CC BY
29
УДК 616.314.18-079:618.3.
ОСОБЕННОСТИ АНТИМИКРОБНОГО ИММУНИТЕТА ПОЛОСТИ РТА У БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С ХРОНИЧЕСКИМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННЫМ ПАРОДОНТИТОМ В ТЕЧЕНИЕ ГЕСТАЦИОННОГО ПЕРИОДА
Сурменева1 С. О., Лапина2 Н.В., Чибичян1 Е.Х.
ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения России, г.Ростов-на-Дону, Россия.
2ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения России, г. Краснодар, Россия.
Аннотация. В статье в динамике беременности при хроническом генерализованном пародонтите (ХГП) средней степени тяжести изучено изменение концентрации антимикробного пептида кателицидина КЬ-37 в ротовой жидкости. У беременных женщин при ХГП средней степени тяжести в первые два триместра повышенное содержание кателицидина LL-37 в слюне способствует повышению антимикробных врожденных механизмов резистентности к патогенным бактериям с последующим снижением антимикробного фактора к 3 триместру гестацион-ного периода. Этот факт является обоснованием для поиска маркеров индукции антимикробных пептидов в целью сдерживания воспалительных изменений в пародонте и основанием для активизации профессиональных гигиенических мероприятий в ротовой полости при беременности.
Ключевые слова. беременность, хронический генерализованный пародонтит, ротовая жидкость, антимикробные пептиды, гестационный период
Бактерицидные свойства ротовой жидкости, обусловленные содержанием в ней большого количества антибактериальных протеинов — лизо-цима, лактоферрина, лактопероксидазы, иммуноглобулинов, агглютининов и муцинов, пептидов антимикробного действия (гистатинов, дефе-нзинов и кателицидина LL-37), обуспечивают мукозальный или врожденный иммунитет ротовой полости [1]. Особая роль в мукозальном иммунитете отводится противомикробным пептидам - катионным белкам, которые обладая широким спектром противомикробной активности, выполняют ряд важных функций как медиаторы воспаления, оказывают иммуномодулирующее и цитотоксическое действие, влияют на хемотаксис лейкоцитов и играют важную роль в развитии аутоиммунных процессов [2].
С нарушением образования противомикроб-ных пептидов, повышением или снижением их
экспрессии связывают развитие, течение и исход воспалительных процессов в полости рта [3]. Однако роль их в развитии воспалительных заболеваний пародонта, особенно у беременных женщин, находится на начальных этапах изучения. Патогенетическое значение антимикробных пептидов при беременности было изучено при развитии кариеса зубов [4]. Это обосновывает актуальность дальнейших исследований иммунных механизмов в развитии хронического генерализованного пародонтита (ХГП) и разработки информативных критериев диагностики и течения этих заболеваний у беременных женщин.
Целью исследования является определить в динамике беременности при ХГП средней степени тяжести изменение активности антимикробных врожденных механизмов полости рта.
Материалы и методы исследования.
Оценка содержания в ротовой жидкости антимикробного пептида кателицидина LL-37 осуществлялась у 42 беременных с ХГП средней степени тяжести (клиническая группа) в динамике гестационного периода: первый триместр -8-12 недель, второй триместр - 13-27 недель, третий триместр беременности - 28-40 недель. Для исследования использовали ротовую жидкость, собранную натощак, утром с 8 до 10 часов утра, без стимуляции в пластиковые пробирки BD Vacutainer («BD Bioscience»). В ротовой жидкости методом иммуноферментного анализа при помощи набора реактивов фирмы «Hycult Biotech human LL-37 ELISA» (Нидерланды) определяли кателицидин LL-37. Результат выражали в мкг/мл. В ходе ИФА использовались тер-мошейкер ST3 (Латвия) и аппарат для промывания планшетов Elisa Washer Human (США), оценку полученных результатов проводили на фотометре Multilabel Counter 1420 Victor (Финляндия).
В две контрольные группы были объединены 31 беременная женщина с физиологически протекающей беременностью и отсутствием стоматологических болезней и 32 здоровая женщина волонтерской группы.
Содержание кателицидина LL-37 (мкг/мл) в ]
В клинической группе возраст колебался от 18 до 39 лет, среди здоровых беременных женщин - от 18 до 34 лет и в группе здоровых доноров - от 17 до 40 лет. Средний возраст беременных женщин клинической группе составил 28,1±1,7 лет, среди здоровых беременных женщин -25,8±1,9 лет и в группе здоровых доноров - 26,3±2,0 лет.
Все исследования у здоровых и больных людей выполнены с их информированного согласия и соответ ствовали этическим принципам, предъявляемым Хельсинской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki, 2000), этических стандартов Комитета по экспериментам, стандартам проведения клинических исследований GCP (ГОСТ Р 52379 - 2005).
