ноябрь №11 (260)
29
10.
Страхова Л.А. и др. Роль кардиоспецифических маркеров и показателей регуляции сердечного ритма у спортменов-гребцов в профилактике заболеваний сердечнососудистой системы / Л.А. Страхова, М.М. Некрасова, Т.В. Блинова, Р.С. Рахманов, В.В. Трошин, И.А. Макаров //Мед. альманах. 2013. № 2. С. 156—159. Флейшман А.Н. Медленные колебания гемодинамики. Теория, практическое применение в клинической медицине и профилактике. Новосибирск,1999. 264 с. Mazon J. et al. Effects of training periodization on cardiac autonomic modulation and endogenous stress markers in volleyball players / J. Mazon, A. Gastaldi, T.Di. Sacco, I.
Cozza, S. Dutra, H. Souza // Scand J Med Sci Sports. 2011. doi: 10.1111/j.1600-0838.
11. Рsychari S.N. et al. Inverse relation of C-reactive protein levels to heart rate variability in patients after acute myocardial infarction / S.N. Psychari, T.S. Apostolou, E.K. Iliodromitis, P.S. Kourakos, D.T. Kremastinos // Hellenic J Cardiol. 2007. Vol 48. P. 64—71.
УДК 615.322:634
Контактная информация: Contact information:
Некрасова Марина Михайловна, Nekrasova Marina, тел.: 8(831)432-70-63, phone: 8(831)432-70-63,
e-mail: [email protected] e-mail: [email protected]
ОЦЕНКА УРОВНЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА И АНТИОКСИДАНТНОЙ СПОСОБНОСТИ СЫВОРОТКИ ПРИ НЕКОТОРЫХ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ И ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ
Т.В. Блинова, Л.А. Страхова ФБУН «Нижегородский НИИ гигиены и профпатологии» Роспотребнадзора, г. Н. Новгород
Проведен анализ уровня показателей окислительной и антиокислительной способности сыворотки, полученных колориметрическим методом, у здоровых после выполнения значительных физических нагрузок и больных профессиональной бронхолегочной патологией. Установлены различия в их количественной характеристике, свидетельствующие об адекватности данных показателей здоровому и измененному состоянию организма. Метод может применяться в практике оказания медицинской помощи населению.
Ключевые слова: окислительная активность, антиоксидантная способность сыворотки, физические нагрузки, бронхолегочная патология.
T. V. Blinova, L.A. Strakhova □ EVALUATION OF OXIDANT STRESS LEVEL AND ANTIOXIDANT CAPACITY OF BLOOD SERUM IN SOME PHYSIOLOGICAL AND PATHOLOGICAL STATUSES □
FBSI «Nizhny Novgorod research institute for hygiene and occupational pathology», Rospotrebnadzor, Nizhny Novgorod.
The authors analyzed indices (obtained by colorimetric method) of oxidant and antioxidant capacity of blood serum in healthy persons after performing of considerable physical loads and in patients with occupational bronchopulmonary diseases. The differences in quantitative characteristics of the indices provided evidence about adequacy of the indices to healthy and altered status of human body. This method may be used in practice of medical aid to population.
Key words: oxidant activity, antioxidant capacity of blood serum, physical loads, bronchopulmonary diseases.
Проблема окислительного стресса (ОС) и антиоксидантной защиты организма привлекает широкий круг исследователей. При сниженной антиоксидантной защите ОС оказывает мощное деструктивное действие на органы и системы организма, способствуя развитию многих заболеваний и ухудшению общего состояния здорового человека [8, 9, 10, 11]. Свободные радикалы образуются при воздействии различных неблагоприятных факторов окружающей среды — загрязнённой атмосферы, табачного дыма, гипоксии, значительных физических нагрузок, радиации, химических соединений и, тем самым, способствуют развитию профессиональной патологии [1, 4, 5]. Маркеры ОС и антиоксидантной защиты, являясь неспецифическими показателями, могут, однако, служить информативными тестами риска ухудшения состояния здоровья, развития того или иного заболевания, оценки тяжести его течения, прогноза, эффективности лечения. Их определение может быть включено в комплекс лечебно-профилактических мероприятий, направленных на снижение концентрации свободных радикалов и активизирующих систему антиоксидантной защиты. Антиоксиданты могут явиться перспективными препаратами для лечения многих заболеваний [2, 7].
