CC BY
14Определяемые в ходе эксперимента показатели содержания уровня холестерина в сыворотке крови контрольной и опытной групп (самцы и самки) не выявили значимых закономерностей их изменений.
Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что длительное (в течение 3 месяцев) введение натурсила внутрь хорошо переносится животными и не вызывает отрицательных изменений в основных процессах обмена в организме интактных до начала эксперимента животных. Отмечена положительная динамика прибавки массы тела, возрастание количества эритроцитов и гемоглобина в крови, увеличение содержания в сыворотке крови общего белка, при этом уровень мочевины снижается, несколько уменьшается активность трансаминаз и увеличивается лактатдегидрогеназная активность, снижается содержание в сыворотке крови триглицеридов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Бурлакова Е.Б. Жизнь в атомном и химическом мире // Вопросы биологии, медицины и фармокологиче-ской химии. - 2004. - № 4. - С. 3-4.
2. Агаджанян Н.А. Экология человека и концепция выживания / Н.А. Агаджанян, А.И. Воложин, Е.В. Евстафьева. - М., 2001. - 240 с.
3. Гильмиярова Ф.Н. Постижение сути. Экология, экопатология, натурсил / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радом-ская. - Самара, 1997. - 401 с.
4. Сокольская Т. А. Комплексная переработка плодов расторопши пятнистой и создание на ее основе препарата «Силимар» // Химико-фармакологический журнал. - 2000. - Т. 34. - № 9. - С. 27- 30.
5. Saller R., Meier R., Brignoli R. The use of Silymarin in the treatment of liver diseases // Drags. - 2001. - Vol. 61, N 14. - P. 2035-2063.
6. Белоногова В.Д. Некоторые аспекты изучения биологической активности веществ и фармакологических свойств лекарственных растений / В. Д. Белоногова [и др.] // Вопросы биологии, медицины и фармокологиче-ской химии. - 2003. - № 4. - С. 16-20.
Статья принята в печать 2 июня 2014 г.
Рецензент Зайцев В.В. доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных, декан факультета биотехнологии и ветеринарной медицины ГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия».
УДК 612.8
© 2014 О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева
РЕАКТИВНЫЕ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС НА ФОНЕ НАГРУЗКИ ГУМАТОМ КАЛИЯ
В статье представлены результаты по изучению онтогенетических изменений нервной системы крыс на фоне нагрузки гуматом калия. Согласно полученным результатам нагрузка гуматом калия способствует интенсификации созревания сенсорно-двигательных рефлексов.
Ключевые слова: гумат калия, рефлекс, нервная система, открытое поле.
Одним из проявлений ненарушенного гомеостаза организма является скорость проведения импульса нервным волокном, а следовательно, скорость проявления безусловных рефлексов, скорость выработки условных навыков и общая стрессовая устойчивость психики животного. В связи с необходимостью расширять кормовую базу сельскохозяйственных животных для устойчивого получения высоких показателей производительности аграрного комплекса имеет смысл изменять состав классических кормовых добавок [5,6,7,11]. Функциональная активность может быть стимулирована введением биологически активных аген-
54
тов, в частности гуматом калия, имеющим большие перспективы применения в аграрном комплексе за счет низкой себестоимости данной кормовой добавки и ярко выраженного влияния на массу тела животного [1,2,3].
Целью данной работы является оценка интенсивности онтогенетического развития животных в период вскармливания при использовании данного компонента питания. Для реализации поставленной цели необходимо было решить ряд задач: в зависимости от длительности поступления кормового агента оценить динамику массы крысят, динамику длины тела, скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания.
Материалы и методы. Исследование проводили на белых беспородных крысах, которые содержались в виварии в стандартных условиях. В эксперименте участвовали 136 крысят в возрасте от 0 до 30 дня жизни. Крысята были получены от 10 самок и 6 самцов белых беспородных крыс, массой 190-210 г, поделенных поровну на контрольную и экспериментальную группы. Самкам экспериментальной группы в течение 30 дней до наступления беременности и родов в качестве дополнительной нагрузки внутрижелудочно вводили раствор гумата калия в дозе 10 мг/100 г веса тела, объемом 1 мл. Раствор готовили на дистиллированной воде. Самкам контрольной группы вводили воду дистиллированную на протяжении того же временного периода, объемом 1 мл [4].
Состояние организма крысят оценивали по следующим параметрам: динамике массы тела, изменению длины тела (без хвоста) и скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания классическими методами и методом «Открытое поле» [4].
