CC BY
42
УДК 575.113.1:618.17:548.33
З.1. Россоха 13, С.П. Кир'яченко 13, Н.Г. Горовенко 12
https://doi.org/10.26641/2307-0404.2018.2.133943
ПОР1ВНЯЛЬНА ОЦ1НКА МОДЕЛЕЙ ГЕНЕТИЧНОГО РИЗИКУ РЕПРОДУКТИВНИХ РОЗЛАД1В, ЗУМОВЛЕНИХ ПОЛ1МОРФ1ЗМОМ ГЕН1В MTHFR, MTRR, MTR1
ДУ «1нститут генетично1 та регенеративно! медицини НАМН Украти» 1 вул. Вишгородська, 67, Кшв, 04114, Украша
Нацюнальна медична академiя тслядипломног освти iM. П.Л. Шутка 2 вул. Дорогожицька, 9, Кшв, 04112, Украша
ДЗ «Референс-центр з молекулярной дiагностики МОЗ Украти» 3 вул. Дорогожицька, 9, Кшв, 04112, Украша
SE "Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine" 1 Vyshgorodska str., 67, Kyiv, 02140, Ukraine e-mail: [email protected]
Shupyk National medical academy of postgraduate education 2 Department Medical and Laboratory Genetics Dorohozhytska str., 9, Kyiv, 04112, Ukraine e-mail: [email protected]
SI "Reference-centre for molecular diagnostic of Public Health Ministry of Ukraine" 3 Dorohozhytska str., 9, Kyiv, 04112, Ukraine e-mail: [email protected]
Ключовi слова: моделi успадкування, репродуктивш розлади, nолiморфнi варiанти, MTHFR, MTRR, MTR1, гени
Ключевые слова: модели наследования, репродуктивные расстройства, полиморфные варианты, MTHFR, MTRR, MTR1, гены
Key words: inheritance models, reproductive disorders, polymorphic variants, MTHFR, MTRR, MTR1, genes
Реферат. Сравнительная оценка моделей генетического риска репродуктивных расстройств, обусловленных полиморфизмом генов MTHFR, MTRR, MTR1. Россоха З.И., Кирьяченко С.П., Горовенко Н.Г. В научной литературе представлены противоречивые данные о влиянии полиморфизма генов фолатного обмена на риск развития репродуктивных расстройств. Цель исследования - определение роли полиморфизма генов MTHFR, MTRR, MTR1 в развитии репродуктивных расстройств путем оценки генетических моделей наследования. Было обследовано 658 пациентов с репродуктивными расстройствами из всех регионов Украины. Группой сравнения служили данные из популяционных исследований, представленные в online ресурсе (1000 genomes). Достоверных моделей риска по полиморфным вариантам гена MTHFR выявлено не было. Для генов MTRR и MTR1 нами было определено 3 и 4 значимые модели наследования соответственно. Наилучшими были доминантная модель наследования для гена MTRR и аддитивная модель наследования для гена MTR1. Частоты полиморфных вариантов исследованных генов не различались среди мужчин и женщин. Необходим дальнейший анализ для оценки влияния генетического полиморфизма и межгенных взаимодействий на риск репродуктивных расстройств с учетом показателей фолатного обмена и экзогенных факторов.
Abstract. Comparative evaluation of genetic risk models of reproductive disorders caused by MTHFR, MTRR, MTR1 gene polymorphism. Rossokha Z.I., Kyriachenko S.P., Gorovenko N.G. The scientific literature presents contradictory data about influence of folate metabolism genes polymorphism on development of risk of reproductive disorders. The aim of the study was to determine the role of MTHFR, MTRR, MTR1 gene polymorphism in the development of reproductive disorders by evaluation of genetic risk models of inheritance. 658 patients with reproductive disorders from all Ukrainian regions were examined. The data from population studies presented in the online resource (1000 genomes) served as comparison group. There were no reliable risk models for polymorphic variants of MTHFR gene. We identified 3 and 4 significant inheritance models for MTRR and MTR1 genes respectively. The best inheritance models were the dominant model for MTRR gene and the additive model for MTR1 gene. The polymorphic variants frequencies of the studied genes did not differ among men and women. Further analyse is necessary for evaluation of genetic polymorphism and intergenic interactions influence on reproductive disorders risk, taking into account folate metabolism indices and exogenous factors.
