CC BY
12
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»
Санкт-Петербург 23-24 июня 2016 г.
Лебедева Л. Л., Чумак А. А., Пухликова Т. В., Зинкин В. Ю., Майорова О. А.
ГБУЗ «Станция переливания крови Департамента здравоохранения города Москвы», г. Москва
ОСОБЕННОСТИ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ HLA-ГАПЛОТИПОВ У ДЕТЕЙ С ОНКОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ
Аллогенная трансплантация гемопоэтиче-ских стволовых клеток (ТГСК) является наиболее эффективным и широко применяемым методом лечения при многих онкогематологических заболеваниях детского возраста. Решающим фактором, определяющим успех алло-ТГСК, является степень совместимости по генам системы HLA и, как показали последние исследования, зависит от совпадения HLA-гаплотипов донора и реципиента, поскольку при этом, как правило, совпадают и другие гены, входящие в состав HLA-комплекса. Поэтому лучшими донорами ГСК являются HLA-идентичные здоровые сиблинги, которые имеются примерно в 30 % случаев всех семей с больным ребенком. Вероятность нахождения неродственного донора зависит как от частоты встречаемости генов HLA системы в популяции здоровых индивидумов и распространенности в ней HLA-гаплотипов, так и от особенностей распределения HLA-генов и их HLA-гаплотипов у детей с различными он-когематологическими заболеваниями.
Целью настоящего исследования явилось изучение распределения HLA-A*/B*/DRB1* га-плотипов и выявление частоты их встречаемости у пациентов с острым лимфобластным лейкозом (В-ОЛЛ), острым миелобластным лейкозом (ОМЛ), хроническим миелобластным лейкозом (ХМЛ), и приобретенной апластической анемией (ПАА) по сравнению с контрольной группой здоровых детей восточно-европейских славянских популяций.
Материалы и методы. Было проведено HLA-генотипирование больных детей, находившихся на лечении в различных ЛПУ г. Москвы в период с 2004 по 2015 гг., а также их родителей и сиблин-гов. Всего было обследовано 76 больных В-ОЛЛ детей в возрасте 0,5-17 лет (средний возраст 8,3 ± 4,6), 57 детей с ОМЛ в возрасте 0,5-17 лет (средний возраст 8,9 ± 5,2), 47 детей с ХМЛ в возрасте 3,5-18 лет (средний возраст 11,5 ± 4,8), 43 ребенка с ПАА в возрасте 2-17 лет (средний возраст 10,7 ± 4,1). Типирование HLA генов I и II классов было выполнено методами SSO и PCR-SSP. Контрольной группой служила рандомизированная выборка из 502 типированных образцов пупо-
винной крови (ПК) условно здоровых новорожденных доноров Московского банка стволовых клеток. Для подсчета ИЬА-гаплотипов одновременно с ПК были протипированы образцы ДНК их матерей. Анализ частоты встречаемости ИЬА-гаплотипов проводили методом прямого подсчета. Сравнение частот встречаемости ИЬА-А*/В*/ DRB1* гаплотипов у больных и в контрольной группе проводилось с использованием %2-теста.
Результаты. Проведенные исследования не обнаружили значительных и достоверных различий в распределении наиболее часто встречаемых в восточно-европейских славянских популяциях ИЬА-А*/В*/БКВ1* гаплотипов (0.013158< >0.046053) среди здоровых и больных детей. Но нами было выявлено значительное увеличение частот встречаемости редких гапло-типов ^ < 0.002249) у детей с В-ОЛЛ по сравнению с контрольной группой: А*02/В*38/БЯВ*15 0.0132 Ув f= 0.00286), А*03/В*44/БЯВ*07 0.0132 Ув f= 0.00225), А*25/В*18/БЯВ*03 0.0132 Ув f= 0.00132), А*11/В*35/БЯВ*11 0.0132 Ув f= 0.00146). Однако только у двух гаплотипов частота встречаемости достоверно отличалась от таковой в контрольной группе: А*33/В*58/БИВ*15 0.0256 Ув f= 0.00131; р = 0.0039) и А*32/В*15/БИВ*04 0.0132 Ув f= 0.000832; р = 0.026). У детей с ОМЛ был выявлен гаплотип А*02/В*27/БИВ*01, который встречался в 6 раз чаше, чем в контрольной группе 0.0175 Ув f= 0.0029; р = 0.0031), а также обнаружен гаплотип А*26/В*38/БИВ*11, не выявленный нами в здоровой популяции восточно-европейских славян. В группе детей с ХМЛ нами не было выявлено никаких различий по частоте встречаемости трехлокусных гаплотипов. Однако, анализируя 2х-локусные гаплотипы А*/В* и В*/БЯВ1*, мы обнаружили значительное увеличение частоты встречаемости гапло-типа А*02/В*57 у больных ХМЛ по сравнению со здоровыми детьми 0.0416 Ув. f= 0.0090; р = 0.041). У пациентов с ПАА нами было выявлено 5-кратное увеличение частоты встречаемости гаплотипа А*24/В*07/БИВ1*15 по сравнению контрольной группой 0.034 Ув f= 0.0069; р = 0.009).
