CC BY
0
При л о ж ен и е 1
Соловьева М. В., Соловьев М. В., Якутик И. А., Бидерман Б. В., Рисинская Н. В., Никулина Е. Е., Обухова Т. Н., Судариков А. Б.,
Менделеева Л. П.
ПОТЕРЯ ГЕТЕРОЗИГОТНОСТИ И МУТАЦИИ В ГЕНАХ ЯА8-ЕЯК-КАСКАДА В ОПУХОЛИ РАЗЛИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ
ПРИ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЕ
ФГБУ «НМИЦ гематоло
Введение. Изучение молекулярно-генетической характеристики клеток в различных очагах опухолевого роста является актуальным направлением при множественной миеломе (ММ). Представляется важным исследование потери гетерозиготности (ПГ) и сопоставление данных с мутационным статусом генов RAS-ERK-каскада и ци-тогенетическими аберрациями.
Цель работы. Исследовать потерю гетерозиготности и мутации в генах KRAS, NRASr BRAF в субстрате опухоли различной локализации при ММ.
Материалы и методы. В одноцентровое исследование с октября 2021 по июнь 2023 г. включен 91 пациент с симптоматической ММ (37 мужчин, 54 женщины) в возрасте от 35 до 84 лет (медиана — 58). Проведено FISH-исследование CD138+ клеток костного мозга с использованием ДНК-зондов для выявления транслокаций 14q32/ IgH, 8q24/MYC, делеций 17р13/ТР53, 13ql4, 1р32, амплификации lq21 и множественных трисомий. При обнаружении t(4;14), t(14;16), dell7pl3, амплификации lq21 больного относили к группе высокого риска. Была выделена ДНК из образцов опухоли различной локализации: СЭ138+клетки костного мозга, сцДНК, плазмоцитома костная (я=10), экстрамедуллярная (я=6). В различных образцах опухоли определяли ПГ и мутации в генах KRAS, NRASBRAF. STR-профиль ДНК из полученных образцов исследовали относительно STR-профиля контрольной ДНК, выделенной из буккально-го эпителия, методом мультиплексной STR-ПЦР при помощи набора COrDIS Plus с последующим фрагментным анализом. Мутации в генах KRAS и NRAS изучали методом секвенирования по Сэнгеру и методом высокопроизводительного секвенирования. Мутацию
гии» Минздрава России
BRAF У600Е определяли методом аллель-специфичной ПЦР в реальном времени.
Результаты и обсуждение. Аберрантные локусы с ПГ определялись во всех случаях в ДНК плазмоцитомы, у 71% больных в костном мозге и у 55% пациентов в опухолевой сцДНК. Мутации в генах КА8-ЕКК-каскада выявлены у 41% пациентов с ММ. Проведен анализ парных образцов опухоли (сцДНК и С0138+ клетки костного мозга) 39 пациентов с впервые диагностированной ММ. У 21 больного в костном мозге обнаружены мутации какого-либо из трех генов, при этом у пяти пациентов (24%) аналогичные мутации выявлены и в парном образце опухолевой сцДНК в плазме. В 4 случаях выявлены мутации в генах К^и NRAS в опухолевой сцДНК в плазме при отсутствии таких же мутаций в костном мозге. Проанализирован мутационный статус трех генов в 16 образцах плазмоцитом (10 — костных, 6 — экстрамедуллярных). В образцах костных плазмоцитом выявлялись только мутации в гене KRAS (30% случаев), а в образцах экстрамедуллярных плазмоцитом — только мутации в тeneNRAS (50% случаев). У 36% больных с мутациями в гене КЯАЭ обнаружены цитогенетические аберрации высокого риска. При этом в случаях выявления мутаций в гене №КА8 признаки миеломы высокого риска (цитогенетические аберрации высокого риска/экстрамедуллярное поражение) определялисьу66,7% больных.
Заключение. При выявлении мутаций в генах А^Аб*, KRAS, BRAF в костном мозге у 24% больных аналогичные мутации детектируются и в опухолевой сцДНК в плазме. Прослежена тенденция к более частому обнаружению признаков миеломы высокого риска при наличии мутации в генеАКАб1 по сравнению с мутированным статусом гена-^ЙЛб'.