18/ Том XXIII/ 2
85
Останшм часом у свт активно проводяться дослщження генетичного полiморфiзму при мультифакторних захворюваннях, у результат яких певнi полiморфнi варiанти були визначеш як генетичнi маркери спадково! схильностi та були використанi при розробщ клiнiчних про-токолiв. Особлива увага придшялась тестуванню полiморфiзму гена МТИ¥К (677С>Т rs1801133, 1298А>С ге1801131) як маркера спадково! тром-бофши та порушень фолатного обмiну [1, 4, 8]. Впродовж останнього десятирiччя для жiнок з репродуктивними втратами та шдозрою на спадкову тромбофшю визначення полiморфiзму гена МТИЕЯ за ктшчними протоколами було обов'язковим [3]. Але подальший аналiз показав, що результати виявлення генетичного ризику та достовiрнiсть зв'язку зазначено! патологи з полiморфiзмом гена МТИЕЯ значною мiрою за-лежить вiд дизайну дослщжень, розмiру вибiрки та методiв застосованого статистичного аналiзу, що призвело до перегляду i вилучення до-слщження полiморфiзму гена МТИЕЯ iз окремих нащональних протоколiв [5]. Адекватна ощнка генетичного ризику можлива за умови роз-рахунку моделей успадкування в репрезен-тативнiй, по вiдношенню до дизайну до-слiдження, вибiрцi. Успадкування бшьшост мультифакторних захворювань найбiльш адекватно описують чотири моделi: адитивна, домь нантна, рецесивна та мультиплiкативна, як в окремих випадках застосовуються залежно вiд iснуючих вихвдних умов, припущень та вщ-повiдностi закону Хард^Вайнберга [2]. Досить часто результати подiбних статистичних розра-хункiв моделей успадкування, якщо вони про-водилися та базувалися на недостатнiй кiлькостi дослщжень, мали наближенi результати, i вщповщно в подальшому не пiдтверджувалися або спростовувалися. Як свiдчить досвiд, для виявлення асощаци однонуклеотидного пол> морфiзму з розвитком мультифакторного за-хворювання при рецесивнiй моделi успадкування (з рiвнем значущостi менше 0,05, статистичною потужнiстю не менше 80%) потрiбнi вибiрки розмiром вiд декiлькох тисяч пащенпв, залежно вiд частоти розповсюдження рецесивного алеля. Тому при менших вибiрках варто розрахувати всi можливi моделi успадкування, що безумовно стосусться i полiморфiзму генiв фолатного обмшу, при оцiнцi впливу яких на репродуктивш розлади було виявлено численш суперечливi результати. Мета дослiдження - визначення ролi полiморфiзму генiв МТИЕЯ, МТШ, МТЮ у розвитку репродуктивних розладiв шляхом оцiнки генетичних моделей успадкування.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛЩЖЕНЬ
Було обстежено 658 пащенпв з репродуктивними розладами з ycix регiонiв Украши (загальна група), яю вiдповiдали критерiям включення в дослщження: наявнiсть в анамнезi безплiддя понад п'ять рокiв або раннiх репродуктивних втрат. Критерiями виключення з дослщження були аномалп карiотипy в подружит пар^ аномалп та вади розвитку статевих органiв, трубно-перитонеальне безплiддя в жшок, хронiчнi шфекцшш та статевi захворю-вання, соматична та злояюсна патологiя, ожи-ршня. Пацieнти, залyченi в дослiдження, надали iнформованy згоду на проведення молекулярно-генетичного дослiдження полiморфiзмy генiв MTHFR, MTRR, MTR1. До загально! групи увш-шло 259 пацieнтiв iз безплiддям у шлюбi понад 5 роюв (195 жшок i 64 чоловши) та 399 пацieнтiв з подружшх пар з раннiми репродуктивними втратами в анамнезi (290 жшок i 109 чоловiкiв). У якосп групи порiвняння використовували дат попyляцiйних вибiрок з Online бази 1000 genomes. Статистично! рiзницi за вiковими та антро-пометричними показниками мiж чоловiками та жшками виявлено не було (p>0,05). Середнш вiк обстежених жiнок становив 