CC BY
34
□□□мШИнПксЛиПкП □ □□□иШлеЛкШ е □□лилМ^^ □ нШШ^к^
УДК 616.381-002.2:612.08
А.А. Аникеев, М.С. Любарский, И.Г. Пустоветова, С.А. Архипов, И.Р. Валеев, И.А. Голубева, И.П. Жураковский, М.В. Битхаева, Т.А. Кунц, Т.В. Шантурова
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СЕРЕБРОСОДЕРЖАЩЕГО СОРБЕНТА В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ОСТРОГО РАЗЛИТОГО ПЕРИТОНИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Новосибирский государственный медицинский университет (Новосибирск) Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН
(Новосибирск)
В экспериментах на крысах проведено исследование по оценке эффективности серебросодержащего сорбента СИАЛ-С(М) в комплексной и иммунокоррегирующей терапии при моделировании острого разлитого перитонита. Изучены, особенности системных нарушений иммунного статуса при. экспериментальном остром, разлитом, перитоните и. проведена их коррекция при. использовании, обычного способа лечения, включающего внутримышечное введение антибиотика «Цефтриаксон» и. иммуномодулятора «Глютоксим», а также при. проведении, предварительной сорбционной терапии. Показано, что стандартное лечение в сочетании с сорбентом, может, быстрее купировать воспалительный процесс в брюшной полости и. нормализовать показатели, лейкограммы, иммунограммы, и. иммуноре-гуляторные индексы, крови, и. тимуса. Показано, что дополнительное использование сорбционной, терапии по ряду показателей приводит, к более устойчивым, результатам, терапии.
Ключевые слова: острый экспериментальный перитонит, сорбент, лейкограмма, иммунограмма
RATING OF EFFICIENCY OF THE ARGENTIFEROUS SORBENT IN THE THERAPY OF ACUTE PERITONITIS IN EXPERIMENT
A.A. Anikeyev, M.S. Lubarsky, M.G. Pustovetova, S.A. Arkhipov, I.R. Valeyev, I.A. Golubeva,
I.P. Zhurakovsky, M.V. Bitkhayeva, T.A. Kunts, T.V. Shanturova
Novosibirsk State Medical University, Novosibirsk Scientific Research Institute of Clinical and Experimental Lymphology SB RAMS, Novosibirsk
In experiments on rats the research of argetiferous sorbent SIAL-S (М) efficiency in complex and immunocor-recting therapy at modeling of acute general peritonitis was carried out. The features of system, disturbances of the immune status at acute general peritonitis and their correction is conducted, at usual therapeutic approach including intramuscular introduction, of an antibiotic "Ceftriaxon" and. the immunomodulator "Glytoxim", and also at carrying out preliminary sorption therapy are studied. It is exhibited, that the reference treatment in combination, with, sorbent can stop the inflammatory process in abdominal cavity faster and. normalize metrics of leukogram, immunogram and immunoregulatory indices of blood and. thymus gland. It is shown, that additional usage of sorption therapy according to number of parameters brings to more stable outcomes.
Key words: an acute experimental peritonitis, sorbent, leukogram, immunogram
Локальное воспаление, синдром системной воспалительной реакции, тяжелый сепсис, полиор-ганная недостаточность, оксидантные нарушения
— все это звенья одной цепи в реакции организма на воспаление вследствие микробной инфекции в брюшной полости [3, 4, 12, 14]. В связи с этим лечение острого разлитого перитонита включает целый ряд лечебных мероприятий по борьбе с возбудителем заболевания и интоксикацией организма. При этом применяется как общее, так и местное введение больших доз нескольких групп антибиотиков, инфу зионная терапия, сорбционная терапия, дренирование брюшной полости и пищеварительного тракта, а также применение принци-
пиально новых устройств для санации брюш ной полости [4, 13]. Применение сорбирующих веществ природного или синтетического происхождения для дренирования брюшной полости является наиболее перспективным на сегодняшний день способом санации внутренней среды организма при остром разлитом перитоните [9, 11]. Механизмы дренажно-детоксикационного действия сорбентов и лимфатической системы во многом сходны. Гранулы сорбента связывают на своей поверхности за счет физико-химических свойств вещества и токсины, поступающие из дренируемых тканей [5, 6, 8]. Известно, что основным путем резорбции содержимого из брюшинной полости
является лимфатическая система. Лимфатическая система является мощным антибактериальным и антитоксическим барьером, который обеспечивает иммунный контроль органов и систем организма. Однако при развитии прогрессирующего воспалительного процесса в брюшной полости недостаточность функций лимфатической системы, наряду с аутоинтоксикацией, является одним из основных патогенетических механизмов развития необратимых нарушений в организме [3, 6].
