CC BY
39
УДК 616-097:577.27
О ВЗАИМОСВЯЗИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ И АКТОПРОТЕКТОРНЫХ ЭФФЕКТОВ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ЭТАНОЛОМ
© Лосенок С.А., Бровкина И.Л.
Кафедра военной и экстремальной медицины, кафедра спортивной медицины и медицинской реабилитации Курского государственного медицинского университета
Внутрижелудочное введение этанола 7-кратно в дозе 0,3 г/100 г стимулировало иммунологическую реактивность организма, повышало физическую работоспособность животных, антиоксидантный потенциал эритроцитов, клеток печени и мышц. При этом иммуномодулирующее и актопротекторное действие этанола опосредовано тяжелыми эритроцитами и выделением под их влиянием цитокинов, прилипающими к стеклу клетками селезенки. Однократное введение большой дозы (3 г/100 г) этанола угнетало эти показатели.
Ключевые слова: иммуномодуляция, алкогольная интоксикация, физическая нагрузка.
THE INTERRELATION OF IMMUNEMODULATING AND ANGIOPROTECTIVE EFFECTS OF
ETHANOL Losenok S.A., Brovkina I.L.
Department of Military and Extreme Medicine, Department of Sports Medicine and Medical Reabilitation
of the Kursk State Medical University
The intragastric introduction of Ethanol in the dose of 0,3 g/100 g injected 7 times stimulated the immunologic reactivity of the body, increased both the physical workability of the animals, and the antioxidant potential of erythrocytes, hepatic and muscular cells. The immunomodulating and angioprotective effects of Ethanol were mediated by the heavy erythrocytes and the release of cytokines due to their influence, and by the sticking splenic cells. The single introduction of a large dose (3 g/100 g) of Ethanol inhibited these indices.
Key words: immunemodulation, alcohol intoxication, physical exercise.
Поступление в организм этанола приводит к изменению иммунологической реактивности, характеризующемуся общими для действия любых стрессорных агентов закономерностями - повышением реактивности после приема небольших доз этанола и снижением ее под влиянием больших доз этого соединения [1]. Иммуносупрессорный эффект больших или относительно небольших, но длительно поступающих в организм доз этанола хорошо изучен [8]. Менее изученным являются особенности иммуномодулирующе-го влияния малых доз этанола, поступающих в организм однократно или в течение относительно короткого промежутка времени. Актуальность этих вопросов обусловлена широко бытующими представлениями о безвредности или даже полезности небольших доз этанола. Эти представления базируются на случайных наблюдениях, а не на систематическом изучении физиологического действия малых доз этанола. Иммунная система участвует в реализации влияния различных стресс-
индуцирующих факторов на функции других физиологических систем. Важную роль в сопряжении иммунологических процессов и неиммунологических функций играют эритроциты и выделяемые под их влиянием цито-кины [14]. Установлено, что цитокины прилипающих к стеклу клеток селезенки повышают способность аллогенных животных выполнять физические нагрузки субмаксимальной интенсивности [5].
В связи с изложенным возник вопрос о влиянии кратковременно поступающих в организм малых доз этанола на иммунологическую реактивность и физическую работоспособность, о взаимосвязи между этими эффектами этанола и о роли эритроцитов в реализации этого взаимодействия.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проведены на крысах-самцах Вистар, массой 180-210 г. Этанол
вводили внутрижелудочно через зонд в дозе 0,3 г/100 г массы тела 7-кратно с интервалом 24 часа. Контролем служили интактные крысы и животные, получавшие по аналогичной схеме дистиллированную воду. На 3-и сутки после начала введения этанола животных однократно внутрибрюшинно иммунизировали эритроцитами барана (ЭБ) и липополисаха-ридом Escherichia 0111: B4 Sigma (ЛПС). Доза ЭБ равнялась 108 клеток/100 г массы тела, ЛПС - 5 мг/100 г массы тела. Через 5 суток после иммунизации в селезенке определяли АОК к ЭБ (методом прямого локального гемолиза) и АОК к ЛПС (методом непрямого локального гемолиза [11]. Способность выполнять физическую нагрузку субмаксимальной интенсивности (ФНСИ) - тестировали по продолжительности плавания с грузом 30% массы тела, а физическую нагрузку высокой интенсивности (ФНВИ) по продолжительности плавания с грузом 8% массы тела [3].