32,99±0,24 року, а чоловiкiв - 34,4±0,38 року. Молекулярно-гене-тичне дослiдження полiморфних варiантiв генiв MTHFR (C677T, rs1801133 та А1298С, rs1801131), MTRR (A66G, rs1801394), MTR1 (A2756G, rs1805087) проводили iз використанням моди-фшованих протоколiв методами алельспе-цифiчно! полiмеразно! ланцюгово! реакци (ПЛР) для полiморфiзмy A1298C за геном гена MTHFR та ПЛР з наступним аналiзом полiморфiзмy довжини рестрикцiйних фрагментiв (ПДРФ) для шших полiморфних варiантiв гешв [7]. Реакцiю амплiфiкацil проводили в амплiфiкаторi Analytik Jena (Нiмеччина). Специфiчнi фрагменти ампл> фiкyвали, використовуючи праймери
виробництва «Metabion» та комерцiйний набiр для ПЛР DreamTaqGreen PCR MasterMix виробництва «ThermoScientific» (США). Продукти амплiфiкацil фрагментiв ДНК генiв MTHFR (C677T), MTRR (A66G), MTR1 (A2756G) тд-лягали пдролггичному розщепленню вщповщ-ними ендонуклеазами рестрикци Hinfl, NdeI та HaeIII виробництва «ThermoScientific» (США). Рестрикщю проводили в мшротермостат TDB-120 виробництва Biosan (Латвiя) при 37°С протягом 12 годин. Реакщю зупиняли шдви-щенням температури (до 65°С для ендонуклеаз Hinfl, NdeI та до 80°С для HaeIII) впродовж 20 хвилин. Рестрикцiйнi фрагменти гена MTRR до-слiджyвали у 3% агарозному гел^ генiв MTHFR
(C677T) та MTR1, а також продукти алельспе- допомогою системи гель-документацп
цифiчноl ПЛР для гена MTHFR (А1298С) - у microDOC з УФ трансшюмшатором вироб-
2% агарозному гелi (агароза виробництва ництва «Cleaver Scientific» (рис. 1-4). «Cleaver Scientific», Великобриташя), за
Рис.1. Електрофореграма продуктiв ПДРФ аналiзу гена MTHFR (C677T)
генотип С/С-4, 7, 8, 10 генотип С/Т-1-3, 5, 9, 11 генотип Т/Т- 6
Рис. 2. Електрофореграма продук^в ами. пфикаци гена MTHFR (A1298C) генотип А/А - 1, 3, 4; генотип С/С - 2; генотип А/С - 5
151п.н. 124п.н.
Рис. 3. Електрофореграма продук^в ПДРФ ан^зу гена MTRR (A66G) генотип А/А - 3; генотип A/G - 2, 4-7, 9; генотип G/G- 1,8
Рис. 4 Електрофореграма продукив ПДРФ ан^зу гена MTR1 (A2756G) генотип А/А - 3, 5-7; генотип A/G- 1, 2; генотип G/G- 4
18/ Том XXIII/ 2
87
Статистичш розрахунки проводилися стан-дартними пакетами програми Excel 2010 (л> цензшний номер K9366093I 2016) та програми з вщкритим доступом SNPStats (https://www.snps-tats.net/start.htm). Частоти генотитв для кожного полiморфного варiанта гешв перевiряли на вщ-повiднiсть рiвновазi Хардi - Вайнберга (http://www.oege.org/software). Найкращу модель успадкування обирали, порiвнюючи обраховаш в статистичних програмах показники %2 та OR.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА IX ОБГОВОРЕННЯ
Розподiл частот генотипiв за полiморфними варiантами гена MTHFR (677C>T та 1298А>С) у загальнiй груш та в груш порiвняння вщповщав закону Хардi-Вайнберга (p>0,05). При порiвняннi частот генотипiв у цих групах достовiрних вщ-мiнностей та достовiрних моделей успадкування
виявлено не було (табл.). Частота розподшу генотипiв за полiморфним BapiaHTOM гена MTR1 (2756A>G) у групах, залучених до дослщження, також вiдповiдaлa закону Хapдi-Вaйнбеpгa (p>0,05). Невiдповiднiсть закону Хард>Вайн-берга (х2=6,70; р=0,01) було визначено для групи поpiвняння за геном MTRR (66 A>G), але в зaгaльнiй груш таких вщхилень виявлено не було (%2=0,43; р=0,51). Частоти вказано! популяцшно1 вибipки було обрано для подальших статистичних обpaхункiв, враховуючи вщсутнють iнших репрезентативних вибipок у пpогpaмi 1000 genomes. Нами було проведено aнaлiз всiх можливих моделей ризику репродуктивних роз-лaдiв для полiмоpфних вapiaнтiв генiв MTR1 (2756A>G) та MTRR (66 A>G) (табл.).
