CC BY
0
При л о ж ен и е 1
Килина Д. А.1, Антонюк Е. В.1, Шевелина В. Р.1, Решетова А. И.1, Ломаиа Э. Г.1, Моторин Д. В.2, Калинина О. В.1
ПРЕДИКТИВНАЯ СПОСОБНОСТЬ АЛГОРИТМОВ РШСНЕ, НЬА-ЕММА, НЬАМасЬтакег ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕРОЯТНОСТИ
РАЗВИТИЯ РТПХ ПОСЛЕ АЛЛО-ТГСК
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр имени В. А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 2ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства»
Введение. Увеличение количества аллогенных трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) и внедрение новых режимов профилактики реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) расширили возможность проводить трансплантации от частично совместимых неродственных доноров. Подбор оптимального донора является сложным процессом, требующимуглубленного анализа несоответствий в вариантах аллелей системы HLA. Различные варианты аллелей в одном HLA-локусе имеют различный набор HLA-эпитопов, которые могут быть представлены на поверхности антиген-презентирующих клеток (АПК). В настоящее время разработаны несколько алгоритмов определения потенциального риска развития РТПХ на основании данных HLA-типирования, в частности, PIRCHE (www.pircbe.org) анализирует количество несовпадающих HLA-эпитопов; HLAMachmaker (www.epitopes.net) и HLA-EMMA (www.Kla-emma.com) оценивают общее количество несовпадающих эплетов и единичных аминокислот, доступных растворителю, соответственно.
Цель работы. Изучить возможности трех алгоритмов PIRCHE, HLA-EMMA, HLAMacbcmaker как инструментов для прогнозирования потенциального риска развития РТПХ при неродственной алло-ТГСК с различной степенью совместимости донора и реципиента.
Материалы и методы. В исследовании проанализировано 74 случая алло-ТГСК с различной степенью совместимости по генам HLA-A, В, С, DRB1, DOB1, проведенных от неродственных доноров в НМИЦ им. Алмазова с 2015 по 2023 годы (рис. 1). Типирование генов HLA проводили методом SBT с использованием коммерческих наборов: Protrans S4 (Protrans, Германия) и AlleleSEOR®HLA (GenDX, Нидерланды). Статистический анализ взаимосвязи переменных оценивали с помощью библиотек Python Pandas 2.1.3, SciPy 1.10.1 и Scikit-learn 1.3.2.
Результаты и обсуждение. На основе анализа ROC-кривых были определены пороговые значения для каждого из критериев (рис. 2, табл.). Риск развития острой РТПХ достоверно определяли все алгоритмы, точность модели на основании коэффициента PIRCHE-II>4 составила 73,9%, odds ratio=4. Риск развития острой РТПХ I-II степеней достоверно определяли алгоритм HLAMactmaker>l и сумма коэффициентов PIRCHE-II и Н LAMach maker>3, при этом предсказательная сила этих моделей одинаковая (69,6% точности, odds ratio=2,4). Риск развития острой РТПХ III-IV степени наиболее точно идентифицировал алгоритм PIRCHE-I>1, обладающий точностью модели 91.3% и odds ratio=2,5. Внутри когорты реципиентов с частичной совместимостью достоверной связи с развитием РТПХ не наблюдалось ни для одного из алгоритмов, что может быть обусловлено малой выборкой. Также статистически значимой связи с развитием хронической РТПХ не наблюдалось ни для одного из алгоритмов.
Заключение. Информативными предикторами риска развития острой РТПХ являются
алгоритмы РШСНЕ, НЬАМасЬтакег и их комбинации, однако они не позволяют однозначно определить степень РТПХ. При этом, ни один из алгоритмов не информативен как предиктор риска развития хронической РТПХ. Пороговые значения, полученные в данной работе, могут быть рекомендованы в качестве дополнительного параметра при выборе несовместимого неродственного донора для ал-ло-ТГСК.