В настоящее время разработаны различные методы сорбционного дренирования брюш ной полости, которые при лечении больных с распространенным гнойным перитонитом обеспечивают активизацию дренажной, транспортной, иммунной функций брыжеечных лимфатических узлов и приводят к более быстрому, в сравнении с традиционными методами лечения, снижению показателей эндогенной интоксикации. Они основаны на использовании: углеродого гемосорбента ВНИИТУ-1, волокнистого сорбента АУВМ, помещаемого в марлевые пакеты или полупроницаемые капсулы с гранулированным гемосорбентом; гранул шивыртуина, предварительно насыщенного гипохлоритом натрия (№СЮ), помещенных в сетчатый контейнер; а также СУМС-1, карболонга, сорбента СКН-6 или активированного угля [6, 7, 11]. Помещение сорбента в контейнер из сетчатой синтетической ткани, например, эластик существенно. Сетчатость контейнера обеспечивает проницательную способность аппликата для воды, слизи, гноя, фибрина, лейкоцитов и лизированной некроткани [11]. Сетчатая форма упаковки сорбента, вводимого в брюшную полость, обеспечивает удержание сорбента в емкости и предотвращает его высыпание в свободную брюшную полость. Вместе с тем нерешенной задачей является управляемое хирургом перемещение сорбента в брюшной полости, подбор пористости контейнеров с сорбентом и выбор сорбента со свойствами поглощения микробных взвесей, белковых структур и лейкоцитарной массы. Нерешенной задачей является ускорение процесса удаления токсичной части выпота при перитоните в сочетании со стимуляцией органов, обеспечивающих метаболизм гидропродукции и гидросорбции в брюшной полости, что является самым важным разделом в лечении перитонита. В связи с этим представляется очень важным выяснение вопросов, касающихся использования сорбентов при лечении острого разлитого перитонита: их сорбционной емкости или насыщаемости, собственной противовоспалительной активности или инертности, потенциального бактерицидного или бактериостатического эффекта.
Диагностика и коррекция иммунных расстройств при распространенных формах перитонита имеет большое значение в клинической практике, поскольку отражает степень нарушений в начале заболевания, а также динамику, наблюдаемую в процессе лечения пациента [3, 4, 14]. При этом остается актуальным поиск новых путей коррекции системных нарушений иммунного
ответа при остром перитоните в составе различных вариантов комплексной терапии указанной патологии. В связи с этим представляется очень важным выяснение многих вопросов, касающихся использования различных сорбентов при лечении острого разлитого перитонита, в том числе их эффективности в коррекции системных нарушений иммунного статуса больных перитонитом. В этом аспекте эффективная коррекция иммунного статуса больных острым гнойным перитонитом при использовании дополнительной сорбционной терапии является не только одной из целей такой терапии, но и своего рода одним из критериев терапевтической эффективности использования сорбентов с различными физико-химическими свойствами.
К одному из эффективных сорбентов, разработанных в последние годы, можно отнести серебросодержащий сорбент СИАЛ-С, который уже зарекомендовал себя как эффективное средство при лечении наружных воспалительных заболеваний [1, 2]. К одному из перспективных сорбентов нового поколения, разработанных Институтом клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН совместно с ЗАО «Вектор-Бест» на основе сорбента СИАЛ-С, можно отнести серебросодержащий сорбент СИАЛ-С (М). Уникальные сорбционные свойства серебросодержащего сорбента СИАЛ-С (М) наряду с бактерицидными, обусловленными высоким содержанием серебра в порах, позволяют предполагать, что он может быть использован (при соответствующей разработке контейнеров) при лечении разлитого перитонита.
Целью нашего исследования явилась оценка эффективности серебросодержащего сорбента СИАЛ-С (М) сорбента в комплексной терапии острого разлитого перитонита в эксперименте.
