CC BY
81
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Экспериментальные модели Experimental models
у 7 здоровых доноров (в среднем в 3 раза, а у отдельных индивидуумов — в 5 раз) и у 4 вакцинированных (в среднем в 2,5 раза, но не более, чем в три раза).
Заключение. Основной вывод по результатам данного исследования заключается в том, что изменение продукции цитокинов клетками крови под воздействием ЭМИ телефона происходит индивидуально; это следует учитывать при решении вопроса о наличии или отсутствии влияния ЭМИ телефона на состояние лимфоцитов.
ОЦЕНКА ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛИНИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ОБЕЗЬЯН ВИДА МАКАК-РЕЗУС (MACACA MULATTA) АДЛЕРСКОГО ПИТОМНИКА
Карал-оглы Д.Д., Игнатова И.Е., Мухаметзянова Е.И., Гварамия И.А., Агрба В.З.
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт медицинской приматологии», Сочи, Россия
Введение. Широко известно, что филогенетическое родство представителей отряда приматов делает обезьян адекватной моделью для воспроизведения на них различных патологических состояний человека. Данные, полученные на обезьянах, с минимальной коррекцией можно экстраполировать на людей, для чего необходимы точные сведения о функционировании их физиологических систем в норме.
Цель. Изучение в комплексе кроветворной и иммунной систем макаков-резусов Адлерского питомника,животных, наиболее востребованных в экспериментальной медицине. Все исследования на животных проводили в соответствии с требованиями комитета по биоэтике и федеральным законом РФ о защите животных от жестокого обращения (ст.4 Закона РФ о защите животных от жестокого обращения от 01 декабря 1999 г.).
Материалы и методы. Материалом для исследования служила цельная кровь, взятая в гепарин, а также сыворотка крови 30 макаков-резусов обоего пола в возрасте от 3 до 5 лет. В эксперименте были использованы следующие методы:
1. Метод проточной цитометрии на проточном цито-метре Beckman Coulter EpicsXL-MCL (ВесЙюп Сои^ег, США) с аргоновым лазером с длиной волны 488 нм. Для постановки реакции использовали моноклональные антитела (фирма «BectonDickmson»),специфичные для антигенов обезьян, в следующих комбинациях:CD3 — FITC/CD4-PE,CD3 - FITC/CD8-PE,CD3 - FITC/CD16-PE,CD3 - FITC/CD20-PE, CD3 - FITC/CD25-PE,CD3 -FITC/CD45RA,CD3 - FITC/HLA-DR. Цитограммы исследуемой клеточной взвеси выводили на основе регистрируемых параметров малоуглового (FSC) и бокового (SSC) светорассеяния.
2. Гематологический анализ крови обезьян проводили на гематологическом анализаторе фирмы «Beckman 5 diff»,USA.
3. Исследование функциональной активности лимфоцитов обезьян (IFNa, IFNy, спонтанная продукция и циркулирующий в сыворотке IFN) изучали биологическим методом в нашей модификации путем определения способности лимфоцитов обезьян отвечать интерферо-новой реакцией на адекватное воздействие.
4. Определение провоспалительных цитокинов (ГЬ-1р, ГЬ-6, TNFa) и С-реактивного белка проводили методом ИФА на приборе «УНИПЛАН» с использованием наборов ЗАО «Вектор-Бест».
Результаты. Показатели клеточного звена иммунитета клинически здоровых обезьян варьировали в широких пределах, отмечалось, что экспрессия CD3, CD4 и CD45RA у самцов незначительно выше, а экспрессия CD8 ниже, чем у самок. Данные, полученные на макаках-резусах как для самцов, так и для самок, максимально приближены к границам нормы таковых у людей, за исключением CD20, показатели которого колеблются от 12,75±8,25% у самцов и 13,45±9,55% у самок.
Поскольку результаты гематологического исследования позволяют выявить различные патологии и заболевания, представляло интерес оценить гематологические показатели клинически здоровых макаков-резусов Адлерского питомника. Исследование показало, что результаты гематологического анализа существенно не отличаются от таковых, установленных для людей и соответствуют данным, описанным раннее, за исключением повышенного содержания лейкоцитов — 14,6±6,5 х 109/л и низкой СОЭ-1-3 мм/ч по сравнению с человеком, что является характерным для приматов и объясняется лабильностью их физиологических показателей.
Исследование показателей интерферонового статуса выявило вариабельность в продукции некоторых ин-терферонов между самцами и самками обезьян, однако эти значения не выходили за рамки нормативных величин, установленных для людей (IFNa — 160±32Ед/мл, №N7 - 48±16 Ед/мл, Ш^сп - 4±2Ед/мл, IFN-S -4±2Ед/мл) и соответствует ранее установленным для ма-каков-резусов.
В настоящее время определение цитокинов достаточно широко используется в клинической практике, поскольку их количественное определение и соотношения между собой, как правило, отражают динамику патологического процесса, коррелируют с активностью заболевания и позволяют судить об эффективности проводимого лечения. Однако при этом необходимо четко знать «референтные» уровни цитокинов, свойственные здоровым животным. Полученные результаты показали, что содержание провоспалительных цитокинов в сыворотке крови клинически здоровых половозрелых макаков-резусов обоего пола максимально приближено к нормам, установленным для людей. Колебания значений С-реактивного белка от 0,4 до 9,6 мг/мл объясняется вариабельностью многих показателей у обезьян.
Таким образом, в результате проведенных исследований были установлены гематологические показатели, изучены клеточное звено иммунитета, интерфероно-вый статус, определены провоспалительные цитокины и С-реактивный белок у клинически здоровых макаков-резусов Адлерского питомника. Показано, что исследованные показатели макаков-резусов максимально приближены к аналогичным у людей, что еще раз подтверждает возможность использования обезьян этого вида как адекватной модели для воспроизведения и изучения различных патологических состояний человека, а также доклинических испытаний новых фармакологических препаратов.
