CC BY
21
УДК 619: 616.9 - 084: 636.053: 616.34 - 002
Куртасов Г.В.1, астрант ([email protected]) Хартвська державна зооветеринарна академ1я
ПЕРОРАЛЬНЕ ЗАСТОСУВАННЯ ПРЕПАРАТУ КОМПЛЕКСНОГО
МЕТАЛОГЛОБУЛ1НУ (КМГ) У ПРОФ1ЛАКТИЦ1 1НФЕКЦ1ЙНИХ ГАСТРОЕНТЕРИТШ НОВОНАРОДЖЕНИХ ТЕЛЯТ
Використання ¡муноглобултових препарат1в як добавок для новонароджених телят е новим та перспективним способом профыактики неонатальних ¡нфекцш. У робот1 представленI дат щодо профыактичног ефективност1 перорального застосування препарату комплексного металоглобулту щодо тфекцтних гастроентерит1в новонароджених телят.
Ключо^^ слова: тфекцтш гастроентерити, новонароджеш телята, ¡муноглобулти, добавки до молозива.
Вступ. 1нфекцшш гастроентерити, викликаш ротавiрусом, коронавiрусом, ешерихiями тощо, е основною причиною загибелi новонароджених телят, знижено! штенсивност 1х росту та недостатньо! реалiзащi генетичного потенщалу. У той же час, ефективно попередити розвиток цих шфекцш можна лише за допомогою комплексу заходiв, серед яких найважлившими е дотримання саштарно-гшешчних норм утримання телят, специфiчна iмунопрофiлактика (вакцинацiя матерiв) та правильне забезпечення пасивним iмунiтетом [6].
Пiд пасивним iмунiтетом здебiльшого розумiють якнайскорiше тсля народження випоювання адекватноi кiлькостi молозива належноi якостi. Завдяки цьому теля отримуе велику кiлькiсть поживних, захисних та бiологiчно активних речовин. Кшьюсною характеристикою адекватностi колострального iмунiтету служить концентращя молозивних iмуноглобулiнiв у сироватщ кровi телят, що визначаеться у перюд пiсля завершення iх всмоктування у тонкому кишечнику (першi 24-48 год. життя). Напруга пасивного iмунiтету е вагомим чинником у процес виникнення та розвитку захворювання. Вщомо, що телята з високою напругою колострального iмунiтету хворiють рiдше [3, 17].
Водночас, о^м належного становлення системного iмунiтету (внаслiдок надходження материнських iмуноглобулiнiв у кровообiг телят), важливим чинником стiйкостi до розвитку шфекцшних гастроентеритiв новонароджених е мiсцевий iмунний стан (стан захисту слизовоi оболонки). Вш обумовлюеться природними бар'ерами (цшсшсть епiтелiальних покривiв, секрецiя слизу, перистальтика, низька рН шлункового соку тощо), неспецифiчними гуморальними (комплемент, лiзоцим, тощо) i клiтинними (макрофаги, гранулоцити, дендритш клiтини) факторами резистентностi, а також iмунними чинниками (специфiчнi антитiла та Т- i В- лiмфоцити) [5, 8, 12, 14].
1 Науковий кер1вник - проф., д. вет. н., академж НААНУ В. О. Головко Куртасов Г.В., 2011
Ефектившсть захисту слизово! оболонки залежить вщ взаемодп перерахованих чинниюв. Особливостями ж новонародженого оргашзму е недовершенiсть захисних механiзмiв: так, iмунна вiдповiдь новонародженого характеризуеться пролонгованим латентним перiодом та продукуванням низько! кiлькостi антитiл [13], компоненти специфiчно! та неспецифiчно! резистентностi у органiзмi новонародженого е присутнiми, але !х концентрацiя та функцiональне значення залишаються низькими [9]. Також слiд зазначити, що при народженнi у травному траки телят вщсутш специфiчнi iмуннi клiтини, а з'являються вони там поступово впродовж перших двох тижшв життя [1].
В умовах, коли достатне ендогенне вироблення захисних чинниюв е неможливим, новонароджений потребуе iмунологiчно! пiдтримки ззовнi, що здiйснюеться лактогенним (колостральним) шляхом - шляхом пасивного надходження, головним чином антитш, у складi молозива або замiнного препарату. Хоча при цьому певна частина iмуноглобулiнiв пiдлягае ензиматичному розщепленню, вони виявляють значну як пряму антимжробну, так i iмуномодулюючу дiю, що на даний момент недостатньо з'ясована. Завдяки материнським антитшам поверхня слизово! оболонки е меншою мiрою доступною мжрооргашзмам, що надходять до травного тракту [10].
