CC BY
359
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
© О. Н. Беспалова 1, Т.С. Бескоровайная 3
Т. Э. Иващенко 1, |С. М. Тверская
И. Ю. Васильева 2, Н. В. Вохмянина 2, А. В. Поляков 3, В. С. Баранов 1, Э. К. Айламазян 1
1 НИИ акушерства и гинекологии
им. Д. О. Отта РАМН: лаборатория прена-тальной диагностики наследственных болезней, Санкт-Петербург;
2 Диагностический медико-генетический центр, Санкт-Петербург;
3 Медико-генетический научный центр РАМН, Москва
ОСОБЕННОСТИ АЛЛЕЛЬНОГО ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ HLA II КЛАССА (DRB1, DQA1, DQB1) У СУПРУГОВ В ПАРАХ С НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ
3
■ Известно, что на течение и исход беременности оказывают влияние иммунологические взаимоотношения между зародышем и материнским организмом. Организм матери может вырабатывать антитела к антигенам главного комплекса гис-тосовместимости эмбриона, что вызывает иммунные реакции несовместимости между организмом матери и эмбриона в период имплантации, следствием чего может быть невынашивание беременности (НБ). Рядом авторов отмечено, что степень совместимости по аллелям HLA (HLA — human leukocyte antygenes) супругов может отражаться на течении беременности. Полное несовпадение HLA-генотипов благоприятно для развития беременности.
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей аллельных полиморфизмов трех генов HLA II класса (DRB1, DQA1, DQB1) у супружеских пар с НБ и у здоровых супружеских пар. В результате проведенной работы выявлено, что совпадение по двум локусам системы HLA II в группах супругов с НБ и привычным невынашиванием беременности (ПНБ) встречалось почти в 3 раза чаще, чем в контроле. Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития невынашивания беременности у супружеских пар, совпадающих по двум локусам, повышен в 3,5 раза (OR 3,61; CL:1,15—11,3), а риск привычного невынашивания беременности в 2,8 раза (OR 2,88; CL: 1,12-7,38). Показано, что некоторые аллели изученных генов HLA II класса имеют протективный характер (аллели DRB1 15, DQA1 101, DQA1 102 и DQA1 201), другие же могут предрасполагать как к НБ, так и к ПНБ (аллели DRB1 04, DQA1 103, DQA1 301 и DQB1 302).
■ Ключевые слова: невынашивание беременности; привычное невынашивание беременности; система HLA II класса, DRB1, DQA1 и DQB1
Введение
В этиологии невынашивания беременности (НБ) иммунологические причины занимают одно из ведущих мест, и, по данным ряда авторов, частота их колеблется от 5 % до 44 % [3, 4]. Известно, что одной из причин НБ в первом триместре может быть иммунологический конфликт между зародышем и материнским организмом. Это может приводить к повторяющимся выкидышам, что позволяет говорить о привычном невынашивании беременности (ПНБ). У женщин с ПНБ наблюдаются изменения как клеточного, так и гуморального иммунного ответа [6].
В последние годы широко изучается роль главного комплекса гистосовместимости человека (Human Leukocyte Antygenes — HLA) в генезе привычной потери плода. В работах Beer A., Kwak J. (2000) иммунологические нарушения при репродуктивной патологии (НБ, бесплодии, неудачах ЭКО) разделяют на 5 категорий. К одной из наиболее важных относят совместимость супругов по системе HLA, ведущей к неэффективному «камуфляжу» плаценты и делающей ее доступной к иммунной атаке материнского организма.
Совместимость супругов по системе HLA и ее роль в репродукции в течение длительного времени остается нерешенной проблемой. Расшифровка генома человека, возможно, позволит более тесно связать особенности HLA системы матери, отца и плода с акушерской патологией.
Несовместимость супругов по HLA-антигенам, а также несовместимость эмбриона и материнского организма по этой системе является важным моментом, необходимым для сохранения и вынашивания беременности [2]. Полное несовпадение HLA-генотипов у супругов является благоприятным фактором для развития беременности. В супружеских парах с ПНБ неясного генеза было отмечено, что одинаковые антигены в HLA класса II встречаются у супругов достоверно чаще по сравнению с теми парами, где беременность развивается нормально
[1, 5, 12].