Розподш пол1морфних вар1ант1в за генами MTHFR, MTRR, у пащент1в загальноУ групи та групи пор1вняння
MTR1
Ген Генотип Загальна група Група поршняння X2 p OR(95% Cl)
MTHFR 677C>T Адитивна модель
677СС 289/43,92 204/40,56 1,28 0,26 1,15(0,91-1,45)
677CT 288/43,77 231/45,92 0,92(0,73- 1,16)
677TT 81/12,31 68/13,52 0,90(0,64-1,27)
Рецесивна модель
С/С+С/Т 577/87,69 435/86,48 0,37 0,54 1,11(0,79-1,57)
Т/Т 81/12,31 68/13,52 0,90(0,64- 1,27)
Домшантна модель
С/С 289/43,92 204/40,56 1,32 0,25 1,15(0,91- 1,45)
С/Т+Т/Т 369/56,08 299/59,44 0,87(0,69- 1,10)
Мультипл1кативна модель
С 866/65,81 639/63,50 1,31 0,25 1,11(0,93- 1,31)
Т 450/34,19 367/36,50 0,90(0,76- 1,07)
MTHFR 1298 А>С Адитивна модель
1298AA 318/48,33 239/47,51 0,07 0,79 1,03(0,82- 1,30)
1298AC 261/39,66 213/42,34 0,90(0,71- 1,13)
1298CC 79/12,01 51/10,14 1,21(0,83- 1,76)
Домшантна модель
АА 318/48,33 239/47,51 0,08 0,78 1,03(0,82- 1,30)
A/C+C/C 340/51,67 264/52,49 0,97(0,77- 1,22)
MTHFR 1298 А>С Рецесивна модель
A/A+A/C 579/87,99 452/89,86 1,00 0,32 0,83(0,57- 1,20)
C/C 79/12,01 51 /10,14 1,21(0,83- 1,76)
Мультиплшативна модель
A 897/68,16 691/68,69 0,07 0,79 0,98(0,82- 1,16)
C 419/31,84 315/31,31 1,02(0,86- 1,22)
Продовження таблицI
Ген
Генотип Загальна група Група поршняння X2 Р OR(95% С1)
Адитивна модель
66АА 128/19,45 129/25,65 4,04 0,04 0,70(0,53 -0,92)
66AG 315/47,87 222/44,14 1,16 (0,92-1,47)
66GG 215/32,67 152/30,21 1,12(0,87-1,44)
Домшантна модель
А/А 128/19,45 129/25,65 6,34 0,01 0,70(0,53-0,92)
A/G+G/G 530/80,55 374/74,35 1,43(1,08-1,89)
Рецесивна модель
A/A+A/G 443/67,33 351/69,77 0,80 0,37 0,89 (0,69-1,15)
G/G 215/32,67 152/30,21 1,12(0,87-1,44)
Мультиплiкативна модель
А 571/43,39 480/47,71 4,30 0,04 0,84(0,71-0,99)
G 745/56,61 526/52,29 1,19 (1,01-1,40)
Адитивна модель
2756АА 377/57,29 224/45,81 16,21 0,0006 1,59(1,25-2,01)
2756AG 240/36,47 216/44,17 0,73(0,57-0,92)
2756GG 41/6,23 49/10,02 0,60(0,39-0,92)
Рецесивна модель
А/А+А^ 617/93,77 440/89,98 5,57 0,02 1,68 (1,09-2,58)
G/G 41/6,23 49/10,02 0,60 (0,39-0,92)
Домiнантна модель
А/А 377/57,29 224/45,81 14,8 0,001 1,59 (1,25-2,01)
A/G+G/G 281/42,71 265/54,19 0,63(0,50-0,80)
Мультиплшативна модель
А 994/75,53 664/67,89 16,14 0,0007 1,46(1,21-1,75)
G 322/24,47 314/32,11 0,69(0,57-0,82)
MTRR (A66G)
MTR1 2756
A>G
Як видно з таблищ, нами було виявлено три значущi моделi успадкування в розвитку репро-дуктивних розладiв для полiморфних варiантiв за геном МТКЯ (66 A>G): адитивну, домiнантну та мультиплшативну. Домiнантна модель успадкування мала найкращi показники %2 та OR. Тобто за результатами нашого дослiдження ризик розвитку репродуктивних розлавдв пiдвищувався майже в 1,5 рази за наявност в пацieнтiв ге-нотипiв 66AG та 66 GG порiвняно з генотипом 66АА, для якого було встановлено асощащю зi зниженням ризику розвитку репродуктивних розладiв.