Пероральне застосування препараив iмуноглобулiнiв дозволяе вплинути на мюцевий iмунний статус, i у такий споаб пiдвищити його. Зараз у св^овш практицi ветеринарно! медицини для захисту травного тракту новонароджених застосовуються iмуноглобулiни сироватки i молозива велико! рогато! худоби, курячих яець, сироватки свиней тощо. Вибiр джерела антитш та способу !х очищення залежить вщ особливостей використання препарату, виду тварин, специфiчностi, коштовностi, необидного обсягу антитш [15].
Двома альтернативними шляхами забезпечення мюцевого iмунного гомеостазу у кишечнику новонароджених е використання препараив iмуноглобулiнiв вiд тварин, що не були попередньо iмунiзованi, та препараив вiд гiперiмунних тварин. Препарати iмуноглобулiнiв вiд неiмунних тварин мiстять антитша до широкого спектру патогенiв, продуковаш впродовж життя тварини-донора, i !х застосування з профiлактичною метою може мати бшьший ефект, шж у випадку гiперiмунних препаратiв [11, 16].
На ринку ветеринарних препараив iмуноглобулiнiв Укра!ни представлений препарат комплексний металоглобулш КМГ (ННЦ «1ЕКВМ», м. Харюв) [2]. Вiн являе собою носш антитiл проти поширено! бактерiальноl та вiрусно! мiкрофлори i як складний бiлок (комплекс iмуноглобулiну з мжроелементами) виявляе позитивний ефект на процеси обмiну речовин та викликае тдвищення загально! резистентностi органiзму.
Мета дослщження - визначити профiлактичну щншсть щодо iнфекцiйних гастроентеритiв випоювання новонародженим телятам препарату КМГ.
Матер1ал i методи. Дослiд був проведений у ТОВ СП «Родша» Богодухiвського району Харювсько! областi у 2011 рощ.
Матерiалом для дослiдження слугували новонароджеш телята чорно-рябо! породи. Телят спочатку утримували у iндивiдуальних станках i впродовж перших
2 дiб життя випоювали материнське молозиво, поим ïx переводили до телятника, i в подальший перюд випоювали цшьне молоко. Для до^ду вщбирали телят з високим потенщалом розвитку, що народжувалися за посередництвом фiзiологiчниx родiв, розподшяли мiж дослiдною i контрольною групами жеребкуванням.
У другу добу життя (24-48 год. життя) вщбирали пробу кровi для гематолопчного дослщження, сироватки кровi - для бiоxiмiчного дослiдження i визначення iмунного статусу за вмютом гамма-глобулiнiв. На пiдставi цього аналiзу при облiку результатiв дослiдна та контрольна групи телят були роздшеш на телят з АПТ - адекватним пасивним транспортом iмунiтету (дослщ 1), та з НПТ - недостатшстю пасивного iмунiтету (дослiд 2).
На третю добу життя при переведенш новонароджених з випоювання материнського молозива на цшьне молоко, телятам дослiдноï групи одноразово випоювали з молоком 50 мл препарату комплексного металоглобулiну, телятам контрольноï групи випоювали з молоком 50 мл фiзiологiчного розчину. Перюд клмчного спостереження за твариною складав 14 дiб, визначали клiнiчний стан телят, консистенцiю фекалш у балах (0 - нормальна, 1 - пастоподiбна, 2 -нашврщка, 3 - рiдка. Результат рiвний або бiльший, нiж 2, звщав про дiарею), наявнiсть симптомiв дiареï та ступiнь ïï важкост (важкий зi значним зневодненням, середнш - виражена дiарея без значного зневоднення, легкий -короткотривала дiарея без системних симптомiв), заxворюванiсть телят, середню тривалiсть захворювання та загальну заxворюванiсть у групi, смертнiсть телят.
