CC BY
38
*УДК 591.3:636.5 +636.58 ОСОБЕННОСТИ ПОСТНАТАЛЬНОГО МОРФОГЕНЕЗА ЭКЗОКРИННЫХ ПАНКРЕОЦНТОВ И АЦННУСОВ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ БРОЙЛЕРОВ КРОССА «СМЕНА-7» В НОРМЕ
НА. Щеглов
Была установлена возрастная динамика экзокринных панкреоцитов и ацинусов поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7». Исследовалось нормальное развитие поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» в возрасте 5-е, 15-е и 20-е, 30-е и 36-е сутки.
Ключевые слова: морфогенез, панкреацит, ацинус, поджелудочная железа, бройлер кросса «Смена-7», Гамаеит, Фоспренил.
Введение
Комплексное изучение закономерностей структурной адаптации органов желудочно-кишечного тракта в процессе онтогенеза является актуальной проблемой современной морфологии. Важное место в этой проблеме занимает исследование закономерностей постнатального онтогенеза различных отделов желудочно-кишечного тракта и пищеварительных желез при приеме пищи с измененными свойствами [1, с.115].
Работами сотрудников кафедры зоологии и анатомии Брянского государственного университета имени академика И.Г. Петровского установлено, что Гамавит и Фоспренил оказывают влияние на морфогенез селезенки (Лютый Р.Ю., 2010; Копылова С.В., 2011), печени (Копылов А.С.. 2011), сердца (Постоялко С.И., 2010), мышечной и слизистой оболочек желудка и пристеночных желез желудка (Мерзлякова И.А., 2010), железы третьего века (Харлан А.Л., 2010) и тимуса (Сердюков К.А., 2011). Показано влияние биологически активных веществ на морфофункциональные изменения организма бройлеров кросса «Смена-7» (Зайцева Е.В., 2010; 2011).
Цель исследования. Установить особенности постнатального морфогенеза экзокринных панкреоцитов и ацинусов поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7».
Задачи исследования. Установить динамику морфометрических показателей экзокринных панкреоцитов и ацинусов различных частей поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» на разных этапах постнатального онтогенеза.
Материалы и методы исследования
Для периодизации постнатального онтогенеза бройлеров кросса «Смена-7» использована схема, предложенная В.И. Махинько и В.Н. Никитиным (1975), основанная на изменении скорости объемного и линейного роста, величин абсолютного прироста и анатомо-физиологических особенностей бройлеров.
Переход от одного естественного периода развития к другому определялся по резким изменениям величины скорости роста.
Эксперимент проводился в соответствии с нормами гуманного обращения с животными, которые регламентированы «Правилами проведения работ и использования экспериментальных животных», утвержденных Приказом М3 СССР №755 от 12 августа 1977г, а также положениями Хельсинской Декларации Всемирной Медицинской Ассоциации от 1964 г., дополненной в 1975, 1983 и 1989 гг.
Для морфологического исследования участки дуоденальной, билиарной, желудочно-селезеночной частей [2, с. 88] поджелудочной железы фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заключали в парафин [3, с. 47]. Гистологические срезы толщиной 5-6 мкм изготавливали с помощью санного микротома МС-2. После депарафинирования срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Окрашенные срезы заключали в бальзам [4, с 115].
Таблица 1
________________________________________Схема исследования________________________________________
Методы исследования ^''\Группа '''\'ПТИЦ возраст (сутки) Гистологические (количество птиц/ препаратов) Морфометрические
Ядра экзокринных панкреоцитов Цитоплазма экзокринных панкреоцитов Цитоплазма ацинусов
Контроль-Опыт I (21) 5/15 1250 1250 250
Контроль (60) 5/15 1500 1500 250
Опыт I (60) 5/15 1500 1500 250
Контроль (120) 5/15 1750 1750 250
Опыт I (120) 5/15 1750 1750 250
г Контроль (180) 5/15 1500 1500 250 N^0 вЦ
Опыт I (180) 5/15 1500 1500 250
Опыт II (180) 5/15 1500 1500 250
Контроль (240) 5/15 1250 1250 250
Опыт I (240) 5/15 1250 1250 250
Опыт II (240) 5/15 1250 1250 250
Всего 55/165 15000 15000 2750
Морфометрические исследования включали:
1. Определение средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов (мкм2);
2. Установление средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов (мкм2);
3. Определение средних показателей ядерно-цитоплазматических отношений экзокринных панкреоцитов (%);
4. Определение относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах поджелудочной железы (шт.);
5. Установление средней площади поперечного сечения панкреатических ацинусов (мкм2);
6. Вычисление средней скорости (уср.) прироста площади поперечного сечения панкреатических ацинусов с помощью формулы (Санжапова А.Ф., 2008) [5, с.8]:
5і - ^
V
ср
Т
(мкм2/сутки), где
81 - средняя величина показателя в начальный период времени;
- средняя величина показателя в конечный период времени;
Т - период времени.