Существующие в настоящее время методы оценки состояния системы свободнорадикально-го окисления и антиоксидантной защиты организма имеют ряд недостатков. Так, прямое измерение уровня активных форм кислорода и свободных радикалов в клетках, крови, ткани или выдыхаемом воздухе затруднено, так как свободные радикалы являются короткоживущими частицами. Методы измерения вторичных продуктов окисления — 4-гидроксиалкенов, нитротирозина, 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина, восстановленного и окисленного глутатиона, изопростаноидов (такие как высокоэффективная жидкостная хроматография, газовая хроматография, масс-спектрометрия, лю-минолзависимая хемилюминесценция сложны) требуют дорогостоящего оборудования и мало доступны практике [3]. Методы ИФА, предложенные для определения некоторых маркеров антиоксидантной защиты, например супероксид-дисмутазы, пероксиредоксинов в сыворотке крови, достаточно длительны и не всегда приемлемы для постановки одного или чуть более количества образцов сыворотки.
В последние годы для оценки уровня ОС и общей антиоксидантной способности сыворотки крови стали применяться колориметрические методы, основанные на измерении пероксидов в
30
ЗНиСО ноябрь №11 (260)
сыворотке крови [6,12]. С помощью данных простых и удобных методов возможна не только констатация присутствия свободных радикалов, но и определение степени выраженности ОС и общей антиокислительной способности сыворотки, что может явиться критерием для назначения антиок-сидантной терапии.
Цель исследования — оценить информативность колориметрических методов определения состояния антиоксидантной защиты и ОС у разных категорий лиц с целью их возможного применения в практике здравоохранения.
Материалы и методы. Объектом исследования явились две группы: лица, выполняющие значительные физические нагрузки с вовлечением в работу более 2/з мышечной массы (спортсмены, занимающиеся академической греблей, n = 33), и больные с профессиональной бронхолегоч-ной патологией (n = 50). Все обследуемые проходили диспансерное наблюдение или лечение в поликлиническом отделе и клинике ННИИГП. Обследование спортсменов проводилось в состоянии покоя, через 12—14 часов после выполнения физической нагрузки и в период отдыха. Кровь у всех обследованных забиралась утром натощак.
Для количественной оценки состояния ОС и общей антиокислительной способности сыворотки был использован колориметрический микропланшетный метод с использованием наборов реагентов «PerOx (TOS/TOC) Kit» и «ImAnOx (TAS/ TAC) Kit». Уровень ОС оценивался количественно по наличию пероксидов в сыворотке крови. Для детекции продуктов реакции использовался хромоген тетраметилбензидин (ТМБ), который преобразуется в окрашенный продукт. Концентрация перекиси в образце рассчитывалась по формуле с использованием стандарта, прилагаемого к набору. Для оценки степени выраженности ОС в сыворотке крови нами использовались данные, рекомендованные производителями наборов — менее 180 мкмоль/л — низкий ОС, 180 — 310 мкмоль/л — средний окислительный стресс, более 310 мкмоль/л — высокий ОС.