З метою з'ясування впливу перорального застосування КМГ на загальну резистентшсть та бiлковий обмiн вiд телят дослщнох' та контрольно!' груп вщбирали проби для гематологiчниx та бiоxiмiчниx дослiджень на 5-6 добу життя тварини, вщповщно на 3-4 добу тсля обробки препаратом КМГ, i порiвнювали зi станом тварини на 2 добу життя (перше взяття проби).
Гематологiчним дослiдженням визначали кшьюсть еритроцитiв (спектрофотометрично) та лейкоциив (у лiчильнiй камерi), вiдсоток нейтрофшв у тонких мазках кровi, рiвень гемоглобiну (спектрофотометрично). Бiоxiмiчним дослiдженням визначали загальний бiлок сироватки кровi (рефрактометрично) та вмют бiлковиx фракцiй (турбщиметричним методом).
Статистичну обробку даних про середню та загальну захворювашсть у груш проводили за допомогою одно- та двобiчного точного методу Фшера i методу х-квадрат з поправкою Йейтса, а даних бiоxiмiчниx дослiджень - методом Стьюдента (пакет програмного забезпечення Statistica Statsoft).
Результати дослщження.
Даш мошторингу адекватностi пасивного транспорту у другу добу життя новонароджених телят представлено у таблищ 1.
Згщно даних таблищ 1, iз дослщжених 24 телят недостатшсть пасивного транспорту зареестровано у 11 з них, або 45,8%, часткову недостатшсть - у 7 телят (29,2%), адекватний рiвень пасивного транспорту - у 6 телят, або 25%. Таким чином, при визначенш профiлактичноï ефективноси перорального застосування
КМГ доречно роздшити дослщну та контрольну групи на тдгрупи за рiвнем пасивного iмунiтету, отриманого з молозивом.
Таблиця 1.
Розподш телят за адекватн1стю пасивного транспорту
Концентрац1я гамма-глобул1н1в, г/л Юльшсть телят (п=24) % телят
Адекватний пасивний транспорт (АПТ), 10-15 г/л 6 25%
Часткова недостатшсть ПТ, 5-10 г/л 7 29,2%
Недостатшсть пасивного транспорту (НПТ), < 5 г/л 11 45,8%
При цьому телята з частковою недостатнiстю пасивного транспорту були вщнесеш до одше! пiдгрупи з телятами, що мали адекватний пасивний транспорт. Подальша обробка отриманих клшчних i лабораторних даних пiдтвердила слушшсть застосованого розподiлу тварин.
Клiнiчнi даш профшактично! ефективностi КМГ наведенi у таблиц 2.
Таблиця 2.
Профшактична ефективн1сть КМГ стосовно 1нфекц1йних гастроентерит1в -
кл1мчм дан1 за 14 дшв спостереження.
Тварини Телята з адекватним ПТ (досл1д 1) Телята з недостатшм ПТ (дослщ 2)
Показники Дослщна група (п=6) Контрольна група (п=7) Дослвдна група (п=5) Контрольна група (п=6)
Захворюван1сть, гол. (%) 2 (33,3%) 4 (57,1%) 4 (80%) 6 (100%)
Середня тривал1сть захворювання, д1б 4 5 6 9
Захворюван1сть загальна у груп1, д1б 8* 20 24* 54
Смертн1сть телят, гол. 0 0 0 1
Примггка. Дослщш величини, позначен *, достов1рно в1др1зняються ввд контрольних (Р<0,05).
У пiдгрупi телят, що мали адекватний рiвень пасивного транспорту (дослвд 1), жодно! тварини тд час дослiдного перiоду не загинуло. Телята дослщно! групи, що отримували препарат КМГ, в середньому хворши 4 доби, тодi як телята контрольно! групи хворши в середньому 5 дiб. У той же час, серед телят, що страждали на недостатшсть пасивного транспорту (дослвд 2), у контрольнш груш загинула 1 тварина, а захворши всi телята (тобто 100%). Телята, що отримували препарат КМГ, хворши в середньому 6 дiб, тодi як телята контрольно! групи - 9 дiб.
Захворюванiсть телят у дослщнш групi (досл1д 1) склала 33,3% вiд числа тварин у груш, а у контрольнш - 57,1%, тодi як у дослщ1 2 захворювашсть у дослiднiй груш склала 80%, тобто, захворши 4 тварини з 5 пщдослщних, а у контрольнш - 100%. Як свщчать результати використання точного методу Фшера, вщмшноси у рiвнi захворюваноси тварин дослiдних i контрольних груп не е достовiрними, бо !х Р>0,05.
