CC BY
12
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
палительного цитокина (ГЬ-10), при снижении корреляционных связей между ГЬ-10 с другими цитокинами. В этом случае, патогенез критического состояния можно характеризовать с позиции возрастания роли депрессивной фазы системного клеточного стресса: преобладание стратегии толерантности над стратегией резистентности клеточного ответа на действие системных повреждающих факторов. При этом СШ при подостром и затяжном течении сепсиса отличается крайней степенью критичности состояния пациентов (летальные исходы у 16 из 17 пациентов). Считаем, что стадийность патогенетических изменений при СШ нецелесообразно рассматривать с позиции иммуносупрессии как фазоспецифичного феномена. При описании патогенеза СШ шока корректней применять термин «дисфункция иммунной системы», которая определяется, в том числе, и эффектами поликлональной активации лимфоцитов. В свою очередь, несостоятельность антимикробной защиты организма при СШ определяется не только состоянием лимфоидной ткани, но и нарушением микроциркуляции, барьерных и гомеостатических функций многих органных систем, связанных с развитием системного провоспали-тельного клеточного стресса в ответ на системный характер действия повреждающих факторов.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В19 ПРИ ОНКОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Зыкова Т.А., Шевякова Е.А., Лысенко И.Б., Кузнецов С.А.
ФГБУ«Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения РФ, Ростов-на-Дону, Россия
Введение. Парвовирусная инфекция В19 (ПВИ) является одним из серьезнейших факторов риска возникновения осложнений для лиц со злокачественными гематологическими заболеваниями: инфицирование данным возбудителем зачастую происходит при гемотрансфузиях и при терапии препаратами иммуноглобулинов, вызывая в итоге тяжелые анемии, панцитопении и апластические кризы. В литературе активно обсуждается необходимость мониторинга таких пациентов на наличие острой формы ПВИ, однако на территории РФ сведения о ее распространенности в онкогематологии на данный момент весьма разрозненны и малочисленны.
Цель. Определение уровня серопревалентности к пар-вовирусу В19 (ПВ В19) и частоты проявления острых форм ПВИ среди онкогематологических больных, проходивших стационарное лечение и обследование в ФГБУ «РНИОИ» Министерства здравоохранения РФ в 20162017 гг.
Материалы и методы. Определяли уровень ^М и IgG к ПВ В19 в сыворотках крови методом твердофазного ИФА. Образцы цельной крови, а также пунктаты костного мозга 21 человека из данной выборки были дополнительно тестированы на наличие ДНК ПВ В19 методом ПЦР в режиме реального времени. Всего в исследование были включены 70 человек.
Результаты. Их общего числа больных 50 было с лим-фомами, 15 с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) и хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), 5 с множественной миеломой (ММ). Детей было 17, средний возраст 9 лет, взрослых — 53, средний возраст 50 лет. Уровень се-ропозитивности по ПВ В19 среди онкогематологических больных составил 66%, максимальным он оказался
в группе больных ММ — 80%, при лимфомах он составил 76%, и при различных формах лейкозов — лишь 27%. При этом уровень IgG в целом колебался в пределах 24,9443,1 Ед/мл, составив в среднем 167,7 Ед/мл. Уровень ин-фицированности различался по возрастам: среди детей он составил 29%, взрослых — 75%.
О наличии острой формы заболевания (реактивации или первичного инфицирования) судили по присутствию у пациента IgM к ПВ В19 и/или ДНК возбудителя. Данные маркеры были выявлены у 26% больных (56,2 Ед/мл), во всех случаях — на фоне наличия IgG, что свидетельствует о процессах реактивации, а не первичной инфекции. При этом у 21% обследованных была обнаружена ДНК ПВ В19, а IgM были выявлены лишь у 6%, из чего следует необходимость не только серологического, но и ПЦР-анализа при мониторинге онкогематологических больных. У детей маркеры острой ПВИ обнаружены не были, у взрослых они наблюдались в 34% случаев. Из 21 больного, обследованного на наличие ДНК ПВ В19 параллельно в крови и в пункциях костного мозга, в абсолютном большинстве случаев возбудитель выявлялся в пунктатах (67%), тогда как в крови — лишь в 5% случаев; одновременно в крови и в костном мозге — также у 5%. Это свидетельствует о необходимости исследования всех возможных видов биологического материала. Необходимо отметить, что наибольшая частота выявления маркеров острого заболевания наблюдалась у пациентов с лим-фомами (36%), при ММ — у 20% больных, при лейкозах IgM и/или ДНК ПВ В19 в данном исследовании обнаружены не были.
