ОТВЕТНАЯ РЕАКЦИЯ ЗАРАЖЁННЫХ ЦЕРКОСПОРОЗОМ ПРОРОСТКОВ СОИ НА ДЕЙСТВИЕ ФУНГИЦИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ С УЧАСТИЕМ МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ Текст научной статьи по специальности «Сельскохозяйственные науки»

Научная статья

УДК 577.15:632.4:635.655 EDN: RZALKO

https://doi.org/10.24412/2949-2211-2024-2-4-47-55

ОТВЕТНАЯ РЕАКЦИЯ ЗАРАЖЁННЫХ ЦЕРКОСПОРОЗОМ ПРОРОСТКОВ СОИ НА ДЕЙСТВИЕ ФУНГИЦИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ С УЧАСТИЕМ МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ

Виктория Александровна Кузнецова1, Анастасия Андреевна Блинова2, Илья Борисович Огурцов3, Любовь Егоровна Иваченко3

1 Всероссийский институт генетических ресурсов растений им. Н. И. Вавилова, Дальневосточная опытная станция, г. Владивосток, Россия, [email protected]

2 Всероссийский научно-исследовательский институт сои, г. Благовещенск, Россия, [email protected]

3 Благовещенский государственный педагогический университет, г. Благовещенск, Россия, ^сЬ^пко[email protected], [email protected]

Аннотация. Сег^рот sojina Шга является одним из основных грибковых заболеваний, снижающих рентабельность выращивания сои. Вред, причиняемый этой болезнью, выражается в снижении урожайности, а также в появлении устойчивых к химическим фунгицидам штаммов грибных фито-патогенов. Необходимость поиска альтернативных стратегий защиты обусловлена несовершенством существующих методов. В этой связи возможно использование природных фунгицидов, которые не только борются с заболеваниями растений, но и активируют естественные механизмы устойчивости растений в ответ на воздействие биотических факторов.

Одной из таких групп веществ являются биологически активные соединения, получаемые посредством экстракции растительного сырья. Также важными являются микробиологические препараты на основе активных штаммов. Эти средства комплексно положительно влияют на растения, способствуя развитию физиологических адаптаций, а также эффективно борются с заболеваниями благодаря высокой фунгицидной активности.

В рамках проведённого исследования была оценена малатдегидрогеназная активность и проведена биометрическая оценка проростков, заражённых грибной инфекцией С. sojina Н^га, семена которых предварительно обрабатывались различными фунгицидными препаратами. Отбор семенного материала осуществлялся путём визуального отбора по морфологическим признакам. Активность малатдегидрогеназы определялась спектрофотометрическим методом, а электрофоретиче-ские спектры исследуемого фермента анализировались методом электрофореза на 8-процентном полиакриламидном геле с использованием соответствующих гистохимических методов. В результате проведённых исследований было установлено, что экстракт коры лиственницы проявляет наибольшую фунгицидную активность, не уступая по своей эффективности таким исследуемым химическим протравителям, как «Максим», «Экселент» и ТМТД. В ходе экспериментов наблюдалось повышение всхожести семян сои до 92 %, средняя высота проростков составила 42 см, корневая система развивалась активно, и было выявлено наличие двух дополнительных минорных форм малатдегидрогеназы, обладающих средней электрофоретической подвижностью 0,43 и 0,52. Удельная активность этой ферментной системы составила 12,83 единицы на миллиграмм белка. Кроме того, была обнаружена одна дополнительная минорная форма в варианте с Биофунгином, имеющая значение Rf 0,85, что, вероятно, можно объяснить спецификой взаимодействия между растением и грибом при инокуляции семян сои грибом вида Trichoderma viride.

Ключевые слова: соя, Сег^рога sojina Н^га, малатдегидрогеназа, удельная активность, множественные формы, фунгицидные препараты, экстракт коры лиственницы, экстракт коры берёзы, Trichoderma УШе, ТМТД, «Максим», «Экселент».

Для цитирования: Кузнецова В. А., Блинова А. А., Огурцов И. Б., Иваченко Л. Е. Ответная реакция заражённых церкоспорозом проростков сои на действие фунгицидных препаратов с участием малатдегидрогеназы //Агронаука. 2024. Том 2. № 4. С. 47-55. EDN: RZALKO. https://doi.org/10.24412/2949-2211-2024-2-4-47-55

© Кузнецова В. А., Блинова А. А., Огурцов И. Б., Иваченко Л. Е., 2024

Original article

RESPONSE OF CERCOSPOROSIS-INFECTED SOYBEAN SEEDLINGS TO FUNGICIDAL AGENTS MALATE DEHYDROGENASE IN RESPONSE TO FUNGICIDAL AGENTS

Victoria A. Kuznetsova1, Anastasia A. Blinova2, Ilya B. Ogurtsov3, Lyubov E. Ivachenko3

