CC BY
62
ОЦЕНКА И БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ СТРАТЕГИЯ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ АНАТОКСИН-ВАКЦИН, АНТИБИОТИКОВ И ЭУБИОТИКОВ
Д.А. Евглевский
Аннотация. Представлены результаты повышения иммуногенной и протективной эффективности анатоксин-вакцин, биоцидного и лечебного действия антибиотиков и активности эубиотических микроорганизмов.
Ключевые слова: анатоксин-вакцина, микроорганизмы, антибиотики, эубиотики.
Инфекционные болезни занимают особое место среди всех заболеваний животных и человека, несмотря на создание и применение эффективных диагностических, иммунопрофилактических биопрепаратов и лекарственных средств.
В структуре инфекционных болезней крупного рогатого скота первое место занимает лейкоз (40-60%), второе туберкулез (18-25%), а среди молодняка превалирует колидиарея - колибакетриоз, сальмонеллез поросят, телят, птиц и стафилострептококковая инфекция.
Повышение протективной, иммуногенной активности анатоксинов и анатоксин-вацин зависит от качества синтетических питательных сред для выращивания микроорганизмов вместо мясопептонного бульона с глицерином, средств, режима детоксикации, полимеризации токсинов, инактивации (обезвреживания) бактерий и вирусов.
В настоящее время производство стафилококковой, колисальмонеллезной и синегнойной анатоксин-вакцин основано на выращивании микроорганизмов на мясо-пептонном бульоне с глицерином с последующей де-токсикацией токсинов 0,3-1,0% раствором формальдегида, который впервые был использован в 1923 году для изготовления столбнячного и дифтерийного анатоксинов ветврачом и известным ученым французом Г. Рамоном.
В сообщении Покровского В.И. (1999 г.) и Воробьева А.А. (1999 г.) указывается, что полная детоксика-ция, полимеризация и стабилизация стафилококкового токсина обеспечивается раствором этония, а не формалином. Однако использование этония или других бис-четвертичных аммониевых соединений для детоксика-ции токсинов пока не имеет практического применения в биопромышленности.
Появление антибиотикоустойчивых микроорганизмов вызывает необходимость не только поиска и получения новых антибиотиков, но и повышения их бактерицидного действия, снижения токсичности.
Разработка универсальной синтетической питательной среды с янтарной и лимонной кислотами позволило обеспечить стабильное и максимальное накопление стафилококков, микобактерий туберкулеза, сальмонелл, кишечной палочки и их экзо-, эндо- и супер-токсино-аллергенов. При этом накопление стафилококков после 10-12-суточного выращивания достигает 1112 млрд/мл, а сальмонелл и кишечной палочки после 3 -х дневного выращивания - 70±10 млрд/мл микробных клеток и сенной палочки - B. Subtilis и лактобактерий до 90-100 млрд/мл (густая масса).
Использование вначале 0,2-0,3% раствора формальдегида или 0,2-0,3% раствора глутарового альдегида, а затем 0,2-0,3% раствора этония, Биопага -Д, ал-килдиметилбензиламмония обеспечило полноту детоксикации, полимеризации и инактивации бактериальных токсино-аллергенов и соответственно изготовление стафилококковой, стафило-стрептококковой, стафило-протейносинегнойной, колибактериозной и колисаль-монеллезной анатоксин-вакцин и туберкулезного ана-
токсина с повышенной иммуногенной и протективной активностью.
Повышение иммуногенной и протективной эффективности анатоксин-вакцин достигнуто использованием свежевыделенных моно- и полирезистентных к антибиотикам микроорганизмов. Это в определенной степени вызывает необходимость изучения «древних», «музейных» и лабораторных микроорганизмов, которые выделены и используются при изготовлении отечественных и импортируемых анатоксин-вакцин до применения антибиотикотерапии.
Приоритетность повышения эффективности средств и способов детоксикации, полимеризации и инактивации бактериальных токсино-аллергенов защищено 11 патентами. На способ изготовления и применение анатоксин-вакцин составлены временные инструкции, наставления, а результаты апробации в хозяйствах подтверждены актами.
Изучено, что антимикробная химиотерапия предусматривает взаимодействие трех основных звеньев: микроорганизм - лекарственное средство и организм животных и человека.
В настоящее время в России используется более 30 различных групп антибиотиков, а число препаратов без учета дженериков составляет 200-250.
Существующее деление антибиотиков на природные, полусинтетические и синтетические (химические) утратило актуальность из-за того, что ряд антибиотиков получают из продуктов жизнедеятельности плесневых грибов и антиномицетов, другие путем переработки и синтетическим синтезом, соединением разных химических ингредиентов.
