CC BY
12
УДК 612.017.1
ОСОБЕННОСТИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С ПОСТИНФАРКТНЫМ КАРДИОСКЛЕРОЗОМ
Л. В. Краснова1'2, В. Д. Беленюк1, И. И. Гвоздев1
'Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН 2Сибирский федеральный университет
Целью статьи явилось исследование закономерностей течения заболевания у больных с постинфарктным кардиосклерозом на примере нейтрофильных гранулоцитов. В ходе исследования состояния нейтрофильных гранулоцитов у больных с постинфарктным кардиосклерозом установлены изменения их функциональной активности. На первой неделе лечения обнаружено значительное снижение интенсивности «кислородного взрыва» в нейтрофильных гранулоцитах крови.
Ключевые слова: нейтрофилы, гранулоциты, хемилюминесценция, кардиосклероз, постинфарктный
Ишемическая болезнь сердца (ИБС) занимает одно из лидирующих положений среди заболеваний с летальным исходом. Одной из форм исхода ИБС является постинфарктный кардиосклероз (ПИКС). При ишемии активированные нейтрофилы привлекаются в зону некроза медиаторами воспаления, продуктами деградации кардиомиоцитов и эндотелиальными факторами [1; 2]. Активированные нейтрофилы способствуют перекисной модификации липидов за счёт активных форм кислорода (АФК), участвуют в дестабилизации атеросклеротиче-ских бляшек, вызывают эндотелиальную дисфункцию, становятся одной из основных причин повреждения миокарда [2; 3; 4]. Исходя из этого, важно не только определить цитотоксическую нагрузку, но и проследить за динамикой изменения активности нейтрофилов при медикаментозном лечении.
Нейтрофильные гранулоциты являются ключевыми клетками воспаления, представляют собой высокореактивное звено в иммунной системе. Они первыми мобилизуются в очаг воспаления, от их фагоцитарной активности во многом зависит эффективность противомикробной защиты организма [2; 3; 5]. Хемилюминесцентная (ХЛ) активность характеризует состояние «респираторного взрыва» нейтрофильных гранулоцитов, который развивается при взаимодействии клеток с объектами фагоцитоза [6; 7; 8]. После фагоцитирования чужеродных частиц нейтрофилы обычно погибают, высвобождая большое количество биологически активных веществ, усиливающих воспаление и хемотаксис иммунных клеток в очаг. Метод хемилюминесценции позволяет обнаружить высоко реакционноспособные радикалы, тем самым оценить интенсивность «кислородного взрыва», скорость его развития в нейтрофильных гранулоцитах [8; 9].
Целью работы явилось определение хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС) в динамике лечения. Исследование особенностей хемилюминесцентной активности нейтрофилов у больных ПИКС позволит охарактеризовать механизмы воспалительного процесса, его регуляцию и в дальнейшем разработать методы прогноза характера течения и исхода заболевания.
Материалы и методы. На базе ФГБНУ «НИИ медицинских проблем Севера» было обследовано 76 пациентов с постинфарктным кардиосклерозом, в возрасте 30-65 лет (средний возраст пациентов составил 46 лет). В качестве контроля обследовано 40 относительно здоровых людей аналогичного возрастного диапазона. Все исследования выполнены с информированного согласия испытуемых и в соответствии с этическими нормами Хельсинской Декларации 2001 года.
Хемилюминесцентное (ХЛ) исследование активности нейтрофилов проводится по ранее разработанным методикам [6; 7]. Исследование спонтанных и зимозан-индуцированных ХЛ гранулоцитов осуществляли с помощью хемилюминесцентного анализатора «CL3606M» (СКТБ «Наука», Красноярск). Результаты хемилюминес-центного анализа оценивали по следующим параметрам: время выхода на максимум (Tmax), максимальное значение интенсивности (Imax) и площадь под хемилюминесцентной кривой (S). Усиление хемилюминесценции, индуцированной зимозаном, оценивали отношением площади индуцированной хемилюминесценции к площади спонтанной ^инд. / Sспонт.) и определяли как индекс активации.
Описание выборки производили с помощью подсчёта медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому критерию Манна-Уитни (Mann-Whitney U test). Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ «Statistica 8.0» (StatSoft Inc., 2007).
