МИКРОБИОТА СОБАК (CANIS LUPUS FAMILIARIS) И УСПЕШНОСТЬ ИХ ПОИСКОВОГО ПОВЕДЕНИЯ
А.В. Сухопутова, М. С. Пидченко
МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, [email protected]
Термин микробиота принят для обозначения сообществ коммен-сальных, симбиотических и патогенных микроорганизмов, существующих в разных полостях и на разных поверхностях тела макроорганизма. Число клеток микробиоты на порядок превышает число клеток макроорганизма (Wilson, 2005). Численность и состав микробиоты связаны с состоянием организма хозяина, регулируются гормонами стресса и эндогенными антимикробными пептидами (Соколов с соавт., 1991; Henderson, 2008; Bruhn et oth., 2011). Запах микрофлоры является важным компонентом обонятельной сигнализации (Мошкин с соавт., 2006). Анализируется гипотеза о существовании медиаторной функции микробиоты при взаимодействии консументов двух трофических уровней (Шубкина с соавт., 2009, 2010, 2012). Общепринятым методом оценки объема микробиоты является оценка КОЕ - подсчет количества колониеобразующих единиц на специально приготовленной питательной среде.
Целью нашей работы является описание изменчивости уровня КОЕ у домашних собак и установление взаимосвязи объема кожной микробиоты с особенностями поискового поведения охотничьих собак.
Задачами данной работы являются:
Изучение кожной микробиоты у собак разных пород, содержащихся в разных условиях, находящихся в разном состоянии: условно здоровых и имеющих клинические признаки неблагополучия.
Сравнение уровня КОЕ у животных с различной успешностью поискового поведения
Использовали методику, предложенную В.Е. Соколовым и Н.А. Ушаковой (Соколов с соавт., 1990, а, б).
Брали отпечатки с мочки носа собак на стерильный мясопептон-ный агар, разлитый по чашкам Петри (диаметр 3,5 см). При каждом сборе проб у собак делали контрольные пробы, характеризующие микрофлору воздуха: открытую чашку Петри помещали рядом с местом получения проб. Чашки
Петри с отпечатками и контроль инкубировали в течение 2х суток в термостате при температуре 38°С, затем проводили оценку уровня КОЕ.
Уровень КОЕ определяли как сумму двух измерений: количество отдельных колоний и площадь не поддающихся подсчету, сросшихся колоний. Для сопоставления этих величин с разной размерностью их нормировали относительно максимального значения этого показателя, полученного за весь период взятия проб. Размерность полученных чисел представляет собой условные единицы, далее у.е.
В работе использованы собаки: 25 борзых (2х пород: псовые и хортые) от 1,5 до 9 лет, предоставленных Экспериментальным питомником собак отечественных пород ИПЭЭ им. А.Н.Северцова РАН - Биологического ф-та МГУ им. М.В. Ломоносова и частными лицами: 69 легавых (7 пород: дратхаар, курцхаар, спаниель, эпаньоль бретон, пойнтер, гордон, венгерская выжла), от 1,5 до 7 лет).
Контрольные пробы (всего 17 проб) показали, что открытая чашка
без отпечатка, в среднем зарастает на 13 отдельных колоний и 1 см сросшихся колоний, что в условных единицах равно 0,13 у.е.; при этом показатель варьирует от 0,04 у.е. до 0,17 у.е.
Проведено сравнение индивидуальной изменчивости уровней КОЕ (пробы от 94 собак в 1-5 повторностях; всего 137 проб) у собак двух групп пород. У борзых собак уровень КОЕ варьировал от 6 до 379 отдельных и от 0 до 9,8 см2 сросшихся колоний на 1 пробу (п = 71 проба). У легавых - 6-382 отдельных и от 0 до 9,8 см2 сросшихся колоний на 1 пробу (п =66 проб). Полученные данные позволяют утверждать, что у борзых и легавых уровни КОЕ не различаются по пределам изменчивости (0,07 - 1,07 у.е.), средним значениям (0,36 - 0,31 у.е.) и доверительным интервалам (0,13-0,53 у.е.).
Для сравнения уровней КОЕ у собак в разном физиологическом и клиническом состоянии, собак питомника (п = 20 собак в 2-5 повторностях) разделили на две группы: здоровые на момент сбора проб и больные. Больными считались собаки, которые имели признаки клинического неблагополучия, например: с травмами, диспепсией разной этиологии и т.п.
Показано, что собаки с признаками неблагополучия, как правило, выходят по уровню КОЕ за доверительные интервалы, типичные для здоровых собак (0,13-0,53 у.е.), в сторону увеличения или уменьшения числа колоний. Значимо (р<0,05) различается величина дисперсии уровня КОЕ животных двух представленных групп: среди особей с признаками клинического неблагополучия дисперсия выше.
