CC BY
12
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Особенности иммунных нарушений у детей с бронхиальной астмой
Г.Г.Кабулов, А.А.Эюбова, Г.М.Насруллаева, Ю.Л.Мизерницкий
Азербайджанский медицинский университет, г.Баку; МНИИ педиатрии и детской хирургии Росздрава, г.Москва
В патогенезе атопической бронхиальной астмы ведущее значение придается наследственно закрепленной функциональной недостаточности барьерных тканей респираторного тракта, повышенной способности к синтезу аллергических антител, высокой чувствительности бронхолегочного аппарата к медиаторам аллергического воспаления, сниженной чувствительности р2-адренорецепторов к эндогенным катехоламинам, изменениям иммунологической реактивности [1, 2, 5]. Известно, что, развитие бронхиальной астмы связано с гиперреактивностью крупных и мелких дыхательных путей, являющейся проявлением хронического воспаления. Воспаление координируется клетками, относящимися к CD4+ лимфоцитам, так называемыми Т1п2 лимфоцитами [3, 6]. Начальные события, приводящие к доминированию Т1п2 лимфоцитов, до конца не ясны, хотя существует много претендентов на роль пускового звена Т1п2 опосредованной иммунной реакции, начиная с особенностей антигена (аллергена) и заканчивая спонтанным эндогенным развитием CD4+ лимфоцита в направлении Т1п2 [7, 8].
В публикациях последнего года было показано, что лимфоциты могут регулировать реактивность бронхов, в том числе вызывать бронхиальную гиперреактивность, и вне антигенной стимуляции, не используя в качестве посредников продукцию 1дЕ или эозинофильную инфильтрацию [1, 9].
В этой связи представляют интерес данные, полученные при комплексном исследовании показателей клеточного и гуморального иммунитета, неспецифической резистентности в сыворотке крови у детей с бронхиальной астмой.
Целью настоящего исследования стало изучение особенностей ряда показателей активности Т- и В-клеточного звеньев иммунитета и системы фагоцитоза у детей с атопической бронхиальной астмой в зависимости от тяжести течения и половой принадлежности.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Донное исследование проводилось в рамках международной программы
исследования астмы и аллергии у детей -International Study of Asthma and Allergy in Childhood ("ISAAC"). Под наблюдением находился 221 ребенок с атопической бронхиальной астмой в возрасте 13-14 лет, проживающих в промышленном городе Сумгаите, расположенном в зоне полупустыни. 26 школьникам (16 мальчиков, 10 девочек) было проведено тщательное иммунологическое обследование по тестам второго уровня.
У 15 детей (9 мальчиков, 6 девочек) была легкая, 8 детей среднетяжелая (5 мальчиков, 3 девочки) у 3 - тяжелая (2 мальчика, одна девочка) бронхиальная астма.
Средняя продолжительность болезни у детей с легким течением БА составила 5±0,38 лет. У группы детей со среднетяжелым течением бронхиальной астмы длительность болезни колебалась в пределах 7,25±0,75 лет, приступы/ удушья возникали у них с промежутками от 2-3 недель до 1 месяца и продолжались от 20 минут до 1,5-2 часов. У группы! пациентов с тяжелым течением бронхиальной астмы длительность болезни составляла 8,33±0,88 лет, приступы/ удушья возникали у них с частотой от 1 до 2 недель и чаще, продолжаясь от 3 часов и дольше. Проведенные ранее кожные скарификационные пробы с бытовыми, эпидер-мальными и пыльцевыми аллергенами позволили выявить у всех наблюдаемых больных признаки поливалентной сенсибилизации организма.
У наблюдаемых больных бронхиальной астмой определяли следующие иммунологические параметры:
- относительное и абсолютное количество Ти В- лимфоцитов, а также популяции CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD16/56+ лимфоцитов (метод проточной цитометрии на аппарате FAXScan фирмыi BD, производства USA);
- уровень сывороточных IgM, IgA, IgG, IgE определяли с помощью твердофазного иммуноферме-нтного анализа (ELISA) (4);
- содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли методом Гриневича и Алферова с использованием полиэтиленгликоля;
- показатели фагоцитарной активности макрофагов определяли с помощью НСТ-теста.
Контрольную группу в этих исследованиях составили 16 практически здоровых детей того же возраста (8 мальчиков, 8 девочек).