В сыворотке крови определяли концентрацию триацилглицеролов, активность ала-нин- и аспартатаминотрансфераз (АЛТ и АСТ), активность щелочной фосфатазы и содержание общего билирубина [12].
В эритроцитах устанавливали концентрацию 2,3-бисфосфоглицерата [4], аденозитри-фосфата, активность супероксиддисмутазы и каталазы [13], ацилгидроперекисей и мало нового диальдегида [2]. В экстрактах тканей печени и мышц определяли активность супер-оксиддисмутазы и каталазы, содержание диеновых конъюгатов, ненасыщенных жирных кислот и малонового диальдегида [17, 18].
Эритроциты выделяли по В. Beutler (1985) [19], фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина [9]. Получали 3 фракции: легкие, плотность которых ниже 1,079 г/см3, промежуточные с плотностью 1,0911,105 г/см3 и тяжелые эритроциты, плотность которых превышала 1,1172 г/см3.
Иммуномодулирующую активность эритроцитов и их способность влиять на физическую работоспособность исследовали путем 5-кратного (с интервалом 24 часа) внутри-брюшинного введения их не получавшим этанол крысам в разовой дозе 108 клеток на 100 г массы тела. Первую инъекцию эритроцитов проводили одновременно с иммунизацией животных.
Клетки селезенки не плававших крыс освобождали от эритроцитов гемолитическим шоком и фракционировали по их способности прилипать к стеклу [15]. Прилипающие клетки окрашивали нейтральным красным, подсчитывали количество макрофагов, моноцитов, лимфоцитов и гранулоцитов. Идентификацию макрофагов и моноцитов в культуре проводили также по тесту захвата ими коллоидального угля. Кроме того, прилипающие клетки селезенки обрабатывали кроличьей антитимической сывороткой в присутствии комплемента. Установлено, что 84,6% клеток окрашивалось нейтральным красным и поглощало коллоидный уголь, а 8,1% клеток лизировались при обработке антитимической сывороткой в присутствии комплемента. Это дает основание считать, что около 85% прилипающих клеток являются макрофагами и моноцитами, а около 8% прилипающих клеток имеют маркеры лимфоцитов тимического происхождения. К прилипающим и неприли-пающим спленоцитам неплававших крыс добавляли эритроциты, полученные после плавания с равномерной или возрастающей нагрузкой (соотношение спленоцитов и эритроцитов 1:2) и инкубировали в среде 199 с добавлением 5% телячьей эмбриональной сыворотки и антибиотиков (пенициллина и стрептомицина). Силиконизированные пробирки, содержащие 107 клеток селезенки в 1 мл среды, инкубировали 48 ч в настольном боксе при периодическом обновлении газовой среды (95% О2 и 5% СО2). Количество жизнеспособных клеток после инкубации превышало 80%. Клетки осаждали центрифугированием, а супернатанты прилипающих и неприлипающих к стеклу клеток концентрировали путем диализа против полиэтиленгли-коля. Содержание белка в супернатантах определяли по Лоури. Супернатанты фракционировали на сефадексе G-150L и оценивали молекулярную массу выходящих из колонки белков [6]. Получали 3 белковые фракции -фракция I, содержащая белки с молекулярной массой более 150 кД, фракция II, основную массу которой составляли белки с молекулярной массой 50-60 кД, и фракция III, в состав которой входили белки с молекулярной массой 10-15 кД и ниже. Активность фракций супернатантов оценивали путем пятикратного (с 24-часовым интервалом) внутрибрю-
шинного введения их интактным крысам в объеме, содержавшем 100 мкг белка на 100 г массы тела животного. Одновременно с первой инъекцией исследуемого материала животных иммунизировали ЭБ или ЛПС.