Для проведения исследований по предварительной оценке сорбента СИАЛ-С (М) выбрана форма свободного внесения сорбента в брюшную полость, то есть без упаковочных контейнеров, для того, чтобы оценить, с одной стороны, наличие его детоксикационных свойств по параметрам иммунокоррекции, с другой стороны, отсутствие собственной провоспалительной активности.
МЕТОДИКА
Эксперименты выполнены на 130 крысах-самцах линии Вистар массой 180 — 200 г, которых содержали в стандартных условиях вивария со свободным доступом к воде и пище. Исследования проводили в соответствии с «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей», согласно «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.1987 г.), Федеральному закону о защите животных от жестокого обращения от 01.01.1997 г., а также Директиве 86/609 ЕЭС, основанной на тексте соглашения «Dr. Robert Hubrecht, Current EU Legislation Controlling Animal Experiments». В каждой группе использовано по 10 животных. Моделью экспери-
niiiMniiiiiiiiin iMimiiim □ 11111 им □ nil II1111
173
ментального перитонита служил острый перитонит, вызываемый введением в брюшную полость 1,5 мл 5% каловой взвеси в изотоническом растворе хлорида натрия по С.С. Ременнику (1965) [10]. В качестве контроля использовали крыс, которым внутрибрюшинно вводили 1,5 мл изотонического раствора хлорида натрия. Сорбционную терапию проводили следующим образом. Внутрибрюшинно вводили серебросодержащий сорбент СИАЛ-С (М) (представляющий собой округлые гранулы
0,4 — 1 мм, модифицированные путем иммобилизации поливинилпирролидоновым комплексом серебра; «Вектор-Бест», Россия) в виде 10% суспензии в 1,5 мл изотонического раствора хлорида натрия сразу же после введения каловой взвеси. После кратковременной обработки брюшной полости сорбентом проводили процедуру по ее промыванию и вымыванию из нее сорбента. В качестве промывающего раствора использовали стерильный изотонический раствор хлорида натрия. Традиционное антибактериальное лечение острого экспериментального перитонита заключалось в ежедневном внутримышечном введении антибиотика «Цефтриаксон» в дозе 50 мг/кг (в латеральную область большой берцовой мышцы). В состав болюса входили: 10% раствора лидока-ина, 32 ЕД лидазы, 1,0 мл 0,9% раствора хлорида натрия, 1 разовая доза антибиотика широкого спектра «Цефтриаксон» (цефалоспорин III поколения). По ходу экспериментов была прослежена выживаемость животных в опытных группах. В динамике воспаления на 1-е, 3-е, 7-е и 14-е сутки исследовали препараты крови и тимуса (на парафиновых срезах толщи ной 5 — 6 мкм). Во всех группах животных, с которыми проводили терапевтические мероприятия, лечение было прекращено на 7-е сутки (включительно). Эти группы, включая группу контроля (без лечения до 14-х суток), были сформированы для оценки «отдаленных» эффектов проводимой терапии. Кровь и тимус забирали сразу после декапитации, которую осуществляли под гексеналовым наркозом. Внутрибрюшинные инфекции каловой взвеси и все манипуляции по проведению комплексной терапии проводили под легким гексеналовым наркозом (100 мг/кг). Подсчет количества лейкоцитов в стабилизированной крови крыс проводили общепринятым методом в камере Горяева. Лейкоцитарную формулу изучали на цитологических препаратах крови, окрашенных по Романовскому — Гимзе (проводился подсчет не менее чем 200 клеток). Цитологические препараты периферической крови перед окраской фиксировали в 4% забуференном нейтральном растворе формалина. Иммуноцитохимические исследования клеток крови и иммуногистохимические исследования гистологических препаратов проводили при помощи непрямого биотин-стрептавидинового им-мунопероксидазного метода. Клетки фиксировали в 4% водном растворе формальдегида (в фос фатном буфере), демаскировку исследуемых кластеров дифференцировки проводили при инкубировании с тритоном Х-100 (0,3% раствор в фосфатном