ИЗ
| ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | Ки$$1АтОША[ОРНЕМАТОЮСУАМОТкАМ$Ри$ЮЮСУ(СЕМАТОЮС1УА 1ТкАМ5Ри$10ЮС1УА) | 2024; ТОМ69; №2 |
Таблица. Взаимосвязь значений критериев Р1кСНЕ-1, Р^СНЕ-И, ШАМа^Нтакег, Н1.А-ЕММА и их комбинации с развитием каждого типа РТПХ
Группы* PIRCHE-I <1** PIRCHE-I >1 P-value*** PIRCHE-II <4 PIRCHE-II >4 P-value HLAmatch-maker il HLAmatch-maker>l P-value HLA- EMMA<3 HLA- EMMA<3 P-value (PIRCHE-II+ HLAmatchmaker) <3 (PIRCHE-II+ HLAmatchmaker)>3 P-value
Острая РТПХ (п=36) 24(66,7%] 12 (33,3%) 0,009 22(61,1%) 14(38,9%) 0,0005 22(61,1%) 14(38,9%) 0,006 27 (75%) 9 (25%) 0,023 17 (47,2%) 19(52,8%) 0,0007
Острая РТПХ 1-11 (п=28) 21 (75%) 7(25%) 0,55 19 (67,9%) 9(32,1%) 0,14 17 (60,7%) 11 (39,3%) 0,03 21 (75%) 7 (25%_ 0,09 14 (50%) 14 (50%) 0,02
Острая РТПХ III-IV (п=8) 3 (37,5%) 5 (62,5%) 0,007 3(37,5%) 5(62,5%) 0,01 5 (62,5%) 3 (37,5%) 0,393 6 (75% 2 (25%) 0,34 3 (4,0%) 5 (6,8%) 0,103
Хроническая РТПХ (п=7) 6 (85,7%) 1 (14,3%) 1,0 6 (85,7%) 1 (14,3%) 1,0 6 (85,7%) 1 (14,3%) 1,0 6 (85,7%) 1 (14,3%) 1,0 5 (6,8%) 2 (2,7%) 1,0
Примечание:* в случае присутствия у пациентов комбинаций степеней и типов РТПХ, пациент был учтен в группе с более тяжелой степенью РТПХ, при сочетании острой и хронической, пациент был учтен в группе острой РТПХ, * пороговое значение критерия, рассчитанное на основании ЮС-кривой. *** анализ проведен с использованием точного критерия Фишера при сравнении соответствующего показателя у пациентов без РТПХ.
Корсакова Н. Е.1, Капустин С. И.2, Ефремова Е. В.1, Силина Н. Н.1, Романенко Н. А.1
ОСОБЕННОСТИ АЛЛЕЛЬНОГО ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ПЛАЗМЕННЫХ ФАКТОРОВ ГЕМОСТАЗА У БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНЫМ
МИЕЛОФИБРОЗОМ
1ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России, 2СП6ГБУЗ
Введение. Тромбозы представляют одну из наиболее существенных клинических проблем при Ph-негативных миелопролифератив-ных новообразованиях (МПН), таких как истинная полицитемия (ИП), эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и первичный миелофи-броз (ПМФ). При этом наибольшая частота тромботических событий характерна для больных ИП и ЭТ, в то время как пациентов с ПМФ отличает склонность к развитию как тромботических, так и геморрагических осложнений. Кроме характеристик клеточного состава крови, предрасположенность к тем или иным гемостатическим нарушениям может быть связана с особенностями аллельного полиморфизма генов факторов гемостаза, ассоциированными с изменением активности процессов тромбообразования.
Цель работы. Оценить особенности распределения генотипов по аллельным вариантам генов плазменных факторов гемостаза, ассоциированных с процессами фибринообразования и фибриноли-за, в группе пациентов с ПЖФ.
Материалы и методы. Исследование включало 20 больных ПМФ и 58 пациентов других нозологий МПН (33 ИП, 25 ЭТ) в качестве группы сравнения. Контрольная группа (КГ) состояла из 200 практически здоровых лиц без установленных тромбозов в анамнезе. Среди обследованных больных тромботические осложнения в анамнезе имели 5 (25,0%) пациентов с ПМФ, 12 (36,4%) с ИП и 8 (32,0%) с ЭТ. Геморрагические проявления были отмечены у 4 (20,0%) больных ПМФ и у 3 (9,1%) пациентов с ИП. Проводили выявление ал-лельных вариантов генов, кодирующих коагуляционные факторы I
(FIA 4266 A/G, FI-B 455 G/A), XII (FXII 46 С/Т), XIII (FXIII-A 163
G/T) и компоненты системы фибринолиза: тканевой активатор плаз-миногена (ТРА 311 Ър Ins/Del) и ингибитор активатора плазминоге-на I типа (PAI-1 675 4G/5G). Идентификацию аллельных вариантов осуществляли при помощи метода ПЦР-ПДРФ. Для оценки степени различий частоты встречаемости (ЧВ) генотипов между группами использовали точный критерий Фишера и коэффициент «отношения шансов» (OR) с 95% доверительным интервалом (CI) (Statistica 10.0). Различия считали статистически значимыми при^<0,05.
Результаты и обсуждение. Особенностью, характерной для больных ПМФ, оказалось существенное повышение доли гомозиготных носителей варианта 46Т FXII относительно как здоровых
«Городская клиническая больница №31»
лиц (ОЯ=3,60; 95%С1 1,05—12,32; ^=0,05), так и пациентов других нозологий (табл.). Также группу больных ПМФ отличало увеличение ЧВ генотипа 16300 ГХШ-А и снижение доли гетерозигот 163 ОТ ЕХШ-А при сравнении с КГ (ОК=2,48; 95%С1 0,92-6,71; ^=0,10 и 0я=0,40; 95%С1 0,14—1,14; ^=0,10, соответственно) и пациентами с ИП и ЭТ (табл.1). Доли гомозиготных носителей аллелей 40 и 50 675 РА1-1 среди больных ПМФ имели близкие значения с некоторым увеличением последних, в то время как в других группах доли гомозигот 675 40/40 в 2 и более раз превосходили ЧВ генотипа 675 50/50 (табл.).
