Zh. A. Doskaliev, V. P. Grigorevskiy, S. S. Amanbayev, B. A. Dzhusipov
TRANSPLANTATION INFLUENCE OF FETAL CELLS ON THE FUNCTIONAL ACTIVITY OF PHAGOCYTES AT RATS WITH EXPERIMENTAL CIRRHOSIS
Intrahepatic transplantation of allogenic fetal cells was carried out in rats with experimental cirrhosis. Fetal cells of liver and spleen were administrated to animals of experimental group 2, only fetal hepatocytes - to experimental group 1. Dynamics of indicators of phagocytosis and oxygen dependent cytotoxicity was estimated. It is shown, that both types of fetal-cellular transplantation make positive impact on indicators of phagocytosis and oxygen dependent metabolism of neutrophils and monocytes, that indicates about the termination of stimulating influences on them, decrease of inflammatory process and homeostasis restoration.
Ж. А. Доскалиев, В. П. Григоревский, С. С. Аманбаев, Б. А. Джусипов
ФЕТАЛДЫ ЖАСУШАЛАР ТРАНСПЛАНТАЦИЯСЫНЫЦ ЭКСПЕРИМЕНТА БАУЫР ЦИРРОЗЫ БАР ЕГЕУК¥ЙРЬЩТАРДЬЩ ФАГОЦИТТЕР1НЩ ФУНКЦИОНАЛДЫ БЕЛСЕНД1Л1Г1НЕ ЭСЕР ЕТУ1
Тэжiрибедеri бауыр циррозi бар егеукуйрыктарра аллогендi феталды жасушалардыч бауырра трансплантациясы жасалды. Тэжiрибедегi 2 топтары жануарларра феталды бауыр жэче кекбауыр жасуша-лары енгiзiлдi, 1 топтары жануарларра тек феталды гепатоциттер енгiзiлдi. Фагоцитоз жэне цитотоксикалык оттегiтэуелдiлiк керсетюштер^щ езгерiстерi бараланды. Феталды жасушалар трансплантациясыныч ею тYрiде фагоцитоз керсеткiштерiне, нейтрофилдердщ оттептэуелдтк метаболизмiне жэне перифериялык канныч моноциттер^е колайлы эсер етедi, ол ез алдына ынталандыру эсерiнiк токтатылрандырын, кабыну процессшщ бэсечдегеын жэне гомеостаздыч калпына келгенiн керсетедi.
Ю. А. Шустеров, Д. С. Карибаева
ПРИМЕНЕНИЕ МОДИФИЦИРОВАННОГО ШОВНОГО МАТЕРИАЛА ПРИ ТРАВМАХ ФИБРОЗНОЙ КАПСУЛЫ ГЛАЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Кафедра глазных болезней Карагандинской государственной медицинской академии, МСЧ «Шахтер-Испат-Кармет» (Караганда)
Травмы органа зрения являются одной из основных причин слепоты и слабовидения у лиц трудоспособного возраста. До 30% всех случаев первичной инвалидности по зрению обусловлены травмами органа зрения и их исходами [5]. В Республике Казахстан в структуре причин инвалидности по зрению травмы глаза составляют 12,1% [7]. Самыми распространенными являются проникающие ранения глазного яблока, в 5766% - повреждения роговицы [2]. Больше чем в половине случаев выполняются реконструктивные операции на базе сквозной кератопластики (53,4%) [6]. Величина и локализация проникающего ранения во многом определяют развитие и тяжесть осложнений, влияющих на исход травмы. Решающее значение в профилактике осложнений механических травм принадлежит оказанию квалифицированной ПХО ран глазного яблока, которая не всегда выполняется на должном уровне в зонах, труднодоступных для ушивания (задний полюс глаза, склера под экстраокулярными мышцами). Возникающая после этого необходимость повторной обработки (в 10% случаях) проникающих ран свидетельствует о неполной герметизации повреждений фиброзной капсулы глаза [4, 8].
Качество шовного материала, используемого при герметизации различных ран фиброз-
ной капсулы глаза, является одним из определяющих факторов успешного проведения и конечного результата офтальмологических операций.