Результаты и обсуждение. В ходе исследования были получены статистически достоверные данные о понижении площади под кривой спонтанной люминол-зависимой хемилюминесценции (р < 0,01) на первой неделе лечения относительно контрольных значений. Достоверных отличий на второй неделе исследования не выявлено. На первой неделе лечения люминол-зависимая хемилюминесценция, индуцированная опсонизирован-
ным зимозаном, достоверно снижена (р < 0,01) относительно контрольных значений. При исследовании интенсивности и времени выхода на максимум люминол-зависимой спонтанной и индуцированной хемилюминес-ценции достоверных отличий обнаружено не было. Это указывает на сниженную продукцию АФК, вызванную метаболическим истощением нейтрофильных гранулоцитов у больных с постинфарктным кардиосклерозом. Площадь под кривой люцигенин-зависимой хемилюминесценции на первой неделе значительно снижена (р < 0,001) по сравнению с контрольным диапазоном. На второй неделе достоверных отличий по данному параметру обнаружено не было. При оценке индуцированной зимозаном люцигенин-зависимой хемилюминесцен-ции значимых различий между показателями контрольной группы и пациентов с постинфарктным кардиосклерозом не обнаружено. При исследовании времени выхода на максимум было обнаружено значимое снижение люцигенин-зависимой спонтанной хемилюминесценции (р < 0,01). Аналогичная картина наблюдалась при исследовании индуцированной зимозаном люцигенин-зависимой хемилюминесценции (р < 0,01). На второй неделе лечения достоверные отличия не зафиксированы. В результате исследования интенсивности люцигенин-зависимой спонтанной и индуцированной хемилюминесценции достоверных отличий обнаружено не было. Это указывает на сниженный уровень синтеза супероксидного анион-радикала нейтрофильными гранулоцитами [8; 9]. Выход супероксидного анион-радикала при антигенной стимуляции опсонизированным зимозаном ускорен, что свидетельствует о наличии дополнительных метаболических резервов нейтрофильных гранулоцитов у пациентов с постинфарктным кардиосклерозом.
Заключение. В ходе исследования состояния нейтрофильных гранулоцитов у больных с постинфарктным кардиосклерозом установлены изменения их функциональной активности. На первой неделе лечения обнаружено значительное снижение интенсивности «кислородного взрыва» в нейтрофильных гранулоцитах крови. Это указывает на возможное истощение метаболических резервов в клетках, опосредованное спецификой развития данного заболевания. На второй неделе достоверных различий в группе больных с постинфарктным кардиосклерозом не обнаружено, что указывает на развитие компенсаторных процессов.
Исходя из этого, можно предположить, что под действием лечения изменение хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов крови у больных ПИКС и понижение реактивности клеток могут определяться процессами восстановления в зоне ишемии миокарда.
Библиографический список
1. Савченко, А. А. Особенности системы гемостаза и хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных с острым коронарным синдромом / А. А. Савченко // Сибирское медицинское обозрение. - 2012. - С. 10.
2. Славинский, А. А. Активированные нейтрофилы при остром инфаркте миокарда / А. А. Славинский // Международный журнал экспериментального образования. - 2010. - № 7. - С. 63-65.
3. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и клеточная хемилюминесценция / Ю. А. Владимиров, Е. В. Проскурнина // Успехи биологической химии. - 2009. - Т. 49. - С. 341-388.
4. Савченко, А. А. Основы клинической иммунометаболитики / А. А. Савченко, А. Г. Борисов. - Новосибирск: «Наука», 2012. - С. 263.
5. Краснова, Л. В. Динамика изменения хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных с постинфарктным кардиосклерозом / Л. В. Краснова, И. И. Гвоздев, А. А. Савченко // Теоретические и прикладные аспекты современной науки. - 2014. -Т. 1. - С. 99-102.
6. Коленчукова, О. А. Особенности люминол- и люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов у больных хроническим риносинуситом / О. А. Коленчукова, А. А. Савченко, С. В. Смирнова // Медицинская иммунология. - 2010. - Т. 12. -№ 4-5. - С. 437-440.
7. Савченко, А. А. Хемилюминесцентная и энзиматическая активность нейтрофильных гранулоцитов у больных распространенным гнойным перитонитом в зависимости от исхода заболевания / А. А. Савченко, Д. Э. Здзитовецкий, А. Г. Борисов, Н. А Лузан. // Вестник РАМН. - 2014. - № 5-6. - С. 23-28.
8. Куртасова, Л. М. Метаболические аспекты иммунореабилитации детей с атопическими заболеваниями / Л. М. Куртасова, А. А. Савченко, В. Т. Манчук. - Новосибирск: Наука, 2006. - С. 222.
9. Куртасова, Л. М. Клинические аспекты функциональных нарушений нейтрофильных гранулоцитов при онкопатологии / Л. М. Куртасова, А. А. Савченко, Е. А. Шкапова. - Новосибирск: Наука, 2009. - С. 184.
© Краснова Л. В., Беленюк В. Д., Гвоздев И. И., 2015