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XII, № 2, 2016
Выводы. Сравнительный анализ частот встречаемости HLA-A*/В*/DRB1* гаплотипов у детей с онкогематологическими заболеваниями и у здоровых детей не выявил существенной разницы в их распределении. Поэтому Московский банк стволовых клеток может служить альтернативным источником при поиске доноров для нуждающихся в ТГСК восточно-европейских
славян. Полученные нами данные о некоторых особенностях распределения частот встречаемости HLA-гаплотипов у детей с онкогематологическими заболеваниями требуют дальнейшего подтверждения на более широкой выборке и, возможно, будут полезны для понимания природы возникновения этих патологий.
Лесниченко И. Ф., Кострома И. И., Грицаев С. В., Чечеткин А. В.
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ ММП-2 И ММП-9 В ПЛАЗМЕ АСПИРАТОВ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ И МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
Цель. Определить клиническую значимость уровня ММП-2 и МПП-9 в костном мозге больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) и ми-елодиспластическим синдромом (МДС).
Материалы и методы. Исследован уровень ММП-2 и ММП-9 в плазме аспиратов костного мозга (ПАКМ) 87 больных: 39 больных ОМЛ и 48 МДС. Больных ОМЛ распределяли в 2 группы: с уровнем бластов в костном мозге < 5 % (ОМЛ-ПР) и >5 % (ОМЛ-вне ПР). Больных МДС распределяли в группы низкого риска (МДС-НР) с бластами < 5 % и высокого риска (МДС-ВР) с бластами от 5 до 19 %. Содержание ММП-2 и ММП-9 определяли с помощью иммунофер-ментной тест-систем "Human MMP-9 immunoassay" (R&D System, USA) и "Human MMP-2 immunoassay" (R&D System, USA).
Результаты. Установлена ассоциация объема лейкозного клона с уровнем ММП-9 и отсутствие такой связи с уровнем ММП-2. Увеличение количества бластных клеток в КМ сопряжено со снижением концентрации ММП-9. При этом наиболее низкий уровень ММП-9 (73,18 ± 51,43 нг/мл) выявлен у больных ОМЛ-вне ПР. У больных МДС-ВР концентрация ММП-9 была значимо выше: 120,1 ± 38,7 нг/мл; р = 0,0001. Наибольшие значения концентрации ММП-9 были зафиксированы у больных ОМЛ-ПР и больных МДС-НР, т. е. с количеством бластных кле-
ток в КМ менее 5 %. Средний уровень ММП-9 у больных ОМЛ-ПР и МДС-НР значимо не различался: 426,8 ± 74,85 нг/мл и 274,9 ± 78,93 нг/мл, соответственно; p = 0,086. В отличие от ММП-9 уровень концентрации ММП-2 в ПАКМ не ассоциирован с объемом лейкозного клона. При сравнительном анализе не обнаружено значимых различий в уровне ММП-2 между больными МДС низкого и высокого риска: 224,70 ± 10,65 нг/мл и 233,70 ± 18,33 нг/мл соответственно; p = 0,68. Среднее значение концентрации ММП-2 у больных МДС не имело значимых различий с уровнем у больных ОМЛ-вне ПР: 234,30 ± 8,32 нг/мл и 225,30 ± 12,58 нг/мл соответственно; p = 0,397. Мониторинг содержания ММП-9 и ММП-2 в ПАКМ двух больных МДС показал, что достижение ПР сопровождается повышением уровня ММП-2 в 1,5-6 раз по сравнению с исходным, а содержания ММП-9 в 6-17 раз. Напротив, при развитии рецидива уровень ММП-2 и ММП-9 снижался.
Выводы. Источником разных ММП могут быть разные типы клеток: опухолевого клона (продуцент МПП-9) и гемопоэтического микроокружения (продуценты МПП-2). Кроме того, полученные данные позволяют рассматривать уровни МПП-2 и -9 в ПАКМ как перспективные критерии оценки эффективности терапии.