В связи с этим продолжается поиск новых и модификация уже имеющихся шовных материалов, изучается их влияние на окружающие ткани. Повышение биосовместимости существующих синтетических шовных материалов продолжает оставаться актуальной проблемой офтальмологии [1]. Одним из перспективных методов модификации является плазмохимический [3].
Целью исследования явилось изучение реакции роговицы и склеры кролика на применение обработанного в газоразрядной плазме синтетического шовного материала.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Работа выполнена на взрослых кроликах. Исследовали шовный материал капрон, нейлон, полипропилен 10/0. Разработан способ улучшения биологической совместимости и снижения токсичности синтетических материалов - обработка в низкотемпературной газоразрядной плазме, которая создавалась высокочастотным емкостным разрядом при давлении 0,5 Торр, с использованием генератора частотой 14 МГц.
Используя микрохирургическую технику, животным под наркозом осуществляли линейный разрез роговицы и склеры. Края раны роговицы ушивали непрерывным швом по Пирсу, на склеру накладывали узловые швы, применяя один из материалов, подвергнутых плазмохимической обработке. Контролем служил парный глаз, на котором проводились аналогичные оперативные вмешательства с применением интактного шовного материала. С целью изучения реакции роговицы кроликов на модифицированный шовный материал, а также проведения сравнительной оценки исследуемых и интактных нитей животные были разделены на 3 группы, в каждой из
которой использовались следующие шовные материалы: I группа - капроновая мононить 10/0, II группа - полипропиленовая мононить 10/0, III группа - нейлоновая мононить 10/0.
В ходе ежедневного наблюдения обращалось внимание на степень слизистого отделяемого (I степень - отдельные глыбки слизи на шве, II - весь шов покрыт слизью, III степень - слизь на шве и других участках тканей), инъекцию конъюнктивы (от I до III степени), отек тканей (I степень - отек в зоне рубца, II - отек в зоне рубца и местах вкола и выкола иглы, III -дуффузный отек ткани, выходящий за пределы наложенного шва), васкуляризацию роговицы (I степень - отсутствие сосудов, II - длина сосуда до 2 мм, III - длина сосуда до 4 мм, IV - длина сосуда до 6 мм), адаптацию краев раны роговицы. Также изучены сроки покрытия нитей эпителием роговицы.
На 14 сут и через 1, 3, 6 мес. животных выводили из эксперимента путем углубления наркоза. Ткань глаза фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и далее проводили по общепринятой методике для гистологических исследований с последующей заливкой материала в воск-парафин. Изготовленные парафиновые срезы толщиной 4-5 микрон окрашивали гематоксилином и эозином.
Проводилось микрофотографирование на современном аппаратном компьютерном комплексе «Leica Microsystems» с цифровым микрофотографированием при 100-, 200- и 400-кратном увеличении. Морфологическое исследование проведено на базе гистологической лаборатории кафедры патологической анатомии, судебной медицины с курсом гистологии Карагандинской государственной медицинской академии.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Наблюдение за экспериментальными животными показало меньшую реактивность модифицированного шовного материала по сравнению с необработанным в плазме, что было подтверждено гистологическими исследованиями.
Сравнивая реакцию ткани роговицы на капрон, подвергнутый плазмохимической обработке, и интактный, следует отметить, что на ранних сроках после операции (до 3 сут) в обоих случаях наблюдалась инъекция конъюнктивы II степени, отек в зоне рубца роговицы II степени, хорошая адаптация краев раны. Однако при использовании интактного капрона отмечено большее слизистое отделяемое на швах роговицы (II степень). В обоих случаях передняя камера и глубжележащие среды были без патологических изменений. При сроке наблюдения до 2 нед. отмечалось уменьшение инъекции конъюнктивы до I степени, уменьшение слизистого отделяемого (на роговице следы слизи в местах перекреста нитей, причем больше при использовании необработанного капрона), хорошая адаптация краев раны. Отек ткани роговицы в местах вкола и вы-
кола иглы был менее выражен при использовании обработанного капрона.
При сроке наблюдения до 1 мес. после операции в обоих случаях выявлено увеличение инъекции конъюнктивы до II степени, слизистого отделяемого (при использовании необработанного капрона II степени, обработанного I). Хорошая адаптация краев раны сохранилась, но при этом необработанный капроновый шов несколько ослаб, отечность ткани в области рубца увеличилась, вдоль всей нити начиналось прорастание сосудов. Все это позволяет отметить на ранних сроках худшую переносимость необработанной капроновой нити.
