CC BY
13
24
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
процессы, способной вызывать повреждения ДНК и приводить к апоптозу, а также усиливать действие противоопухолевых препаратов. В связи с этим в настоящее время проводятся работы по разработке доноров NO, обладающих противоопухолевыми свойствами. В качестве источников биоактивного NO представляют интерес синтетические се-ранитрозильные комплексы железа (СНКЖ) на основе же-лезосерных кластеров, широко распространенных в живой природе. Как правило, СНКЖ обладают низкой растворимостью в воде, что ограничивает их применение in vivo. Нами были синтезированы и исследованы водорастворимые СНКЖ, обладающие NO-донорными свойствами.
Цель исследования — изучить цитотоксические свойства ряда водорастворимых СНКЖ.
Материалы и методы. В работе изучались цитотоксические свойства СНКЖ, содержащих в качестве лигандов тиомочевину и диметилтиомочевину. Исследования проводились на клетках аденокарциномы шейки матки человека HeLa и аденокарциномы молочной железы человека MCF7. Для определения цитотоксичности комплексов и их лигандов использован метод МТТ-окрашивания. Для изучения влияния исследуемых комплексов на клеточный цикл применялась проточная цитофлуориметрия.
Результаты. В ходе работы получены данные по цитотоксичности водорастворимых СНКЖ и их лигандов. Было показано, что комплекс с диметилтиомочевиной в качестве лиганда обладает более сильными цитотоксическими свойствами, чем комплекс с тиомочевиной. Вклад лигандов в ци-тотоксичность комплексов незначительный, так как их IC50 в несколько раз превышают IC50 для исследуемых комплексов. Полученные результаты могут свидетельствовать о том, что NO вносит значительный вклад в цитотоксичность исследуемых комплексов. Через 24 ч после введения исследуемых комплексов не обнаружено существенных изменений в профиле клеточного цикла. Дальнейшая работа связана с исследованием механизма цитотоксического действия водорастворимых СНКЖ.
Заключение. Изучены цитотоксические свойства водорастворимых СНКЖ с тиомочевиной и диметилтиомоче-виной в качестве лигандов, а также самих лигандов на 2 линиях опухолевых клеток. Цитотоксическое действие исследуемых соединений в течение 24 ч не связано с существенным изменением профиля клеточного цикла.
Н.В. Голубцова, О.С. Бурова, М.А. Барышникова, А.Ю. Барышников
ПОЛУЧЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ICO403 ПРОТИВ АНТИГЕНА CD45
ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Введение. Антиген CD45 (общий лейкоцитарный антиген) экспрессирован на поверхности всех гемопоэтиче-ских клеток, за исключением зрелых эритроцитов и их предшественников. Уровень экспрессии CD45 нарастает по мере дифференцировки гемопоэтических клеток от незрелых предшественников до зрелых форм.
Цель исследования — получение моноклональных антител (МКА) против антигена CD45.
Материалы и методы. Мышей линии BALB/С в возрасте 3—5 мес трижды иммунизировали внутривенно с интервалом 2 нед клетками пациента с острым миелобласт-ным лейкозом в количестве 10 х 106 на мышь. Слияние проводили на 3-й день после последней иммунизации с использованием клеток мышиной миеломы NS-1, при помощи раствора полиэтиленгликоля ПЭГ/ДМСО («Sigma»). Экспрессию антигена CD45 оценивали в реакции непрямой иммунофлуоресценции (РИФ). Полученные результаты оценивали на проточном цитофлуориметре BD FACSCanto™ II.
Результаты. Супернатанты, возникшие после гибридизации колоний, тестировали методом РИФ на лимфоцитах пациентов с лейкозом и здоровых доноров, клеточных линиях, экспрессирующих 80—90 % антиген-положительных клеток к маркеру CD45 и общему лейкоцитарному поверхностному антигену. В супернатанте одной из лунок была выявлена специфическая реакция к антигену CD45. Полученную гибридому дважды клонировали методом лимитирующих разведений. Образцы распределения гистограмм иммунофлуоресценции полученных МКА 1С0403 в сравнении с коммерческими антителами против CD45 [anti CD45 (F10-89-4) FITC) NOVUS a biotechne brand, NBP1-28510 «MACS Miltenyi Biotec»] показали их идентичность по интенсивности свечения и частоте встречаемости, выявляя одинаковый процент антиген-положительных клеток.
Заключение. Полученные МКА IC0403 против антигена CD45 могут служить для иммунодиагностики.
Н.Я. Гридина1, Л.П. Швачко2, А.Н. Морозов1 ВЕРАПАМИЛ КАК ВЕРОЯТНЫЙ ПРОТЕКТОР ИНДУКЦИИ ГЕНА ЭПИТЕЛИАЛЬНО-МЕЗЕНХИМАЛЬНОГО ПЕРЕХОДА (ЭМП) В МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ ЛИМФОБЛАСТАХ ПРИ ГЛИОМАХ ГОЛОВНОГО МОЗГА 1ГУ«Институт нейрохирургии им. акад. А.П. Ромоданова НАМН УкраиныI», Киев, Украина;
2ГУ«Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины», Киев, Украина
Введение. Верапамил в определенном концентрационном интервале подавляет проявления опухоль-ассоцииро-ванного воспаления, ускоряющего возникновение рецидивов глиом в послеоперационном периоде. Интерес представляет участие верапамила в подавлении механизма ЭМП, способствующего прогрессии опухолей, путем снижения экспрессии гена Snail в мезенхимальных лимфоб-ластах у пациентов со злокачественными глиомами головного мозга.
Цель исследования — проведение исследований в лим-фобластах крови пациентов со злокачественными глиомами уровня экспрессии гена Snail, который определяет переход зрелых клеток в эмбрионально-стволовой фенотип, с целью определения протекторной роли верапамила в индукции гена ЭМП.
Материалы и методы. Исследования проведены у 7 пациентов с глиомами III—IV ст., у 3 здоровых людей и у 3 пациентов с кровоизлиянием в головной мозг. Определение экспрессии генов GAPDH и Snail (ЭМП-транскрип-
Спецвыпуск / том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