1 N. I. Vavilov All-Russian Institute of Plant Genetic Resources, Far East Experimental Station, Vladivostok, Russia, [email protected]

2 All-Russian Scientific Research Institute of Soybeans, Blagoveshchensk, Russia, [email protected]

3 Blagoveshchensk state pedagogical university, Blagoveshchensk, Russia, [email protected], [email protected]

Abstract. Cercospora sojina Hara is one of the major fungal diseases that reduce the profitability of soybean cultivation. The damage caused by this disease, yield reduction, as well as the emergence of fungal phytopathogen strains resistant to chemical fungicides and the imperfection of available protection measures dictate the need to search for alternative strategies. For these purposes, it is possible to use natural fungicides, which fight plant disease and at the same time mobilise natural plant resistance mechanisms in response to biotic factors. One of such substances are biologically active substances obtained by extraction of plant raw materials, as well as microbiological preparations based on active strains. They have a complex positive effect on plants, contributing to the emergence of physiological adaptations, as well as effectively fight the disease, having high fungicidal activity. Malate dehydrogenase activity and biometric evaluation of seedlings infected with fungal infection of C. sojina Hara whose seeds were treated with different fungicidal preparations were studied. Seed material was selected by visual selection based on morphological characters. Malate dehydrogenase activity was determined by spectrophotometric method. Electrophoretic spectra of the investigated enzyme were detected by electrophoresis on 8 per cent polyacrylamide gel plates by the corresponding histochemical method. As a result of the research it was obtained that the greatest fungicidal activity was shown by larch bark extract, which was not inferior in efficiency to the studied chemical dressing agents Maxim, Excelent and TMTD. The germination of soybean seeds increased up to 92 %, the average height of seedlings was 42 cm, the root system developed well and 2 additional MFs of malate dehydrogenase appeared with an average electrophoretic mobility of 0.43 and 0.52, and its specific activity was 12.83 units/mg protein. One additional minor form was detected in the variant with Biofungin with Rf 0.85, which is probably due to the specificity of the relationship between the plant and the fungus when soybean seeds are inoculated with the fungus of Trichoderma Viride species.

Keywords: soybean, Cercospora sojina Hara, malate dehydrogenase, specific activity, multiple forms, fungicidal preparations, larch bark extract, birch bark extract, Trichoderma viride, TMTD, Maxim, Excelent.

For citation: Kuznetsova VA, Blinova AA, Ogurtsov IB, Ivachenko LE. Otvetnaya reaktsiya zarazhennykh tserkosporozom prorostkov soi na deistvie fungitsidnykh preparatov s uchastiem malatdegidrogenazy [Response of cercosporosis-infected soybean seedlings to fungicidal agents malate dehydrogenase in response to fungicidal agents]. Agronauka. Agroscience. 2024;2:4:47-55 (in Russ.). EDN: RZALKO. https:// doi.org/10.24412/2949-2211-2024-2-4-47-55

Введение

Главным приоритетом в выращивании сельскохозяйственных культур является получение высоких и стабильных урожаев. Урожайность сои во многом зависит от степени поражения болезнями возделываемых сортов.

На Дальнем Востоке соя является высокорентабельной культурой, и её посевы преобладают в севообороте всех хозяйств региона. Увеличение производства зерна этой культуры осуществляется за счёт рас-

ширения посевных площадей и повышения урожайности. При этом степень поражае-мости сои болезнями варьируется от 20 до 100 % в зависимости от устойчивости сорта, агрессивности возбудителей болезней, климатических условий и применяемой агрономической практики.

Одной из основных проблем современного растениеводства остается устойчивость растений к болезням и вредителям. Этот факт в своих трудах отмечал ещё Н. И. Вавилов, который подчеркивал значимость

общей проблемы иммунитета для задач селекции. Он акцентировал внимание на том, что решающим методом в борьбе с болезнями растений является создание иммунных сортов, основанных на использовании природного иммунитета возделываемых растений, а также их диких сородичей из мирового генофонда. С тех пор, как Н. И. Вавилов обратил внимание на эту проблему, её актуальность не только не снизилась, но и значительно возросла. В настоящее время наблюдается значительный рост числа патогенных организмов и ухудшение экологической составляющей сельскохозяйственных ландшафтов как в России, так и за рубежом.

В посевах сои широко распространены микозы, бактериозы, несколько видов вирусных заболеваний. Доминирующими фитопатогенами являются возбудители сеп-ториоза (Septoria glycines T. Hemmi. Syn.), церкоспороза (Cercospora sojina Hara), пурпурного церкоспороза (Cercospora kikuchii (Matsuet Tomoyasu) Yardn), пероноспоро-за (Peronospora manshurica (Naum.) Syd. Syn.), бактериальной угловатой пятнистости (Pseudomonas glycineum Coerper) и корневых гнилей (Fusarium solani (Mart.); Rhizoctonia solani Kuehn; Ascochyta sojaecola Abramof. Syn.) [3, 5].