По данным Серовой Л. Д. и др., при совместимости супругов по двум и более антигенам HLA-системы риск невынашивания беременности составляет практически 100 %. В то
же время у супружеских пар с НБ было отмечено, что одинаковые антигены в HLA-генотипах матери и плода встречаются чаще по сравнению с теми парами, где беременность развивается нормально [7]. В последние годы весьма интенсивно изучаются ассоциации системы HLA с различной репродуктивной патологией. Так у 86,5 % пациенток с антифосфолипидным синдромом определяется HLA DQ4 [5], а при наличии аллеля DQА 0201 у мужчин из пар с НБ в 50 % случаев беременность заканчивалась анэмбрионией [4, 7].
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей аллельных полиморфизмов трех локусов ^А II класса (DRB1, DQA1, DQB1) у супружеских пар с НБ и у здоровых супружеских пар.
Материалы и методы
Проведено исследование у 334 женщин и мужчин (167 супружеских пар) с НБ в анамнезе и без НБ. В группу 1 (контроль) вошли 50 супружеских пар, имеющих одного и/или более здорового родного ребенка. Группу 2 составили 27 супружеских пар с НБ в анамнезе (с одним выкидышем раннего или позднего срока). В группе 3 состояли 90 пар с ПНБ в анамнезе (наличие 2 и более самопроизвольных выкидышей раннего и/или позднего срока). Все пары проходили полное комплексное клинико-лабораторное обследование: гормональное, УЗИ, микробиологическое, цитогенетическое и т. д. Молекулярно-биологи-ческое исследование проводилось на базе лаборатории пренатальной диагностики наследственных болезней НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта РАМН (Санкт-Петербург) и в лаборатории ДНК-диагностики Медико-генетического научного центра РАМН (Москва).
Образцы ДНК получали из лимфоцитов периферической крови, используя набор реагентов и протокол для выделения ДНК из различного биологического материала фирмы <Ю1АШт™ DNAPrep100» (Россия).
Определение полиморфных аллелей локусов DRB1, DQA1 и DQB1 проводили с использованием набора реагентов фирмы «ДНК-технология» согласно прописи, рекомендованной фирмой-изготовителем.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы STATISTICA у5.5а. При сравнении частот генотипов использовали стандартный критерий X2. Относительный риск (OR) развития заболевания при определенном генотипе рассчитали по стандартной формуле ОЯ = а/Ь х d/c, где а и Ь — количество больных, имеющих и не име-
ющих мутантный генотип соответственно, а с и d — количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип соответственно. OR указан с 95%-м доверительным интервалом. Границы доверительного интервала вычисляли по формулам ОЯтт = ОЯ(1 — 1,96 / ^Х2) и ОЯтах = ОЯ(1 + 1,96 / ^Х2).
Результаты
В трех исследуемых группах нами проведен сравнительный анализ частот аллелей и генотипов по DRB1, DQA1, DQB1 генам ^А II класса.
Выявлены статистически значимые различия в частотах некоторых аллелей изученных генов у женщин из супружеских пар с НБ и ПНБ в анамнезе по сравнению с женщинами из контрольных пар (табл. 1). Так, у пациенток с НБ из группы 2 достоверно чаще встречались аллели DRB1 04 (22,2 %), DQA1 301 (33,3 %), DQA1 103 (22,2 %) и DQB1 302 (22,2 %) (р < 0,01) (табл. 1). У женщин с ПНБ из группы 3 по сравнению с контролем достоверно чаще идентифицирован аллель DQA1 301 (24,4 %; р < 0,05). Вместе с тем, у женщин в контрольной группе по сравнению с пациентками из группы с НБ достоверно чаще встречались 3 аллеля: DQA1 201 (13 %; р < 0,05), DQA1 101 (24 %; р < 0,05) и DQA1 102 (19 %; р < 0,05).
Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития НБ у женщин при носительстве определенных аллелей повышен в несколько раз: для аллеля DRB1 04 в 2,6 раза (ОЯ 2,61; С^1,1-6,3), для аллеля DQA1 301 почти в 4 раза (ОЯ 3,9; ^:1,8-9,1), для аллеля DQA1 103 в 4,5 раза (ОЯ 4,5; С^1,6-11,9) и для аллеля DQB1 302 в 2,5 раза (ОЯ 2,6; С^1,1-6,3). Риск ПНБ повышен у женщин при носительстве аллеля DQA1 301 (ОЯ 2,6; С^1,3-5,2).
При сравнительном анализе частот аллелей DRB1, DQA1, DQB1 генов у мужчин из супружеских пар с НБ и ПНБ в анамнезе и в контрольной группе также выявлены статистически значимые различия (табл. 1). У пациентов из групп 2 и 3 из супружеских пар с НБ и ПНБ в 2,5 раза чаще встречался аллель DQA1 301, и в 4 раза чаще аллель DQB1 302 по сравнению с контролем. У мужчин из группы контроля достоверно чаще выявлялись аллели DЯB1 15 (22 %) и DQA1 102 (22 %) по сравнению с мужчинами из супружеских пар с НБ (11,1 % и 7,4 % соответственно, р < 0,05).
Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск НБ в семьях, где мужчина является носителем определенных аллелей, повышен в несколько раз: для аллеля DQA1 301 в 3 раза (ОЯ 3,3; ^:1,3-8,3) и для аллеля DQB1 302 в 6 раз (ОЯ 6,1; С^1,4-26,1). Более того,
Таблица 1
Частота аллелей в локусах DRB1, DQA1, DQB1 у мужчин и у женщин из групп с НБ, с ПНБ и в контроле
Частота аллелей у мужчин Частота аллелей у женщин
Локус л н и Контроль Группа с НБ Группа с ПНБ Контроль Группа с НБ Группа с ПНБ
< п = 100 п = 54 п = 180 п = 100 п = 54 п = 180
п М ± т, % п М ± т, % п М ± т, % п М ± т, % п М ± т, % п М ± т, %
1 11 11,0 ± 3,1 8 14,8 ± 4,8 17 9,4 ± 2,2 17 17,0 ± 3,8 6 11,1 ± 4,3 28 15,6 ± 2,7
3 8 8,0 ± 2,7 6 11,1 ± 4,3 9 5,0 ± 1,6 5 5,0 ± 2,2 5 9,3 ± 3,9 9 5 ± 1,6
4 8 8,0 ± 2,7 9 16,7 ± 5,1 16 8,9 ± 2,1 10 10,0 ± 3,0 12 22,2 ± 5,7 * 21 11,7 ± 2,4
6 9 9,0 ± 2,9 3 5,6 ± 3,1 28 15,6 ± 2,7 14 14,0 ± 3,5 7 13,0 ± 4,6 22 12,2 ± 2,4
7 13 13,0 ± 3,4 5 9,3 ± 3,9 28 15,6 ± 2,7 13 13,0 ± 3,4 3 5,6 ± 3,1 22 12,2 ± 2,4
8 3 3,0 ± 1,7 1 1,9 ± 1,8 5 2,8 ± 1,2 2 2,0 ± 1,4 2 3,7 ± 2,6 7 3,9 ± 1,4
а 9 1 1,0 ± 1,0 0 0 2 1,1 ± 0,8 1 1,0 ± 1,0 0 0 4 2,2 ± 1,1
10 1 1,0 ± 1,0 2 3,7 ± 2,6 9 5,0 ± 1,6 1 1,0 ± 1,0 3 5,6 ± 3,1 7 3,9 ± 1,4
11 16 16,0 ± 3,7 13 24,1 ± 5,8 28 15,6 ± 2,7 14 14,0 ± 3,5 6 11,1 ± 4,3 27 15,0 ± 2,7