Результаты исследования.
Выявлена положительная динамика массы крысят контрольной и экспериментальной групп (табл. 1).
Таблица 1
Динамика массы крысят опытных и контрольной групп
Дни Контроль Гумат калия
1 3,653±0,094 3,939±0,0831
2 4,216±0,095 4,555±0,0921
3 4,846±0,122 5,354±0,1101
4 5,851±0,144 6,835±0,1701
5 7,170±0,188 9,136±0,3201
6 8,632±0,277 10,920±0,4081
7 9,649±0,287 11,534±0,5071
8 10,827±0,297 12,770±0,5661
9 11,014±0,414 14,211±0,6491
10 12,654±0,637 18,516±0,7731
12 16,269±0,951 22,394±0,6771
14 19,992±1,374 26,155±0,7111
16 23,238±1,310 31,224±0,8671
18 26,630±1,157 34,590±0,8921
20 29,979±1,654 37,207±0,9701
22 33,078±0,985 39,921±0,8111
24 35,998±0,815 42,519±1,0031
26 39,856±0,509 46,227±1,1461
28 42,155±0,592 48,323±0,9581
30 44,968±0,677 50,634±0,8471
Примечание. В этой и всех последующих таблицах, различия достоверны при Р<0,05: 1 - по сравнению с показателями животных контрольной группы.
В результате внутрижелудочного введения гумата калия к 30 дню жизни прослеживается увеличение массы тела крысят экспериментальной группы на 12 % по сравнению с животными контрольной группы.
Установлена положительная динамика изменения длины тела крысят (табл. 2).
Таблица 2
Динамика изменения длины тела крысят (без хвоста) опытной и контрольной группы
Дни Контроль Гумат калия
1 4,311±0,109 4,667±0,0951
2 4,646±0,114 5,010±0,1271
3 5,136±0,134 5,720±0,1331
4 5,329±0,132 6,056±0,1761
5 5,521±0,116 6,222±0,1381
6 5,838±0,096 6,478±0,1361
7 6,085±0,092 6,644±0,1321
8 6,231±0,080 6,800±0,0931
9 6,400±0,084 6,922±0,1021
10 6,692±0,090 7,211±0,0901
12 7,169±0,102 7,622±0,0791
14 7,285±0,097 7,711±0,0941
16 7,354±0,094 7,900±0,0851
18 7,646±0,089 8,167±0,0821
20 7,877±0,101 8,478±0,0661
22 8,115±0,095 8,767±0,0781
24 8,715±0,089 9,600±0,0821
26 9,138±0,097 10,500±0,1381
28 10,108±0,135 12,156±0,3071
30 10,823±0,152 12,889±0,2041
Средняя длина тела крысят экспериментальной группы к 30 дню исследований была больше на 19 % по сравнению с длиной тела крысят контрольной группы.
Наиболее значимым для выявления степени развитости нервной системы является исследование эмоционально-двигательного поведения и способности к тонкой координации движений животных (табл. 3).
Таблица 3
Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания
Сроки наблюде- Показатель Дни проведения Контроль Гумат калия
ния эксперимента
(рекомендуемые)
1 2 3 4 5
2 12,5±0,41 0
3 12,5±0,38 18,7±0,641
Переворачивание на 4 43,7±1,53 40,3±1,25
со 2 дня жизни плоскости (кол-во 5 62,5±2,38 55,7±1,931
крысят в %) 6 86,7±2,86 100,01
7 89,7±3,32 100,0
8 100,0 100,0
с 5 дня жизни Отрицательный гео- 5 12,5±0,45 22,2±0,821
таксис 6 43,8±1,36 33,3±1,901
(кол-во крысят в %) 7 37,5±1,39 44,4±1,471
8 50,0±1,75 66,7±2,471
9 62,5±2,13 77,8±2,571
10 81,2±3,08 88,8±3,02
11 100,0 100,0
с 6 дня жизни Избегание обрыва 6 13,3±0,52 22,2±0,711
(кол-во крысят в %) 7 13,3±0,48 22,2±0,641
8 21,4±0,77 33,3±1,231
9 57,1±2,17 55,5±2,11
10 76,9±2,85 77,7±2,95