буфере). Иммунологический фенотип иммунных клеток дифференцировали на цитологических препаратах крови и гистологических препаратах тимуса с помощью мышиных моноклональных антител к различным фенотипам клеток (фирмы «Becton, Dickinson», США). Использовали моноклональные антитела к CD3-антигенам (общие Т-лимфоциты), CD4 (Т-лимфоциты-хелперы), CD8 (Т-лимфоциты-супрессоры), CD24 (В-лимфоциты), CD25 (активационный маркер Т- и В-лимфоцитов). Препараты клеточных культур инкубировали в течение 1 часа с «первыми» антителами к CD3 (Mouse Anti-Rat; Isotype: Mouse IgG3, к; клон G4.18), CD4 (Mouse Anti-Rat; Isotype: Mouse IgG2a, к; клон OX-38), CD8 (Mouse Anti-Rat; Isotype: Mouse IgG1, к; клон OX-8), CD24 (Mouse Anti-Rat; Isotype: Mouse IgM, к; клон HIS50), CD25 (Mouse Anti-Rat - IL-2R a chain; Isotype: Mouse IgG1, к; клон OX-39), и далее со «вторыми» антимыши ными биотинилированными антителами лошади (Novocastra) во влажной камере (30 мин), со стрептавидин-пероксидазным комплексом (30 мин). Окраску препаратов проводили в растворе диаминобензидина (DAB) с субстратом, содержащим Н2О2, (использовали стандартный BD DAB Kit). Тяжесть нарушений в иммунной системе оценивали по изменению иммунорегуляторных индексов (ИРИ) крови и тимуса: определяли соотношение CD4/CD8 (иммунорегуляторный индекс) для клеток крови и тимуса (в медуллярной зоне). Статистическую обработку результатов производили методами вариационной статистики, данные в таблицах представлены в виде средней арифметической и ее стандартной ошибки (M ± m). Оценка достоверности различий осуществлялась с помощью непараметрического критерия Вилкоксона
— Манна — Уитни. Для обработки результатов исследований использовали пакет прикладных программ «Statistica 7.0 for Windows».
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как видно из таблицы 1, лейкограмма крыс с распространенной формой экспериментального острого перитонита, не получавших лечение, характеризовалась постепенным нарастанием лейкоцитоза, снижением относительного содержания лимфоцитов, возрастанием относительного содержания моноцитов, тенденцией к возрастанию пула эозинофилов. На 7-е сутки после индукции воспаления в брюшной полости количество лейкоцитов в крови крыс возросло более чем на 50 % по сравнению с их количеством в контрольной группе животных. Установлено, что при всех оцениваемых вариантах лечения острого разлитого перитонита отмечается нормализация большинства показателей лейкограммы к 7-м суткам обычного лечения: снижается количество лейкоци тов периферической крови, снижается относительное содержание моноцитов и полиморфноядерных лейкоцитов в крови, возрастает количество лимфоцитов. Однако положительная динамика, отмечаемая в лимфограммах животных, имела некото рые различия при использовании различных подходов в
174
niiiiiiiiiiiiiiiiiin 11 n iiim □ ii 11II мм □ nil i 1111
Таблица 1
Лейкограмма крыс с распространенной формой экспериментального острого перитонита
Время после индукции воспаления и начала лечения Группа животных Количество лейкоцитов (тыс./мкп.) % моноцитов % лимфоцитов % нейтрофилов % эозинофилов
Контроль 9,7 ± 0,5 2,4 ± 0,2 76,1 ± 3,7 19,8 ± 0,8 1,6 ± 0,3
1-е сутки ОП без лечения 13,5 ± 0,7* 5,7 ± 0,3* 64,5 ± 3,2* 28,7 ± 1,3* 2,5 ± 0,4