Статистическая обработка результатов будет проведена с использованием пакета прикладного программного обеспечения Statistica 7.0.
Результаты и обсуждение. Содержание антимикробного пептида кателицидина LL-37 в ротовой жидкости в группах обследуемых представлено в таблице 1.
Таблица 1
й жидкости в группах обследуемых (M±m)
Группа Этап гестационного периода
8-12 нед. (1 триместр) 13-27 нед. (2 триместр) 28-40 нед. (3 триместр)
Клиническая группа, п=42 38,6±3,2*° 65,3±3,8*° 21,4±1,1*°
Здоровые беременные женщины, п=31 20,4±1,2* 23,4±1,5 27,4±1,9
Здоровые доноры, п=32 25,1±1,6
Примечание: * - достоверные отличия по сравнению со здоровыми донорами прир<0,05, ° - достоверные отличия по сравнению со здоровыми беременными женщинами без стоматологических заболеваний
У беременных женщин с физиологически протекающей беременностью и без стоматологической патологии по сравнению со здоровыми донорами в 1 триместре беременности наблюдалось статистически значимое снижение содержания кателицидина LL-37 в ротовой жидкости на 18,7% (р<0,05). Затем во 2 и 3 триместры содержание данного антимикробного пептида не отличалось (р>0,05) от уровня у здоровых доноров. Следовательно, депрессия изучаемого антимикробного фактора врожденной иммунной защиты
ротовой полости в первом триместре беременности была характерна и при отсутствии стоматологических болезней.
Уровень антимикробных пептидов в настоящее время рассматривается как маркер активации воспалительного процесса различного ге-неза [5]. Кателицидины, имеющие широкий спектр противомикробной активности, включая грамотрицательные и грамположительные бактерии, грибы, некоторые вирусы, наряду с антибактериальной активностью играют важную
роль в воспалении. Кателицидины влияют на экспрессию провоспалительных цитокинов, являются хемотаксическим фактором для нейтро-филов, моноцитов, тучных клеток, нейтрализуют эндотоксины [6, 7]. Так, кателицидин LL-37 оказывает прямое воздействие и способствует снижению выработки провоспалительного фактора некроза опухоли-а [6]. Повышение содержания кателицидина LL-37 в ротовой жидкости у беременных пациенток с ХГП средней степени тяжести в 1 и 2 триместры беременности можно рассматривать как активацию врожденного антимикробного фактора, направленную на ограничение патогенного потенциала этиологическии значимых микробных возбудителей. У пациенток клинической группы содержание кателици-дина LL-37 в ротовой жидкости по сравнению со здоровыми беременными женщинами было выше в 1 триместр на 89,2% (р<0,001), а во 2 триместр в 2,8 раза (р<0,001).
Однако, в 3 триместр беременности содержание кателицидина LL-37 в ротовой жидкости у беременных пациенток клинической группы снижалось до 21,4±1,1 мкг/мл и было статистически значимо ниже (р<0,001) аналогичного показателя здоровых беременных женщин в 3 триместре беременности (27,4±1,9 мкг/мл), а также по отношению к здоровым волонтерам (25,1±1,6 мкг/мл). Итак, если у беременных женщин с физиологически протекающей беременностью и без стоматологической патологии в динамике ге-стационного периода содержание кателицидина LL-37 в ротовой жидкости повышалось, то при ХГП средней степени тяжести наблюдалась иная картина. Ко 2 триместру беременности содержание кателицидина LL-37 в слюне в клинической группе повышалось, а к 3 триместру прогрессивно снижалось, являясь признаком иммунодефицита.
Таким образом, у беременных женщин с ХГП средней степени тяжести в 3 триместре беременности антимикробный потенциал кателицидина LL-37 в ротовой полости снижался. Этот факт является обоснованием для поиска маркеров индукции антимикробных пептидов в целью сдерживания воспалительных изменений в пародонте и основанием для активизации профессиональных гигиенических мероприятий в ротовой полости при беременности.
Выводы:
1. У беременных женщин с физиологически протекающей беременностью и при отсутствии стоматологических заболеваний в 1 триместре наблюдается снижение содержания кателицидина LL-37 в ротовой жидкости с последующим ростом во 2 и 3 триместры антимикробного потенциала биологичекой среди ротовой полости
2. У беременных женщин при ХГП средней степени тяжести в первые два триместра повышенное содержание кателицидина LL-37 в ротовой жидкости способствует повышению антимикробных врожденных механизмов резистентности к патогенным бактериям с последующим снижением антимикробного фактора к 3 триместру гестационного периода.