11 88,8±2,95 100,01
12 100,0 100,0
6-8 дня жизни Маятниковый реф- 6 12,5±0,41 20,0±0,721
лекс (кол-во крысят 7 25,0±0,98 30,0±1,021
в %) 8 50,0±1,55 60,0±2,101
9 87,5±3,24 1001
10 100 100
Открытое поле
8-9 дни жизни Поднимание головы и передних лап 8 Головы-2,13±0,40 Лап-1,06±0,18 Головы-2,25±0,35 Лап-1,08±0,19
(в среднем на 1 кры- 9 Головы-2,73±0,30 Головы-3,50±0,45
су) Лап-1,33±0,25 Лап-1,75±0,22
10 Головы-3,20±0,28 Лап-2,20±0,20 Головы-4,33±0,451 Лап-3,17±0,171
11 Головы-3,93±0,28 Лап-2,93±0,25 Головы-5,17±0,421 Лап-3,58±0,19
9-11 дни жизни Ползание 9 50,5±2,12 30,3±0,941
(кол-во крысят в %) 10 56,3±1,81 44,4±1,591
11 75,0±2,55 66,7±2,071
12 81,3±2,93 77,8±2,41
13 100 100
13-15 дни жизни Опора на задние 13 1,20±0,26 1,60±0,34
конечности 14 1,73±0,28 2,30±0,37
(в среднем на 1 кры- 15 2,40±0,27 2,90±0,31
су) 16 2,93±0,30 3,20±0,42
13-15 дни жизни Подъем всего тела 13 1,33±0,28 1,30±0,30
(в среднем на 1 кры- 14 1,93±0,23 2,20±0,29
су) 15 2,93±0,23 2,90±0,28
16 3,67±0,21 3,40±0,27
17-20 дни жизни Число пересеченных 17 42,0±4,97 24,0±3,241
квадратов 18 41,9±5,41 35,7±4,57
(в среднем на 1 кры- 19 44,3±5,82 40,7±4,36
су) 20 44,5±6,79 68,7±6,131
17-20 дни жизни Груминг 17 1,51±0,61 1,67±0,54
(время в среднем на 18 3,24±0,41 3,59±0,44
крысу), 19 5,08±0,47 4,25±0,39
сек 20 5,03±0,45 4,37±0,43
17-20 дни жизни Число вертикальных 17 3,78±0,52 4,00±0,79
стоек 18 4,22±0,47 6,22±0,681
(в среднем на 1 кры- 19 4,55±0,58 8,22±0,761
су) 20 4,78±0,59 8,33±0,971
17-20 дни жизни Карабканье на стен- 17 0 0
ки 18 0 15,4±0,571
(кол-во крысят в %) 19 18,7±0,67 0
20 12,5±0,40 0
17-20 дни жизни Прыжки 17 0 0
(кол-во крысят в %) 18 0 0
19 0 0
20 0 0
17-20 дни жизни Время отсутствия 17 23,16±2,68 18,07±1,81
активности 18 26,49±2,44 16,84±1,591
(в среднем на 1 кры- 19 22,92±1,88 15,77±1,811
су), сек 20 22,26±2,16 15,88±1,891
17-20 дни жизни Возможные анома- 17 0 0
лии походки 18 0 0
(кол-во крысят в %) 19 0 0
20 0 0
8-13 дни жизни Реакция на акусти- 8 8,33±0,27 11,54±0,451
ческий стимул 9 12,50±0,49 11,54±0,36
(кол-во крысят в %) 10 25,00±1,03 19,23±0,671
11 29,92±1,11 34,62±1,211
12 37,50±1,35 42,30±1,611
13 70,83±2,69 65,38±1,89
14 83,33±3,58 96,15±3,271
15 100 100
с 14 дня жизни Зрачковый рефлекс 14 66,7±2,27 88,9±3,111
(кол-во крысят в %) 15 100 100
14-15 Избегание обрыва 14 55,6±1,89 66,7±2,461
дни жизни (вызванное визуаль- 15 77,8±2,80 72,7±2,11
ным стимулом) 16 100 100
(кол-во крысят в %)
10-11 дни жизни Обонятельная реак- 10 45,00±4,83 22,5±3,411
ция 11 29,17±2,98 21,25±2,63
(в среднем на 1 кры-
су), см
с 15 дня жизни Мышечная сила 15 7,00±2,39 10,71±3,17
(в среднем на 1 кры- 16 8,11±2,21 12,14±2,89
су), сек 17 9,44±2,09 14,00±2,54
18 11,00±1,57 17,57±1,391
19 12,44±1,49 20,00±1,271
20 15,33±1,27 22,00±1,561
Исследование эмоционально-двигательного поведения и способности к тонкой координации движений
17-20 дни жизни Переворачивание в 17 62,5±2,25 1001
свободном падении 18 87,5±2,89 1001