При сроке наблюдения до 3 мес. после операции при использовании интактного капрона отмечалось раздражение глаз, инъекция конъюнктивы III степени, окутывание слизью всей нити, отек роговицы в зоне наложения шва, его грубая васкуляризация, в 3 случаях возникло отторжение шва. В то же время при использовании обработанного капрона регистрировалась инъекция конъюнктивы ЬП степени, на роговице слизь в местах перекреста нити, некоторое утолщение роговицы в области рубца, отека не было, имелась поверхностная васкуляризация.
При сроке наблюдения до 6 мес. в глазах, где была использована нить без предварительной плазмохимической обработки, сохранялась инъекция конъюнктивы II степени, слизистое отделяемое на нитях - II степени. Отек роговицы в зоне наложения швов продолжал сохраняться (I и II степени). В 3 случаях отмечалось образование грубого васкуляризированного помутнения роговицы и отторжение шва. Выраженная васку-ляризация роговицы была отмечена во всех случаях наложения необработанной капроновой мононити (IV степень). Вместе с тем при применении модифицированных капроновых швов инъекция конъюнктивы II степени была обнаружена лишь в 1 случае. Отделяемого и отека роговицы в зоне швов не наблюдалось. Сохранялась умеренная васкуляризация роговицы II степени в 3 случаях. Следует отметить, что при длительном сроке наблюдения происходило значительное улучшение переносимости тканями глазного яблока капроновых нитей, обработанных в газоразрядной плазме, в виде отсутствие отека, слизистого отделяемого, умеренной васкуляризации.
Результаты патоморфологического исследования показали развитие ответной клеточной реакции на наложение капроновой мононити как реактивное воспаление. При этом развитие асептического воспаления сохранялось во все сроки наблюдения при наложении капроновой нити без предварительной обработки. Отмечено уменьшение интенсивности лимфоидно-макрофагальной инфильтрации с примесью эозинофилов с увеличением срока опыта. Отличительной особенностью тканевой реакции на шовный материал является наличие лимфоидно-эозинофильной инфильтрации, что говорит о формировании аллер-
Медицина и экология, 2008, 1
гического компонента воспаления. Положительная динамика отмечена при применении капроновой мононити после плазмохимической обработки с увеличением срока эксперимента, что характеризовалось уменьшением лимфоидной и макрофагальной инфильтрации в срок после 2 нед. эксперимента, которая отчетливо проявлялась к 1 мес. Эозинофильная реакция значительно уменьшалась к 3 мес. и не выявлялась в срок 6 мес., что говорит об отсутствии аллергической реакции на шовный материал после плазмохими-ческой обработки.
При сравнении переносимости обработанного и интактного нейлона в ранний послеоперационный период (от 1 до 3 сут) в обоих случаях наблюдалась инъекция конъюнктивы II степени, незначительное слизистое отделяемое на нитях, отек роговицы в местах вкола и выкола иглы, хорошая адаптация краев ран. Передняя камера и глубжележащие отделы без изменений. При сроке наблюдения до 2 нед. инъекция конъюнктивы уменьшилась до I степени, слизистое отделяемое в случаях использования необработанного нейлона оставалось II степени, обработанного - I, сохранялся легкий отек роговицы в зоне наложения шва. При сроке наблюдения до 1 мес. отмечено некоторое увеличение отека роговицы в области наложения необработанной нейлоновой нити, сохранение инъекции конъюнктивы II степени, слизистое отделяемое сохранялось в случае необработанного нейлона II, обработанного - I степени. В обоих случаях отмечалась поверхностная васкуляризация роговицы в области наложения нитей. При сроке наблюдения до 3 мес. после операции отмечена лучшая переносимость тканями глаза нитей, подвергнутых плаз-мохимической обработке. Так, при использовании необработанного нейлона сохранялась некоторая раздраженность глаз, инъекция конъюнктивы I степени, скудное слизистое отделяемое на нитях, более выраженная васкуляризация области наложения шва, в единичных случаях - провисание и ослабление нити. В обоих случаях отмечено отсутствие отека роговицы в зоне рубца. При длительном сроке наблюдения (до 6 мес.) отек роговицы и слизистое отделяемое в случаях наложения модифицированной нити не наблюдались. В подгруппе, где использовалась необработанная нить, сохранялось скудное слизистое отделяемое на швах и отек роговицы I степени. Васкуляризация роговицы в области наложения шва была более выражена в глазах, где применялся интактный нейлон (во всех случаях IV степень реакции), при этом ослабление и провисание шва отмечалось в 3 случаях. Однако модифицированный нейлон вызывал менее выраженную васкуляризацию роговицы (II степень).