ОП + ОЛ 12,9 ± 0,6* 5,6 ± 0,4* 67,3 ± 3,4* 26,4 ± 1,1* 2,3 ± 0,2
ОП + ОЛ + сорбент 12,0 ± 0,2* 5,5 ± 0,1* 68,1 ± 2,6* 26,0 ± 0,8* 2,2 ± 0,2
3-е сутки ОП без лечения 14,6 ± 0,7* 7,6 ± 0,4* 57,9 ± 2,9* 31,5 ± 1,4* 3,1 ± 0,5*
ОП + ОЛ 12.3 ± 0,6* 5,6 ± 0,3* 66,7 ± 3,4* 26,6 ± 1,2* 2,9 ± 0,4*
ОП + ОЛ + сорбент 11,9 ± 0,3* 5,2 ± 0,1* 65,9 ± 2,9* 26,2 ± 0,7* 2,8 ± 0,1*
7-е сутки ОП без лечения 15,9 ± 0,8* 9,2 ± 0,5* 52,6 ± 2,5* 36,6 ± 1,9* 3,9 ± 0,6*
ОП + ОЛ 11,3 ± 0,6* 4,6 ± 0,2* 68,3 ± 3,5* 24,2 ± 1,4* 2,9 ± 0,4*
ОП + ОЛ + сорбент 11,0 ± 0,7 4,5 ± 0,2* 72,4 ± 2,4 23,1 ± 0,8 3,0 ± 0,1*
14-е сутки ОП без лечения 16,8 ± 0,7* 9,9 ± 0,6* 54,5 ± 2,3* 34,4 ± 1,7* 4,1 ± 0,5*
14-е сутки (ОЛ прекращено на 7-е сутки) ОП + ОЛ 11,9 ± 0,2* 4,9 ± 0,2* 73,5 ± 2,9 23,4 ± 0,9* 3,2 ± 0,1*
14-е сутки (ОЛ прекращено на 7-е сутки) ОП + ОЛ + сорбент 9,8 ± 0,3 2,6 ± 0,3 78,4 ± 3,2 18,6 ± 0,9 1,3 ± 0,1
Примечание: Обозначения групп: ОП - острый перитонит, ОЛ - обычное лечение, +сорбент - внутрибрюшинное введение адсорбента. * - достоверность различий относительно показателя в контроле ф < 0,05).
лечении животных. Например, при обычном лечении все показатели лейкограммы на 7-е сутки хотя и приближались к соответствующим показателям в контроле, однако еще достоверно отличались от них, что свидетельствует о недостаточности проведенной терапии. Дополнительная сорбционная терапия, основанная на кратковременном предварительном внутрибрюшинном введении сорбента с последующим вымыванием его из брюшной полости, привела к улучшению ка чества проводимой терапии — все показатели лейкограм-мы достоверно не отличались от соответствующих показателей в контроле.
Как видно из таблицы 2, иммунограмма крыс с распространенной формой экспериментального острого перитонита, не получавших лечение, характеризовалась: постепенным снижением иммунорегуляторного индекса (ИРИ) крови за счет уменьшения относительного содержания Т-хелперов (СD4 + ) без существенного возрастания доли Т-супрессоров (СD8 + ); уменьшением числа всех субпопуляций Т-лимфоцитов (СD3 + ); возрастанием пула лимфоцитов (Т- и В-), экспрессирующих активационный маркер CD25; возрастанием пула В-лимфоцитов в крови (СD24 + ). При этом важно отметить, что с учетом значительного возрастания количества лейкоцитов в крови у животных с экспериментальным перитонитом, не получавших лечения, абсолютное количество Т-хелперов (СD4 + ) практически не изменилось, а количество Т-супрессоров (СD8 +) возросло более чем на 50 % по сравнению с контролем.
Традиционное лечение острого разлитого перитонита привело к нормализации большинства показателей иммунограммы к 7-м суткам лечения. При этом, также как и по показателям лейкограммы, к более эффективному лечению в этом отношении отнесено комплексное лечение в сочетании с элементами сорбционной терапии. При таком лечении почти все показатели иммунограммы (пул всех субпопуляций Т-лимфоцитов СD3 + , а также В-лимфоцитов) практически полностью «вернулись» к показателем иммунограммы контрольных животных. При этом отмечена тенденция к возрастанию количества Т-хелперов (СD4 +) и снижению количества Т-супрессоров (СD8 +), что выразилось в возрастании иммунорегуляторного индекса крови по сравнению с этим показателем в группе животных, получивших обычную терапию. Важно при этом отметить, что в рассматриваемой группе животных пул лимфоцитов (Т- и В-), экспрессирующих активационный маркер CD25 превысил этот показатель в контроле, что свидетельствует о выраженной стимуляции Т- и В-лимфоцитарных звеньев иммунитета в ходе проведенной терапии.