При розрахунку моделей успадкування для полiморфних варiантiв гена МТШ нами визна-чено, що вс чотири розрахованi моделi були значущими. Але найбiльш показовими з ураху-ванням порiвняних показникiв %2 та OR були адитивна та мультиплшативна моделi успадку-
вання, якi майже не розрiзнялися мiж собою. З наведених у таблищ результапв дослщження видно, що в пацieнтiв загально! групи вочевидь спостерiгаeться збiльшення частоти розпов-сюдження генотипу 2756АА та зниження частоти розповсюдження генотипiв 2756AG i 2756GG за геном MTR1, на вiдмiну вiд групи порiвняння. Такi самi особливостi було шд-тверджено в значущiй мультиплiкативнiй моделi для загально! групи пацieнтiв, на вiдмiну вiд групи порiвняння: значуще пiдвищення частоти розповсюдження алеля 2756А та значуще зниження частоти розповсюдження алеля 2756G (табл.). Обидвi значущi моделi вказують на зро-стання ризику репродуктивних розладiв за наявносп в пацieнтiв генотипу 2756АА або алеля 2756А в 1,59 та в 1,46 разу вщповщно. А генотипи 2756AG i 2756GG або алель 2756G, навпаки, знижували цей ризик в обстежених
18/ Том XXIII/ 2
89
КЛ1Н1ЧНА МЕДИЦИНА
нами пащенпв. Отримаш нами даш та визначенi двi найбшьш значущi моделi успадкування не суперечать результатам окремих дослiджень, в яких також було описано подiбний протективний ефект для 2756G алеля та надано вiдповiдне патогенетичне пояснення [6]. У нашому до-слiдженнi адитивна модель успадкування для
полiморфiзму 2756А^ за геном МТШ була найбшьш значущою. Наступним етапом до-слщження було проведення порiвняльного аналiзу частот полiморфних варiантiв за до-слщженими генами серед чоловiкiв та жшок загально! групи (рис. 5).
Рис. 5. Розподш полiморфних ва|)1аи'мв досл1джених генiв фолатного обмiну в ж1мок' та чоловiкiв iз загальмоТ групи
Достовiрних вiдмiнностей у частот розподiлу генотипiв за дослiдженими генами фолатного обмшу серед чоловiкiв та жшок нами виявлено не було (р>0,05), представленi частоти роз-повсюдження генотипiв вiдповiдали закону Хардi-Вайнберга. Встановлеш нами особливостi генетичного ризику, зумовленого полiморфiзмом генiв фолатного обмiну, вказують на необхщ-нiсть дослiдження мiжгенних взаeмодiй в оцiнцi ризику репродуктивних розладiв. А виявленi асощацп МТЯЯ домшантно! та МТЯ1 адитивно! моделей успадкування з розвитком репродуктив-них розладiв пiдтверджують важливiсть забезпечення ошб репродуктивного вiку кофакторами фолатв в однокарбоновому метабо-лiзмi та привертають увагу до необхiдностi аналiзу генетичного контролю процесiв, якi забезпечують бiосинтез ДНК. З iншого боку, для преконцепцшно! пiдготовки в подружшх парах призначають препарати фолiево! кислоти, а достатнють забезпечення вiтамiном В12 е не вивченою, особливо у випадку додаткового спо-живання фолiево! кислоти, що вказуе на
необхiднiсть подальшого аналiзу показникiв фолатного обмiну залежно вiд генетичного пол> морфiзму та мiжгенно! взаемодi!.
ВИСНОВКИ
1. Встановлено значущий вплив полiморфних варiантiв за геном MTRR (домiнантна модель успадкування) та полiморфних варiантiв за геном MTR1 (адитивна модель успадкування) на роз-виток репродуктивних розладiв.
2. Достовiрних моделей за полiморфними варiантами гена MTHFR (С677Т, А1298С) у ризику розвитку репродуктивних розладiв нами виявлено не було (р>0,05).
3. Частоти розповсюдження полiморфних ва-рiантiв генiв MTHFR (С677Т, А1298С), MTRR та MTR1 не розрiзнялися в чоловiкiв та жiнок з репродуктивними розладами (р>0,05).
4. Необхщний подальший аналiз впливу генетичного полiморфiзму i мiжгенно! взаемодi! на показники фолатного обмшу в подружшх парах з урахуванням екзогенних чинниюв та прийому вiтамiнних препаратiв.