(кол-во крысят в %) 19 100 100
20 100 100
14-25 Удержание на вра- 14 10,33±1,83 16,11±2,26
дни жизни щающемся цилинд- 15 12,78±2,77 42,88±13,611
ре 16 18,11±4,73 31,88±6,221
(в среднем на 1 кры- 17 20,67±3,69 42,33±6,941
су), сек 18 25,33±3,66 49,22±6,711
19 32,11±3,79 62,44±8,421
20 47,67±3,08 80,67±8,451
21 61,56±3,97 91,44±6,911
22 84,77±4,37 107,56±7,251
23 103,89±3,39 124,78±7,021
24 122,33±4,08 146,56±6,101
25 142,00±3,88 168,56±6,161
26 162,00±4,58 181,56±6,151
27 181,78±3,58 201,22±4,701
Открытое поле - 2
40-45 дни жизни Латентный период выхода из центра, с (в среднем на 1 крысу) 40 18,00±2,38 11,56±1,731
41 16,78±1,93 11,22±2,22
42 14,33±1,44 8,44±1,631
43 11,78±1,12 6,22±1,191
44 10,67±0,85 5,56±1,001
45 9,78±0,62 5,22±0,851
40-45 дни жизни Число пересеченных квадратов (в среднем на 1 крысу) 40 147,14±17,165 128,33±15,057
41 185,00±9,076 109,67±13,0431
42 163,00±16,63 144,17±11,368
43 133,86±10,707 152,33±18,896
44 151,33±14,233 152,40±18,954
45 122,29±15,259 190,00±12,3831
40-45 дни жизни Число стоек (в среднем на 1 крысу) 40 3,71±0,68 7,57±0,751
41 12,86±2,15 16,14±1,81
42 5,43±0,84 12,14±1,341
43 3,57±1,04 5,57±0,99
44 8,29±1,57 11,00±1,66
45 4,43±0,89 14,57±1,191
40-45 дни жизни Число умываний (в среднем на 1 крысу) 40 2,00±0,44 1,29±0,18
41 2,00±0,54 1,14±0,40
42 2,00±0,58 1,43±0,57
43 2,43±0,84 1,29±0,36
44 2,71±0,68 1,29±0,29
45 2,57±0,69 1,43±0,29
40-45 дни жизни Время груминга, с (время в среднем на крысу) 40 6,50±0,63 3,75±0,451
41 6,88±0,72 3,50±0,381
42 7,00±0,66 3,63±0,381
43 7,38±0,63 3,38±0,321
44 7,00±0,54 3,50±0,331
45 6,63±0,59 3,25±0,451
40-45 дни жизни Время замирания, с (время в среднем на крысу) 40 24,56±1,94 16,00±0,991
41 23,88±1,81 16,56±0,891
42 22,67±1,72 15,78±0,891
43 21,89±1,51 14,22±0,761
44 20,88±1,65 14,00±0,761
45 19,33±1,54 13,22±0,861
40-45 дни жизни Число дефекаций, шт (время в среднем на крысу) 40 2,44±0,34 1,22±0,281
41 2,56±0,24 1,11±0,351
42 2,11±0,39 1,11±0,261
43 2,67±0,24 1,22±0,281
44 3,00±0,29 1,22±0,221
45 2,56±0,29 0,89±0,201
40-45 дни жизни Число уринаций, шт (время в среднем на крысу) 40 4,33±0,33 2,33±0,331
41 4,44±0,44 2,22±0,281
42 4,33±0,41 2,22±0,401
43 4,22±0,49 2,11±0,391
44 3,33±0,41 1,89±0,351
45 3,78±0,32 2,11±0,351
40-45 дни жизни Число заглядываний в норки (время в среднем на крысу) 40 5,67±0,88 13,78±0,951
41 6,44±0,85 13,89±0,901
42 8,55±1,39 14,00±1,041
43 8,44±1,16 13,33±1,111
44 9,22±0,95 14,89±1,031
45 10,33±0,93 15,44±1,141
По данным, представленным в таблице, видно, что рефлекс переворачивания на плоскости у крысят экспериментальной группы был полностью сформирован к 6 дню жизни, а у крысят контрольной группы только к 8 дню. Рефлекс «отрицательный геотаксис» у крысят обеих групп был полностью сформирован к 11 дню жизни. Рефлекс «избегание обрыва» и «маятниковый рефлекс» у крысят экспериментальной группы были полностью сформированы к 11 и 9 дню соответственно, а в контрольной группе - к 12 и 10 дню жизни.
