Полиморфизм АРОЕ и показатели оксидативного статуса плазмы у больных раком яичников Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

• Полиморфизм АРОЕ и показатели оксидативного статуса плазмы у больных раком яичников

Ключевые слова: малондиальдегид, общая антиоксидантная активность, аллель аполипопротеин Е4

Keywords: malondialdehyde, total antioxidant activity, apolipoproteiin E4 allele

Иванова Т.И., Хорохорина В.А., Дзиковская Л.А., Дегтярёва Е.С., Сыченкова Н.И., Крикунова Л.И.

Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф.Цыба - филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации

249036, Российская Федерация, Калужская область, г. Обнинск, ул. Королева, д. 4

APOE polymorphism and plasma oxidative status indicators of ovarian cancer patients

Ivanova T.I., Khorokhorina V.A., Dzikovskaya L.A., Degtyareva E.S., Sychenkova N.I., Krikunova L.I.

Tsyb Medical Radiological Research Center - branch of the National Medical Research Radiological Center

of the Ministry of Health of the Russian Federation

4, Korolev str., Kaluga region, Obninsk, 249036, Russian Federation

E-mail: [email protected]

В Российской Федерации рак яичников (РЯ) занимает первое место по показателю смертности от рака органов женской репродуктивной системы, и 60-70% всех диагностированных случаев выявляются на поздних стадиях заболевания. У большинства женщин РЯ развивается в отсутствие BRCA1 или BRCA2 мутаций и сопровождается оксидативным стрессом. Поэтому выявление генетических факторов, лежащих в основе развития и течения РЯ, является актуальным для персонализированной медицины.

Цель исследования. Сравнительная оценка показателей малонового диальдегида (МДА) и общей антиоксидантной активности (ОАА) плазмы, являющихся маркерами оксидативного статуса, у больных РЯ и здоровых женщин, а также анализ ассоциаций этих показателей с полиморфизмом Е2 и Е4 АРОЕ.

Пациенты и методы. Группу исследования составляли женщины в возрастном диапазоне от 45 до 75 лет. 72 человека — пациентки с диагнозом серозная аденокарцинома яичников и 110 женщин, у которых рак не диагностирован, представляли контрольную группу. Оксидативный статус плазмы оценивался по показателям малондиальдегида (МДА) и общей антиоксидантной активности (ОАА). Метод определения МДА основан на том, что при нагревании в кислой среде часть продуктов перекисного окисления ли-пидов разлагается с его образованием. Связывание молекулы МДА с двумя молекулами тиобарбитуровой кислоты приводит к появлению окрашенного комплекса, выявляемого с помощью фотометрии (длина возны 532 нм). Для определения ОАА использовали АБАП (2,2-азобис 2-метил-пропионамидин). При 37 °С каждая молекула этого вещества распадается на радикалы, которые индуцируют флуоресценцию флуоресцеина. Метод определения ОАА стандартизован по водорастворимому аналогу витамина Е — Тролоксу (6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоновая кислота), который взаимодействует с радикальными продуктами и гасит флуоресценцию. Тролокс используется в качестве эталона для оценки антиоксидантных свойств разных веществ. После добавления плазмы крови измерялась флуоресценция системы АБАП-флуоресцеин, которая сопоставлялась с калибровочной кривой для тролокса. Антиок-

сидантные свойства образца вычисляют по калибровочной прямой и выражают в мкМ_ТЕ (тролокс-эквивалент).

Для генотипирования аллелей гена аполипопротеина Е (АРОЕ rs 429358, rs 7412), использовали ДНК клеток периферической крови и методику полимеразной цепной реакции с последующей обработкой рестриктазой Cfol (Promega, США) и определением длины фрагментов рестрикции (ПЦР/ПДРФ) в полиакриламидном геле.

Статистический анализ проводили с помощью пакета программ "Statistica 6.0" (StatSoft, Inc). Для обнаружения различий между средними значениями двух выборок использовали непараметрический тест Манн-Уитни, двусторонний критерий.

Результаты. Показано, что у больных пациенток уровень ОАА (mean ± SE: 144,5 ± 11,3 мкМ_ТЕ) значимо ниже (p < 0,0001) по сравнению со здоровыми женщинами (216,7 ± 11,7 мкМ_ТЕ), а показатель МДА (60,1 ± 2,4 мкм/л) превышает контрольные значения (58,7 ± 1,7 мкм/л), но различия не достигают значимого уровня (р = 0,68) по сравнению с контрольной группой. Обратная корреляционная зависимость между параметрами МДА и ОАА плазмы наблюдается в обеих исследуемых группах, но в контроле она значима (коэффициент корреляции равен -0,31, р = 0,003), а у больных не достигла уровня статистически значимых раличий (коэффициент корреляции равен -0,15, р = 0,44).

У пациенток носительниц аллеля Е4 АРОЕ (rs 429358) значимо повышен уровень МДА в плазме крови по сравнению с лицами, у которых он отсутствует (70,7 ± 4,2 и 56,4 ± 2,9 мкм/л; р = 0,046). Выявлено незначимое повышение величины ОАА у носительниц Е4 АРОЕ (р = 0,47). В ранее проведенных нами исследованиях была показана значимая ассоциация аллеля Е4 АРОЕ с развитием серозной аденокар-циномы яичников.

Показатели ОАА и МДА не отличаются между пациентками, у которых присутствует аллель Е2 АРОЕ (rs 7412) или его нет (р = 0,83 и р = 0,5 соответственно).

Заключение. У пациенток с диагнозом рак яичников аллель Е4 (rs 429358) АРОЕ ассоциирован с повышенным уровнем МДА плазмы, являющимся маркером оксидативного стресса.

Материалы Первого Международного Форума онкологии и радиологии. Москва, 23-28 сентября 2018 г. 117