12 3 3,0 ± 1,7 1 1,9 ± 1,8 3 1,7 ± 1,0 1 1,0 ± 1,0 2 3,7 ± 2,6 5 2,8 ± 1,2
15 22 22,0 ± 4,1 * 6 11,1 ± 4,3 24 13,3 ± 2,5 15 15,0 ± 3,6 6 11,1 ± 4,3 20 11,1 ± 2,3
16 5 5,0 ± 2,2 0 0 11 6,1 ± 1,8 7 7,0 ± 2,6 2 3,7 ± 2,6 8 4,4 ± 1,5
101 15 15,0 ± 3,6 9 16,7 ± 5,1 16 8,9 ± 2,1 24 24,0 ± 4,3 5 9,3 ± 3,9 * 29 16,1 ± 2,7
102 22 22,0 ± 4,1 4 7,4 ± 3,6 * 31 17,2 ± 2,8 19 19,0 ± 3,9 3 5,6 ± 3,1* 22 12,2 ± 2,4
103 8 8,0 ± 2,7 4 7,4 ± 3,6 21 11,7 ± 2,4 6 6,0 ± 2,4 12 22,2 ± 5,7 * 18 10,0 ± 2,2
201 13 13,0 ± 3,4 4 7,4 ± 3,6 24 13,3 ± 2,5 13 13,0 ± 3,4 1 1,9 ± 1,8 * 21 11,7 ± 2,4
DQA 301 8 8,0 ± 2,7 12 222 ± 5,7 ** 34 18,9 ± 2,9 * 11 11,0 ± 3,1 18 33,3 ± 6,4 ** 44 24,4 ± 3,2 *
302 0 0 1 1,9 ± 1,8 1 0,6 ± 0,6 0 0 0 0 0 0
401 3 3,0 ± 1,7 0 0 5 2,8 ± 1,2 2 2,0 ± 1,4 1 1,9 ± 1,8 6 3,3 ± 1,3
501 30 30,0 ± 4,6 20 37,0 ± 6,6 47 26,1 ± 3,3 25 25,0 ± 4,3 14 25,9 ± 6,0 38 21,1 ± 3,0
601 1 1,0 ± 1,0 0 0 1 0,6 ± 0,6 0 0 0 0 2 1,1 ± 0,8
201 18 18,0 ± 3,8 7 13,0 ± 4,6 25 13,9 ± 2,6 15 15,0 ± 3,6 7 13 ± 4,6 29 16,1 ± 2,7
301 26 26,0 ± 4,4 14 25,9 ± 6,0 41 22,8 ± 3,1 19 19,0 ± 3,9 8 14,8 ± 4,8 37 20,6 ± 3,0
302 2 2,0 ± 1,4 6 11,1 ± 4,3 * 15 8,3 ± 2,1 * 10 10,0 ± 3,0 12 22,2 ± 5,7 * 20 11,1 ± 2,3
303 4 4,0 ± 2,0 2 3,7 ± 2,6 10 5,6 ± 1,7 6 6,0 ± 2,4 7 13 ± 4,6 13 7,2 ± 1,9
304 2 2,0 ± 1,4 2 3,7 ± 2,6 1 0,6 ± 0,6 0 0 0 0 0 0
И 305 1 1,0 ± 1,0 0 0 1 0,6 ± 0,6 0 0 0 0 0 0
и1 а 401 2 2,0 ± 1,4 0 0 4 2,2 ± 1,1 2 2,0 ± 1,4 1 1,9 ± 1,8 7 3,9 ± 1,4
501 14 14,0 ± 3,5 12 22,2 ± 5,7 26 14,4 ± 2,6 18 18,0 ± 3,8 5 9,3 ± 3,9 29 16,1 ± 2,7
502 5 5,0 ± 2,2 0 0 9 5 ± 1,6 8 8,0 ± 2,7 2 3,7 ± 2,6 8 4,4 ± 1,5
503 2 2,0 ± 1,4 0 0 3 1,7 ± 1,0 4 4,0 ± 2,0 0 0 2 1,1 ± 0,8
601 5 5,0 ± 2,2 2 3,7 ± 2,6 7 3,9 ± 1,4 3 3,0 ± 1,7 1 1,9 ± 1,8 4 2,2 ± 1,1
602 19 19,0 ± 3,9 9 16,7 ± 5,1 38 21,1 ± 3,0 15 15,0 ± 3,6 11 20,4 ± 5,5 31 17,2 ± 2,8
* _ - р < 0,05; "* — р < 0,01 — между контрольной и каждой из сравниваемых групп
Рис. 1. Частота генотипов БЯБ1, DQA1, DQB1 у женщин из пар с НБ, с ПНБ и в контроле (* — р < 0,05; **—р < 0,01)
Рис. 3. Распределение совпадающих аллелей трех ло-кусов системы НЬА II класса (DQA1, DQB1, DRB1) в супружеских парах с НБ, ПНБ и в контроле (* — р < 0,05; ** — р < 0,01)
риск ПНБ в семьях, при носительстве аллеля DQA1 301 у мужчины, повышен почти в 3 раза (ОЯ 2,7; С^1,2-5,9) и при наличии DQB1 302 — в 4,5 раза (ОЯ 4,5; С^1,1-17,6).