Таблица 1. Показатели иммунологической реактивности у мальчиков, страдающих бронхиальной
астмой различной степени тяжести, (п=16)
Показатели иммунного статуса Тяжесть течения бронхиальной астмы
Легкая, п=9 Среднетяжелая, п=5 Тяжелая, п=2
Популяции и субпопуляции лимфоцитов в крови
CD 3+, % 72.11 (65-82) 58.8 (57-60) 55 (54-56)
CD 4+, % 40.11 (30-56) 33.8 (31-41) 34 (34-34)
CD 8+, % 26.44 (18-35) 16.4 (14-19) 18(14-22)
CD 19+, % 15.9 (8-27) 11.8 (9-13) 11 (10-12)
CD 16+/CD56+, % 11.44 (7-15) 9.2 (7-11) 8.5 (8-9)
CD4+/CD8+ 1.55(1.1-2.3) 2.12 (1.79-2.41) 1.89(1.54-2.07)
Иммуноглобулины в сыворотке
lg G, г/л 8.91 (6.8-11.2) 7.1 (5.25-9.52) 6.8 (6.12-7.65)
lg M, г/л 1.13(0.73-1.6) 1.08 (0.7-1.79) 0.95 (0.7-1.2)
lg А, г/л 1.81 (0.9-0.3) 0.86 (0.7-1.1) 0.95 (0.8-1.11)
IgE, нг/мл 94.22 (49-184) 206(126-301) 400.5 (341-460)
ЦИК, у.е. 45.56 (29-64) 59 (26-81) 54.5 (34-75)
Показатель фагоцитоза
НСТ-тест, % 66.3 (50-81) 54.6 (48-61) 55(48-62)
Полученные результаты исследования были занесены в программу MS EXCEL 2003 для дальнейшей обработки. Для статистической обработки полученных данных исследования был применен непараметрический метод - ранговый критерий Уил-коксона-Манна-Уитни с использованием компьютерной программы Primer of Biostatistics v.4.03 by Stanton A. Glantz.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. При анализе генеалогического анамнеза установлено, что наследственная отягощенность по аллергическим заболеваниям отмечалась у 77% детей. Следует отметить, что наследственная отягощен-ность по атопическим заболеваниям по материнской линии, равно как и заболеваемость матерей БА, регистрировались соответственно в 1,6 и 3,5 раза чаще, чем по отцовской линии. С нарастанием тяжести течения БА у детей, частота встречаемости атопических заболеваний по обеим родительским линиям нарастала, а при тяжелой форме в 73% случаев встречалась одновременно у обоих родителей. Обследуемые дети родились от первой беременности в 50%, от второй - в 31%, от третьей - в 19 % случаев. Следует отметить, что у детей со среднетяжелой и тяжелой формами БА матери имели хронические заболевания дыхательной системы (бронхиальная астма, хронический бронхит) или соче-танную соматическую патологию (гастрит, дис-кинезия желчевыводящих путей, гипертония, пиелонефрит) чаще, чем у детей с легкой формой болезни (р<0,05). У 6 (23%) матерей беременность и роды протекали без патологии, в то время как у 20 (77%) женщин отмечался неблагополучный акушерский анамнез: токсикоз первой половины беременности, угроза прерывания и т.д. На первом году жизни у детей с БА выявля-
лись: анемия (54%), рахит (30%), перинатальное поражение ЦНС (8%) и дисбиотические нарушения кишечника (8%). Дети, в анамнезе страдающие анемией, впоследствии чаще входили в группу с среднетяжелым и тяжелым течением БА (р<0,05). У детей с перинатальным поражением ЦНС или сочетанными патологическими состояниями чаще отмечалось тяжелое течение БА (р<0,05). По нашим данным, 35% обследованных находились на раннем искусственном вскармливании, что сопровождалось аллергизацией организма и частым формированием атопичес-кого дерматита у этих детей (р<0,05). Симптомы атопического дерматита регистрировались у 77% обследованных детей, при этом у половины из них в первом полугодии жизни отмечались кожные проявления пищевой аллергии. В последующем установлено, что ранняя (до 1 года) манифестация симптомов атопического дерматита являлась фактором высокого риска формирования БА с тяжелой формой течения (р<0,05). Характерно, что все дети с бронхиальной астмой на первом году жизни перенесли хотя бы один эпизод ОРВИ (в возрасте 2-3-х месяцев - 73%, а во втором полугодии - 27%). У половины детей со среднетяжелым или тяжелым течением ОРВИ из-за развития осложнений (гнойного отита, бронхита, пневмонии) назначались антибактериальные препараты. Кроме того, дети, перенесшие ОРВИ в течение года 4 и более раз и входящие в группу так называемых "часто болеющих детей", составляли группу с тяжелой формой течения БА (р<0,05). Таким образом, дети со среднетяже-лым и тяжелым течением бронхиальной астмы рождались в основном от матерей с отягощенным соматическим и акушерско-гинекологичес-
Таблица 2. Показатели иммунологической реактивности у девочек, страдающих бронхиальной
астмой различной степени тяжести, (п=10)
Показатели иммунного статуса Тяжесть течения бронхиальной астмы
Легкая, п=6 Среднетяжелая, п=3 Тяжелая, п=1
Популяции и субпопуляции лимфоцитов в крови
СО 3+, % 62 (59-67) 55.7 (53-58) 56
СО 4+, % 35.83 (33-41) 35 (32-41) 33
СО 8+, % 23.83 (18-35) 14(11-17) 11
СО 19+, % 16.67 (13-22) 11 (11-11) 8
СО 16+/С056+, % 11.67 (10-16) 8.67 (7-11) 8
С04+/С08+ 1.56 (1-1.9) 2.63 (1.88-3.73) 3
Иммуноглобулины в сыворотке
1д в, г/л 9.05 (7.8-10.1) 5.84 (5.3-6.63) 5,7
1д М, г/л 1.24(0.88-1.65) 1.05 (0.8-1.2) 0,9
1д А, г/л 1.6 (0.9-2.3) 1.21 (0.91-1.46) 1,75
1дЕ, нг/мл 84.14 (30-112) 74.33 (34-97) 435
ЦИК, у.е. 48.17 (32-72) 70.33 (24-119) 62
Показатель фагоцитоза
НСТ-тест, % 66.5 (53-75) 58.67 (51-67) 49
ким анамнезом, когда на плод действовали инт-ранатальные факторы, способствующие неблагоприятному развитию иммунной системы (снижение общей реактивности и резистентности организма, особенно к инфекционным агентам).