Сравнительный анализ патоморфологиче-ских изменений тканей глаза кролика при наложении нейлоновой нити показал, что более выраженная картина реактивного воспаления в
виде формирования инфильтрата из макрофагов, лимфоцитов и единичных эозинофилов развивалась при использовании нейлоновой мононити без плазмохимической обработки, которая убывала по мере увеличения срока исследования. При применении в качестве шовного материала нити после предварительной плазмохимической обработки уже в срок 1 мес. воспалительная реакция значительно уменьшалась и носила рассеянный характер с наличием единичных лимфоцитов вокруг шовного материала. Отек ткани глаза сохранялся, но был менее выражен, чем при наложении необработанной нити. В срок 3 мес. отмечалось уже значительное уменьшение интенсивности клеточной реакции. Через 6 мес. после завершения эксперимента картина реактивного воспаления не прослеживалась.
При сравнении обработанного и необработанного полипропилена в ранний послеоперационный период (от 1 до 3 сут) отмечено сходство клинических проявлений: инъекция конъюнктивы II степени, слизистое отделяемое II степени, отек роговицы II степени, хорошая адаптация краев ран. Передняя камера и глубжележащие отделы в норме. При сроке наблюдения до 2 нед. инъекция конъюнктивы уменьшилась до I степени, окутывание шва слизью при использовании обработанного полипропилена значительно уменьшилось. Слизь сохранялась только в местах перекреста нити на роговице. При этом в обеих подгруппах сохранялся локальный отек роговицы в зоне раны. Поверхностная васкуляризация роговицы к этому времени более выражена при использовании необработанного полипропилена. При сроке наблюдения до 1 мес. в обоих группах регистрировалась инъекция конъюнктивы I степени, слизистое отделяемое на необработанных нитях роговицы II степени, на обработанных -практически нет, отек роговицы в зоны наложения швов I степени, но в группе с необработанной нитью под швами просматривались пролежни роговицы. При сроке наблюдения до 6 мес. в глазах, где использовалась полипропиленовая нить без плазмохимической обработки, сохранялась легкая инъекция конъюнктивы, скудное слизистое отделяемое, васкуляризация III и IV степени. Модифицированные швы из полипропилена практически не вызывали реакции конъюнктивы, отека роговицы в зоне наложения, не было отмечено пролежней, а васкуляризация соответствовала II и III степени.
Результаты гистологического исследования структур глаза при использовании полипропиленовой нити без обработки и после плазмохи-мической обработки показали развитие ответной клеточной и сосудистой реакции на шовный материал. При этом интенсивность реакции была в прямой зависимости от срока эксперимента и вида использованного шовного материала. Следует отметить, что реактивное воспаление с наличием единичных эозинофилов и отек ткани развивались в ранние сроки эксперимента - на 2
нед. при использовании в качестве шовного материала необработанной нити. Положительная динамика отмечена в тканях глаза при использовании полипропиленовой мононити, подвергшейся предварительной плазмохимической обработке, и характеризовалась отсутствием клеточных и сосудистых изменений вокруг шовного материала.
ВЫВОДЫ
1. Шовный материал, подвергнутый плаз-мохимической обработке (нейлон 10/0, полипропилен 10/0, капрон 10/0) лучше переносится тканями глаза кролика, чем аналогичные нити, не подвергнутые обработке в газоразрядной плазме, вызывая реакцию глаза (ЬП степени).
2. Использование обработанного в газоразрядной плазме капрона 10/0 позволяет уменьшить степень васкуляризации роговицы в месте наложения, исключает возможность отторжения шва.
