CC BY
3
ПРИЛОЖЕНИЕ l
Овсепян В. А., Лучинин А. С.
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОЙ ДЕЛЕЦИИ 13014 В ОБЩЕЙ ВЫЖИВАЕМОСТИ БОЛЬНЫХ
ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства»
Введение. В настоящее время данные о прогностическом значении величины изолированной интерстициальной деле-ции хромосомного региона 13ql4 (dell3ql4) и процента клеток с такой делецией в период постановки диагноза на течение хронического лимфолейкоза (ХЛЛ) носят противоречивый характер. Опубликованных исследований по этому вопросу недостаточно, чтобы сделать однозначные выводы.
Цель работы. Изучить влияние величины делетированного сегмента изолированной интерстициальной dell3ql4 и процента клеток с данной делецией в период диагностики на прогноз общей выживаемости больных ХЛЛ.
Материалы и методы. В исследование включены 170 больных ХЛЛ, в том числе 25 — в стадии А и 145 — в стадиях В и С по классификации Binet. Медиана возраста больных составила 64 года (33—82 года). Хромосомные аберрации в выделенных мононукле-арных клетках периферической крови определены методом FISH с использованием наборов коммерческих ДНК-зондов фирм «Leica Biosystems» и «Cytocell Limited» к локусам MYB (6q23.3), ATM (llq22.3), GLIl (12ql3), RBI (13ql4.2), DLEU1 (13ql4.3), D13S25 (13ql4.3), TP53 (17pl3). Статистическая обработка данных проводилась с использованием статистической программы MedCalc (версия 19.1). Для определения порогового значения процента клеток с dell3ql4 больных разделяли на 2 группы с точками отсечения от 10 до 85% и с шагом 5%. Анализ общей выживаемости (OB) в группах проводился по методу Каплана - Майера с вычислением критерия log-rank. Межгрупповые различия считались статистически значимыми при р <0,05. Пациенты с другими, кроме dell3ql4, хромосомными нарушениями исключены из анализа OB.
Результаты и обсуждение. Хромосомные аномалии выявлены у 75% (128/170) больных ХЛЛ. Наиболее распространенным нарушением являлась dell3ql4, она обнаружена у 52% (88/170) пациентов. Делеции llq22.3, 17р13 и 6q23 встречались соответственно у 19% (33/170), 9% (15/170) и 4% (6/170) больных, трисомия хромосомы 12 — у 15% (25/170). Изолированная dell3ql4 встречалась у 34% (57/170) больных ХЛЛ и включала в себя локус D13S25, расположенный дистальнее от центромеры по сравнению с локусами DLEU1 и RB1. У 16% (9/57) пациентов делеция затрагивала локус D13S25 изолированно, у 84% (48/57) — совместно с локусом DLEU1. У 44% (21/48) больных наряду с делетированными локусами DLEU1 и D13S25 присутствовала делеция локуса RB1, занимающего наиболее проксимальное положение к центромере. В качестве порогового значения процента лейкозных клеток с изолированной dell3ql4 принят 75%, при котором достигнута максимальная величина критерия log-rank. В группе пациентов с dell3ql4 в 75% клеток и выше медиана ОВ составила 63 мес., в группе больных с делецией 13ql4 менее чем в 75% клеток медиана ОВ не достигнута за период наблюдения в 75 мес. (log-rank, р = 0,001). Анализ ОВ пациентов в группах с разными величинами делетированных сегментов локуса 13ql4 не выявил статистически значимых раз -личий (р>0,05).
Заключение. Больные ХЛЛ с изолированной dell3ql4 не менее чем в 75% лейкозных клеток характеризуются более низкой ОВ по сравнению с пациентами с меньшим процентом клеток с указанной аномалией. Величина делетируемого сегмента 14ql3 не влияет на ОВ больных ХЛЛ.
