой соединительной ткани вблизи стенок сосудов отсутствовали какие-либо воспалительные инфильтраты. За исключением двух случаев. В одном участке миокарда, где имел место ценкеровский некроз мышечного волокна, был найден один погибший паразит, а в другом месте, в межмышечной соединительной ткани правого предсердия, встретилась особь в окружении мелкоклеточных элементов очага воспаления. Это говорит о некоторой степени реакции организма на антиген.
Обсуждение результатов и заключение
На основании полученных гистологических данных и морфологических критериев удалось определить и установить принадлежность исследованных червей к роду Dirofilaria sp., часто встречающихся у собак. Несмотря на большое число работ, посвященных изучению дирофилярий, многие вопросы, касающиеся их топографии и временных периодов локализации в организме хозяина, ответные реакции тканей и органов на инвазию, остаются все еще мало изученными [1-6]. Это относится в равной степени и к вопросу выяснения взаимоотношений личинок - микрофилярий - с окружающими тканями сердца животных и человека. Результаты двух случаев показали, что личинки микрофилярии ведут активный
Рис. 1. Нервное сплетение (а) и личинки микрофилярий (б) в стенке правого предсердия обезьяны. Импрегнация азотнокислым серебром по Бильшовскому - Грос. Докраска гематоксилином-эозином. Ув. х 100.
Рис. 2. Локализация паразитов в тканях предсердия обезьяны: а - в просвете артерии; б - в просвете вены; в - внутри миокардиацитов; г - в эндокарде. Импрегнация азотнокислым серебром по Бильшовскому - Грос. Докраска гематоксилином-эозином. Ув. х 400.
Рис. 3. Микрофилярия внутри капилляра. Импрегнация азотнокислым серебром по Бильшовскому -Грос. Докраска гематоксилином-эозином. Ув. х 400.
образ жизни в тканях сердца. Они находятся в тесных взаимоотношениях не только с сосудами микроциркуляторного русла, соединительной тканью, но и с рабочими ми-окардиоцитами стенки правого предсердия и межпредсердной перегородки. Здесь они питаются, проходят определенную стадию своей дифференцировки и роста. Оригинальностью работы, на наш взгляд, является то, что личинки рода Dirofilaria sp. были обнаружены в «контрольном материале», да еще и в препаратах, обработанных нейрогистоло-гическим методом серебрения по Бильшовскому - Грос, избирательно выявляющему только нервные элементы: нервные сплетения, нейроны, рецепторные нервные окончания. Благодаря этой реакции удалось выявить и паразитов в различных тканях сердца. На основании полученных данных можно предположить, что какие-то специфические белки тегумента или покрова этих червей обладают таким же сродством к AgNO3 или аргентофильностью, как и белки нейрофи-ламентов. При этом следует отметить, что, несмотря на порой тесные взаимоотношения паразита с нервными структурами, сосудами
и миокардиоцитами, никаких специфических патологических изменений в ответ на инвазию со стороны нервной ткани не наблюдалось. Воспалительная реакция на паразита в исследуемых случаях не наблюдалась. Приведенные факты свидетельствуют о том, что данная личиночная стадия относительно временная и необходима, по-видимому, для развития и подготовки личинок к выходу из тканей стенки сердца в полости предсердий и желудочков для дальнейшего дефинитивного развития и последующей миграции в ткани легких.
Список литературы
1. Архипов, И. А. Дирофиляриоз [Текст] / И. А. Архипов, Д. Р. Архипова. - М., 2004. - 194 с.
2. Архипова, Д. Р. Биология дирофилярий и эпизоотология дирофиляриоза собак в степной зоне юга России [Текст] : автореф. дис... канд. биол. наук / Д. Р. Архипова. - Н. Новгород, 2003. - 25 с.
3. Бессонов, А. С. Дирофиляриозы плотоядных и человека [Текст] / А. С. Бессонов // Ветеринария. 2003. - № 3. - С. 57-60.
4. Колодий, И. В. Особенности рентгендиагности-ки при дирофиляриозе у собак [Текст] / И. В. Колодий, A. M. Ермаков, А. В. Макрицкая // Ветеринария Кубани. - 2007. - № 6. - С. 14.
5. Согоян, И. С. Патолого-морфологические изменения при дирофиляриозе собак [Текст] / И. С. Согоян // Тр. Арм. НИИЖиВ. - 1962. - Т. 6. -С. 117-121.
6. Шинкаренко, А. Н. Экология паразитов собак и меры борьбы с вызываемыми ими заболеваниями в Нижнем Поволжье [Текст] : автореф. дисс. ... докт. вет. наук / А. Н. Шинкаренко. - Волгоград, 2005. - 42 с.
7. Ceribasi, A. Histopathologic Effects of Dirofilaria immitis Microfilaria on Internal Organs of Dog Confirming by PCR Technique [Текст] / A. Ceribasi, S. Simsek // Iran. J. Parasitol. - 2012. - Vol. 7, № 2. -P. 103-107.
8. Orihel, T. C. Zoonotic filariasis [Текст] / T. C. Orihel, M. L. Eberhard // Clin. Microbiol. Rev. -1998. - Vol. 11, № 2. - Р. 366-381.
реклама МОСКОВСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ BE Б-LIEH TP
webrnvccom V Заболел Ваш домашний питомец? Не отчаивайтесь - посетите наш веб-центр! У нас Вы найдете исчерпывающую информацию о болезни Вашего друга, лечении, профилактике и других вопросах ветеринарии. Также на нашем сайте Вы можете найти адрес ближайшей к Вам ветеринарной клиники, чтобы обратиться эа помощью к специалистам,
щ, лш^щт Кроме этого, наш веб-центр располагает полным спектром информации по уходу за животными -будь то кошки или собаки, птицы или рыбы, черепахи или экзотические животные. Вы научитесь, как правильно разводить, кормить, дрессировать и воспитывать своих домашних питомиее, На страницах нашего сайта с Вами делятся опытом и советами признанные авторитеты в области ветеринарии и ухода за животными. К Вашим услугам - энциклопедические справочники и научные статьи о животном мире, фото и видеоматериалы, ежедневнь»е новости и тематический форум,
Мы ждем Вас по адресу WWW.WebmVC.COm