3. Использование обработанного в газоразрядной плазме нейлона 10/0 позволяет уменьшить степень васкуляризации роговицы, исключает провисание и ослабление швов.
4. Использование обработанного в газоразрядной плазме полипропилена 10/0 позволяет уменьшить степень васкуляризации роговицы, исключить возможность образования пролежней при наложении швов.
5. Гистологическое исследование фиброзной капсулы глаза показало формирование ответной клеточной реакции в виде умеренно выраженного реактивного асептического воспаления на модифицированные швы. Интенсивность клеточной инфильтрации зависела от сроков наблюдения. При длительном сроке наблюдения (6 мес.) лимфолейкоцитарная и эозинофильная реакции вокруг шовного материала отсутствовали.
ЛИТЕРАТУРА
1. Волков В. В. Офтальмохирургия с использованием полимеров /В. В. Волков, В. В. Брже-ский, Н. А. Ушаков. - СПб.: Гиппократ, 2003. -316 с.
2. Гундорова Р. А. Причины, прогнозирование и профилактика рубцового астигматизма роговицы /Р. А. Гундорова, И. В. Синельщикова, Е. Н. Вериго //Вестн. офтальмологии. - 2002. -№2. - С. 3 - 6.
3. Использование плазмы высокочастотного разряда для улучшения биосовместимости полимерных материалов в офтальмологии /И. Ш. Аб-дулин, В. Е. Брагин, А. Н. Быканов и др.//Матер. конф. «Физика низкотемпературной плазмы». -Петрозаводск, 1995. - Ч. 3. - С. 398 - 399.
4. Курбанова Н. Ф. Анализ осложнений хирургических вмешательств при травмах органа зрения //Вестн. офтальмологии. - 2003. - №6. -С. 41 - 42.
5. Курбанова Н. Ф. Характер проведенных операций при травме глаза и ее последствиях по данным специализированного отделения //Вестн. офтальмологии. - 2003. - №5. - С. 45 - 46.
6. Мороз З. И. Современные оптико-реконструктивные вмешательства при патологии роговицы /З. И. Мороз, Ю. Ю. Калинников, Е. В. Ковшун //Офтальмохирургия. - 2006. - №4. - С. 66 - 68.
7. Мустафина Ж. Г. К вопросу о причинах слепоты населения Казахстана //«Вопросы офтальмологии»: Тр. офтальмологов Казахстана. -Алма-Ата, 1975. - Т. 1. - С. 23 - 26.
8. Особенности диагностики и причины проникающих ранений заднего полюса /Р. А. Гундо-рова, Е. Н. Вериго, А. П. Тишковаи др. //Вестн. офтальмологии. - 2004. - №3. - С. 10 - 14.
Поступила 21.02.08
Yu. A. Shusterov, D. S. Karibayeva
APPLICATION MODIFIED SUTURE MATERIAL AT TRAUMAS OF A FIBROUS CAPSULE OF AN EYE IN EXPERIMENT
By the purpose of the given work was an experimental substantiation of application processed in gasdischarge plasma ophthalmologic suture material (kapron, nylon, polypropylene). For achievement of an object in view were spent morphological and experimental researches on rabbits. During daily supervision the best beara-bleness is established.
Ю. А. Шустеров, Д. С. Карибаева
К9З ФИБРОЗДЫ КАПСУЛАСЫНЬЩ ЖАРАКАТТАНУЫ КЕЗ1НДЕ МОДИФИКАЦИЯЛАНРАН Т1Г1Н МАТЕРИАЛДАРЫН ДОЛДАНУ
Жумыстыч басты максаты - газоразрядты плазмамен ечделген офтальмологиялык тИн материалыныч (капрон, нейлон, полипропилен) колдануын т^рибе жYЗiнде зерттеу. Бул максатка жету Yшiн кояндарра экперимент жасалып морфологиялык зерттеулер журпзшдк ^нделкт бакылау жузшде модификацияланран тИн материалыныч баскаларра караранда жаксы орныкканы байкалды. бчделген жmтердiч коян кез^ч фиброзды капсуласында реактивтi кабынуды аз мелшерде тудыратыны морфологиялык туррыдан дэлелдендi.
Медицина и экология, 2008, 1