Об этом же эффекте свидетельствуют и данные, полученные при оценке иммунорегуляторного индекса (ИРИ) тимуса. Показано, что величина иммунорегуляторного индекса (ИРИ) тимуса снижалась при развитии острого разлитого перитонита за счет возрастания количества Т-супрессоров (СD8 + ) при сохранении количества Т-хелперов (СD4 +) на одном уровне, и возрастала при проведении обычной и комплексной терапии.
Таблица 2
Иммунограмма крыс с распространенной формой экспериментального острого перитонита
Время после индукции воспаления и начала лечения Группа животных т О %їІ о ■& 2 Ц т о н Ц т О Ц щ о -И ° о-&£ 2 Ц т о „ + ~ о 2 о о ■& £ 2 Ц нГ _ 2 О I ац О. О Ї ^ ^ о т + ' [і > о ■& ЕЕ | ш ц т ° о> ■ * і о ■& ЕЕ | ш ц нГ о и? Н О О
Контроль 54,9 ± 2,6 25,2 ± 1,3 3,8 ± 0,2 33,9 ± 1,8 21,3 ± 1,2 1,6 ± 0,1 12,1 ± 0,6 7,1 ± 0,4 1,7 ± 0,3
1-е сутки ОП без лечения 42,5 ± 2,3* 32,9 ± 1,7* 5,1 ± 0,4* 23,4 ± 1,5* 19,5 ± 1,3 1,2 ± 0,1* 11,4 ± 0,5 9,5 ± 0,5* 1,2 ± 0,1*
ОП + ОЛ 45,5 ± 2,4* 31,0 ± 1,5* 5,8 ± 0,3* 25,5 ± 1,3* 19,6 ± 1,1 1,3 ± 0,2 12,3 ± 0,6 8,8 ± 0,5* 1,4 ± 0,2
ОП + ОЛ + сорбент 46,4 ± 2,1* 29,6 ± 1,2* 5,9 ± 0,2* 27,0 ± 1,2* 19,1 ± 0,9 1,4 ± 0,2 11,6 ± 0,3 8,3 ± 0,3* 1,4 ± 0,1
3-е сутки ОП без лечения 39,2 ± 2,3* 33,6 ± 1,8* 5,9 ± 0,4* 20,4 ± 1,3* 18,7 ± 1,1 1,1 ± 0,2* 11,1 ± 0,6 10,1 ± 0,5* 1,1 ± 0,1*
ОП + ОЛ 44,3 ± 2,2* 30,1 ± 1,6 * 6,2 ± 0,5* 25,5 ± 1,4* 18,3 ± 0,9* 1,4 ± 0,1 11,1 ± 0,6 8,5 ± 0,5* 1,3 ± 0,2
ОП + ОЛ + сорбент 44,0 ± 2,0* 29,6 ± 1,3* 6,8 ± 0,3* 26,3 ± 1,3* 17,5 ± 0,8* 1,5 ± 0,3 11,6 ± 0,4 8,3 ± 0,4* 1,4 ± 0,2
7-е сутки ОП без лечения 36,8 ± 1,8* 35,4 ± 1,7* 6,1 ± 0,5* 17,4 ± 0,8* 19,2 ± 0,8 0,9 ± 0,2* 11,5 ± 0,7 11,5 ± 0,6* 1,0 ± 0,1*
ОП + ОЛ 48,7 ± 2,4 27,1 ± 1,4 8,8 ± 0,4* 30,6 ± 1,6 18,0 ± 0,8* 1,7 ± 0,4 10,8 ± 0,6 8,3 ± 0,5* 1,3 ± 0,2
ОП + ОЛ + сорбент 49,9 ± 2,1 26,1 ± 1,2 9,3 ± 0,4* 31,8 ± 1,5 17,5 ± 0,7* 1,8 ± 0,1 11,3 ± 0,4 8,1 ± 0,2 1,4 ± 0,2
14-е сутки ОП без лечения 35,7 ± 1,6 37,1 ± 1,5 7,2 ± 0,6 16,3 ± 0,7* 20,2 ± 0,9 0,8 ± 0,2 11,4 ± 0,6 12,7 ± 0,8* 0,9 ± 0,1*
14-е сутки (ОЛ прекращено на 7-е сутки) ОП + ОЛ 53,2 ± 2,2 27,1 ± 1,1 9,7 ± 0,4* 30,8 ± 1,6 16,1 ± 0,5* 1,9 ± 0,1* 11,3 ± 0,5 7,4 ± 0,3 1,5 ± 0,1
14-е сутки (ОЛ прекращено на 7-е сутки) ОП + ОЛ + сорбент 58,7 ± 2,4 23,0 ± 1,0 12,9±0,3* 36,1 ± 1,4* 15,4 ± 0,4* 2,3 ± 0,2* 13,2 ± 0,4 7,1 ± 0,2 2,0 ± 0,1
Примечание: ОП - острый перитонит, ОЛ - обычное лечение, +сорбент - внутрибрюшинное введение адсорбента; * - достоверность различий относительно показателя в контроле ф < 0,05).