Среднюю площадь исследуемой структуры определяли по итогам измерения 400 структур у каждого из изученных животных. Все возрастные группы были представлены в исследовании пятью опытными и контрольными животными. Полученные морфометрические данные подвергали статистической обработке с определением критерия значимости (1) по Стьюденту, который был принят р<0,05 [6, с. 156]. Изготовлено и изучено 165 гистологических препаратов и 2500 микрофотографий поджелудочной железы.
Результаты исследования
В рамках контрольного исследования рассматривалось нормальное развитие поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» в возрасте 5-е, 15-е и 20-е, 30-е и 36-е сутки. Значение средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов дуоденальной части поджелудочной железы белых крыс контрольной группы характеризуется увеличением (р<0,05) в поздний препубертатный период (515 сутки) онтогенеза от 23,77±0,07 мкм2 у 5-суточных животных до 24,27±0,11 мкм2 у 15-суточных. Средняя площадь сечения ядер экзокринных панкреоцитов билиарной части поджелудочной железы контрольных животных в этот же период увеличивается (р<0,05) от 22,28±0,06 мкм2 до 23,99±0,10 мкм2, соответственно. Аналогичным образом увеличивается средняя площадь сечения ядер экзокринных панкреоцитов желудочно-селезеночной части от 20,69±0,06 мкм2 до 21,70±0,09 мкм2 (р<0,05). В пубертатный период наблюдается резкое снижение (р<0,05) средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы белых крыс контрольной группы до 16,88±0,11 мкм2, 15,24±0,10 мкм2 и 14,22±0,07 мкм2, соответственно. В период с 20-х по 36-е сутки происходит стабильное увеличение (р<0,05) средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы белых крыс контрольной группы, которая к 36-м суткам составляет 22,31±0,05 мкм2, 21,03±0,04 мкм2 и 18,74±0,04 мкм2.
После перехода птиц от одного типа питания к питанию пищей взрослых птиц (5-15 сутки) в норме средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов дуоденальной части поджелудочной железы возрастает (р<0,05) почти в 1,5 раза: от 82,64±0,50 мкм2 у 5-суточных животных до 115,79±1,16 мкм2 у 15-суточных животных (рис. 1). Подобные изменения средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов наблюдаются и в билиарной части поджелудочной железы бройлеров контрольной группы в период с 5-х по 15-е сутки постнатального онтогенеза - увеличение от 81,75±0,51 мкм2 до 114,31±1,18 мкм2, при р<0,05 (рис. 1). Средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов желудочно-селезеночной части поджелудочной железы в период с 5-х по 15-е сутки постнатального онтогенеза так же характеризуется значительным увеличением (р<0,05), почти в 1,5 раза. В пубертатный период средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы в норме
репродуктивном периоде средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов поджелудочной железы бройлеров вновь увеличивается (р<0,05) и достигает в дуоденальной части 85,11±1,24 мкм2, в билиарной части - 83,09±1,27 мкм2, а в желудочно-селезеночной части - 81,13±1,21 мкм2 (рис. 1). К 36-м суткам значения средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов всех исследованных частей поджелудочной железы продолжают стабильно увеличиваться (р<0,05), достигая 100,34±0,72 мкм2 в дуоденальной части, 98,64±0,70 мкм2 в билиарной части и 96,86±0,69 мкм2 в желудочно-селезеночной части (рис. 1).
□ дуоденальная часть
□ билиарная часть
П______желудочно-селезеночная част
3
с]
5
15 20
30
□ дуоденальная часть
□ билиарная часть
□_____желудочно-селезеночная часті
с
Рис. 1. Площадь (мкм2) сечения Рис. 2. Площадь (мкм2) сечения
цитоплазмы экзокринных панкреоцитов цитоплазмы ацинусов различных частей
различных частей поджелудочной железы в норме поджелудочной железы в норме (контроль) (контроль)
Значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей в поздний препубертатный период онтогенеза в норме достоверно уменьшаются. В пубертатный период значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов увеличиваются (р<0,05) и достигают максимума для всего исследованного периода онтогенеза. Репродуктивному периоду соответствует снижение (р<0,05) значений ЯЦО экзокринных панкреоцитов бройлеров кросса «Смена-7» контрольной группы, а к периоду возмужания происходит их стабилизация. Следовательно, степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов бройлеров контрольной группы (обратно пропорциональная значениям ЯЦО) оказывается самой низкой (р<0,05) в позднем препубертатном и пубертатном периоде. У 15- и 30-суточных животных степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов наиболее высокая (р<0,05). Указанные изменения степени функциональной активности экзокринных панкреоцитов определяются увеличением площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов.
