CC BY
9
174
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
как ключевой особенности механизма процесса. Кроме того, варьированием электролита можно добиться химического состава покрытия, близкого к человеческой кости, включающего фосфаты кальция и особенно ги-дроксиапатит. Процесс ПЭО был оптимизирован для получения покрытий на всех используемых сплавах [1-3]. Обеспечение сигналинга клеток достигается за счет заполнения пор ПЭО-покрытия олигопептидами; трипеп-тидная последовательность RGD (аргинин-глицин-аспа-рагиновая кислота) была зафиксирована на поверхности с помощью бисфосфонатного линкера для улучшения биосовместимости имплантата [2]. Эффективность реализации биомиметического подхода была подтверждена исследованиями in vitro на клеточных линиях MG63, ФЛЭЧ и МСК [2, 3]. Такой подход формирует биомиметическую поверхность, которая повышает все аспекты биосовместимости имплантата и открывает возможность производства имплантатов 4-го поколения. Авторы благодарят Российский научный фонд за поддержку в рамках междисциплинарного проекта № 20-69-47029.
Литература:
1. Farrakhov R., Melnichuk O., Parfenov E. et al. Coatings. 2021. V.
11. P. 401.
2. Parfenov E., Parfenova L., Mukaeva V. et al. Surf. Coat. Technol.
2020. V. 404. P. 126486.
3. Parfenov E., Parfenova L., Dyakonov G. et al. Surf. Coat. Technol.
2019. V. 357. P. 669.
ОСТЕОГЕНЕЗ: РОЛЬ СИГНАЛЬНОЙ ФУНКЦИИ
NА/K-АТФАЗЫ
Н.А. Пасатецкая1, Е.В. Лопатина1, 2
1 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова МЗ РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: Ыа/К-АТФаза, катехоламины, органоти-
пическая культура ткани, эксплантаты ткани кости.
Na/K-АТФаза поддерживает трансмембранный градиент ионов и участвует в модуляции процессов клеточного роста и пролиферации. Кардиотонические стероиды прямо регулируют активность фермента в норме и при патологии. Многочисленные данные свидетельствуют, что Na/K-АТФаза участвует в образовании мультимо-лекулярного сигнального комплекса с другими белками. Следовательно, изменение функциональной активности фермента может быть связано с рецептор-опосредованными эффектами со стороны вегетативной нервной системы и ряда других факторов. Участие сигнальной функции Na/K-АТФазы в регуляции остеогенеза изучено слабо.
Цель работы: изучить вклад сигнальной функции Na/ К-АТФазы вмодуляцию остеогенеза в эмбриональный период развития.
Исследование проводили на эксплантатах ткани кости 10-12.-дневных куриных эмбрионов, культивируемых в чашках Петри на коллагеновых подложках в питательной среде в СО2-инкубаторе («Binder», Германия) в течение 3-х суток при 37°С и 5% СО2. В ходе работы исследовано 2500 эксплантатов ткани кости. Контрольные эксплантаты культивировали в питательной среде стандартного состава. В культуральную среду
экспериментальных чашек Петри добавляли оуабаин, дигоксин, адреналин, норадреналин, пропранолол и ура-пидил в широком диапазоне концентраций. Полученные данные анализировали с использованием морфоме-трического метода и метода реконструкции оптических срезов. Морфометрический критерий — индекс площади — рассчитывали как отношение площади всего эксплантата к площади исходной зоны. Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы STATISTICA 10.0, использовали t-критерий Стьюдента для двух независимых выборок. Часть работы выполнена на оборудовании Центра коллективного пользования «Конфокальная микроскопия» Института физиологии им. И.П. Павлова РАН.
Кардиотонические стероиды исследовали в диапазоне концентраций от 10-12 до 10-6 М. В концентрации 1010 М оуабаин стимулировал рост эксплантатов ткани кости на 100%. Дигоксин трофотропного действия не проявил. В концентрации 10-6 М оуабаин и дигоксин ингибирова-ли рост эксплантатов ткани кости. Участие катехолами-нов в остеоремоделировании исследовали в диапазоне концентраций от 10-10 М до 10-4 М. Ингибиторный анализ показал, что остеотоксическое действие катехолами-нов в высоких концентрациях опосредовано активацией Р2-адренорецепторов. Норадреналин (10-6 М), в отличие от адреналина, стимулировал рост эксплантатов ткани кости на 36% через а1-адренорецепторы. Норадреналин, но не адреналин, устранял ингибирующее рост эксплантатов действие оуабаина (10-6 М), что свидетельствует о рецептор-опосредованной активации сигнальной функции Na/K-АТФазы.
АДГЕЗИЯ И ПРОЛИФЕРАЦИЯ КЛЕТОК ЛИНИИ HEK 293T НА ПОЛИМЕРНЫХ МАТРИКСАХ РАЗЛИЧНОЙ МОРФОЛОГИИ
Т.Д. Пацаев1, Е.В. Ястремский1, 2, А.М. Азиева1,
Д.А. Кириллова1, А.А. Михуткин1,
К.Г. Антипова1, Р.В. Шариков1, Н.А. Шарикова1,
К.И. Луканина1, Т.Е. Григорьев1,
Р.А. Камышинский2, А.Л. Васильев1, 2
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 Институт кристаллографии им. А.В. Шубникова ФНИЦ Кристаллография и фотоника РАН, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: HEK 293 T, полилактид (PLA), синтетический матрикс, растровая электронная микроскопия, флюоресцентная микроскопия, адгезия и пролиферация клеток.
Адгезионные и пролиферативные свойства ма-триксов — каркасов, обеспечивающих механическую стабильность и стимулирующих рост клеток — играют существенную роль в тканевой инженерии и во многом зависят от химических и структурных особенностей их поверхности. В то же время морфология матриксов — важный фактор, влияющий на рост и развитие клеток и последующее формирование ткани [1].
В настоящей работе исследовано влияние морфологически различных полилактидных матриксов на адгезию и пролиферацию культивированных на них клеток линии HEK 293Т при посадке, через два и пять дней. Для исследований были выбраны матриксы следующих типов: ориентированные и неориентированных матриксы губок и нетканых материалов, а также плёнки, обладающие существенно различным рельефом поверхности.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