Достоверность различий оценивали по 1;-критерию Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
После 7-кратного введения этанола наблюдалась выраженная стимуляция развития ГИО на ЭБ. Количество АОК в селезенке контрольных крыс после иммунизации ЭБ равнялась 24,5±2,6 тыс., а в селезенке животных, получавших этанол, 51,4±5,3 тыс. Выраженность ГИО на ЛПС после введения этанола не отличалась от контроля (соответственно 18,5±2,0 тыс. и 17,4±1,9 тыс.). Физическая работоспособность, тестируемая по максимальной продолжительности плавания с грузом 8% массы тела, после введения этанола значительно возросла. До введения этанола максимальная продолжительность плавания крыс с грузом 8% массы тела равнялась 7,6±1,3 мин, а после введения этанола 15,2±2,4 мин.
Этанол увеличивал также продолжительность плавания с грузом 30% массы тела (в контроле 1,8±0,3 мин, после введения этанола 3,7±0,5 мин).
Семикратное введение малых доз этанола не оказывало существенного влияния на содержание триацилглицерола, холестерина и общего билирубина, активность щелочной фосфатазы, повышало активность аланин- и аспартатаминотрансфераз в сыворотке крови, увеличивало активность супероксиддисмута-зы и каталазы, не влияло на концентрацию диеновых конъюгатов и малонового диальде-гида в клетках печени и мышц. В эритроцитах увеличивалось содержание 2,3-бисфосфоглицерата и аденозинтрифосфата, повышалась активность супероксиддисмута-зы и каталазы, не изменялось содержание ацилгидроперекисей и малонового диальде-гида (табл. 1). Приведенные данные показывают, что метаболические изменения после приема малых доз этанола направлены в основном на сохранение антиоксидантного статуса и энергетического потенциала клеток.
Повышение аспартат- и аланинаминотранс-фераз, преимущественно последней (коэффициент де-Ритиса до поступления этанола -0,78; после поступления - 0,45), вероятно следует рассматривать не как следствие повреждения цитоплазматических мембран гепато-цитов, а как усиление анаболической направленности обменных процессов [16].
Можно предположить, что предварительное поступление малых доз этанола будет индуцировать возникновение иммунометабо-лических сдвигов, противодействующих последующему деструктивному влиянию на организм больших доз этого препарата (явление гомеостаза).
Подтверждением этому служат эксперименты, в которых продолжительность плавания крыс с грузом 30% (ФНСИ) после однократного введения большой дозы этанола (3 мг/100 г массы тела) была существенно ниже, чем у контрольных (не получавших этанол) животных (в контроле 1,8±0,3 мин, после приема этанола 0,8±0,1 мин), а у крыс, однократно получивших 3 мг/100 г этанола, после 7-кратного введения малых доз этого соединения (0,3 мг/100 г) способность выполнять ФНСИ не отличалась от контроля (1,7±0,3 мин).
Однократное введение большой дозы этанола снижало показатели ФМА нейтрофилов и иммунологической реактивности в отношении ЭБ и ЛПС, повышало активность АЛТ и АСТ в крови, снижало активность суперок-сиддисмутазы и каталазы в эритроцитах печени и мышц, увеличивало содержание продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах печени и мышц. Предварительное кратковременное введение малых доз этанола ослабляло иммуносупрессорное действие и ограничивало снижение антиоксидант-ных ферментов в эритроцитах, печени и мышцах (табл. 1).
Полученные данные свидетельствуют о важной роли антиокислительного состояния клеток в реакции иммуномодулирующего и актопротекторного действия низких доз этанола.