Для оценки состояния антиоксидантной системы в сыворотке крови определяли об-
щую антиоксидантную способность сыворот- Я| ки. Антиоксиданты, присутствующие в образце, элиминируют определенное количество вноси- ^ мой перекиси водорода. Количество оставшейся ^ перекиси определяли колориметрически в присутствии ТМБ и пероксидазы. Разница между внесенным и измеренным количеством перекиси за определенный промежуток времени пропорциональна активности антиоксидантов, при-сутстствующих в образце. В качестве единиц антиоксидантной активности использовались эквиваленты перекиси водорода. Антиоксидантная способность выражалась в мкмолях разложившейся антиоксидантами перекиси на литр сыворотки и определялась по формуле с использованием стандарта. Для антиоксидантной способности сыворотки использовались данные, рекомендованные производителями наборов — менее 280 мкмоль/л — низкая антиоксидантная способность, 280—320 мкмоль/л — средняя антиоксидантная способность, более 320 мкмоль/л — высокая антиоксидантная способность. Для оценки адекватности степени повреждения систем сво-боднорадикального окисления и антиоксидант-ной защиты с помощью выше перечисленных показателей, последние сравнивались с содержанием в сыворотке крови малонового диальдегида (МДА), содержание которого определяли колориметрическим методом с тиобарбитуровой кислотой [13]. Статистическую обработку результатов проводили с помощью компьютерной программы «БШАзйка 6.1».
Результаты и обсуждение. Установлена зависимость между частотой выявления ОС и общей антиокислительной активностью разной степени выраженности и величиной этих показателей у лиц до выполнения физической нагрузки, после выполнения значительной физической нагрузки и больных с бронхолегочной патологией (см. таблицу).
У здоровых лиц до выполнения физической нагрузки был выявлен низкий и средний уровень ОС, при чем у большей части обследованных преобладал низкий ОС. Выявляемое наименьшее количество пероксидов в сыворотке крови составля-
Таблица. Показатели ОС и общей антиоксидантной способности сыворотки у обследованных лиц
ОС
Уровни ОС До выполнения физических нагрузок После выполнения физических нагрузок Больные с бронхолегочной патологией
Частота выявления, % Величина показателя (М ± ст) мкмоль/л Частота выявления, % Величина показателя (М±ст) мкмоль/л Частота выявления, % Величина показателя (М ± ст) мкмоль/л
Высокий 0 0 23,3 357 ± 13,6 90 728,0 ± 280,0
Средний 16,7 224,0 ± 21,2 50,0 280 ± 20,1 р = 0,001 10 260,4 ± 43,2 р = 0,001
Низкий 83,3 99,1 ± 41,0 Р = 0,001 26,7 112 ± 43,6 Р = 0,001 0 0
Антиокислительная способность
Высокая 52,1 351 ± 26,2 13,3 356,3 ± 24,2 6,2 361,0 ± 37,4
Средняя 49,7 307,8 ± 12,3 р = 0,001 6,6 290,2 ± 10,5 р = 0,002 18,1 296,1 ± 11,3 р = 0,004
Низкая 0 Менее 280 73,3 162,7 ± 76 р = 0,001 75,7 206 ± 31,5 р = 0,001
Ш №11 (260)
31
ло 40,0—50,0 мкмоль/л. Высокого уровня ОС не наблюдалось, но после значительной физической нагрузки у 1/5 обследованных он становился высоким. Наибольшее количество пероксидов в этой д группе обследованных составляло 527,0 мкмоль/л.
Увеличилась частота среднего уровня ОС. На 40 % ^z уменьшилось число лиц с низким уровнем ОС. "— После отдыха показатели ОС и антиоксидантной защиты возвращались к исходному уровню.
Почти у вех больных с бронхолегочной патологией был выявлен высокий уровень ОС, превысивший в 2 раза его значение у лиц после выполнения физической нагрузки. Из них у 15,0 % обследованных количество пероксидов в сыворотке крови достигало 780,0—1 380,0 мкмоль/л. Средний уровень ОС был выявлен у незначительного числа пациентов, низкий ОС не выявлялся.