Церкоспороз, или округлую серую пятнистость, вызывает возбудитель - гриб Cercospora sojina, поражающий все надземные органы сои. Болезнь прогрессирует вверх по растению, достигая массового развития к концу цветения и в фазу налива бобов сои. При сильном развитии болезни урожай снижается до двух раз, уменьшается содержание масла и белка в зерне [3, 6].

Устойчивость растений к болезням связана со сложной системой их морфофизи-ологических особенностей. Они могут не подвергнуться заболеванию, поскольку фе-нофазы и цикл развития фитопатогена не совпадают. Устойчивость или слабая пора-жаемость могут быть обусловлены анатомическими особенностями строения листа, стебля, цветка и т.д. Очень часто устойчивость определяется физиологическими и биохимическими свойствами растений. Нередко защитные механизмы обусловле-

ны комбинацией различных признаков и свойств устойчивости [3, 7].

Одним из эффективных способов защиты растений от болезней является применение химических фунгицидов, при этом проводится изначально предпосевная обработка семян, призванная не только защитить всходы от фитопатогенов и фитофагов, но и стимулировать ростовую активность, определяющую продуктивность культуры [8]. Однако для экологически устойчивой агрономии, не использующей химические фунгициды, а также в плане развития органического земледелия большой интерес могут представлять новые натуральные биостимуляторы, обладающие фунгицид-ным действием и способные защитить растения от прогрессирующего заболевания, повысив урожайность сои.

Биохимическую реакцию на уровне заражённых проростков сои можно оценивать путём измерения активности малатдегидро-геназы (МДГ, КФ 1.1.1.37), которая состоит из двух субъединиц, имеет молекулярную массу 65...70 кДа и локализуется в митохон-дриальной и цитоплазматической фракциях клеток. Малатдегидрогеназа катализирует обратимую реакцию окисления яблочной кислоты (малата) до щавелевоуксусной кислоты (оксалоацетата). Исследование активности фермента позволяет выявить его роль в переносе восстановленных соединений, в частности, малата, через митохондриальные мембраны, установить функционирование челночного механизма с участием малата, который способен регулировать соотношение окисленных и восстановленных форм НАД+ в митохондриальном и цитозольном компартментах клетки и регулировать соотношение концентраций восстановленных пиридиновых нуклеотидов и оксалоацетата. Кроме того, МДГ участвует в инициировании начальных этапов глюконеогенеза, обеспечивая фосфоенолпируваткарбоксикиназ-ную реакцию субстратом [9]. Нами установлено, что на ранних стадиях онтогенеза, при переходе от состояния покоя к прорастанию происходят значительные изменения активности оксидоредуктаз, в том числе при инфицировании септориозом, но мало ис-

следована роль малатдегидрогеназы в условиях биотического стресса [10, 11].

Цель исследования - изучение ответной реакции проростков сои сорта Даурия, заражённых церкоспорозом, на действие фунгицидных препаратов с участием фермента малатдегидрогеназы.

Условия, материалы и методы

Объектом исследования явились проростки сои сорта Даурия селекции ФГБНУ ФНЦ «Всероссийский научно-исследовательский институт сои» (ФНЦ ВНИИ сои), подверженные воздействию грибковой инфекции C. sojina и обработанные следующими фунгицидными препаратами: 1 - контроль (зараженные семена), 2 - «Биофунгин» (на основе гриба штамма Trichoderma Viride, штамм АмТ-23), 3 - экстракт лиственничной коры (д. в. - проантоцианидины), 4 - фун-гицидный препарат ТМТД (д. в. - тирам), 5 - фунгицидный препарат «Максим» (д. в. -флудиоксонил), 6 - фунгицидный препарат Экселент (д. в. - клотианидин, зета-ципер-метрин), 7 - экстракт коры березы (д. в. - бе-тулин), 8 - экстракт чаги (д.в. - хромогенный комплекс). Семенной материал, заражённый грибковой инфекцией C. sojina, собран в 2023 г., проводился путём визуального отбора семенного материала по следующим морфологическим признакам: наличие на семенах неправильно-округлых, выпуклых, коричнево-серых пятен с резко выраженным бурым ободком или с расплывчатыми краями [12, 13].

Для получения экстракта растворимых белков соевых семян, навеску материала массой 0,5 г гомогенизировали и экстрагировали в фарфоровых ступках с 15 мл раствора 0,15 М хлорида натрия в течение 15 мин. при температуре 0...5 °С, затем центрифугировали в течение 15 мин. при 3000 об/мин. После центрифугирования осадок отбрасывали, а в надосадочной жидкости определяли содержание белка и активность малатдегидрогеназы. Содержание белка определяли по методу Лоури на спектрофотометре ПЭ-5400УФ при длине волны 750 нм напротив контроля в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1 см [14].