Повышение иммунологической активности, наблюдающееся после действия некоторых стресс-индуцирующих агентов (умеренно высокой внешней температуры, физической
Таблица 1
Влияние малых доз этанола на метаболические параметры крови и органы крыс
Биохимические параметры До поступления этанола После 7-кратного поступления 0,3 г/100 г массы тела этанола После однократного поступления 3 г/100 г массы тела этанола После 7-кратного поступления 0,3 г и однократного поступления 3 г этанола
Сыворотка крови
Концентрация ТАГ, моль/л 1,7±0,2 1,8±0,3 1,5±0,2 1,7±0,3
Концентрация холестерина, моль/л 4,3±0,3 4,7±0,3 4,3±0,4 4,6±0,4
Активность АЛТ, моль (ч*л) 1,8±0,6 8,6±1,31 5,3±0,91,2 5,6±0,91,2
Активность АСТ, моль (ч*л) 1,4±0,3 3,9±0,51 2,6±0,41,2 2,8±0,51,2
Активность ЩФ, моль (ч*л) 7,2±1,2 7,8±1,3 7,5±1,4 7,0±1,1
Содержание ОБ, мкмоль/л 8,4±0,7 8,1±0,6 8,8±0,9 8,6±0,8
Эритроциты
Концентрация БФГ, мкмоль/л 5,8±0,3 7,1±0,41 5,3±0,4 5,2±0,42
Концентрация АТФ мкмоль/л 1,2±0,1 1,6±0,11 3,1±0,12 1,4±0,1
Активность СОД, ед/мл 59,4±2,8 72,3±3,11 42,6±2,61,2 5,7±2,01,3
Активность каталазы, ед/мл 11,4±0,5 19,5±0,71 0,7±0,31,2 12,3±4,12'3
Содержание АГП, 0233/мл 1,4±0,3 1,6±0,4 1,6±0,3 1,5±0,4
Содержание МДА, мкмоль/л 45,0±3,7 48,0±4,1 43,8±4,0 45,2±4,1
Ткань печени
Активность СОД, ед/мл 4,1±0,2 6,3±0,41 3,2±0,21,2 5,4±0,31,3
Активность каталазы, ед/мл 20,9±1,3 27,7±2,11 13,5±1,81,2 18,8±2,02'3
Содержание ДК, нмоль/л 52,7±2,4 49,6±2,3 63,3±3,71,2 55,1±2,62'3
Содержание МДА, нмоль/л 22,6±1,5 20,8±1,7 28,1±1,81,2 23,6±1,63
Ткань мышц
Активность СОД, ед/мл 3,6±0,2 4,9±0,31 2,5±0,21,2 3,1±0,3
Активность каталазы, ед/мл 8,7±1,0 13,4±1,21 6,9±0,71,2 9,4±0,82'3
Содержание ДК, нмоль/л 50,6±2,4 48,7±2,6 59,4±2,71,2 47,0±2,83
Содержание МДА, нмоль/л 17,3±1,4 18,5±1,6 22,5±1,81,2 19,3±1,63
нагрузки, низкой интенсивности, дозированной кровопотери), а также после введения некоторых лекарственных средств (протео- и гликолитических ферментов, жирорастворимых витаминов), обусловлено появлением в крови эритроцитов, обладающих иммуностимулирующими свойствами [14]. В связи с этим возникло предположение, что такие эритроциты могут накапливаться в крови и при поступлении в организм низких доз этанола. Установлено, что после 7-дневного введения 0,3 г/100 г массы тела этанола в сосудистом русле животных появляются эритроциты, стимулирующие у аллогенных реципиентов развитие ГИО на ЭБ и не влияющие на иммунный ответ, индуцированный ЛПС. Им-муномодулирующими свойствами обладали тяжелые эритроциты, легкие клетки такого эффекта не вызывали (табл. 2). Введение ин-тактным крысам тяжелых эритроцитов, полученных от аллогенных животных после 7-кратного введения этанола, повышало их способность выполнять физическую работу субмаксимальной и высокой интенсивности.
Результаты проведенных исследований показывают, что при кратковременном поступлении в организм небольших доз этанола в сосудистом русле появляются эритроциты, оказывающие влияние на иммунологическую реактивность и физическую работоспособность организма. Тяжелые эритроциты животных, кратковременно получавших этанол, стимулируют развитие Т-зависимого иммунного ответа, но не влияют на интенсивность Т-независимого ответа. Это свидетельствует о том, что иммуностимулирующее действие эритроцитов реализуется при участии имму-норегуляторных популяций макрофагов и Т-лимфоцитов (табл. 2).