В группе животных без лечения к 14-м суткам погибло 4 животных. У остальных крыс, не получавших никакого лечения, отмечено ухудшение показателей лейкограммы и иммунограммы по сравнению с животными, выведенными из эксперимента на 7-е сутки. В группе животных, у которых обычное лечение было прекращено на 7-е сутки после индукции воспаления, на 14-е сутки эксперимента отмечено возрастание количества лейкоцитов, а также пула моноцитов и эозинофи-лов в крови, по сравнению с показателями этой группы, оцениваемых на 7-е сутки сразу после проведенной терапии. Таким образом, были отмечены признаки своего рода рецидива заболевания при моделировании острого разлитого перитонита. В группе животных, получавших предварительную сорбционную терапию, а в последующем в течение
7 дней — обычное лечение, на 14-е сутки эксперимента все показатели лейкограммы приблизились к показателям контрольной группы животных. При оценке иммунограммы указанных групп животных были получены аналогичные результаты. В группе животных, получавших предварительную сорбционную терапию и в последующем в течение 7 дней — обычное лечение, отмечены более высокие показатели иммунорегуляторных индексов крови и тимуса, чем в группе с обычным лечением. При этом отмечено, увеличение пула активированных
лимфоцитов (CD25 + ), что в совокупности с данными, рассмотренными выше, свидетельствуют о повышении резервных возможностей иммунной системы в целом.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Сравнительный анализ результатов исследований иммунного статуса у крыс с перитонитом при различных вариантах лечения позволил установить, что иммунотерапия в сочетании с базовым традиционным лечением и применением серебросодержащего сорбента СИАЛ-С (М) на ранней стадии лечения острого разлитого перитонита несомненно повышает эффективность лечения острого разлитого перитонита. При этом дополнительное использование сорбента СИАЛ-С (М) в той форме его применения (однократно), которое использовалось в наших исследованиях, приводило к заметным, более выраженным «отдаленным» эффектам иммунокоррекции и нормализации лейкограммы, свидетельствующей о купировании воспалительного процесса и его ослаблении, чем при обычном лечении. Показано, что дополнительное использование сорбционной терапии по целому ряду иммунологических показателей приводит к более устойчивым результатам терапии. Полученные данные могут стать основой для дальнейших экспериментальных и клинико-
лабораторных исследований, касающихся разработки новых подходов в лечении острого разлитого перитонита, основанных на использовании сорбентов.
ВЫВОДЫ
1. Применение серебросодержащего сорбента СИАЛ-С (М) в комплексной терапии острого распространенного экспериментального перитонита, повышает эффективность терапии острого разлитого перитонита по показателям лейкограммы и иммунограммы.
2. Серебросодержащий сорбент СИАЛ-С (М) можно рассматривать как перспективное средство в сорбционной терапии острого разлитого перитонита.
3. Полученные данные можно рассматривать как экспериментально-методическую основу для дальнейших экспериментальных и клинико-лабораторных исследований, касающихся разработки новых подходов в лечении острого разлитого перитонита, основанных на использовании сорбентов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бородин Ю.И. и др. Способы эндоэкологиче-ской реабилитации организма / под ред. Л.Д. Сидоровой. — Новосибирск, 1999. — С. 64.
2. Бородин Ю.И. и др. Опыт применения серебросодержащего сорбента-пудры СИАЛ-С в клинике // Проблемы лимфологии и эндоэкологии: матер. междун. симпозиума. — Новосибирск, 1998. - С. 59-62.
3. Ерюхин И.А., Шляпников С.А., Ефимова И.С. Перитонит и абдоминальный сепсис // Инфекции в хирургии. — 2004. — № 2 (1). — С. 2-8.