В таблице 1 представлены результаты исследований показателей иммунологического статуса 16 мальчиков с атопической бронхиальной астмой различной тяжести течения.
Согласно результатам исследования, представленным в таблице, у мальчиков с легкой степенью бронхиальной астмы было выявлено умеренное повышение CD4+ 40,11 (30-56) и CD8+ 26,44 (18-35), что вероятно носило протек-тивный характер и свидетельствовало о напряжении иммунной системы. Отмечалось повышение иммуноглобулина класса Е в сыворотке крови - 94,22 (49-164 нг/л) у мальчиков этой группы. Количество CD3+ клеток у детей в этой группе находилось в пределах показателей детей контрольной группы (только у одного больного отмечалось значительное повышение СD4+ (56%), при контрольных значениях СD8+ (24%), что привело к повышению иммунорегуляторного индекса до 2,33. Обращает на себя внимание снижение уровня 1дО - 8,91 (6,82-11,2 г/л) при нормальных показателях 1дА - 1,61 (0,9-3 г/л) и 1дМ -1,13 (0,73-1,6 г/л).
При средней тяжести отмечался более значительный дисбаланс как в клеточном, так и в гуморальном звене иммунитета. Это выражалось в снижении количества CD4+ 33,8 (31-41) и параллельном снижении СD8+ 16,4 (14-19), причём снижение количества хелперов и супрессо-ров носило равномерный динамический характер. Показатель CD4+/CD8+ не отличался от по-
казателей контрольной группы - 2,12 (1,79-2,41).
Количество CD19+ находилось на нижней границе значений детей из контрольной группы -11,8 (9-13 г/л), а синтез антител класса 1дО - 7,09 (5,25-9,52 г/л) и 1дА - 0,86 (0,7-11 г/л) имел тенденцию к ослаблению при нормальном показателе 1дМ - 1,08 (0,7-1,79 г/л). У этих же больных усиление синтеза 1дЕ - 206 (126-301 нг/л) достоверно отличалось как от контрольной группы (р<0,001), так и от мальчиков с легким течением бронхиальной астмы (р<0,05).
В группе мальчиков с тяжелым течением бронхиальной астмы отмечалось снижение СD3+ до 55 (54-56), СD4+ до 34 (34-34) и СD8+ до 18 (14-22) популяций лимфоцитов, причем наиболее значимо снижалось именно количество CD8+ (до 50%). В той же группе больных страдало и В-клеточное звено иммунитета - 11 (10-12), что сопровождалось значительным снижением синтеза 1дО - 6,88 (6,12-7,65 г/л), 1дМ - 0,95 (0,71,2 г/л) и 1дА - 0,95 (0,8-1,11 г/л) антител с резким повышением уровня 1дЕ - 400,5 (341-460 нг/л). Только в этой группе больных отмечалось достоверное снижение фагоцитарной активности моноцитов/макрофагов до 48%, и количества CD16+/CD56+ клеток до 9% при сравнении с контрольной группой (р<0,05).
У девочек показатели иммунного статуса при легком течении бронхиальной астмы практически не отличались от изменений, выявленных у мальчиков (таблица 2).