Регуляторный эффект этих клеток опосредуется выделяемыми ими гуморальными факторами. Учитывая это, исследовано влияние тяжелых эритроцитов крыс, кратковременно получавших этанол, на выделение прилипающими и не прилипающими к стеклу клетками селезенки интактных крыс факторов, модулирующие развитие иммунного ответа и физическую работоспособность.
Таблица 2
Влияние фракций эритроцитов алкоголизированных крыс на иммунологическую реактивность и физическую работоспособность животных, не получавших этанол
Условия эксперимента Иммунологическая реактивность Физическая работоспособность
АОК к ЭБ, тыс./орган АОК к ЛПС, тыс./орган Продолжительность плавания с грузом 30% массы тела, мин Продолжительность плавания с грузом 8% массы тела, мин
Контроль (без введения аллоген-ных эритроцитов) 24,7±1,8 16,6±1,2 1,8±0,3 7,6±1,3
Введение легких эритроцитов интактных крыс 23,1±1,7 17,0±1,3 1,9±0,3 7,4±1,2
Введение тяжелых эритроцитов интактных крыс 25,3±1,9 17,8±1,7 1,8±0,4 7,7±1,4
Введение легких эритроцитов алкоголизиро-ванных крыс 24,0±2,1 15,2±1,3 1,7±0,3 7,5±1,2
Введение тяжелых эритроцитов интактных крыс 49,5±2,41-4 17,3±1,41-4 3,4±0,51-4 13,7±2,11-4
Установлено, что супернатанты прилипающих и не прилипающих спленоцитов крыс, получавших инъекции эритроцитов ин-тактных крыс, не обладали иммуномодули-рующей активностью, не вызывал иммуно-модулирующего эффекта также супернатант неприлипающих клеток селезенки крыс, получавших этанол. Вместе с тем супернатант прилипающих к стеклу спленоцитов крыс, получавших инъекции эритроцитов кратковременно алкоголизированных крыс, стимулировал у неалкоголизированных аллогенных реципиентов развитие Т-зависимого иммунного ответа, но не влиял на выраженность Т-независимого иммунного ответа. Введение интактным животным иммунологически неактивных супернатантов, обладающих иммуностимулирующей активностью, повышало способность неалкоголизированных крыс выполнять физические нагрузки субмаксималь-
нои интенсивности и не влияло на возможность выполнения нагрузок высокой интенсивности.
Фракционирование супернатантов прилипающих клеток на сефадексе G-150 позволила выделить три белковые фракции. При ал-логенном переносе фракции I увеличивалась продолжительность плавания крыс с грузом 30% массы тела. Фракция III повышала иммунологическую реактивность реципиентов в отношении ЭБ, но не влияла на реактивность в отношении ЛПС и на физическую работоспособность неалкоголизированных крыс (рис).
Результаты проведенного исследования показывают, что иммуномодулирующее и ак-топротекторное действие кратковременного поступления в организм этанола опосредовано различными соединениями, выделяющимися прилипающими к стеклу клетками селе-
Рис. Влияние фракций супернатантов прилипающих к стеклу спленоцитов крыс, получавших инъекции тяжелых эритроцитов алкоголизированных крыс, на иммунологическую реактивность и физическую работоспособность аллогенных животных, не получавших этанол. Рисунок А: Развитие ГИО на ЭБ (светлые столбики) и ЛПС (заштрихованные столбики).
По оси абсцисс: 1 - контроль (без введения фракций супернатантов), 2, 3 и 4 - введения I, II и III фракций супернатантов соответственно. По оси ординат: число АОК тыс./селезенка. Рисунок Б: Продолжительность плавания с грузом 30%.
По оси абсцисс: продолжительность плавания в мин. По оси ординат: К - контроль (без фракции супернатантов); I, II и III - введение фракций I, II и III соответственно. Рисунок В: Продолжительность плавания с грузом 8%. То же, что и рис. Б
зенки, после активации их модифицированными тяжелыми эритроцитами алкоголизи-рованных крыс.
Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о том, что некоторые выделяющиеся иммуноцитами соединения (интерлей-кины) усиливают секрецию АКТГ и глюко-кортикоидов [7].
Следствием этого является стимуляция глюконеогенеза, играющего важную роль в энергообеспечении работающих мышц [3]. В связи с изложенным есть основания считать, что под влиянием модифицированных тяжелых эритроцитов клетки селезенки выделяют низкомолекулярные пептиды, обладающие иммуномодулирующими свойствами, и высокомолекулярные соединения, оказывающие влияние на процессы энергетического обеспечения мышечного сокращения.
Физическая нагрузка субмаксимальной интенсивности выполняется в течение не-сколькуих секунд за счет энергии АТФ, КФ и в небольшой степени гликолиза. Более продолжительные (несколько минут) нагрузки высокой интенсивности возможны при использовании энергии аэробно осуществляемых процессов окисления глюкозы и жирных кислот [3]. Полученные нами результаты позволяют предположить, что в составе фракции I супернатанта прилипающих к стеклу спленоцитов алкоголизированных крыс присутствуют соединения, повышающие эффективность образования, транспорта и использования макроэргов АТФ и КФ в миоцитах. Вместе с тем во фракции I спленоцитов алко-голизированных крыс, вероятно, нет соединений, влияющих на аэробно реализуемые процессы энергообеспечения работающих мышц. Не исключено также, что действие таких соединений ингибировано поступающим в мышцы этанолом или его метаболитами.
Обращает на себя внимание тот факт, что введение этанола повышает способность крыс выполнять физическую нагрузку субмаксимальной и высокой интенсивности, а инъекции эритроцитов или фракции суперна-тантов спленоцитов алкоголизированных животных - только нагрузку субмаксимальной интенсивности. Вероятно, относительно продолжительная работа высокой интенсивности зависит от гормонально обусловленных изменений энергетического обмена в жировой
ткани и мышцах. Такие изменения индуцируются поступающим в организм эталоном и продуктами его метаболизма. Что же касается кратковременной субмаксимальной нагрузки, то на ее продолжительность влияют многие биологически активные соединения, быстро накапливающиеся в крови при действии на организм различных внешних агентов. Увеличение способности к кратковременному выполнению субмаксимальной нагрузки под влиянием соединений, выделяющихся спле-ноцитами, является одной из экстренных реакций организма на действие раздражителей, в частности на поступление этанола.
В связи с изложенным возникает предположение о возможности повышения способности выполнять высокоинтенсивные нагрузки путем совместного введения малых доз этанола с лекарственными препаратами, активирующими процессы аэробного энергообеспечения. В качестве таких средств можно использовать препараты, повышающие окси-генацию клеток (рибоксин), ускоряющие транспорт жирных кислот в митохондриях (элькар), активирующие работу лимоннокислого цикла (мексидол) и окислительной цепи митохондрий (кудесан) [10].
Выявление взаимосвязи между иммунологической реактивностью и физической работоспособностью является основанием для изучения эффективности использования различных иммуномодуляторов в качестве средства повышения физической работоспособности организма в норме, при стрессе и в условиях патологии.
Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать следующие выводы:
1. Кратковременное (в течение 7 дней) введение крысам Вистар малых доз этанола (0,3 г/100 г массы тела) стимулировало развитие Т-зависимого иммунного ответа, повышало активность аланин- и аспартатами-нотрансфераз крови (снижало коэффициент де-Ритиса), увеличивало активность суперок-сиддисмутазы и каталазы в клетках печени и мышц, повышало содержание 2,3-бисфосфо-глицерата и аденозинтрифосфата, активность супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов, повышало способность животных выполнять физическую нагрузку субмаксимальной и высокой интенсивности.
2. Однократное введение большой дозы этанола (3 г/100 г массы тела) снижало функционально-метаболическую активность ней-трофилов, угнетало развитие Т-зависимого иммунного ответа, повышало активность ас-партатаминотрансфераз крови, снижало активность супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов, повышало содержание продуктов перекисного окисления липидов в этих клетках. Предварительное кратковременное введение малых доз этанола ослабляло им-мунносупрессорный эффект и ограничивало снижение активности ферментов этих клеток, вызванное введением большой дозы этанола. Малые дозы этанола вызывали актопротек-торный эффект.