90
МЕДИЧН1ПЕРСПЕКТИВИ / ЫЕШСМ РЕЯЗРЕКТШ
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Горовенко Н.Г. Роль генетического тестирования в диагностике и лечении наследственной тромбофилии в акушерско-гинекологической практике (обзор клинических протоколов и рекомендаций) / Н.Г. Горовенко, З.И. Россоха, С.П. Кирьяченко // Мед. аспекты здоровья женщины. - 2013. - № 6 (70). - С. 5-9.
2. Кутихин А.Г. Современные тенденции статистической обработки данных и представления результатов в кандидатных генетико-эпидемиологи-ческих исследованиях / А.Г. Кутихин, А.Е. Южалин, А.В. Понасенко // Фундаментальная и клинич. медицина. - 2017. - № 2 (2). - С. 77-82.
3. Россоха З.И. Диагностика и лечение наследственной тромбофилии в акушерско-гинекологи-ческой практике / З.И. Россоха, С. П. Кирьяченко, Н.Г. Горовенко // Мед. аспекты здоровья женщины. -2014. - № 6 (81). - С. 5-13.
4. Association study of folate-related enzymes (MTHFR, MTR, MTRR) genetic variants with non-
obstructive male infertility in a Polish population / M. Kurzawski, A. Wajda, D. Malinowski [et al.] // Genetics Molecular Biology. - 2015. - Vol. 38. - P. 42-47.
5. Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR) 2 Variants [Електронний ресурс]. - 2016. - Режим доступу до ресурсу: http://ltd.aruplab.com/tests/pub/0055655.
6. MTHFR C677T, A1298C and MS A2756G Gene Polymorphisms and Male Infertility Risk in a Chinese Population: A Meta-Analysis / Z. Ren, P. Ren, B. Yang [et al.] // PLOS ONE. - 2017. - Vol. 12. - P. e0169789.
7. Polymorphic variants of genes involved in homocysteine metabolism in celiac disease / K. Hozyasz, A. Mostowska, A. Szaflarska-Poplawska [et al.] // Molecular Biology Reports. - 2011. - Vol. 39. - P. 3123-3130.
8. Role of genetic mutations in folate-related enzyme genes on Male Infertility / K. Liu, R. Zhao, M. Shen [et al.] // Scientific Reports. - 2015. - Vol. 5, N 1. doi: 10.1038/srep15548
REFERENCES
1. Gorovenko NG, Rossokha ZI, Kyriachenko SP. [The role of genetic testing in the diagnosis and treatment of hereditary thrombophilia in obstetric and gynecological practice (review of clinical protocols and recommendations)]. Meditsinskie aspekty zdorov'ya zhenshchiny. 2013;6(70):5-9. Ukrainian.
2. Kutikhin AG, Yuzhalin AE, Ponasenko AV. [Current trends in statistical data processing and presentation of results in candidate genetic and epidemiological studies]. Fundamental'naya i klinicheskaya meditsina. 2017;2(2):77-82. Russian.
3. Rossokha ZI, Kyriachenko SP, Gorovenko NG. [Diagnosis and treatment of hereditary thrombophilia in obstetric and gynecological practice]. Medychni aspekty zdorovia zhinky. 2014;6(81):5-13. Ukrainian.
4. Kurzawski M, Wajda A, Malinowski D, Kazien-ko A, et al. Association study of folate-related enzymes
(MTHFR, MTR, MTRR) genetic variants with nonobstructive male infertility in a Polish population. Genetics and Molecular Biology. 2015;38(1):42-47.
5. Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR) 2 Variants. (2016). [Internet]. Available from: http://ltd.aruplab.com/tests/pub/0055655
6. Ren Z, Ren P, Yang B, et al. MTHFR C677T, A1298C and MS A2756G Gene Polymorphisms and Male Infertility Risk in a Chinese Population: A Meta-Analysis. PLOS ONE. 2017;12(1):e0169789.
7. Hozyasz K, Mostowska A, Szaflarska-Poplaws-ka A, et al. Polymorphic variants of genes involved in ho-mocysteine metabolism in celiac disease. Molecular Biology Reports. 2011;39(3):3123-30.
8. Liu K, Zhao R, Shen M, et al. Role of genetic mutations in folate-related enzyme genes on Male Infertility. Scientific Reports. 2015;5(1). doi: 10.1038/srep15548
CraTTa Hagmm^a go pegaKmï 01.03.2018
♦
18/ Том XXIII/ 2
91