При среднетяжелом течении обращает на себя внимание снижение общего количества CD3+ до 55,7 (35-58) и, особенно, CD8+ лимфоцитов - 14 (11-17), при умеренном снижении количества CD4+ 35 (32-41) лимфоцитов. В связи с
этим у этих детей наблюдалось колебание показателя иммунорегуляторного индекса в пределах (2,28-3,73). В этой группе больных отмечался пониженный уровень 1дО антител - 5,84 г/л (5,36,63) при нормальных показателях 1дМ - 1,05 г/л (0,8-1,2) и 1дА - 1,21 г/л (0,91-1,46). В отличие от мальчиков уровень 1дЕ антител колебался в пределах 74,33 нг/л (34-97).
Наименьшую по численности группу составили девочки с тяжелым течением БА, у которых страдали практически все популяции лимфоцитов CD4+, CD8+, CD19+. Однако угнетение Т-супрессорной популяции было наиболее значимым, что способствовало повышению значения иммунорегуляторного индекса до 3 единиц. В тоже время такое резкое изменение CD4+/CD8+ имело место только у одного больного с тяжелым течением бронхиальной астмы, что снижает категоричность данного значения. В последующих исследованиях мы надеемся удостовериться в данной тенденции. Одновременно ослабление дифференцировки В-лимфоцитов и снижение их функциональной активности привело к значительному дефициту 1дО антител до 5,3 г/л и резкому увеличению 1дЕ до 435 нг/л. В этой группе, как и у мальчиков с тяжелым течением бронхиальной астмы, было выявлено снижение активности клеток неспецифического иммунитета CD16+/56+ до 8 %, значения НСТ-теста до 49%.
Таким образом, необходимо отметить, что течение атопической бронхиальной астмы у детей пубертатного возраста имело ряд половых различий. Если показатели иммунного статуса у мальчиков при легком течении бронхиальной астмы практически не отличались от изменений, выявленных у больных женского пола, то при среднетяжелом и тяжелом течении болезни у них были выявлены некоторые особенности. Так у мальчиков с тяжелым течением бронхиальной астмы количество CD8+ клеток оставалось в пределах показателей детей того же пола из контрольной группы, или незначительно снижалось, а у девочек дефицит этой популяции был выражен резче (соответственно 18% и 11%). Такая картина наблюдалась и в отношении CD19+ лимфоцитов. У мальчиков наблюдалось снижение их до 11%, тогда как этот показатель среди девочек был равен 8%. Следует отметить, что ес-
ли у девочек уровень IgE значительно возрастал только при тяжелом течении бронхиальной астмы (435 нг/л), у мальчиков было выявлено достоверное усиление синтеза IgE как при среднетяже-лой, так и при тяжелой БА (соответственно 206 нг/л и 400,5 нг/л).
Таким образом, данные, полученные в ходе исследований, свидетельствуют о том, что у детей обоих полов со среднетяжёлым и тяжёлым течением атопической бронхиальной астмы отмечались изменения иммунологической реактивности в виде относительной недостаточности клеточного звена иммунитета, понижения уровней сывороточных иммуноглобулинов основных классов и гипериммуноглобулинемии Е, а также снижения показателей неспецифической резистентности организма. Анализ ряда показателей иммунитета детей с бронхиальной астмой в зависимости от тяжести течения заболевания позволил установить наличие вторичного иммуноде-фицитного состояния только у детей с тяжелым течением бронхиальной астмы, касающейся как показателей неспецифического иммунитета, так и специфического гуморального и клеточного его звена.
ЛИТЕРАТУРА
1. Балаболкин И.И. Бронхиальная астма у детей. - М.: Медицина, 2003, 320 с.; 2. Земсков А.М., Земсков В.М., Караулов А.В. - М.: Гэотар, 2005, 319 с.; 3. Мамедов М., Кребс Р. Методы твердофазного иммуноферментного анализа. Теория и практика. - Москва, 1999, 102 с.; 4. Ярилин А.А. Основы иммунологии. - М.: Медицина, 1999; 5. 9yyubova А.А., Nssrullayeva G.M. Immunoloqiya. -Dsrslik. Бак1: Nurlan, 2006, 232 с.; 6. Paul W. Fundamental Immunology. - NY: Lippincott, 1999, p.196; 7. Hayashi T, Gong X, Rossetto C, et. al. Induction and inhibition of the Th2 phenotype spread: implications for childhood asthma. - J Immunol., 2005, v.174(9), p.5864-73; 8. Corrigan CJ. The role of the T cell in the immunopathogenesis of asthma. - Chem Immunol., 2000, v.78, p.39-49; 9. Donovan CE, Finn PW. Immune mechanisms of childhood asthma. - Thorax, 1999, v.54(10), p.938-46.
SUMMARY
Particularities of immune disorders at children with bronchial asthma
G.Kabulov, A.Eyubova, G.Nasrullayeva, Y.Mizernickiy
The authors have shown the results of study dedicated to the T- and B-cell immunity at children with atopical bronchial asthma.
Поступила 05.10.2006