При исследовании скорости созревания рефлексов по методу «открытое поле» было зафиксировано, что крысята экспериментальной группы несколько чаще осуществляли поднятие головы и лап, по сравнению с крысятами контрольной группы. Ползать все крысята обеих групп начали к 13 дню жизни. Опора на задние конечности и подъем всего тела осуществлялись крысятами обеих групп примерно с одинаковой частотой. Число пересеченных квадратов у крысят экспериментальной группы к 20 дню жизни было больше на 10,7 % по сравнению с контролем. Время груминга у крысят обеих групп, при исследовании с 17 по 20 дни жизни, было примерно одинаковым. Число вертикальных стоек у крысят экспериментальной группы к 20 дню жизни было больше на 74,2 % по сравнению с контролем. Карабканье на стенки было зафиксировано у 15,4 % крысят экспериментальной группы на 18 день жизни, а у крысят контрольной группы на 19 и 20 день в количестве 18,7 % и 12,5 % соответственно. Прыжки крысята обеих групп во время наблюдения не осуществляли. Время отсутствия активности у крысят экспериментальной группы на протяжении заданного периода наблюдений было достоверно ниже, по сравнению с крысятами контрольной группы. Реакция на акустический стимул и «зрачковый» рефлекс у крысят обеих групп были полностью сформированы к 15 дню жизни. Рефлекс «избегания обрыва, вызванного визуальным стимулом» у крысят обеих групп был полностью сформирован к 16 дню жизни.
При исследовании эмоционально-двигательного поведения и способности к тонкой координации движений было зафиксировано, что переворачивание в свободном падении все крысята экспериментальной группы осуществляли с 17 дня жизни, а крысята контрольной группы только с 20 дня. Время удержания на вращающемся цилиндре у крысят экспериментальной группы к 27 дню жизни было на 10,7 % больше, по сравнению с контролем.
При исследовании созревания рефлексов по методу «открытое поле 2» на 45 день жизни нами были зафиксированные следующие показатели: латентный период выхода из центра у крысят экспериментальной группы был меньше на 46,6 % по сравнению с контролем. Число пересеченных квадратов у крысят экспериментальной группы больше на 55,4 % по сравнению с контролем, число вертикальных стоек больше на 228,9 %, а число умываний меньше на 44,4 % относительно контрольной группы.
Время груминга у крысят экспериментальной группы на 50,9 % меньше, чем у крысят контрольной группы; время замирания меньше на 31,6 %, число дефекаций меньше на 65,2 %, число уринаций меньше на 44,2 %, при этом число заглядываний в норки больше на 49,5 % по сравнению с контролем. Результаты исследований говорят о неуклонной стабилизации психического состояния животных, получавших в качестве дополнительной нагрузки гумат калия.
Таким образом, почти по всем перечисленным параметрам мы наблюдали интенсификацию созревания сенсорно-двигательных рефлексов у крысят экспериментальной группы по сравнению с контролем, следовательно, введение гумата калия в состав кормовых добавок можно считать оправданным.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Бузлама В. С. Механизм действия препаратов гуминовых веществ / В. С. Бузлама, В. Н. Долгополов, А. В. Сафонов, С. В. Бузлама // Итоги и перспективы применения гуминовых препаратов и кормовых добавок в ветеринарии: материалы IV Всероссийской конференции. - М., 2006. - С. 24-35.
2. Гуминовые препараты в животноводстве и ветеринарии: монография / А.М. Самотин [и др.]. - Воронеж: ВГАУ, 2010. - 90 с.
3. Косолапова А.И. Гуминовые препараты - нетрадиционная кормовая добавка для животных / А.И. Косолапо-ва, Э.И. Смышляев // Гуминовые препараты и их применение в растениеводстве и животноводстве: материалы Всероссийской научно-практической конференции (17-19 мая 2005 г.). - Рязань, 2005. - С. 51-55.
4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Р. У. Хабриева. - 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Медицина, 2005. - 832 с.
Статья принята в печать 13 июня 2014 г.
Рецензент Зайцев В.В. доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных, декан факультета биотехнологии и ветеринарной медицины ГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия».