Анализ общей антиокислительной активности сыворотки (ААС) показал, что у здоровых лиц до выполнения физической нагрузки в равной степени преобладала высокая и средней степени выраженности ААС. Средняя величина ее составила (330,2 ± 31,5) мкмоль/л. После выполнения значительной физической нагрузки у большей части обследованных антиокислительная способность сыворотки снижалась до низкого уровня. Высокая антиокислительная способность сохранялась только у 1/5 обследованных.
У больных с хронической бронхолегочной патологией также, как и у лиц после выполнения значительной физической нагрузки, преобладала низкая ААС. Высокая ААС была выявлена лишь у 6,0 % обследованных. Несмотря на проводимое лечение, положительных сдвигов в изменении показателей свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты не наблюдалось.
Выявлена обратная коррелятивная связь между показателями окислительной и ААС у лиц до выполнения и после выполнения физических нагрузок : r = -0,57; р = 0,001, r = -0,35, р = 0,017, и у больных бронхолегочной патологией — r = -0,6, р = 0,001.
Анализ содержания МДА показал, что у большей части здоровых лиц (75,8 %) до выполнения физических нагрузок содержание МДА было в пределах нормы (/0,8 ± 0,24/ мкмоль/л), а у 24,2 % — превышало этот уровень. После значительной физической нагрузки доля лиц с повышенным содержанием малонового диальде-гида увеличилась на 39,3%, достигая (1,9 ± 0,39) мкмоль/л (р = 0,001). Как правило, это были лица с высоким и средним уровнем ОС. У 80,0 % больных с хронической бронхолегочной патологией концентрация МДА в сыворотке крови была высокой (2,7 ± 0,89) мкмоль/л, превышающей норму в 2—3 раза и достигая у некоторых лиц 4,5—6,1 мкмоль/л.
Заключение. Основываясь на полученных нами результатах, можно полагать, что при значительных физических нагрузках и профессиональной бронхолегочной патологии происходят изменения системы оксидантов/антиоксидантов в сторону увеличения окислительного стресса и снижения общей антиоксидантной способности сыворотки крови. Более выраженные изменения данных показателей наблюдаются при патологии легких. Это подтверждают результаты, свидетель-
ствующие о более выраженном накоплении продуктов перекисного окисления липидов при профессиональной бронхолегочной патологии.
Представляется важным не только констатировать наличие ОС и антиоксидантной защиты, но и определить уровень этих нарушений. Используемая нами оценка окислительного стресса и антиоксидантной защиты по соответствующим уровням (высокого, среднего и низкого) вполне адекватно отражает состояние данных систем у здоровых лиц до и после воздействия физических нагрузок и профессиональной патологии легких.
Колориметрические методы, определения уровня ОС, основанные на измерении перокси-дов, могут быть рекомендованы в клинической практике, профилактической и спортивной медицине, в оздоровительных центрах, при профилактических осмотрах, в качестве мониторинга за образом жизни и режима питания населения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Соадаева С.К. Свободнорадикальные механизмы повреждения при болезни органов дыхания. //Пульмонология. 2012. № 1. С. 5—10.
2. Рахманов Р.С. Оценка состояния антиоксидантной системы как перспективное направление в прогнозировании здоровья населения //Приоритеты профилактического здравоохранения в устойчивом развитии общества: состояние, пути и проблемы: Мат. Пленума научн. совета по экологии человека и окружающей среде (12-12. XII. 2013). М., 20134. С. 307—309.
3. Морозов Ю.А. и др. Лабораторная оценка оксидативного стресса и антиоксидантной защиты / Ю.Ф.Морозов, И.И., Дементьева, М.В. Палюлина // Справочник заведующего КДЛ. 2014. № 3. С. 49—62.
4. Aslan R et.al. The correlation of the total antioxidant status (TAS), totaloxidantstatus (TOS) and paraoxonase activity (PON1) with smoking./ R. Aslan, R Kutlu, S. Civi; E.Tasyurek //Clinical Biochemistry issue 6 April 2014.vol.47. Р. 393—397.