Проведено сравнение успешности поискового поведения у собак с разным уровнем КОЕ. На испытаниях и состязаниях легавых собак 2011 года по болотно-луговой дичи сравнивали уровень КОЕ собак с разной успешностью поискового поведения. Испытания проводили независимые экспертные комиссии по системе оценки, принятой в РФ (Сборник нормативных документов по Охотничьему собаководству, 2010).
По результатам испытаний собак разделили на 3 группы: с успешным комплексом поисковых реакций (получивших дипломы второй и третьей степени), не получивших дипломов (расцененных без диплома) и снятых с испытаний. Собаки, попавшие в группу снятых с испытаний, не были оценены по балльной системе вследствие нарушения установленных правил испытаний. Учитывая, что возможны нарушения как связанные с особенностями работы собаки, так и не связанные с ними, этих собак в рамках нашей работы рассматривали как животных, успешность поискового поведения которых мы не можем оценить.
Собаки, получившие дипломы (п=9), значимо (р<0.05) отличаются по уровню КОЕ от собак (п=22), не получивших диплома. У собак, расцененных без диплома, КОЕ несколько выше, приближаясь к верхним пределам доверительного интервала, хотя и не достигает предельных значений. На основании полученных данных, можно утверждать, что поисковое поведение наиболее успешно у собак, уровень КОЕ которых не приближается к верхней границе доверительного интервала.
Выводы:
• Уровень КОЕ варьирует у собак от 6 до 379 отдельных колоний и от 0 до 9,8 см2 слитых колоний, что соответствует минимуму 0,07 у.е. и максимуму 1,07 у.е. Доверительные интервалы, определенные для здоровых собак, составляют 0,13-0,53 уе.;
• Собаки разных породных групп (легавые-борзые), разных пород, содержащиеся в разных условиях, не различаются значимо по средним значениям, доверительному интервалу и пределам изменчивости КОЕ;
• Величина дисперсии уровня КОЕ значимо (р<0.05) выше у животных с клиническими признаками неблагополучия по сравнению с условно здоровыми животными;
• Собаки, проявляющие успешное поисковое поведение, включая лучшие оценки «чутья», обладают относительно невысоким уровнем КОЕ в пределах определенного ранее доверительного интервала. Искренне благодарим сотрудников Отдела собаководства Ассоциации Росохотрыболовсоюз за помощь при сборе материалов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Мошкин М. П., Герлинская Л. А., Нагатоми Р. Запах, который не
лжет. Химическая коммуникация полов и физическое здоровье // Российская наука. М. : Октопус, 2006. С. 228-239.
Сборник нормативных документов по охотничьему собаководству, 2010.
Реакция микробных ассоциаций на поверхности кожи млекопитающих на изменение физиологического состояния организма / В. Е. Соколов [и др.] // Известия АН СССР. Сер. биол. 1990. № 5. С. 694-700.
Особенности микробных ассоциаций в секретах некоторых кожных желез млекопитающих / В. Е. Соколов [и др.] // Микробиология. 1990. Т. 59, № 3. С. 472-481.
Стресс - как фактор, нарушающий стабильность кожных микробных ассоциаций / В. Е. Соколов [и др.] ; ДАН СССР. 1991. Т. 317, № 3. С. 764768.
Шубкина А. В., Северцов А. С., Чепелева К. В. Хищник и жертва: проблема избирательного изъятия на уровне особей // Вестник охотоведения. 2010. № 7, вып. 1. С. 1-22.
Шубкина А. В., Северцов А. С., Чепелева К. В. Изучение охотничьего поведения борзых с помощью gps-регистрации: количественная характеристика поиска и преследования жертвы // Зоологический журнал. 2010. Т. 89, № 2. С. 1-16.
Шубкина А. В., Северцов А. С., Чепелева К. В. Факторы, влияющие на изъятие жертвы хищником: моделирование с использованием борзых собак // Успехи современной биологии. 2012. № 1. С. 1-12
O.Bruhn, J. Grötzinger, I. Cascorbi, S. Jung, 2011. Antimicrobial peptides and proteins of the horse - insights into a well-armed organism // Vet Res. 2011; 42(1): 98
M. Wilson, 2005. Microbial inhabitants of the humans. Cambridge University press. P.447.
Henderson B., 2008. Cell Stress Proteins as Modulators of Bacteria-Host Interactions // The Biology of Extracellular Molecular Chaperones: Novartis Foundation Symposium 291 (eds D. J. Chadwick and J. Goode), UK.