Относительное количество экзокринных панкреоцитов в ацинусах дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы, позволяющее косвенно судить об объеме ацинусов в целом, с 5-х по 15-е сутки почти не изменяется (р>0,05), увеличиваясь (р<0,05) лишь с 15-х по 20-е сутки, после чего (20-36 сутки) достоверно снижается. Рассмотренная динамика изменений относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах соответствует основным периодам развития организма бройлеров кросса «Смена-7» на протяжении всего исследованного периода онтогенеза.
В возрастной динамике средней площади сечения цитоплазмы ацинусов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы бройлеров в позднем перпубертатном периоде значения возрастают (р<0,05), достигая максимума для всего исследованного периода онтогенеза (рис. 2). В пубертатном периоде значения средней площади сечения цитоплазмы ацинусов поджелудочной железы резко снижаются (р<0,05). Репродуктивный период характеризуется стабилизацией (р<0,05) значений средней площади сечения цитоплазмы ацинусов. К периоду возмужания происходит увеличение значений средней площади сечения цитоплазмы ацинусов, компенсирующее падение показателей в течение предыдущих двухэтапов (рис. 2).
Заключение
Таким образом, в ходе постнатального морфогенеза возрастной динамике экзокринных панкреоцитов и ацинусов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» в норме свойственна этапность изменений. Первый этап - этап прогрессивного роста (5-15 сутки) отличается высокими темпами морфологических преобразований, включающих: увеличение объема ядер и цитоплазмы экзокринных панкреоцитов; увеличение площади сечения ацинусов различных частей поджелудочной железы, а также повышение степени функциональной активности экзокринных панкреоцитов. Интенсивный рост на ранних этапах
нтогенеза соответствует представлениям о повышенной функциональной нагрузке поджелудоч железы в этот период, связанной с переходом от молочного к дефинитивному питанию. Второй этап (1520 сутки) характеризуется уменьшением объема ядер и цитоплазмы экзокринных панкреоцитов и ацинусов в целом, а также снижением степени их функциональной активности. За счет увеличения относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах поджелудочной железы к 20-м суткам, площадь сечения ацинусов сохраняет значение выше 5-суточных животных, несмотря на значительное уменьшение средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов. На третьем этапе (20-30 сутки) - этапе интенсивного роста, морфологические характеристики основных структур экзокринного отдела поджелудочной железы отличаются увеличением основных показателей экзокринных панкреоцитов и снижением значений средней площади сечения цитоплазмы ацинусов. Периоду возмужания (30-36 сутки) - четвертый этап - свойственна относительная стабилизация преобразований ядер и цитоплазмы экзокринных панкреоцитов и ацинусов различных частей поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7»
Полученные данные позволяют констатировать, что всему исследованному периоду постнатального морфогенеза (5-36 сутки) поджелудочной железы в норме свойственно постоянство соотношения показателей различных частей поджелудочной железы, что указывает на
однонаправленное и синхронное развитие экзокринных панкреоцитов и ацинусов в различных частях поджелудочной железы контрольных животных на разных этапах постнатального онтогенеза.
Was established age dynamics of exocrine acini and pankreotsits pancreas broiler cross "Smena-7". We studied the normal development ofpancreatic broiler cross "Smena-7" at the age of the 5 th, 15 th and 20th, 30th and 36th day.
The key words: morphogenesis, pankreatsit, acinus, pancreas, broiler cross Smena-7"Gamavit, Fosprenil.
Список литературы
1. Тельцов, Л. П. Периодизация развития пищеварительной системы человека в онтогенезе / Л. П. Тельцов, Р. К. Мустаев, Е. М. Богородская // Актуальные вопросы здоровья и среды обитания современного человека: Материалы 2-й Всероссийской научной конференции. Ульяновск, 2005. С. 115116.
2. Ноздрачев, А. Д. Анатомия крысы / А. Д. Ноздрачев, Е. Л. Поляков. СПб., 2001. 464 с.
3. Меркулов, Г.А. Курс патологической техники / Г. А. Меркулов. Л: Медицина. Ленингр. отд-ние, 1969. 424 с.
4. Елисеев, В. Г. Основы гистологии и гистологической техники / В. Г. Елисеев, М. Я. Субботина, К. И. Афанасьев. М.: Медицина, 1967. 268 с.
5. Санжапова, А. Ф. Особенности постнатального морфогенеза слизистой оболочки фундального отдела желудка белых крыс при длительном потреблении диспергированной пищи: автореф. ... канд. биол. наук / А. Ф. Санжапова. Ульяновск, 2008. 22с.
6. Лакин, Г. Ф. Биометрия / Г. Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. 343 с.
Об авторе
Щеглов Н.А. -аспирант Брянского государственного университета имени академика И.Г. Петровского.