5. De Vizcaya-Ruizet.al. Biomarkers ofoxidativestress and damage in human populations exposed to arsenic. / De Vizcaya-Ruiz, Andrea; Barbier, Olivier; Ruiz-Ramos, Ruben; Cebrian, Mariano //Mut.Res.-Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. issue 1-2 March 31. 2009. vol. 674. Р. 85—92.
6. Erel, Ozcan A new automated colorimetric method for measuring totaloxidantstatus //Clinical Biochemistry issue 12 December 2005. vol. 38. Р 1103—1111.
7. Li et.al. Cardiovascular effects and molecular targets of resveratrol. / Li, Huige; Xia, Ning; Forstermann, Ulric //Nitric Oxide. issue 2 February 15, 2012. vol. 26. Р. 102—110.
8. Neyal M et.al. Plasma nitrite levels, total antioxidant status, totaloxidantstatus, and oxidative stress index in patients with tension-type headache and fibromyalgia. / M.Neyal, F.Yimenicioglu, A. Aydeniz, A. Taskin, S. Saglam, M. Cekmen,
A. Neyal, S. Gursoy, O. Erel, A.Balat //Clinical Neurology and Neurosurgery. issue 6 June, 2013. vol. 115. Р. 736—740.
9. Niki, Etsuo Lipid peroxidation: Physiological levels and dual biological effects. //Free Radical Biology and Medicine issue 5 September 1, 2009. vol. 47. Р. 469-484.
10. ReuterSet.al. Oxidative stress, inflammation, and cancer: How are they linked? / S. Reuter, S.C.Gupta, M.M. Chaturvedi,
B.B. Aggarwal //Free Radical Biology and Medicine. issue 11 December 1, 2010. vol. 49. Р. 1603—1616.
11. Rees et. al. Oxidative damage to extracellular matrix and its role in human pathologies ./ Rees , D.Martin, Kennett, C. Eleanor; Whitelock, M. John; Davies, Michael //Free Radical Biology and Medicine issue 12 June 15. 2008. vol. 44. Р. 1973—2001.
12. Selek et. al. Oxidative imbalance in obsessive compulsive disorder patients: A total evaluation of oxidant-antioxidant status/ Selek, Salih; Herken, Hasan; Bulut, Mahmut; Ceylan, F. Mehmet; Celik, Hakim; Savas, A. Haluk; Erel, Ozcan //
32
ЗНиСО ноябрь №11 (260)
Progress in Neuropsychopharmacology & Biological Psychiatry issue 2 February 15, 2008. vol. 32. P. 487-491. 13 Ushiyama M. Determination of malonaldehyd precursor in tissues by thiobarbituric acid test //Anal. Biochem.1978. Vol.86. № 1. P. 271—278.
Контактная информация: Contact information:
Блинова Татьяна Владимировна, Blinova Tatiana, тел.: 8 (831) 419-61-94, phone: 8 (831) 419-61-94,
e-mail: [email protected] e-mail: [email protected]
-♦♦♦-
УДК 616 - 001.34; 616.8 - 009.7
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ЖИЗНИ И ВКЛАДА БОЛИ С ПРИМЕНЕНИЕМ ОПРОСНИКОВ SF-12 И «МЕТОДИКА ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА ЖИЗНИ БОЛЬНОГО»
П. Н. Морозова
ФБУН «Нижегородский НИИ гигиены и профпатологии» Роспотребнадзора, г. Н. Новгород
При обследовании больных вибрационной болезнью от воздействия локальной вибрации выявлено, что болевой синдром в области верхних конечностей связан с изменением качества жизни больных. Оценка качества жизни у больных вибрационной болезнью важна для выбора индивидуальных схем лечения и реабилитации пациентов. Наиболее удобными для этого методами являются опросники «Короткая версия опросника здоровья-12» и «Методика оценки качества жизни больного».
Ключевые слова: вибрационная болезнь, болевой синдром, качество жизни.