Для определения активности малат-дегидрогеназы использовался спектро-фотометрический метод [15]. Этот метод основан на катализе обратимой реакции окисления яблочной кислоты (малата) до щавелевоуксусной кислоты (оксалоацетата) [9]. Удельную активность малатдегидроге-назы определяют по изменению оптической плотности при длине волны 340 нм, регистрируя данные ежесекундно в течение 3 мин.

Расчёт удельной активности малатдегидрогеназы (МДГ) в относительных единицах на мг белка проводится по следующей формуле:

Амдг = (AD х V/ (К х t)) / С

белка

(1)

где AD - величина светопоглощения (D2-D1) за время, усл. единицы;

V - конечный объём пробы в кювете,

мл;

K - коэффициент молярной экстинкции (6,22 х 10л6 моль-1 см2);

t - время реакции, мин.;

Свел™ - содержание белка в пробе, мг.

Удельную активность МДГ (ед/мг белка) измеряли в двух биологических и трёх аналитических повторностях.

Электрофоретические спектры исследуемого фермента проводили методом электрофореза на пластинах с 8-процентным полиакриламидным гелем в камере для вертикального электрофореза Mini-PROTEAN Tetra (Bio-Rad) при 4 °C, применяя напряжение 120...140 В в концентрирующем геле и 180 В - в разделяющем [14, 16].

Визуализацию множественных форм малатдегидрогеназы проводили соответствующим гистохимическим методом [15]. После электрофореза гели промывали дистиллированной водой, а затем гели вносили в инкубационную среду, содержащую 6 мл трис HCl-буферного раствора (pH 7,8); 5 мг/ мл малата натрия; 0,1 мл НАД+ (2 мг/мл) и 2 мг/мл нитротетразолиевого синего (НСТ). Затем гели с инкубационной смесью помещали в термостат (при температуре 37.40 °С) на 30 мин. По окончанию инкубации вносили 0,2 мг/мл N-метилфеназинмето-

сульфата (ФМС) и вновь помещали в термостат до проявления зон активности фермента в виде фиолетовых полос на бесцветном фоне геля [15].

Для выявленных множественных форм (МФ) фермента определяли значения его относительной электрофоретической подвижности (Rf) и строили схемы энзимограмм.

Обработка результатов исследования выполнена с использованием статистической программы STATISTICA 10, графическое представление данных - с помощью программного обеспечения Excel (2010).

Результаты и обсуждение

Анализ биометрических характеристик и визуальный осмотр исследуемых образцов показал наличие заболевания церкоспоро-

зом во всех проростках, выраженное в низкой всхожести (38 % в контроле и 52...92 % при обработке препаратами) и в значительном увядании (рисунок 1). На некоторых образцах присутствовали коричневые пятна с тёмно-бурой окантовкой, которые располагались около главных листовых жилок.

Исключение составили образцы в варианте, обработанные фунгицидным препаратом ТМТД, в которых всхожесть составила 95 %, отсутствовали визуальные признаки заболевания, была хорошо развита корневая система, но оказалась сильно подавлена ростовая активность. Проростки были мощные, но гораздо ниже проростков в остальных вариантах опыта, в среднем высота была снижена в 2.3 раза (высота составила в среднем 18 см).

1 - контроль (зараженные семена), 2 - Биофунгин, 3 - экстракт лиственничной коры, 4 - ТМТД, 5 - «Максим», 6 - «Экселент», 7 - экстракт коры берёзы, 8 - экстракт чаги 1 - control (infected seeds), 2 - Biofungin, 3 - larch bark extract, 4 - TMTD, 5 - Maxim, 6 - Excellent, 7 - birch bark extract, 8 - chaga extract

Рисунок 1 - Биометрические показатели проростков сои, заражённых церкоспорозом и обработанных фунгицидными препаратами

Figure 1 - Biometric parameters of soybean sprouts infected with cercospora and treated

with the fungicidal preparations

Самые высокие и мощные проростки были в варианте опыта с обработкой экстрактом лиственничной коры. Всхожесть при этом составила 92 %, высота растений 42 см, листья были насыщенного зелёного окраса, практически отсутствовали визуальные признаки заболевания. Можно пред-

положить, что экстракт коры лиственницы проявляет явное фунгицидное действие и может составить альтернативу химическим протравителям, не вызывая стрессовое состояние у проростков сои, которое явно проявляется в варианте опыта с ТМТД (рисунок 1).

В седьмом варианте эксперимента, в образцах, заражённых церкоспорозом и обработанных экстрактом коры берёзы, проростки сои оказались не такими высокими, как при обработке экстрактом коры лиственницы. Однако всхожесть составила 90 %, проростки были правильно развиты, не наблюдалось явных признаков заболевания, корневая система развилась хорошо, а листья имели насыщенный зелёный цвет. Это указывает на то, что данный экстракт можно рассматривать как биологический фунгицид, который также может быть использован в борьбе с церкоспорозом сои.