3. Тяжелые эритроциты крыс, кратковременно получавших малые дозы этанола, индуцируют выделение прилипающих к стеклу клеток селезенки, низкомолекулярных факторов, стимулирующих развитие Т-зависимого иммунного ответа, а также высокомолекулярных соединений, повышающих антиокси-дантный потенциал эритроцитов, клеток печени и мышц, увеличивающих способность аллогенных животных выполнять физическую нагрузку субмаксимальной интенсивности.
ЛИТЕРАТУРА
1. Алиев Н.А. Иммунопатология алкоголизма // Иммунология. - 1989. - № 1. - С. 7-11.
2. Бенисевич В.И., Идельсон Л.Н. Образование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Маркиа-фава - Микели // Вопр. мед. химии. - 1973. -Т. 19, Вып. 6. - С. 596-599.
3. Бобков Ю.Г., Виноградов В.М., Катков В.Ф. и др. Фармакологическая коррекция утомления. - М.: Медицина, 1984. - 208 с.
4. Виноградова И.Л., Багрянцева С.Ю., Дер-виз Г.В. Метод одновременного определения 2,3 ДФГ и АТФ в эритроцитах // Лаб. дело. -1980. - № 7. - С. 424-426.
5. Денисюк Т.А., Покровский М.В. Актопротек-торное действие регуляторов энергетического обмена и фосфолипидов при алиментарных нарушениях гомеостаза // Курский науч.-практ. вестн. "Человек и его здоровье". -2005. - № 1. - С. 11-15.
6. Детерман Г. Гель-хроматография. - М.: Ме-ер, 1970. - 252 с.
7. Дильман В.М. Четыре модели медицины. - Л.: Медицина, 1987. - 287 с .
8. Евсеев В.А. Иммунологические парадоксы алкоголизма // Иммунология. - 1990. - № 2. -С. 4-8.
9. Кобзев Т.В., Троицкая Н.А., Куприенко В.И., Кобзева О.М. Методика разделения эритроцитов на возможные группы // Патол. системы крови и кровообращения. - Симферополь, 1978. - 38 с.
10. Лазарева Г.А., Бровкина И.Л., Лазарев А.И. и др. Иммунометаболические эффекты регуляторов энергетического обмена при нарушении гомеостаза. - Курск, 2006. - 230 с.
11. Мальберг К., Зигль Э. Метод локального гемолиза // Иммунологические методы; пер. с нем. / под ред. Г. Фримеля. - М.: Медицина, 1987.- С. 57-72.
12. Меньшиков В.В., Делектарская Л.Н. Методы клинической биохимии // Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. - С. 174-276.
13. Подильчак М.А. Клиническая энзимология. -Киев, 1967. - 292 с.
14. Прокопенко Л.Г., Бровкина И.Л. Иммуноме-таболические нарушения и их коррекция // Окислительный энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция). -Курск. - 2003. - С. 13-34.
15. Родионов С.М., Патним В. И., Макаренко И.Г., Земсков В.М. Новый подход к изучению гетерогенности макрофагов // Иммунология. - 1985. - № 3. - С. 34-37.
16. Рослый И.М., Абрамов С.В., Агаронов В.Р. и др. Биохимия и алкоголизм (IV): Типовые клинико-биохимические синдромы при хронической алкогольной интоксикации // Вопр. наркологии. - 2004. - № 5. - С. 46-56.
17. Стальная Н.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Соврем. методы в биохимии / Под. ред. В.Н. Ореховича. - М., 1977. - С. 63-64.
18. Стальная Н.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиабарбитуровой кислоты // Соврем. методы в биохимии / Под. ред. В.Н. Ореховича - М., 1977. - С. 66-68.
19. Beutler B., Vilsark J., Cermal A. Cachection tumor necrosis factor: production, distribution and metabolic fate in vivo. - 1985. - V. 135. -Р. 3972-3977.