P. N. Morozova □ COMPARATIVE EVALUATION OF QUALITY OF LIFE AND ROLE OF PAIN WITH THE USE OF QUESTIONNAIRES SF-12 AND «METHOD FOR EVALUATING QUALITY OF LIFE IN PATIENT» □ FBSI «Nizhny Novgorod research institute for hygiene and occupational pathology», Rospotrebnadzor, Nizhny Novgorod.
Medical examination of patients with vibration disease caused by hand-arm vibration revealed pain syndrome in upper extremities was associated with the changes of quality of life in patients. Evaluation of quality of life in patients with vibration disease is important to choose individual schemes for treatment and rehabilitation of patients. The questionnaires «12-Item Short-Form Health Survey» and «Method for evaluating quality of life in patient» are the most relevant evaluation techniques. Key words: vibration disease (hand-arm vibration syndrome), pain syndrome, quality of life.
Сохранение трудового потенциала, качества жизни (КЖ) и здоровья работников является одной из важнейших задач системы здравоохранения Российской Федерации. Перспективы развития государства напрямую зависят от состояния здоровья, профессиональной активности и долголетия людей [3]. Число работающего населения в России составляет около 70 миллионов человек, из них примерно 30 % работают в условиях воздействия вредных и (или) опасных производственных факторов, способствующих развитию профессиональных заболеваний (ПЗ) [4]. Первое место в структуре ПЗ занимают болезни, связанные с воздействием физических факторов, из них 36,48 % составляет вибрационная болезнь (ВБ) [7]. Заболевание отличается многогранностью (полисиндромностью) проявлений, в том числе — хроническим болевым синдромом в области верхних конечностей.
Для изучения КЖ больных ВБ в Российской Федерации применяется опросник БР-36 [5, 8]. Он состоит из 36 пунктов, требует времени на заполнение и для подсчета результатов тестирования (по нескольким шкалам), поэтому не совсем удобен для применения в практическом здравоохранении. Для практического здравоохранения важно быстро и качественно оценить, какой фактор играет ведущую роль в снижении КЖ у конкретного пациента. От этого зависит эффективность проведения профилактических, лечебных и реабилитационных мероприятий, направленных на сохранение и укрепление здоровья трудоспособного населения. Кроме того, для детальной оценки связи характеристик боли в области рук с
изменением КЖ больных ВБ БР-36 не использовался [5, 8].
Цель исследования: провести сравнительный анализ результатов тестирования с помощью специализированных шкал и опросников для оценки интенсивности боли и качества жизни, оценить связь между изменением качества жизни и субъективными характеристиками боли у больных длительно страдающих ВБ.
Материалы и методы. Обследованы 144 пациента, страдающих ВБ от воздействия локальной вибрации, находившихся на лечении в неврологическом отделении ФБУН «ННИИГП» Роспотребнадзора. Всем больным диагноз ВБ был установлен (13,4 ± 0,5) лет назад. Возраст больных составил (55,7 ± 0,5) лет. В группу входили 94 (65,3 %) мужчины и 50 (34,7 %) женщин. Возраст пациентов на момент постановки диагноза ВБ находился в пределах от 30 до 62 лет (42,2 ± 0,6) лет. Стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации до момента выявления профессионального заболевания (ВБ) был равен (14,0 ± 0,5) лет, общий стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации — (18,6 ± 0,7) лет.
Для оценки КЖ применяли опросники: «Короткая версия опросника здоровья-12» (БР-12) [6, 9, 10]; «Методика оценки качества жизни больного» (КЖБ) [1]. Оба опросника заполняются пациентами, оба содержат вопросы, связанные с наличием болевого синдрома. БР-12 разработан на английском языке, переведен на русский язык, состоит из 12 вопросов. Время заполнения опросника составляет от 30—40 с до 2—3 мин, подсчет результатов проводится по специальному алго-