В варианте опыта с препаратом «Био-фунгин» также была выявлена высокая фун-гицидная активность, что проявилось в высокой всхожести (87 %), мощной корневой системе, хорошо развитых проростках насыщенного тёмно-зелёного цвета и отсутствии признаков заболевания. Эти результаты обосновывают необходимость дальнейших полевых исследований и возможной регистрации этого препарата в Российской Федерации в качестве биологического фунгицида (рисунок 1).

В вариантах эксперимент с химическими фунгицидами «Максим» и «Экселент»

А

были зарегистрированы средняя всхожесть (51 % и 39 % соответственно) и визуальное наличие признаков заболевания. Эти факторы позволяют предположить недостаточную эффективность указанных фунгицидов против исследуемого заболевания.

Анализ удельной активности малатде-гидрогеназы в проростках сои, заражённых церкоспорозом, показал самые высокие значения в диапазоне 12,83.13,55 ед/мг белка в вариантах опыта с ТМТД и «Максимом» (рисунок 2А), что, скорее всего, связано с сильным фунгицидным действием данных препаратов и высокой отзывчивостью проростков на их действие. Самое низкое значение активности обнаружено в образцах проростков сои, обработанных экстрактом коры берёзы, значение которого составило 8,54 ед/мг белка, что ниже контрольных образцов заражённых проростков (10,18 ед/мг белка), что может характеризовать низкую отзывчивость исследуемых образцов. Во всех исследуемых образцах обнаружены по четыре МФ с равной 0,08; 0,7; 0,82 и 0,92, что связано со стабильностью данных форм и их устойчивостью к заболеванию семян сои церкоспорозом (рисунок 2Б).

Б

Rf

0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1

1 2 3 4 5 6 7

8

V

+

1 - контроль (заражённые семена), 2 - «Биофунгин», 3 - экстракт лиственничной коры, 4 - ТМТД, 5 - «Максим», 6 - «Экселент», 7 - экстракт коры берёзы, 8 - экстракт чаги 1 - control (infected seeds), 2 - Biofungin, 3 - larch bark extract, 4 - TMTD, 5 - Maxim, 6 - Excellent, 7 - birch bark extract, 8 - chaga extract

Рисунок 2 - Удельная активность (А) и схема энзимограмм (Б) МДГ проростков сои, зараженных церкоспорозом и обработанных фунгицидными препаратами

Figure 2 - Specific activity (A) and enzymogram diagram (B) of MDH of soybean seedlings infected with cercospora and treated with the fungicidal preparations

В ходе эксперимента на проростках, семена которых были обработаны «Биофун-гином», экстрактом коры лиственницы и фунгицидом «Максим», было обнаружено по две дополнительных формы фермента МДГ с одинаковой средней электрофорети-ческой подвижностью, равной 0,43 и 0,52. Это, вероятно, указывает на фунгицидное действие препаратов на физиологическом уровне, а также на увеличение устойчивости проростков к рассматриваемому патогену благодаря обработке семян этими средствами.

Также была выявлена одна дополнительная минорная форма МДГ в варианте с «Биофунгином», с Rf, равным 0,85. Это, скорее всего, связано со спецификой взаимодействия между растением и грибом при инокуляции семян сои грибом Trichoderma у'тде.

Выводы

На основании полученных данных можно сделать вывод, что изученные препараты по-разному влияют на патоген Сегсоврот sojina Н^га в семенах сои. Наибольшую эффективность показал фунгицид ТМТД, который увеличил всхожесть до 95 %, однако его воздействие негативно сказалось на ростовой активности проростков. В качестве альтернативных препаратов могут быть использованы исследованные природные экстракты, среди которых экстракт коры лиственницы продемонстрировал наивысшую фунгицидную активность, значительно улучшив биометрические показатели и визуально снизил уровень заражённости проростков сои. Кроме того, он повысил всхожесть до 92 %. Биохимическая оценка также показала появление двух дополнительных форм МДГ.