4. Ларичев А.Б., Волков А.В., Абрамов А.Ю. Лечение распространенного послеоперационного перитонита // Российский мед. журн. — 2006. — № 1. — С. 8—12.
5. Любарский М.С., Плешаков В.П., Шеве-ла А.И. Местная сорбционная терапия перито-
нита. — Новосибирск: Изд-во РИПЭЛ, 1992. — С. 56-79.
6. Любарский М.С. и др. Лимфостимуляция в лечении осложненных форм синдрома диабетической стопы // Бюлл. СО РАМН. — 2005. — Т. 115, № 1. — С. 117 — 119.
7. Лопаткин Н.А., Лопухин Ю.М. Эфферентные методы в медицине (теоретические и клинические аспекты экстракорпоральных методов лечения). — М.: Медицина, 1989. — 352 с.
8. Майбородин И.В., Гаврилин В.Н. Взаимодействие искусственных углерод-минеральных сорбционных препаратов с раневым отделяемым // Морфология. — 2001. — № 2. — С. 40 — 44.
9. Майбородин И.В., Любарский М.С. Прямое введение сорбента в брюшную полость при разлитом гнойном перитоните // Архив патологии. — 1996. — № 1. — C. 54 — 55.
10. Рагимов Р.М. Применение озонированного перфторана в комплексном лечении острых перитонитов и профилактике послеоперационных осложнений // Автореф. дис. ... докт. мед. наук. — Махачкала, 2010. — 43 с.
11. Пат. 2123361 РФ. Способ лечения перитонита / Богомолов Н.И., Кулиш Н.И., Минина Л.А., Богомолова Н.Н.; опубл. 20.12.1998.
12. Федоров В.Д., Гостищев В.К., Ермолов А.С., Багницкая Т.Н. Современные представления о классификации перитонита и системной оценке тяжести состояния больных // Хирургия. — 2000. — № 4. — С. 58 — 62.
13. Mulier S. et al. Factors affecting mortality in generalized postoperative peritonitis: multivariate analysis in 96 patients // J. Surg. — 2003. — Vol. 27, N 4. — P. 379 — 384.
14. Yamamoto T., Umegae S., Kitagawa T., Matsu-moto K. Intraperitoneal cytokine productions and their relationship to peritoneal sepsis and systemic inflammatory markers in patients with inflammatory bowel disease // Dis. Colon. Rectum. — 2005. — Vol. 48. — P. 1005—1015.
Сведения об авторах
Аникеев А.А. - кандидат медицинских наук, научный сотрудник Центральной научно-исследовательской лаборатории (ЦНИЛ) Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития РФ (ГОУ ВПО НГМУ Минздравсоцразвития РФ)
Любарский Михаил Cеменович -- доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по научной работе Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательского института клинической и экспериментальной лимфологии Сибирского отделения РАМН и руководитель клиники НИИКЭЛ СО РАМН
Пустоветова М.Г. - доктор медицинских наук, профессор, руководитель Центральной научно-исследовательской лаборатории Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава (630099, г. Новосибирск, ул. Семьи Шамшиных, д. 16, кв. 21; тел.: 89139189571; е-таИ: [email protected])
Архипов С.А. - доктор биологических наук, старший научный сотрудник ЦНИЛ ГОУ ВПО НГМУ Росздрава (е-таН: агЫр[email protected])
Валеев И.Р. - аспирант Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательского института клинической и экспериментальной лимфологии Сибирского отделения РАМН
Голубева И.А. - доктор медицинских наук, профессор Государственного образо-вательного учреждения высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития РФ
ЖураковскийИ.П. - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник ЦНИЛ ГОУ ВПО НГМУ Министерства здравоохранения и социального развития РФ.
Битхаева М.В. - научный сотрудник ЦНИЛ ГОУ ВПО НГМУ Министерства здравоохранения и социального развития РФ Кунц Т.А. - младший научный сотрудник ЦНИЛ ГОУ ВПО НГМУ Министерства здравоохранения и социального развития РФ Шантурова Т.В. - ветеринарный врач высшей категории, заведующая виварием ЦНИЛ ГОУ ВПО НГМУ Министерства здравоохранения и социального развития РФ