Ольховский И. А.1, Поспелова Т. И.2, Горбенко А. С.1, Столяр М. А.1,3, Сидорова Ю. В.4, Судариков А. Б.4, Бахтина В. И.5, Михалёв М. А.5, Капорская Т. С.6, Колесникова М. А.2, Лыскова В. А.6
РЕЗУЛЬТАТЫ КОМПЛЕКСНОГО АНАЛИЗА ЭКСПРЕССИИ МРНК ГЕНОВ WT1, HMGA2, EVI1, BAALC И PRAME В ПРОБАХ ВЕНОЗНОЙ
КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
'Красноярский филиал ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 2Новосибирский медицинский институт, 3ФИЦ КНЦ СО РАН, 4ФГБУ «НМИЦ гематологии»
Минздрава Рос
5КГБУЗ «Красноярская краевая клиническая больница», 6ГБУЗ Иркутская ордена «Знак Почета» областная клиническая больница
Введение. В ряде исследований в крови пациентов с острыми лейкозами показано повышение уровня экспрессии мРНК ряда генов, активность которых характерна для клеток в период эмбрионального развития. Среди них наиболее часто упоминаются мРНК генов WT1, HGMA2, EVI1, BAALC и PRAME, однако в предыдущих публикациях не обсуждается диагностическое значение комбинаций активности данных генов, как и использование этих маркеров в качестве скринингового теста у пациентов с подозрением на онкогематологическое заболевание.
Цель работы. Определение профиля экспрессии мРНК генов WT1, HGMA2, EVI1, BAALC и PRAME в пробах крови пациентов с острыми лейкозами.
Материалы и методы. В исследование включены 143 обезличенные пробы венозной крови пациентов с острыми лейкозами, направленные для выполнения молекулярно-генетических исследований. В качестве группы сравнения были использованы 56 проб пациентов с измененным соотношением клеток крови, не имеющих онкогематологических заболеваний. Тестирование проводили методом мультиплексной ПЦР с использованием наборов, разработанных в Красноярском филиале ФГБУ «НМИЦ гематологии» в рамках государственного задания № АААА-А20-120021890168-5. Для выделения отдельных подгрупп из всей совокупности данных использовали метод нечеткой кластеризации по Fanny.
Результаты и обсуждение. Полученные значения различались в сотни раз, при этом уровни отдельных мРНК не коррелировали между собой либо с уровнем лейкоцитоза и бластных
клеток. ROC-анализ (рис. 1) диагностической эффективности продемонстрировал значения чувствительности 93% и специфичности 71% (AUC — 0,89; р<0,01) при разграничении проб пациентов с острым лейкозом и группы сравнения. Кластерный анализ данных по совокупному удельному весу уровня всех пяти мРНК позволил выделить три основных различающихся кластера: в самом компактном оказалось 90 проб пациентов
Рис.
ии
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
(64 — ОМЛ, 20 — ОЛЛ, б — неуточненных на момент исследования ОЛ); вторая менее компактная группа включала 21 пробу пациентов (14 с ОМЛ, 3 — ОЛЛ, 4 — ОЛ), а третья — 32 пробы (22 пациента с ОМЛ, 3-е ОЛЛ и7~ ОЛ) (рис. 2).
Заключение. Высокая чувствительность ПЦР-теста мРНК эмбриональных генов при острых лейкозах, вместе с его доступностью и относительной простотой, дает основания для использования на первичном этапе диагностики, особенно при отсутствии или низком уровне бластных клеток в венозной крови пациентов. Кроме того, высокая гетерогенность полученных значений отдельных комбинаций мРНК позволяет высказать гипотезу о возможной прогностической роли отдельных транскрип-томных комбинаций.
fx л д
\ \ t- + + + + - -+ ++ + +
Рис.2
2 3
Компонента 1
Ольховский И. А.1, Почтарь Е. В.2, Горбенко А. С.1, Столяр М. А.1,3, Дмитриева Е. А.4, Бахтина В. И.5, Михалёв М. А.5, Луговская С. А.6
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ И ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ШШ
В ЛЕЙКОЦИТАХ КРОВИ ПРИ ХЛЛ
'Красноярский филиал ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 2ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, 3ФИЦ КНЦ СО РАН, 4МГГЦ Городская клиническая больница имени С.П. Боткина Департамента здравоохранения города Москвы, 5КГБУЗ «Красноярская краевая клиническая больница», 6ФГБОУ ВО КрасГМУ Минздрава
России, ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России
Введение. RORl-трансмембранная рецепторная тирозинки-наза, член семейства «receptor tyrosine kinase-like orphan receptor (ROR)», не детектируется в тканях взрослого организма, за исключением короткого периода дифференцировки В-лимфоцитов. Ранее показано, что ROR1 способствует активации и выживанию лейкозных клеток иускоряет прогрессирование заболеванияу пациентов с ХЛЛ (Blood, 2016, 128(25):2931-2940). Определение антигена ROR1 предложено включить в панель иммунофенотипиче-ских маркеров ХЛЛ (doi: 10.4999/uhod.215209). В предварительном исследовании было продемонстрировано присутствие детектируе-мого уровня мРНК ROR1 в клетках крови большинства пациентов с ХЛЛ, в отличие от здоровых добровольцев и пациентов с некло-нальными лейкоцитозами (Горбенко А.С. и др. Разработка метода определения мРНК гена ROR1 в лейкоцитах крови. Лабораторная служба. 2021;10(1):32-37) Вместе с тем соотношение уровня экспрессии антигена и мРНК гена ROR1 в венозной крови при ХЛЛ ранее не исследовалось.