Список источников

1. Рубанова М. Ю., Курилова Д. А. Влияние предпосевного протравливания семян сои химическими фунгицидами на распространённость пурпурного церкоспороза // Актуальные вопросы биологии, селекции, технологии возделывания и переработки сельскохозяйственных культур: Сборник материалов 12-й Международной конференции молодых учёных и специалистов, Краснодар, 01-03 марта 2023 года. Краснодар: Федеральный научный центр «Всероссийский научно-исследовательский институт масличных культур имени В. С. Пустовойта», 2023. С. 226-230. https://doi. org/10.25230/conf12-2023-226-230

2. Синеговская В. Т. Научное обеспечение эффективного развития селекции и семеноводства сои на Дальнем Востоке // Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021. Т. 25. № 4. С. 374-380. https:// doi.org/10.18699/VJ21.040

3. Торопова Е. Ю., Колесникова Т. П., Царькова М. Ф. Листостеблевые болезни сои на сортах разных групп спелости в условиях Амурской области // Вестник НГАУ (Новосибирский государственный аграрный университет). 2024. № 3 (72). С. 104-112. https://doi.org/10.31677/2072-6724-2024-72-3-104-112

4. Фокина Е. М., Разанцвей Д. Р. Селекция на повышение иммунитета при создании новых сортов сои // Вестник КрасГАУ. 2023. № 4 (193). С. 30-37. https://doi.org/10.36718/1819-4036-2023-4-30-37

5. Семенова Е. А., Колесникова Т. П. Использование фунгицидных протравителей при выращивании сои в Амурской области // Защита и карантин растений. 2023. № 2. С. 10-13. https://doi. org/10.47528/1026-8634_2023_2_10

6. Заостровных В. И., Кадуров А. А. Селекционная ценность сортообразцов сои различных групп спелости для условий лесостепи Кемеровской области // Вестник Российской академии естественных наук. Западно-Сибирское отделение. 2019. № 22. С. 136-146. URL: https://www.eNbrary.ru/item.asp7ed-n=wqcwrh&ysdid=m4qezpr4th496960086

7. Устойчивость культурной и дикой сои при искусственном заражении патогеном Septoria glycines Hemmi / Г. Н. Веремейчик, Е. В. Бродовская, Е. С. Бутовец, Л. М. Лукьянчук // Дальневосточный аграрный вестник. 2020. № 4 (56). С. 5-11. http://doi.org/10.24411/1999-6837-2020-14041

8. Торопова Е. Ю. Каменев И. А. Предпосевная подготовка семян сои в лесостепи Западной Сибири // Защита и карантин растений. 2022. № 2. С. 10-16. https://doi.org/10.47528/1026-8634_2022_2_10

9. Практикум по биохимии сельскохозяйственной продукции: учеб. пособие для вузов / В. В. Рогожин, Т. В. Рогожина // Санкт-Петербург: ГИОРД, 2016. 480 с. ISBN 978-5-98879-172-0

10. Активность оксидоредуктаз семян и проростков сои в условиях грибковой инфекции Septoria glycines Hemmi / В. А. Кузнецова, А. А. Блинова, О. Н. Тарасова, Л. Е. Иваченко // Аграрный вестник

Урала. 2020. № 7 (198). С. 47-55. https://doi.org/10.32417/1997-4868-2020-198-7-47-55

11. Огурцов И. Б., Иваченко Л. Е., Кузнецова В. А. Активность оксидоредуктаз проростков сои на ранней стадии онтогенеза // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2023. Т. 53. № 12. С. 35-44. https://doi.org/10.26898/0370-8799-2023-12-4

12. Определитель болезней растений / М. К. Хохряков, Т. Л. Доброзракова, К. М. Степанов, М. Ф. Летова; под общ. ред. М. К. Хохрякова // Санкт-Петербург: Лань, 2003. 592 с. ISBN: 5-8114-0479-4. URL: https://djvu.online/file/ct0QhiFLjdJW?ysdid=m4qf2q1sik125955311

13.ПересыпкинВ.Ф.Сельскохозяйственнаяфитопатология:учеб.длявузов.Москва:Агропромиздат, 1989. 479 с. ISBN: 5-10-000292-1. URL: https://vk.com/doc272923737_337693764?hash = HTkrowbiNn1Og-zOqktYp7zsgrWxLPeQzbv8XgdEyqMD&dl=AgrPToTBz67FZtZtw3GCeEXvDtjWxDgG3Vfs4YDTpeT

14. Молекулярная биология. Практикум: учебное пособие для вузов / А. С. Коничев, И. Л. Цветков, А. Б. Комаров, Т. Н. Шамшина, А. П. Попов; под редакцией А. С. Коничева. Москва: Издательство Юрайт, 2024. 169 с. ISBN 978-5-534-12544-3.

15. Методы изучения полиморфизма ферментов сои: учебное пособие / Л. Е. Иваченко, В. А. Кашина, Е. С. Маскальцова, В. И. Разанцвей, Е. М. Стасюк, И. А. Трофимцова; под редакцией Л. Е. Иваченко. Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2008. 142 с. URL: https://vk.com/doc89820209_455869627?hash=QCZMCX-wFEaC1qut9yl6IHJ0UGWZYmq5j5lD9oo3iOzz&dl=JkuA72IjLkF3NVRxHuO7MWhTtkzoZ7VdUZaUL57JWDo

16. Стручкова И. В., Кальясова Е. А. Теоретические и практические основы проведения электрофореза белков в полиакриламидном геле: Электронное учебно-методическое пособие. Нижний Новгород: Нижегородский госуниверситет, 2012. 60 с. URL: https://www.docdroid.net/RRwMI-Of/struchkova-kalyasova-pdf