Изучено, что к большинству сульфаниламидам, сульфапиридазину, сульфамонометоксину и к комбинированному с триметоприму, к хинолонам 1-го поколения (хинозол, энтеросептол и хлорхинальдон, содержащий йод, хлор, а интестопан-бром), к хинолонам 2-го поколения развивается вторичная резистентность достаточно быстро.
Сочетание или комбинирование одних антибиотиков с другими, введение в их состав клавулановой кислоты отдельно и с аэросилом, аргинином, лимонной и янтарной кислот, трилона-Б, пропиленгликолей, кремния диоксида и т.д.), конструирование химических соединений хинозолов 3 -го поколения монофторхиноло-нов, дифторхинолонов и трифторхинолонов с пипера-зиновым радикалом, а затем введение в их состав других галогенов (хлора, йода и т.д.), лимонной и янтарной кислот, кокосового масла, сахаров и т.д. обеспечивает биоцидное и лечебное действие на определенное время. Следует учитывать, что из галогенов фтор наиболее токсичный элемент.
При исследовании установлено, что фтор в концентрации 0,05 и 0,1% мг/л и фторхинолоны (моно, ди, три) с пиперазиновым радикалом отдельно и в комплексе с хлором, йодом, трилоном-Б, янтарной и лимонной кислотами вызывает гиперемию и ожоги кожи у морских свинок, собак, свиней в зависимости от экспозиции действия и осаждение, коагуляцию белка из молекулярных (растворимых) растворов.
Однако многоуровневый маркетинг, выпуск фтор-хинолонов с различным составом и названием, финансовый интерес провайдеров практически заполнили все отрасли животноводства.
Учитывая, вышеизложенные недостатки и полученные негативные результаты изучения биоцидного
действия и супертоксичности фторхинолонов в стратегию биотехнологии повышения эффективности природных и полусинтетических антибиотиков положен процесс полимеризации, детоксикации, используемый в биопромышленности при изготовлении анатоксинов.
Существенным недостатком является использование разных поколений антибиотиков для консервирования кормов из-за запрета канцерогенного ртутьсо-держащего консерванта - мертиолята, применение антибиотиков с водой и кормом при лечении желудочно-кишечных болезней следует считать «кормовыми».
Особую тревогу и беспокойство вызывает образование «непатогенными» бактериями и некоторыми эу-биотиками ферментов - беталактамаз, разрушающие антибиотики.
Да, микроорганизмы «научились» существовать с антибиотиками. Существующие методы и способы создания эффективных антимикробных средств не обеспечивают перспективного прорыва в антимикробной химиотерапии.
С учетом эффективности и приоритетности проведения детоксикации, полимеризации и инактивации бактериальных токсино-аллергенов достигнуто повышение биоцидного и лечебного действия растворов амоксициллина, тетрациклина, гентамицина, стрептомицина, канамицина, линкоспектина, левомицетина при стафилококкозе, колибактериозе, сальмонеллезе, туберкулезе и на мазевой основе для лечения дерматоми-козов у собак и маститов у коров.
Для восстановления водно-солевого состава и эу-биотических микроорганизмов после антибиотикотера-пии желудочно-кишечных болезней телят и поросят с успехом использовали солевой раствор, содержащий в 1 литре воды: хлористого калия - 2-3 г, хлористого натрия -2-3, сукцината калия -3-4, глюкозы - 30-40г и 5-7 млрд/мл молочнокислых бактерий в объеме 30-50 мл в течение 3 -5 суток.
Однако в отдельных партиях (сериях) бифидум, лакто, колибактерина, линекс, бифацида, бактенорма, биопротектина, флорентина, литергарда обнаружены посторонние микроорганизмы - сальмонеллы, кишечная палочка, стафилококки и слабый рост эубиотиче-ских микроорганизмов. Изменения условий и режима хранения микроорганизмов от 25°- 33°С вызывают их нежизнеспособность.
Для повышения лечебного и антагонистического действия эубиотических микроорганизмов достигнуто предварительным высевом во флаконы лиофилизиро-ванной массы на разработанную жидкую синтетическую среду с солями янтарной и лимонной кислот в 2-х литровые биобутыли с объемом среды, равным 1 литру. После 2-3-х суточного выращивания концентрация микроорганизмов достигала 90-100 млрд/мл. Для выпаивания животным использовали 5-7 млрд/мл суспензию эубиотиков в объеме 30-50 мл в течение 3-5 суток.
Полученные результаты создают основу повышения иммуногенной и протективной активности анатоксин-вакцин, лечебного и биоцидного действия антибиотиков и эффективности эубиотиков с солевыми растворами и целесообразность изучения свойств региональных микроорганизмов при изготовлении анатоксинов, аллергенов взамен импортируемых и музейных культур.
Информация об авторе
Евглевский Дмитрий Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник, Курский НИИ АПП