Загальну ж захворювашсть вираховували як число дiб хвороби вЫх тварин групи. Як видно з таблищ 2, загальна захворювашсть тварин дослщно! групи вiдрiзняeться вщ контролю достовiрно (Р<0,05, був використаний метод х-квадрат з поправкою Йейтса) як у першому дослiдi (8 дiб хвороби у дослiднiй груш та 20 -у контрольнш), так i у другому - 24 доби хвороби у дослвд проти 54 дiб у контрольнш групi.
Данi лабораторного дослiдження наведеш у таблицi 3.
Таблиця 3.
Показники гематолопчного та бiохiмiчного дослщжень, М±8Б.
^Тварини, взяття ^ч^ проби Показники^^ Телята з адекватним ПТ (дослвд 1) Телята з недостатшм ПТ (досл1д 2)
Дослщна група (П=6) Контрольна група (п=7) Дослщна група (п=5) Контрольна група (п=6)
1 2 1 2 1 2 1 2
Еритроцити, млн/мкл 11,9± 1,7 12± 1,7 11,7± 1,4 11,8± 1,3 10,7± 1,0 10,8± 1,1 11,1± 1,1 11,2± 1,1
Лейкоцити, тис/мкл 7,7± 1,6 7,7± 1,6 7,3± 1,2 7,4± 1,1 6,2± 0,4 6,3± 0,4 6,5± 0,8 6,5± 0,8
% нейтрофшв 41,8± 8,3 36,1± 6,3 40,1± 6,2 49,9± 12,0 34,8± 5,5 36,8± 11,7 46,0± 13,2 60,8± 9,2
Гемоглобш, г/л 89,8± 6,1 - 85,1± 22,1 - 91,9± 17,8 - 89,4± 15,5 -
Загальний бшок, г/л 54,3± 13,5 52,1± 6,6 53,0± 8,6 50,5± 7,3 -н ^ чо К ^ 4 -н ит" ^ 4 45,5± 5,4 42,7± 2,7
у-глобулши, г/л 15,3± 3,6 15,2± 3,6 15,2± 3,8 15,4± 3,9 7,8± 1,3 7,7± 1,1 6,7± 1,1 6,3± 1,0
Як видно з таблищ 3, причиною розпод^ тварин на два окремi дослiди е суттева вiдмiннiсть у концентращ! y-глобулiнiв сироватки кровi телят.
За результатами статистично! обробки отриманих даних методом Стьюдента (порiвнювалися значення, отриманi при другому взята проб), показники бшкового обмiну дослiдних тварин недостовiрно вiдрiзняються вщ контрольних у обох дослiдах. Таким чином, пероральне застосування iмуноглобулiнового препарату не мало значного впливу на концентращю у-глобулiнiв та загального бiлка сироватки кровi телят.
Пщсумовуючи вищенаведенi клiнiчнi та лабораторнi даш, треба визнати, що застосованi у нашш роботi лабораторнi методики не дозволили пщтвердити або спростувати наявшсть профiлактичного ефекту перорального застосування препарату комплексного металоглобулiну стосовно iнфекцiйних гастроентериив новонароджених телят. Таким чином, системний iмунний статус телят не зазнае суттевих змш внаслiдок перорального застосування препарату КМГ. У той же час, юнуе потреба у подальших дослiдженнях з метою вивчити мехашзм локально! дi! КМГ на оргашзм тварини, але слiд враховувати, що це пов'язане з певними методичними складностями.
Разом з тим, за клшчними даними, наведеними у таблищ 2, можна стверджувати про наявшсть профшактичного ефекту перорального застосування
препарату комплексного металоглобулiну стосовно шфекцшних гастроентериив новонароджених телят. Виявлеш достовiрнi вщмшност у загальнш захворюваностi тварин дослiдних та контрольних груп дозволяють зробити такий висновок та дають пiдстави використовувати випоювання КМГ новонародженим телятам з профшактичною метою у практицi ветеринарно! медицини.
Висновки.
1. Використання новонародженим телятам препарату комплексного металоглобулiну (КМГ), за клмчними даними, мало профiлактичний ефект стосовно шфекцшних гастроентериив.