Заключение. Был определен уровень серопревалант-ности к ПВ В19 среди онкогематологических больных: в среднем он составил 66%, у детей 29%, у взрослых 75%. Маркеры острого заболевания чаще наблюдались при лимфомах (36%). Были получены данные, демонстрирующие необходимость мониторинга больных с гемобла-стозами как серологическими, так и молекулярно-био-логическими методами, причем не только в крови, но и в костном мозге для своевременного выявления острых форм ПВИ.
ОСОБЕННОСТИ МИГРАЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ КОКСИЕЛЛЕЗА
Карпенко С.Ф., Галимзянов Х.М., Аракельян Р.С.
Астраханский государственный медицинский университет, Астрахань, Россия
Развитие очагов воспаления в паренхиматозных органах и аллергическая перестройка организма являются особенностью патогенеза коксиеллеза. Изменения миграционной активности лейкоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) с экстрактами органов позволяют выявить тканевую аутосенсибилизацию.
Цель. Изучить особенности миграционной активности лейкоцитов при различных формах коксиеллеза.
Задачи: исследовать органную гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) по динамике миграционной активности лейкоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов с печеночным и легочным экстрактами при коксиеллезе в зависимости от формы заболевания.
Материалы и методы. Под наблюдением находилось 326 пациентов со среднетяжелым течением коксиеллеза в возрасте от 18 до 72 лет. Средний возраст больных соста-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология инфекций Immunology infections
вил 40,9±0,7 лет. Диагноз коксиеллеза был подтвержден иммуноферментным анализом (Coxiella burnetii Elisa IgG, IgM, Vircell, Испания) и полимеразной цепной реакцией («АмплиСенс Coxiella burnetii-FL» ФБУН «ЦНИИЭ», Россия). Все больные получали комплексную терапию, включающую этиотропное (доксициклин в первый день по 0,2 г, затем по 0,1 г однократно в течение 8,0±0,1 дней), патогенетическое и симптоматическое лечение. Обследование больных проводилось в динамике заболевания: в период разгара и в период ранней реконвалесценции. Для изучения особенностей формирования органной ГЗТ у больных коксиеллезом проводили РТМЛ с печеночным экстрактом (ПЭ) и легочным экстрактом (ЛЭ) по методу I. Clausen в агаровой среде (1971). Контроль — 100 здоровых лиц. Статистическая обработка результатов проводилась при помощи программ Microsoft Exel и BioStat. Определяли среднюю арифметическую (M), стандартную ошибку средней арифметической (m) — формат (M±m), процентное выражение ряда данных (%).
Результаты. Как показали наши исследования, у здоровых лиц индексы миграции (ИМ) составили в РТМЛ с ПЭ 93,5±0,1%, а в РТМЛ с ЛЭ 93,5±1,1%. Больные поступали в стационар на 6,2±0,2 день болезни. У 288 пациентов регистрировалась острая форма коксиеллеза, а у 38 больных отмечалась подострая (затяжная) форма заболевания. Возраст пациентов с подострой формой коксиел-леза в 1,2 раза превышал возраст больных с острой формой (47,1±1,8 лет против 39,9±0,8 лет, p < 0,001). У больных с подострой формой коксиеллеза чаще, чем у пациентов с острой формой, выявлялись гепатомегалия (68,4±7,5% против 47,6± ,9% случаев, p < 0,05), желтуха (44,7±8,1% против 17,9±2,3% случаев, p < 0,01) и снижение аппетита (71,0±7,4% против 38,5±2,3% случаев, p < 0,001). Было выявлено, что в разгар болезни изменение миграционной активности лейкоцитов наблюдалось у всех больных с по-дострой формой коксиеллеза и у большинства больных с острой формой болезни. Причем у пациентов с подострой формой коксиеллеза в 1,3 раза чаще, чем у больных с острой формой, происходили изменения миграционной активности лейкоцитов в РТМЛ с ПЭ (100% против 78,3±4,2%, p < 0,001). При этом у больных с подострой формой ИМ при торможении миграции лейкоцитов оказался в 1,3 раза ниже, чем у пациентов с острой формой болезни (43,3±3,9% против 56,1±2,8%, p < 0,05). Оказалось, что в разгар болезни у пациентов с острой формой болезни изменение миграционной активности лейкоцитов в РТМЛ с ЛЭ развивалось в 1,2 раза реже, чем у больных с подострой формой коксиеллеза (100% против 82,0±4,2%, p < 0,001). В разгар болезни у больных с по-дострой формой коксиеллеза уровень ИМ при ускорении миграции лейкоцитов оказался в 1,5 раза выше, чем у пациентов с острой формой болезни (227,5±4,8% против 156,0±2,3%, p < 0,01). В период ранней реконвалесцен-ции изменение миграционной активности лейкоцитов отмечалось у большинства пациентов в РТМЛ с ПЭ и с ЛЭ. В этот период болезни различия в частоте выявления этих изменений и величине ИМ в зависимости от формы коксиеллеза выявлены не были.