Суренков А. А. Орел Е. Б., Двирнык В. Н., Яковлева Е. В., Лихачева Е. А., Яструбинецкая О. И., Димитриева О. С., Андреев Н. В.,
Зозуля Н. И.
ПРИОБРЕТЕННАЯ ГЕМОФИЛИЯ: РЕДКАЯ ПРИЧИНА ПОСЛЕРОДОВОГО КРОВОТЕЧЕНИЯ
ФГБУ«НМИЦгематологии» Минздрава России
Введение. Приобретенная гемофилия (ПГ) — редкая коагуло-патия, обусловленная спонтанным образованием поликлональных антител (ингибиторов) к эндогенному РУШ, что клинически проявляется опасными для жизни кровотечениями у пациентов без предшествующих нарушений гемостаза в анамнезе. Ежегодная заболеваемость ПГ во всем мире составляет 1—4 случая на 1 млн. населения, среди которых 7—11% приходится на пациенток с послеродовой ПГ.
Цель работы. Представить результаты клинико-лабораторного обследования и лечения пациенток с послеродовой ПГ.
Материалы и методы. В исследование было включено 18 женщин в возрасте от 19 до 40 лет (медиана — 30 лет) с диагнозом послеродовая ПГ, которые наблюдались в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России в период с 2007 по 2023 г. Диагнозустанавливался на основании впервые возникшего геморрагического синдрома в течение года после родов, который сочетался с изолированнымудлинением АЧТВ, снижением активности РУШ <50% и наличием ингибитора РУШ >0,6 БЕ. Тяжесть геморрагического синдрома по характеру и выраженности клинических проявлений оценивалась в соответствии с классификацией ВОЗ по двум обобщенным критериям: незначительные (легкие и умеренные) и тяжелые (большие и жизнеугрожа-ющие) кровотечения. Ремиссия констатировалась при достижении активности РУ1П >50% и титра ингибитора РУП1 <0,6 БЕ.
Результаты и обсуждение. Время до возникновения первых клинических проявлений у 16 (89%) пациенток составило от 0 до 4 мес. после родов иу 2 (11%) пациенток — 6 и 8 мес. (медиана — 1,5 мес.). Дебют геморрагического синдромау 11 (61%) пациенток наблюдался
после первых родов, у 5 (28%) — после вторых и у 2 (11%) — после третьих. Время от появления первых симптомов до верификации диагноза составило от 1 до 40 нед. (медиана — 4 нед.). Клиническая картина представлена гематомным типом кровоточивостиу 13 (72%) женщин, реже отмечались маточные кровотечения — у 8 (44%), экхи-мозы и петехии — у 5 (28%), гематурия — у 1 (6%), кровоточивость десен — yl (6%), носовое кровотечение — yl (6%) и гемартроз — yl (6%). Тяжелые кровотечения встречались у 11 (61%) пациенток, незначительные — у 7 (39%). Активность FVIII варьировала в диапазоне от 0,1% до 5,4% (медиана — 0,9%), титр ингибитора FVIII — от 1,6 БЕ до 1740 БЕ (медиана — 25 БЕ). Отмечалось увеличение концентрации vWF у 11 (61%) обследованных. Динамическое наблюдение проводилось за 12 пациентками. У 5 (42%) была констатирована спонтанная ремиссия на фоне только гемостатической терапии. У 7 (58%) по причине роста титра ингибитора и прогрессирования геморрагического синдрома проводилась эрадикационная терапия. Терапевтическая ремиссия была достигнута у 6 из 7 (86%) женщин. Пациентке с резистентным течением заболевания, после нескольких курсов моно— и комбинированной эрадикационной терапии, выполнялась профилактическая гемостатическая терапия эмицизумабом (off-label) судовлетворительным эффектом.
Заключение. Полученные данные демонстрируют клинико-ла-бораторные особенности пациенток с послеродовой ПГ, которые могут быть полезны не только для повышения осведомленности врачей о данной патологии, но и необходимы для своевременной верификации диагноза и выбора правильной тактики лечения.
