CC BY
20
УДК 595.132.6:599.365
ОБНАРУЖЕНИЕ ТРИХИНЕЛЛ У ЮЖНОГО ЕЖА (ERINACEUS ROUMANICUS) НА ТЕРРИТОРИИ КУРСКОЙ ОБЛАСТИ
Вагин Н.А.1, Малышева Н.С.1, Власов Е.А.1, Самофалова Н.А.1, Успенский А.В.,2 Одоевская И.М.2,Вагин Ю.А.3
1ФГБОУ ВПО «Курский государственный университет» Научно-исследовательский институт паразитологии ([email protected]) 2ФГБНУ «Всероссийский НИИ фундаментальной и прикладной
паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина» 3ФГБОУ ВО «Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И. И. Иванова»
Введение. На территории Курской области с целью выявления потенциальных хозяев трихинелл с 2008 по 2014 годы было исследовано более 30 особей южного ежа (Erinaceus roumanicus), но трихинеллы у исследуемых животных не обнаружены. В 2015 году в НИИ паразитологии КГУ был доставлен погибший южный еж, обнаруженный на автодороге, ведущей в село Панино Медвенского района Курской (вблизи охранной зоны Стрелецкого участка Центрально-Черноземного государственного природного биосферного заповедника имени профессора В.В.Алехина). При исследовании мышечной ткани животного были выявлены личинки трихинелл.
Материалы и методы. Выявление личинок трихинелл осуществляли методом компрессорной трихинеллоскопии, в соответствии с МУК 4.2.2747 -10 «Методы санитарно-паразитологической экспертизы мяса и мясной продукции» Материалом для исследований являлась мышечная ткань погибшего животного. Исследовали основные группы мышц: мышцы головы, туловища, передних конечностей, а также мышцы задних конечностей. Всего исследовано 7 скелетных мышц (табл.).
Видовую принадлежность трихинелл определяли методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР), основанной на взаимодействии одной из 4-х пар синтезированных олигонуклеотидных праймеров со специфичными для данного генотипа паразита локусами ДНК. В ходе реакции происходит экспоненциальный рост амплифицируемого фрагмента, характерного для данного генотипа. Последующий электрофорез продуктов амплификации позволяет визуализировать полученные фрагменты ДНК, определять молекулярную массу последних. Выделение геномной ДНК проводили с использованием набора реактивов для получения и многоступенчатой очистки ДНК из клеток млекопитающих - Pure Link Genomic DNA Mini Kit фирмы «Invitrogen», согласно рекомендациям фирмы-производителя. Для проведения ПЦР использовали готовый набор реактивов «Мастер Микс» фирмы «Изоген», праймеры для таксономической идентификации (гомологичные к ДНК T. spiralis, T. nativa, T. britovi, T.
100
pseudospiralis) были синтезированы коммерческой фирмой «Синтол». В качестве положительных и отрицательных контролей реакции использовали ДНК эталонных штаммов трихинелл.
Результаты и обсуждение. Амплифицированный фрагмент геномной ДНК, выделенный из личинок трихинелл, имел молекулярную массу 127 н.п. и визуализировался между уровнями электрофоретической подвижности фрагментов маркёра 100 - 200 н.п. Таким образом, результаты исследований показали, что личинки трихинелл, выделенные из мышц южного ежа, принадлежат к виду Trichinella nativa. Инвазия достаточно «молодая», так как капсулы вокруг личинок еще полностью не сформировались (рис.). Наиболее высокие показатели интенсивности инвазии отмечены в двуглавой мышце бедра (606 личинок в 1 г) и трехглавой мышце плеча (507 личинок в 1 г). Несколько меньше личинок выявлено в большой жевательной мышце (413 личинок в 1 г) и межреберных мышцах (394 личинки в 1 г). Еще меньше личинок трихинелл было обнаружено в широчайшей мышце спины (223 личинки в 1 г) и икроножной мышце (173 личинки в 1 г) (табл.).
Таблица
Распределение личинок трихинелл в поперечнополосатой мускулатуре спонтанно зараженного южного ежа
Исследуемые группы мышц Количество личинок трихинелл в 1 г мышечной ткани
Мышцы головы: -большая жевательная (m. masseter) 413
Мышцы туловища: -диафрагма (diaphragma) -межреберные (mm. intercostales externi et interni -широчайшая спины (m. latissimus dorsi) 204 394 223
Мышцы передних конечностей: -трехглавая плеча (m. triceps brachii) 507
Мышцы задних конечностей: -икроножная (m. gastrocnemius) -двуглавая бедра (m. biceps femoris) 173 606
Рис. Личинки T. nativa в мышечной ткани южного ежа (микрофото, ув. объектив PL10/0,25, окуляр ^10Х22, ориг.)
Заключение. Таким образом, южный еж входит в паразитарную систему трихинеллеза на территории Курской области, и играет определенную роль в циркуляции трихинелл, так как между ним, хищными млекопитающими, кабанами и грызунами существуют тесные трофические взаимоотношения.
Recovery of Trichinella in northern white-breasted hedgehog (Erinaceus
roumanicus) in the Kursk Region. Vagin N.A., Malisheva N.S., Vlasov E.A., Samofalova N.A., Uspensky A.V., Odoyevskaya I.M., Vagin Yu.A. Kursk State University,Scientific Research Institute of Parasitology; All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants; I.I. Ivanov Kursk State Agricultural Academy.
Summary. Trichinella larvae were detected in muscles of the northern white-breasted hedgehog for the first time in the Kursk Region. Specific identification was performed using multiplex PCR and Trichinella nativa were revealed. Data on muscular distribution of Trichinella larvae in northern white-breasted hedgehog were represented. The highest intensity of Trichinella larvae was recorded in biceps femoris muscle and arm triceps.