3. Дефицит кателицидина LL-37 в ротовой жидкости в 3 триместре беременности у пациенток с ХГП средней степени тяжести является отражением угнетения антимикробной врожденной защиты ротовой полости и фактором, способствующим прогредиентному течению стоматологического заболевания.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бутюгин И.А., Долгушин И.И., Ронь Г.И. Кли-нико-иммунологическая характеристика пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом // Уральский медицинский журнал. 2014. № 5. С. 34-38.
2. Шамова О.В., Орлов Д.С., Кокряков В.Н., Корнева Е.А. Антимикробные пептиды в реализации различных защитных функций организма. // Медицинский академический журнал. 2013. №3. С.42-52.
3. Кулакова Е.В., Елизарова В.М., Пампура А.Н. Эндогенные антимикробные полипептиды-факторы неспецифической защиты организма // Российский стоматологический журнал. 2012. №6. С. 42-45.
4. Проходная В.А. Патогенетическое значение антимикробных пептидов ротовой полости для рецидивирова-ния кариеса зубов у беременных женщин // Стоматология для всех. 2015. №2. С.32-35.
5. Окороченков С.А., Желтухина Г.А., Небольсин В.Е. Антимикробные пептиды: механизмы действия и перспективы практического применения // Биомедицинская химия. 2012. №2. С. 131-143.
6. Yount N.Y., Yeaman M.R. Immunoconsiluum: Perspectives in Antimicrobial. Peptide Mechanisms of Action and Resistance // Protein and Peptide Letters. 2005. Vol. 12. P. 4967.
7. Dale B.V., Fredericks L.P. Antimicrobial peptides in oral environment: expression and function in Health and disease // Curr. Issues. Mol. Biol. 2005. Vol.7. №2. P. 119-133.
ANTIMICROBIAL FEATURES ORAL IMMUNITY IN PREGNANT WOMEN WITH CHRONIC GENERALIZED PERIODONTITIS WITHIN GESTATION
Surmeneva1 S.O., Lapinа2 N. V., Chibichjan1 E.H.
'Rostov State Medical University, Health Ministry Russia, Rostov-on-Don, Russia. 2Kuban State Medical University, Health Ministry Russia, Krasnodar, Russia.
Annotation. In an article in the course of pregnancy in chronic generalized periodontitis (CGP) moderate studied changes in the concentration of the antimicrobial peptide cathelicidin LL-37 in oral fluid. In pregnant women with CGP moderate during the first two trimesters high content of cathelicidin LL-37 in the saliva contributes to the innate antimicrobial resistance mechanisms in pathogenic bacteria, followed by reduction of the antimicrobial factors in 3 trimester of gestation. This fact is a justification for finding the induction of antimicrobial peptides in order to curb markers of inflammatory changes in the periodontium and the basis for the activation of professional hygiene measures in the oral cavity during pregnancy.
Key words. pregnancy, chronic generalized periodontitis, oral liquid, antimicrobial peptides, gestational period.
REFERENCES
1. Butjugin I.A., Dolgushin I.I., Ron' G.I. Clinical and immunological characteristics of patients with chronic generalized periodontitis. Ural'skij medicinskij zhurnal, 2014, №5, pp. 34-38 (in Russian).
2. Shamova O.V., Orlov D.S., Kokrjakov V.N., Korneva E.A. Antimicrobial peptides in the implementation of the various protective functions of the organism. Medicinskij akademicheskij zhurnal. 2013. №3. pp.42-52 (in Russian).
3. Kulakova E.V., Elizarova V.M., Pampura A.N. Endogenous antimicrobial polypeptides factors of nonspecific protection of an organism. Rossijskij stomatolog-icheskij zhurnal. 2012. №6. pp. 42-45 (in Russian).
4. Prohodnaja V.A. Pathogenetic importance of antimicrobial peptides mouth to the recurrence of dental caries in pregnant women. Stomatologija dlja vseh, 2015, №2, pp.32-35 (in Russian).
5. Okorochenkov S.A., Zheltuhina G.A., Nebol'sin V.E. Antimicrobial peptides: mechanisms of action and practical perspective. Biomedicinskaja himija. 2012. №2. S. 131-143 (in Russian).
6. Yount N.Y., Yeaman M.R. Immunoconsiluum: Perspectives in Antimicrobial. Peptide Mechanisms of Action and Resistance. Protein and Peptide Letters. 2005. Vol. 12. P. 49-67.
7. Dale B.V., Fredericks L.P. Antimicrobial peptides in oral environment: expression and function in Health and disease. Curr. Issues. Mol. Biol. 2005. Vol.7. №2. P. 119-133.