References

1. Rubanova MYu, Kurilova DA. Vliyaniye predposevnogo protravlivaniya semyan soi khimicheskimi fungitsidami na rasprostranonnost' purpurnogo tserkosporoza [Effect of pre-sowing treatment of soybean seeds with chemical fungicides on the prevalence of purple cercospora blight]. Aktual'nyye voprosy biologii, selektsii, tekhnologii vozdelyvaniya i pererabotki sel'skokhozyaystvennykh kul'tur: Sbornik materialov l2-y Mezhdunarodnoy konferentsii molodykh uchonykh i spetsialistov, Krasnodar, 01-03 Marta 2023. Current issues in biology, breeding, technology of cultivation and processing of agricultural crops: Collection of materials from the 12th International Conference of Young Scientists and Specialists, Krasnodar, March 01-03, 2023. Krasnodar: Federal'nyy nauchnyy tsentr «Vserossiyskiy nauchno-issledovatel'skiy institut maslichnykh kul'tur imeni VS. Pustovoyta», 2023. Krasnodar: Federal Research Center «All-Russian Research Institute of Oil Crops named after VS. Pustovoit», 2023;226-230. (in Russ.). https://doi.org/10.25230/conf12-2023-226-230

2. Sinegovskaya VT. Nauchnoe obespechenie effektivnogo razvitiya selekcii i semenovodstva soi na-Dal'nem Vostoke [Scientific provision of an effective developmentof soybean breeding and seed production in the Russian Far East]. Vavilovskij zhurnal genetiki i selekcii. Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2021;25:4:374-380. (in Russ.). https://doi.org/10.18699/VJ21.040

3. Toropova EYu, Kolesnikova TP, Tsarkova MF. Listosteblevyye bolezni soi na sortakh raznykh grupp spelosti v usloviyakh Amurskoy oblasti [Leaf-stem diseases of soybean on varieties of different ripenity groups in the conditions of the Amur region]. Vestnik NGAU (Novosibirskiy gosudarstvennyy agrarnyy uni-versitet). Vestnik NGAU (Novosibirsk state agrarian university). 2024;3:72:104-112. (in Russ.). https://doi. org/10.31677/2072-6724-2024-72-3-104-112

4. Fokina EM, Razantsvey DR. Selektsiya na povysheniye immuniteta pri sozdanii novykh sortov soi [Breeding for increasing immunity when creating new soybean varieties]. Vestnik KrasGAU. Bulletin of KSAU. 2023;4:193:30-37. (in Russ.). https://doi.org/10.36718/1819-4036-2023-4-30-37

5. Semenova EA, Kolesnikova TP. Ispol'zovaniye fungitsidnykh protraviteley pri vyrashchivanii soi v Amurskoy oblasti [Application of seed treatment fungicides for growing soybean in the Amur oblast]. Zashchita i karantin rasteniy. Plant protection and quarantine. 2023;2:10-13. (in Russ.). https://doi. org/10.47528/1026-8634_2023_2_10

6. Zaostrovnykh VI, Kadurov AA. Selektsionnaya tsennost' sortoobraztsov soi razlichnykh grupp spelosti dlya usloviy lesostepi Kemerovskoy oblasti [Breeding value of soybean varieties of different maturity groups for forest-steppe conditions of the Kemerovo region]. Vestnik Rossiyskoy akademii yestestvennykh nauk. Zapadno-Sibirskoye otdeleniye. Bulletin of the Russian Academy of Natural Sciences. West Siberian Branch. 2019;22:136-146. (in Russ.). Available from: https://www.elibrary.ru/item.asp?edn=wqcwrh&ys-clid = m4qezpr4th496960086

7. Veremeichik GN, Brodovskaya EV, Butovets ES, Lukyanchuk LM. Ustoychivost' kul'turnoy i dikoy soi pri iskusstvennom zarazhenii patogenom Septoria glycines Hemmi [Pathogen resistance of cultivated and

wild soybean under artificial infection with the pathogen Septoria glycines Hemmi]. Dal'nevostochnyy agrar-nyy vestnik. Far eastern agrarian bulletin. 2020;4:56:5-11. (in Russ.). http://doi.org/10.24411/1999-6837-2020-14041

8. Toropova EYu, Kamenev IA. Predposevnaya podgotovka semyan soi v lesostepi Zapadnoy Sibiri [Pre-sown preparations for soybean seeds in the forest-steppe of Western Siberia]. Zashchita i karantin rasteniy. Plant protection and quarantine. 2022;2:10-16. (in Russ.). https://doi.org/10.47528/1026-8634_2022_2_10

9. Rogozhin VV, Rogozhina TV. Praktikum po biokhimiisel'skokhozyaystvennoy produktsii: ucheb. poso-biye dlya vuzov [Practical training in biochemistry of agricultural products: a textbook for universities]. Saint Petersburg: GIORD, 2016;480 p. ISBN 978-5-98879-172-0. (in Russ.).