Заключение. Группу больных ПМФ отличали особенности распределения генотипов по аллельным вариантам ГХ11 46С/Т, ГХ1П-А 1630/Т и РА1-1 675 40/50, что может вносить вклад в характеристики гемостатического статуса, а также процессы миелопролиферации и развитие фибротических изменений.
Таблица. Распределение генотипов по аллельным вариантам генов компонентов плазменного гемостаза у пациентов с различными нозологическими формами МПН и в контрольной группе
Ген, полиморфизм Генотип n (частота встречаемости, %) ПМФ vs ИП+ЭТ
Контрольная группа (n=200) ИП+ЭТ (n=58) ПМФ („=20) OR (95% Cl) P
Fl-A, 4266 A/G 4266AA 4266AG 4266 GG 102 (51,0) 87(43,5) 11 (5,5) 33 (56,9) 18(31,0) 7(12,1) 9 (45,0) 9 (45,0) 2(10,0) 0,620 (0,223-1,724) 1,818(0,641-5,154) 0,810(0,154-4,261) 0,439 0,285 1,000
FI-B, 455 G/A 455 GG 455GA 455 AA 111 (55,5) 73 (36,5) 16(8,0) 38 (65,5) 17(29,3) 3 (5,2) 12 (60,0) 7(35,0) 1 (5,0) 0,789 (0,277-2,246) 1,299(0,442-3,820) 0,965 (0,095-9,844) 0,788 0,779 1,000
FXII, 46C/T 46 CC 46 CT 46TT 96 (48,0) 91 (45,5) 13(6,5) 24 (41,4) 31 (53,4) 3 (5,2) 7(35,0) 9 (45,0) 4 (20,0)* 0,763 (0,265-2,195) 0,713(0,257-1,978) 4,583(0,928-22,637) 0,792 0,607 0,067
FXIII-A, 163G/T 163 GG 163GT 163 TT 97(48,5) 91 (45,5) 12(6,0) 29 (50,0) 24 (41,4) 5 (8,6) 14 (70,0) 5 (25,0) 1 (5,0) 2,333 (0,788-6,913) 0,472(0,151-1,475) 0,558(0,061-5,086) 0,192 0,284 1,000
PAI-1, 675 4G/5G 675 4G/4G 675 4G/5G 675 5G/5G 68 (34,0) 96 (48,0) 36(18,0) 19(32,8) 31 (53,4) 8(13,8) 4 (20,0) 11 (55,0) 5 (25,0) 0,513(0,151-1,747) 1,065 (0,384-2,955) 2,083 (0,592-7327) 0,396 1,000 0,300
TPA, 311 bp Ins/ Del Ins/Ins Ins/Del Del/Del 53 (26,5) 94 (470) 53 (26,5) 20 (34,5) 27(46,5) 11 (19,0) 4 (22,2) 11 (61,1) 3(16,7) 0,543 (0,158-1,869) 1,804(0,613-5,308) 0,855 (0,210-3,475) 0,396 0,419 1,000
Примечание: * р<0,05 при сравнении с контрольной группой
Костин А. И., Буланов А. Ю., Клычникова Е. В., Сергеева Е. И., Набатчикова Н. А., Чиркова К. С. СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЗАГОТОВКИ КРИОПРЕЦИПИТАТА ИЗ ПУЛИРОВАННОЙ ПАТОГЕНРЕДУЦИРОВАННОЙ ПЛАЗМЫ
ГБУЗ «НИИ СП им. Н.В. Склифосовского ДЗМ»
Введение. Криопреципитат (КП) является криоглобулиновой фракцией плазмы человека. Данный компонент крови содержит повышенные концентрации фибриногена, ф. Виллебранда, VIII фактора, XIII фактора, фибронектина, а также тромбоцитарные микрочастицы. Трансфузии криопреципитата являются неотъемлемой частью лечения приобретенной коагулопатии вследствие массивной кровопотери при политравме, во время кардиохирургических вмешательств, других клинических ситуациях, а также как вспомогательный метод купирования кровотечений при некоторых врожденных коагулопатиях. В настоящее время распространен способ получения и клинического применения криопреципитата из отдельных доз
карантинизированной плазмы в объеме 30—40 мл. Также применяется технология пулирования 5—6 идентичных по группе крови доз криопреципитата в 1 контейнер с целью оптимизации его применения. Описано использование дополнительной обработки КП с помощью технологий патогенредукции (ПР) [ВаскЬо1ег Ь, 2016, Галстян Г.М. и соавт, 2020, Момот А.П. и соавт, 2020].
Цель работы. Стандартизировать технологию заготовки лечебной дозы криопреципитата из пулированной патогенредуцированной плазмы.
Материалы и методы. Проведен контроль качества заготовки КП. В качестве сырья была использована аферезная плазма 48