Значительные различия были выявлены при анализе частот генотипов по изученным генам как у женщин, так и мужчин из пар с НБ и ПНБ (рис. 1 и рис. 2) по сравнению с контрольными парами.
У женщин контрольной группы генотипы DRB1 01\06 (12 %, р < 0,05), DQA1 0101\0101 (10 %, р < 0,01) и DQA1 0101\0102 (8 %, р < 0,05) встречались достоверно чаще, чем в двух группах с НБ и ПНБ. Генотип DQA1 0301\0103 идентифицирован только у пациенток с ПНБ. Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск ПНБ у женщин с генотипом DQA1 0301\0103 повышен почти в 12 раз (ОЯ 11,8; С^1,45-95,2).
Интересные данные получены при анализе распределения генотипов по изученным генам у мужчин (рис. 2). Так, генотип DRB1 15\15 идентифицирован только у мужчин в контрольной группе. У мужчин из пар
Рис. 2. Частота генотипов DRB1, DQA1, DQБ1 у мужчин из пар с НБ, с ПНБ и в контроле (* — р < 0,05; ** — р < 0,01)
с НБ достоверно чаще встречались генотипы DRB1 04\11 (11 %), DQA1 0501\0101 (18,5 %) и DQA1 0501\0301 (14,8 %) (р < 0,05). У 11 % мужчин из пар с ПНБ был определен генотип DQA1 0301\0102, тогда как в контрольной группе данный генотип идентифицирован лишь в 2 % (р < 0,05). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов, риск НБ в семьях, где мужчина имеет определенный генотип по генам DRB1, DQA1, DQB1 повышен: DQA1 0501\0101 (ОЯ 24,7; С^3,3-181,9), DQA1 0501\0301 (ОЯ 19,3; С^2,4-154,3), DRБ1 04\11(ОЯ 14,4; CL:1,6-127,1).
Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о наличии ассоциации некоторых аллелей и генотипов DRB1, DQA1, DQB1 системы HLA II класса с развитием как НБ, так и ПНБ.
В трех исследуемых группах нами проведена оценка доли супружеских пар, совпадающих по одному, двум и трем локусам системы ^А II класса (DRB1, DQA1, DQB1) (рис. 3). Так, в группе 2 (супруги с одним самопроизвольным выкидышем в анамнезе) в 2 раза чаще зарегистрировано совпадение по одному локусу HLA II класса, чем в группе супругов с повторными выкидышами в анамнезе и в контроле (р < 0,05). Совпадение по двум локусам системы ^А II в группе 2 (29,6 %) и 3 (25,6 %) встречалось достоверно чаще, чем в контроле (10 %; р < 0,01). Частота совпадений по трем локусам в парах с НБ и в группе контроля статистически значимо не отличалась.
Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития НБ у супружеских пар, совпадающих по двум локусам, повышен в 3,5 раза (ОЯ 3,61; С^1,15-11,3), а риск ПНБ — почти в 3 раза (ОЯ 2,88; С^1,12-7,38).