10. Kuznetsova VA, Blinova AA, Tarasova ON, Ivachenko LE. Aktivnost' oksidoreduktaz semyan i pro-rostkov soi v usloviyakh gribkovoy infektsii Septoria glycines Hemmi [Activity of oxidoreductase of seeds and soybean seedlings under conditions of fungal infection Septoria glycines Hemmi]. Agrarnyy vestnik Ura-la. Agrarian bulletin of the Urals. 2020;7:198:47-55. (in Russ.). https://doi.org/10.32417/1997-4868-2020-198-7-47-55

11. Ogurtsov IB, Ivachenko LE, Kuznetsova VA. Aktivnost' oksidoreduktaz prorostkov soi na ranney stadii ontogeneza [Oxidoreductase activity of soybeen seedlings at the early stage of ontogenesis]. Sibirskiy vestnik sel'skokhozyaystvennoy nauki. Siberian herald of agricultural science. 2023;53:12:35-44. (in Russ.). https://doi.org/10.26898/0370-8799-2023-12-4

12. Khokhryakov MK, Dobrozrakova TL, Stepanov KM, Letova MF, Khokhryakova MK. (eds.). Opredeli-tel' bolezney rasteniy [Plant Disease Identifier]. Saint Petersburg: Lian, 2003;592 p. ISBN: 5-8114-0479-4. (in Russ.). Available from: https://djvu.online/file/ct0QhiFLjcIJW?ysclid = m4qf2q1sik125955311

13. Peresypkin VF. Sel'skokhozyaystvennaya fitopatologiya: ucheb. dlya vuzov [Agricultural phytopathology: textbook for universities]. Moscow: Agropromizdat, 1989. 479 p. ISBN: 5-10-000292-1. (in Russ.). Available from: https://vk.com/doc272923737_337693764?hash = HTkrowbiNn1OgzOqktYp7zsgrWx-LPeQzbv8XgdEyqMD&dl=AgrPToTBz67FZtZtw3GCeEXvDtjWxDgG3Vfs4YDTpeT

14. Konichev AS, Tsvetkov IL, Komarov AB, Shamshina TN, Popov AP, Konichev AS (eds.). Molekulyar-naya biologiya. Praktikum: uchebnoye posobiye dlya vuzov [Molecular Biology. Practical Training: A Textbook for Universities]. Moscow: Nauka Publ. Yurait, 2024;169 p. ISBN: 978-5-534-12544-3. (in Russ.).

15. Ivachenko LE, Kashina VA, Maskaltsova ES, Razantzvey VI, Stasyuk EM, Trofimtsova IA, Ivachenko LE (eds.). Metody izucheniya polimorfizma fermentov soi: uchebnoye posobiye [Methods for studying the polymorphism of soybean enzymes: a tutorial]. Blagoveshchensk: Nauka Publ. BSPU, 2008;142 p. (in Russ.). Available from: https://vk.com/doc89820209_455869627?hash=QCZMCXwFEaC1qut9yl6IHJ0UGW-ZYmq5j5lD9oo3iOzz&dl=JkuA72IjLkF3NVRxHuO7MWhTtkzoZ7VdUZaUL57JWDo

16. Struchkova IV, Kalyasova EA. Teoreticheskiye iprakticheskiye osnovyprovedeniya elektroforeza belkov v poliakrilamidnom gele: Elektronnoye uchebno-metodicheskoye posobiye [Theoretical and practical principles of conducting protein electrophoresis in polyacrylamide gel: Electronic teaching aid]. Nizhny Novgorod: Nizhny Novgorod State University, 2012;60 p. (in Russ.). Available from: https://www.docdroid.net/RRwMI-Of/struchkova-kalyasova-pdf

Информация об авторах

В. А. Кузнецова - канд. биол. наук, науч. сотр.; А. А. Блинова - науч. сотр., зав. лаб. биотехнологии;

И. Б. Огурцов - аспирант кафедры химии; Л. Е. Иваченко - д-р биол. наук, профессор кафедры химии.

Information about the authors

V. A. Kuznetsova - Cand. of Biol. Sci., Researcher; A. A. Blinova - Researcher, Head of the Biotechnology Laboratory;

I. B. Ogurtsov - Postgraduate Student of the Department of Chemistry;

L. E. Ivachenko - Dr Biol. Sci., Professor of the Department of Chemistry.

Статья поступила в редакцию 26.11.2024; одобрена после рецензирования 28.11.2024; принята к публикации 02.12.2024

The article was submitted 26.11.2024; approved aftee reviewing 28.11.2024; accepted for publication 02.12.2024