Цель работы. Исследовать ассоциацию экспрессии мРНК и антигена RORly пациентов с ХЛЛ.
Материалы и методы. В работе были использованы образцы крови 40 пациентов МГГЦ (24 женщины, Me возраста 68 лет, и 16 мужчин, Me возраста 66 лет) с подтвержденным диагнозом ХЛЛ. Иммунофенотипическое исследование проводили с использованием 5-цветной панели моноклональных антител (BD) CD19/ ROR1/CD20/CD5/CD45 на приборе FACSCanto II (BD Biosciences, США). Для определенияуровня экспрессии мРНК ROR1 использовали образцы венозной крови, отобранные в раствор стабилизатора РНК (ООО «Формула гена»), с дальнейшем тестированием методом ПЦР-РВ, разработанным в лаборатории красноярского филиала НМИЦ гематологии.
Результаты и обсуждение. У всех пациентов с ХЛЛ, включенных в данную выборку, в пробах цельной крови определялась экспрессия мРНК ROR1 (от 0,01 до 0,44 отн.ед.; Ме=0,03), при этомвысокийуровень (более 60%) циркулирующих CD19+CD5+
и CD19+RORl+ лимфоцитов сочетался с относительно низким уровнем мРНК RORl (до 0,1 отн.ед). Вместе с тем в отдельных пробах крови фиксировалось как высокие значения экспрессии антигена RORl, так и мРНК его гена (рис.). Расчетная удельная экспрессия мРНК RORl, отражающая интенсивность транскрипции гена RORl, находилась в диапазоне от 0,04 до 25,6 на 1000 CD19+RORl+ клеток и вероятно может иметь самостоятельное диагностическое значение. У пациентов, находящихся на терапии, этот показатель был на порядок ниже уровня, регистрируемого при первичной диагностике Ме=4,42 и Ме=0,44 (р=0,03) соответственно. Однако сделать вывод о преимущественном влиянии отдельных схем терапии в данном пилотном исследовании не представляется возможным в связи с недостаточной выборкой.
Заключение. Дополнение цитометрического определения CD19+RORl+ клеток молекулярно-генетическим исследованием уровня экспрессии мРНК гена RORl может быть перспективно для дальнейшего изучения этого потенциального маркера для первичной диагностики и оценки эффективности терапии пациентов с ХЛЛ.
Омарова Ф. А., Дроков М. Ю., Попова Н. Н., Давыдова Ю. О., Капранов Н. М., Никифорова К. А., Старикова О. С., Масликова У. В., Сайдуллаева И. С., Карасева Л. А., Васильева В. А., Кузьмина Л. А., Гальцева И. В., Паровичникова Е. Н., | Савченко В. Г.
ВЛИЯНИЕ АНТИТИМОЦИТАРНОГО ГЛОБУЛИНА В СОСТАВЕ СХЕМ ПРОФИЛАКТИКИ РЕАКЦИИ «ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА» С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОСТТРАНСПЛАНТАЦИОННОГО ЦИКЛОФОСФАМИДА НА ВОССТАНОВЛЕНИЕ Т-КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Внедрение в схемы профилактики реакции «транс- результаты трансплантации аллогенных гемопоэтических ство-плантат против хозяина» (РТПХ) посттрансплантационного ловых клеток (алло-ТГСК). Однако остается не изученной циклофосфамида (ПТ-ЦФ) позволило значительно улучшить целесообразность иногда применяемой комбинации ПТ-ЦФ
