2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
из семей с двумя и более детьми, в которых второй (третий) ребенок посещает детский сад или школу; именно они и составили 75,8% носителей.
Полученные данные свидетельствуют о необходимости вакцинации не только детей, находящихся в организованных коллективах, но и неорганизованным детям из семей с двумя и более детьми.
ГЕНОТИПИРОВАНИЕ РОТАВИРУСОВ ГРУППЫ А МЕТОДОМ ПЦР С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ
Г.Н. Бахтояров, А.А. Марова, С.А. Лободанов, В.В. Зверев, Е.Б. Файзулоев
ФГБУ«НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, лаборатория молекулярной вирусологии, Москва
В странах с развитым здравоохранением рота-вирусная инфекция не несет серьезной опасности для жизни людей, но представляет значительные проблемы в педиатрии. Рекомендуемые ВОЗ протоколы генотипирования ротавирусов основаны на ПЦР с электрофоретической детекцией результатов, что обусловливает высокую трудоемкость теста, сложность в интерпретации результатов и проблемы, связанные с риском кросс-контаминации исследуемых образцов ампликонами, а также не позволяют типировать значительную часть выявляемых штаммов. Поэтому задача разработки более эффективных тест-систем остается актуальной. Целью настоящей работы являлась отработка условий генотипирования ротавирусов группы А методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).
В работе были использованы 40 биопроб от больных с клиническими проявлениями острой кишечной инфекции, охарактеризованные методами ИФА и ПЦР (ПЦР-РВ) на наличие антигенов и РНК ротавирусов группы А. В качестве системы классификации генотипов были приняты рекомендации ВОЗ (WHO/IVB/08.17, October 2009) и группы исследователей (Jelle Matthijnssens et al., 2008). Для исследований методом мультиплексной ПЦР-РВ использованы праймеры и ДНК-зонды собственной разработки, направленные на дифференциальное выявление РНК ротавирусов группы А генотипов G1, G2, G3, G4, G9, P4, P6, P8, I1, I2. В результате ротавирусы генотипа G1 выявлены в 17,5%, G2 — 2,5%, G3 — 17,5%, G4 — 55%, P4 — 2,5%, P8 — 92,5%, I1 — 77,5% случаев. Доля проб c неопределенным генотипом составила для генотипов G — 7,5%, P — 5%, I — 22,5%. В 2 биопробах выявлена коинфекция 2 типов ротавирусов, что свидетельствует о вероятном вторичном инфицировании госпитальным штаммом. Результаты ПЦР-РВ и генотипирования подтверждали электрофоре-тическим анализом продуктов ПЦР, выборочным секвенированием с последующим филогенетическим анализом. Таким образом, в работе показана перспективность тест-систем на основе ПЦР-РВ для генотипирования (в том числе по маркерным локусам полногеномного, посегментного) ротавирусов группы А. Дальнейшая валидация и совершенствование разработанного подхода позволит предложить альтернативную, менее трудоемкую, более точную и удобную в сравнении с традиционными методами тест-систему для определения генотипа ротавирусов.
ОСОБЕННОСТИ ВАГИНАЛЬНОГО МИКРОБИОЦЕНОЗА ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА С НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ
Л.Т. Баязитова, О.Ф. Тюпкина, В.И. Шайхразиева
ФБУН «Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии Роспотребнадзора», г. Казань
В патогенезе инфекционно-воспалительных заболеваний органов малого таза большую роль играют дисбиотические изменения в вагинальной микрофлоре.
Цель. Изучение характера микро биоценоза влагалища женщин репродуктивного возраста с невынашиванием беременности.
Материалы и методы. Исследовано 40 женщин в возрасте от 18 до 42 лет. Биоматериал с заднего свода влагалища засевали на питательные среды: 5% кровяной агар, желточно-солевой агар, Эндо, MRS агар, Шедлера и тиогликолевую среду по методу Ю.М. Фельдман и соавторов. Идентификацию микроорганизмов проводили по комплексу культу-ральных и морфологических свойств согласно действующим нормативным документам.
Результаты. Установлено, что у 10,5% женщин выявлено состояние вагинального нормобиоценоза. Дисбиотические изменения во влагалищном секрете выявлены
у 89,5% пациенток: выраженный дефицит лак-тобактерий, бифидобактерий и избыточный рост условно-патогенной микрофлоры. Часто высевались бактерии рода Staphylococcus — S. epidermidis (22,4%), S. aureus (24,2%); в 9,5% случаев стафилококковые штаммы оказались метициллинрези-стентными. Дисбиоз влагалища, обусловленный энтеробактериями (E coli, Klebsiella spp, Proteus spp и Enterobacter spp), отмечался у 15,1% обследованных. Вагинальный дисбиоз, выражающийся ростом условно-патогенных бактерий в ассоциации с грибами рода Candida, наблюдался у 15, 9% пациенток.
Таким образом, установлены дисбиотические сдвиги в вагинальном микробиоценозе у 89,5% женщин репродуктивного возраста с невынашиванием беременности. Своевременное выявление и коррекция вагинального дисбиоза позволит оптимизировать тактику ведения данной категории пациентов
ВИДОВОЙ СОСТАВ
И АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ МИКРОФЛОРЫ ГНОЙНОЙ РАНЫ У БОЛЬНЫХ С СИНДРОМОМ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ СТОПЫ
Ю.П. Белозерцева1, П.П. Курлаев1, В.А. Гриценко2
1Оренбургская государственная медицинская академия Минздрава РФ, г. Оренбург; 2Институт клеточного и внутри клеточного симбиоза УрО РАН, г. Оренбург
Сахарным диабетом (СД) страдает около 4% населения, а в России число таких больных приближается к 8 млн (Аникин А.И. с соавт., 2009). Синдром диабетической стопы (СДС) осложняет течение СД более чем у 25% пациентов, являясь причиной ампутаций нижних конечностей в 50—70% случаев (Светухин А.М., Прокудина М.В, 2010). Антибактериальная терапия — один из основных подходов к лечению инфицированных поражений стоп у больных СД (Пащина С.Н., Крайнова Л.Е., 2008).