В таблице 2 представлена частота совпадений по некоторым аллелям в генах DRB1, DQA1,
Таблица 2
Число совпадений аллелей в локусах DRB1, DQA1, DQB1 в парах с НБ, с ПНБ и в контроле
Число совпадений аллелей в парах Контроль (n = 50 пар) Группа с НБ (n = 27 пар) Группа с ПНБ (n = 90 пар)
n % n % n %
оба в паре БЯВ1 = 01 3 6,0 ± 3,4 1 3,7 ± 3,6 6 6,7 ± 2,6
оба в паре БЯВ1 = 04 1 2,0 ± 2,0 5 18,5 ± 7,5** 2 2,2 ± 1,6
оба в паре БЯВ1 = 07 3 6,0 ± 3,4 2 7,4 ± 5,0 7 7,8 ± 2,8
оба в паре БЯВ1 = 11 0 0 3 11,1 ± 6,0 10 11,1 ± 3,3 *
оба в паре БЯВ1 = 15 0 0 1 3,7 ± 3,6 7 7,8 ± 2,8 *
оба в паре БдА1 = 0201 3 6,0 ± 3,4 1 3,7 ± 3,6 8 8,9 ± 3,0
оба в паре БдА1 = 0301 1 2,0 ± 2,0 9 33,3 ± 9,1*** 15 16,7 ± 3,9 **
оба в паре БдА1 = 0101 4 8,0 ± 3,8 2 7,4 ± 5,0 8 8,9 ± 3,0
оба в паре БдА1 = 0102 3 6,0 ± 3,4 0 0,0 11 12,2 ± 3,5
оба в паре БдА1 = 0501 7 14,0 ± 4,9 8 29,6 ± 8,8 18 20,0 ± 4,2
оба в паре БдВ1 = 0201 3 6,0 ± 3,4 1 3,7 ± 3,6 9 10,0 ± 3,2
оба в паре БдВ1 = 0301 4 8,0 ± 3,8 2 7,4 ± 5,0 19 21,1 ± 4,3 **
оба в паре БдВ1 = 0501 3 6,0 ± 3,4 1 3,7 ± 3,6 9 10,0 ± 3,2
оба в паре БдВ1 = 0602 1 2,0 ± 2,0 3 11,1 ± 6,0 11 12,2 ± 3,5 *
* — р < 0,05; ** — р < 0,01; *** — р < 0,001 — между контрольной и каждой из сравниваемых групп
DQB1 в парах. Было установлено, что в каждой пятой паре из группы 2 оба супруга являлись носителями аллеля DRB1 04. У супружеских пар из группы 3 наиболее часто совпадают аллели DRB1 11, DRB1 15, DQВ1 301, DQВ1 602 по сравнению с группами 1 и 2. Кроме того, аллель DQA1 301 достоверно чаще присутствовал у обоих супругов из групп 2 и 3 по сравнению с контрольной группой.
Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития НБ у супругов, которые совпадают по алле-лю DRB1 04, повышен в 8 раз (ОЯ 8,07; CL:1,6-39,3), при совпадении по аллелю DQA1 301 — в 17 раз (ОЯ 16,9; ^:4,1-70,2). Относительный риск ПНБ у супругов, которые совпадают по аллелю DRB1 11, повышен в 13 раз (ОЯ 13,2; ^:1,7-103,9), при совпадении по аллелю DRB1 15 — в 9 раз (ОЯ 9,07; CL:1,07-76,8), при совпадении по аллелю DQА1 301 — почти в 7 раз (ОЯ 6,77; ^:1,6-28,4), при совпадении по аллелю DQВ1 602 — почти в 5 раз (ОЯ 4,77; ^:1,08-20,9), а при совпадении по аллелю DQВ1 301 — почти в 3 раза (ОЯ 2,82; 1,02-7,7).
Обсуждение
Накопленные к настоящему времени знания указывают на то, что развитие НБ определяется многими факторами. Важную роль в патогенезе привычной потери плода играют нарушения в процессе инвазии трофобласта. В организме беременной женщины фетоплацентарный комплекс является своего рода аллотрансплантантом и служит уникальным примером иммунологической «терпимости» между аллотканью плода и материнскими факторами [2-4].