Заключение. Таким образом, у больных подострой формой коксиеллеза в разгар болезни наблюдаются более выраженные, чем у пациентов при острой форме болезни, реакции гиперчувствительности замедленного типа. Это
позволяет предположить, что аллергический компонент играет определенную роль при формировании затяжного течения коксиеллеза.
СПЕЦИФИКА ФАГОЦИТОЗА НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ В ОТВЕТ НА ВОЗДЕЙСТВИЕ ß-ЛАКТАМАЗ РАСШИРЕННОГО СПЕКТРА (STAPHYLOCOCCUS AUREUS, KLEBSIELLA PNEUMONIAE, PSEUDOMONAS AERUGINOSA)
Коленчукова О.А.1, 2, Сарматова Н.И.2
1 Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера ФИЦКНЦ СО РАН, Красноярск, Россия
2 Институт биологии и биотехнологии Сибирского федерального университета Министерства образования и науки РФ, Красноярск, Россия
Исследование посвящено изучению фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов при воздействии антибиотикорезистентных штаммов бактерий Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и Klebsiella pneumoniae, относящихся к ß-лактамазам расширенного спектра (БЛРС).
Объектами исследования служили нейтрофильные гранулоциты крови, выделенные у 25 практически здоровых людей в возрасте от 25 до 45 лет, и устойчивые и чувствительные штаммы P. aeruginosa и K. pneumoniae; штаммы S.aureus устойчивые к действию оксациллина (мети-циллина) (MRSA). В качестве контроля использовались штаммы P. aeruginosa, S. aureus, K. pneumoniae чувствительные к действию антибиотиков в аналогичной концентрации. Функции фагоцитоза оценивали с помощью FITC меченых бактериями в концентрации 106 КОЕ/мл. Анализ проводили в цельной периферической крови на проточном цитофлюориметре FC-500 с использованием метода прямой иммунофлюоресценции моноклональны-ми антителами, меченными CD14-PE/CD45-PC7/CD16-PC5 (Beckman Coulter, USA).
Анализируя результаты исследования, можно отметить различия, полученные при индукции нейтро-фильных гранулоцитов устойчивыми и чувствительными штаммами БЛРС. Так, в ответ на MRSA процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз и среднее число бактерий, находящихся внутриклеточно, увеличивается относительно чувствительных штаммов. В ответ на резистентные штаммы K. pneumoniae происходит снижение фагоцитарной активности нейтрофильных гра-нулоцитов. Различия в фагоцитарном ответе могут быть связаны с особенностями строения и жизнедеятельности бактерий. Бактерия P. aeruginosa относится к патогенной микрофлоре, в норме не заселяющей слизистые оболочки макроорганизма. В связи с чем при воздействии резистентными и чувствительными штаммами синегнойной палочки не получено существенных различий в фагоцитарном ответе. Таким образом, в результате приобретения резистентности к антибиотикам изменяется рецептор-ный аппарат бактерий вследствие модификации клеточной стенки.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ № 16-44-240668 и Краевого государственного автономного учреждения «Красноярский краевой фонд поддержки научной и научно-технической деятельности».