2. Випоювання препарату КМГ новонародженим телятам не викликало суттевих змiн !х системного iмунного статусу. Для точного з'ясування мехашзму впливу перорального застосування КМГ на оргашзм телят iснуе потреба у подальших дослiдженнях, зокрема вивчення локального iмунного статусу.
Л1тература
1.Аминова Г. Г. Морфологическая характеристика лимфоидной ткани у новорожденных детей / Г. Г. Аминова // Морфология. - 2000. - Т. 118, № 6. - С. 53-56.
2.Ветеринарш iмунобiологiчнi препарати: довщник / [заг. ред. П.1. Вербицький, А.М. Головко]. - К.: Реферат, 2004. - 400 с.
3.Гланц С. Медико-биологическая статистика; [пер. с англ. Данилова Ю.А.] -М., Практика, 1998. - 459 с.
4. Зароза В.Г. Эшерихиоз. / В.Г. Зароза. - М.: Агропромиздат, 1991. - 238 с.
5.Карпуть И. М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка. / И.М. Карпуть. - Мн.: Ураджай, 1993. - 288 с.
6.Першин Б. Б. Вакцинация и местный иммунитет - Л.: Медицина, 1980. -
232 с.
7. Шварцман Я. С. Местный иммунитет / Я. С. Шварцман, Л. Б. Хазенсон. -Л.: Медицина, 1978. - 224 с.
8.Barrington G. M. Bovine neonatal immunology / G.M. Barrington, S.M. Parish // The Veterinary Clinics of North America. Food Animal Practice. - 2001. - V. 17. - № 3. - P. 463-476.
9.Chattha K.S. Age related variation in expression of CD21 and CD32 on bovine lymphocytes: Across-sectional study / K.S. Chattha, M.A. Firth, D.C.Hodgins et al. // Veterinary Immunology and Immunopathology. - 2009. - V. 130. - P. 70-78.
10. Korhonen H. Bactericidal effect of bovine normal and immune serum, colostrum and milk against Helicobacter pilori. / H. Korhonen // The Journal of Applied Bacteriology. - 1995. -V. 78. - P. 655-662.
11. Lissner R. A standard immunoglobulin preparation produced from bovine colostra shows antibody reactivity and neutralization activity against Shiga-like toxins and EHEC-hemolysin of Escherichia coliO157:H7. / R. Lissner // Infection. - 1996. - V. 24. - P. 378-383.
12. Mucosal immunology / [edited by Mestecky J. et al.] - 3rd ed. - Elsevier Academic Press. - 2005. - 1886 p.
13. Ogilvie T.H. Large animal internal medicine [National vet med. series for independent study] / T.H. Ogilvie // Willey- Blackwell. - 1998. - 512 p.
14. Ptak W. Podstawy immunologii: Podr^cznik / W. Ptak, M. Ptak, M. Szczepanik; - Warszawa: Wyd. lekarskie PZWL, 2008. - 320 s.
15. Stefaniak T. Control of intestinal diseases by dietary supplementation with antibodies // Biology of Nutrition in Growing Animals. - Elsevier, 2006. - V. 4. - C. 8. - P. 285-309.
16. Stefaniak T. Propozycja programu ochrony zdrowia ciel^t ras mlecznych. / T. Stefaniak et al. // Noworodek a Srodowisko. Programy ocrohy zdrowia ciel^t i krow: zbior prac nauk. - Wroclaw. - 2009. - Czesc 5. - S. 132-145.
17. Weaver D.M. Passive transfer of colostral immunoglobulins in calves / D.M. Weaver, J.W. Tyler, D.C. Van Metre et al. // Journal Veterinary Internal Medicine. -2000. - № 14. - P. 569-577.
Summary
Kurtasov G. V., postgraduate, [email protected] Kharkiv State Zooveterinary Academy ORAL ADMINISTRATION OF COMPLEX METAL-GLOBULIN PREPARATION (KMG) IN NEWBORN CALVES INFECTIOUS GASTROENTERITIS PREVENTION The use of immunoglobulin preparations as a colostrum supplement is a new and promising tool to prevent neonatal infections. The data about preventive value of complex metal-globulin preparation (KMG) oral administration against newborn calves infectious gastroenteritis have been presented in the article.
Key words: infectious gastroenteritis, newborn calves, immunoglobulins, colostrum supplements.
Рецензент - д.б.н., проф. Куртяк Б.М