В настоящее время общепризнана важная роль главного комплекса гистосовместимос-ти человека в генезе привычной потери плода [1, 5, 10]. Обеспечивая регуляцию иммунного ответа, система HLA осуществляет генетический контроль взаимодействия всех иммунокомпетент-ных клеток организма, распознавание своих и чужеродных (в том числе измененных собственных) клеток, запуск и реализацию иммунного ответа и, в целом, обеспечивает выживание человека в условиях экзогенной и эндогенной агрессии.
Большое число совпадающих антигенов HLA II класса у супругов приводит к тому, что не проис-
ходит достаточной иммуностимуляции организма матери, и она не вырабатывает необходимого количества аллоантител к антигенам плода. Эмбрион не распознается как плод, а воспринимается как измененная клетка собственного организма, против которой запускается цитотоксическая реакция, которая может приводить к прерыванию беременности.
Рядом авторов отмечено, что степень совместимости по HLA супругов может отражаться на течении беременности [4]. Полное несовпадение HLA-генотипов благоприятно для развития беременности. Выявлено, что у супружеских пар с НБ одинаковые антигены HLA II класса встречаются чаще по сравнению с теми парами, где беременность развивается нормально.
На наш взгляд, представляют интерес работы, проведенные в Германии, а также в Японии и Китае по изучению частот аллелей и генотипов по генам HLA класса II (DRB1, DQA1, DQB1), в которых авторы определили, что HLA-генотипы DRB1 03/-; DRB1 04/-; DQA1 0101/-; DQB1 0402/-; DQB1 0604/0605; DQB1 0501/0502 у матери являются факторами риска развития НБ [8, 9, 11]. Ассоциация с некоторыми из этих аллелей получена и в наших исследованиях, что указывает на существование определенных механизмов, обусловленных наличием конкретных аллелей в генотипе у супругов и участвующих в генезе потери плода, а не только ассоциация с локусом HLA.
При анализе частоты встречаемости различных аллелей генов DRB1, DQA1, DQB1 системы HLA II класса у женщин и мужчин из обследованных пар мы обнаружили ассоциации определенных аллелей как с НБ (для женщин — аллели DRБ1 04, DQA1 301, DQA1 103 и DQB1 302, для мужчин — аллели DQA1 301 и DQВ1 302), так и с ПНБ (для женщин — аллели DQA1 301, для мужчин — аллели DQA1 301 и DQВ1 302). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития НБ у женщин с наличием определенных аллелей повышается от 2,5 до 4,5 раза, а риск ПНБ — в 2,5 раза. Риск НБ в парах, где мужчина является носителем определенных аллелей, повышается от 3 до 6 раз, а риск ПНБ — от 3 до 4,5 раза.
Интересно отметить, что некоторые аллели имеют протективный характер (аллели DRB1 15, DQA1 101, DQA1 102 и DQA1 201), другие же могут предрасполагать как к НБ, так и к ПНБ (аллели DRB1 04, DQA1 103, DQA1 301 и DQB1 302).
При анализе частоты совпадений по одному, двум и трем локусам системы HLA II
класса (DRB1, DQA1, DQB1) мы обнаружили повышение частоты совпадений по двум локусам системы HLA II в группах супругов с НБ и ПНБ по сравнению с контролем. Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов риск развития НБ у супружеских пар совпадающих по двум локусам повышен в 3,5 раза (OR 3,61; CL:1,15-11,3), а риск ПНБ — в 2,8 раза (OR 2,88; CL:1,12-7,38). Наши данные согласуются с работой московских ученых (Серова Л. Д., 1998) и исследователей из Чикаго (Beer A. E., Kwak J., 2000) [7, 10].
В настоящее время достаточно сложно однозначно сказать каким образом определенные аллели генов DRB1, DQA1, DQB1 системы HLA II класса участвуют в патогенезе НБ, однако уже сейчас их можно рассматривать как фактор генетического риска НБ. Более того, мы полагаем, что необходимо обследовать супругов как после двух самопроизвольных выкидышей, так и после одного выкидыша в анамнезе. При выявлении совпадений у супругов по двум и более локусам системы, а также при наличии определенных генотипов, предрасполагающих к НБ, возможно проведение соответствующего лечения. Одним из методов является иммунизация таких женщин супружескими или донорскими Т- и B-лимфоци-тами, так как появление антител к HLA-антигенам мужа увеличивает шанс благоприятного исхода каждой последующей беременности и рождения доношенных детей.
Статья представлена М. А. Тарасовой НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта, Санкт-Петербург
Литература
1. Карпова Т. В. Особенности системы HLA у женщин с привычным невынашиванием беременности и бесплодием: автореф. дис. ... канд. мед. наук. — М., 1998. — 25 с.
2. Коненков В. И. Медицинская и экологическая иммуногене-тика / Коненков В. И. — Новосибирск, 1999. — 250 с.
3. Невынашивание беременности: этиопатогенез, диагностика, клиника и лечение: учебное пособие / Кошеле-ва Н. Г., Аржанова О. Н., Плужникова Т. А. [идр.] — СПб.: ООО «Издательство Н-Л», 2002. — 70 с.
4. Ранние сроки беременности / Под ред. В. Е. Радзинского, А. А. Оразмурадова. — М., 2005. — 448 с.
5. Салбиева Н. Г. Прогностическое значение наследственных факторов в развитии привычного невынашивания беременности у супружеских пар: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — М., 2003. — 23 с.
6. СамородиноваЛ.А. Невынашивание беременности:иммуно-логические и гормональные аспекты / Самородинова Л. А.,
Кормакова Т. Л. // Ж. акуш. жен. болезн. — 2002. — Вып. 2. — С. 28-31.
7. Серова Л. Д. Иммунологический HLA-статус у женщин с привычным невынашиванием беременности: методические рекомендации / Серова Л. Д. — М., 1998.
8. Association of HLA-DQB1 coding with unexplained recurrent spontaneous abortions / Wang XP, Lin QD, Lu PH [et al.] // Chin. Med. J. — 2004. — Vol. 117, N 4. — P. 492-497.
9. A study of HLA-DR and -DQ alleles in 588 patients and 562 confirms that HLA-DRB1*03 is associated with recurrent miscarriage / Kruse C., Steffensen R., Varming K. [et al.] // Hum. Reprod. — 2004. — Vol. 19, N 5. — P. 1215-1221.
10. Beer A. E. Reproductive medicine program Finch University of Health Science / Beer A. E., Kwak J. — Chicago: Medical School, 2000. — 96 p.
11. Possible susceptibility of the HLA-DPB1*0402 and HLA-DPB1*04 alleles to unexplained recurrent abortion: analysis by means of polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism method / Takakuwa K., Hataya I., Arakawa M. [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 1999. — Vol. 42. — P. 233-239.
12. Vojvodic P. The HLA antigen system in married couples with recurrent spontaneous abortions / Vojvodic P., Belic B. // Med. Prege. — 2001. — Vol. 54, N 1-2. — Р. 75-79.
ASSOCIATION OF POLYMORPHISM OF HLA-DRB1, DQA1 AND DQB1 GENES IN COUPLES WITH UNEXPLAINED RECURRENT SPONTANEOUS ABORTION
Bespalova O. N., Beskorovainaya T. S., Ivashchenko T. E., Tverskaya S. M., Vasileva I. Y., Vochmynina N. V., Polyakov A. V., Baranov V. S., Aylamazyan E. K.
■ Summary: Immunological factors have been discovered to be implicated in the pathogenesis of unexplained recurrent spontaneous abortion (URSA). The aim of this investigation was to study polymorphism of three HLA class II genes (DRB1, DQA1, DQB1) in couples with URSA and healthy couples. According to the results of the study a coincidence for 2 loci of HLA class II genes in couples with URSA occurred 3 times more often than in control couples. It is shown that some alleles of studied HLA genes are protective against URSA (alleles DRB1*15, DQA1*101, DQA1*102 and DQA1*201) and the other may predispose to this complication of pregnancy (alleles DRB1*04, DQA1*103, DQA1*301 and DQB1*302).
■ Key words: spontaneous abortion; recurrent spontaneous abortion; HLA class II genes; DRB1, DQA1 and DQB1
