CC BY
36
10. Hepatotoxicity in Guinea Pigs Following Acute Inhalation Exposure to 1,1-Dichloro-2,2,2-Trifluoroethane / G.B. Marit [et al.] // Toxicologic Pathology. 1994. Vol. 22. № 4. P. 404-414.
УДК 636.2.082
МЕХАНИЗМЫ ИММУНОПАТОГЕНЕЗА И СТРУКТУРНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ ПРИ ПАТОЛОГИИ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ
У ТЕЛЯТ
В.В. МАЛАШКО, И.П. ЛИШИК, Д.В. МАЛАШКО, А.Н. ПЕТУШОК, М.С. АСАНОВА, В.Т. БОЗЕР УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230008
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. Научное обеспечение ветеринарной медицины Республики Беларусь является основой, которая определяет успешное проведение ветеринарных мероприятий. В настоящее время в Республике Беларусь зарегистрировано около 100 инфекционных заболеваний, которые наносят огромный экономический ущерб. Причем болезни органов дыхания и пищеварения имеют сложную этиологическую проблему [1]. В хозяйствах довольно часто диагностируются клинические и, особенно, субклинические формы болезней животных, обусловленные дефицитом витаминов, макро- и микроэлементов [2]. Требуют дальнейшего решения вопросы расшифровки этиологической структуры желудочно-кишечных и респираторных болезней крупного рогатого скота и свиней. В настоящее время среди болезней крупного рогатого скота особую актуальность имеют вирусные инфекции молодняка, инфекционное бесплодие коров [5].
Удельный вес вирусных инфекций желудочно-кишечного тракта и респираторных органов телят из всей инфекционной патологии крупного рогатого скота занимает от 95 до 98%, непроизводительное выбытие по этим причинам в отдельных хозяйствах достигает 56-78% [6].
В связи с этим при исследованиях по отработке ведения животноводства, адаптации животных к условиям содержания, кормления, получения жизнеспособного и с высокой живой массой молодняка важное значение имеет объективная и полная характеристика особенностей обменных процессов в организме телят [4].
Необходимость в исчерпывающей информации о гематологических, биохимических, иммунологических особенностях и ростовых показателях животных раннего постнатального периода вызвана потребностью в разработке принципиально новых, нетрадиционных подходов к решению вопросов повышения жизнеспособности ослабленных животных, а также об организации физиологически обоснованного кормления и содержания беременных животных. Решение данной проблемы позволит существенно повысить продуктивность животных
175
и уменьшить потери при выращивании молодняка сельскохозяйственных животных [3].
Недостаточная изученность морфологических, гистохимических и ультраструктурных особенностей пищеварительной системы телят как в норме, так и в динамике болезни не позволяет раскрыть основные моменты патоморфогенеза заболеваний алиментарной системы. Для этого необходимо комплексное применение современных морфологических методов, позволяющих изучить механизмы возникновения патологии. Предупреждение заболеваний должна обеспечить эффективная превентивная ветеринария, основывающаяся на использовании адаптагенов (витамины, микробные метаболиты, бифидо- и лактобак-терии, микро- и макроэлементы).
Цель работы - исследовать механизмы иммунопатогенеза и структурно-метаболические процессы при патологии пищеварительной системы у телят и под влиянием микробно-витаминных препаратов и ка-тозала.
Материал и методика исследований. Объектом исследования являлись телята молозивно-молочного периода с разной живой массой при рождении. Материалом исследований служили кровь, сычуг и тонкий кишечник. Для проведения гематологических, биохимических, иммунологических и морфологических исследований использовали новорожденных, 2-, 3-, 6-, 10-, 30- и 35 -дневных телят. Для гистологических исследований использовали новорожденных телят (5 гол.), 3-дневных телят (6 гол.), 6-дневных (9 гол.), 10-дневных (8 гол.) и 30-дневного возраста (6 гол.). Исследовались образцы сычуга, двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок. Биоптаты фиксировали в 10%-ном нейтральном забуференном формалине по Р. Лилли при температуре +4 и +20оС.
Для получения обзорной информации структурных компонентов сычуга и тонкого кишечника гистосрезы окрашивали гематоксилин-эозином по П. Эрлиху, прочным зеленым по И. Ван-Гизону, эозином -метиленовым синим по Лейшману, альциновым синим с докраской ядер гематоксилином. Определение плазмоцитов проводили по методу Ж. Браше. Для оценки физиологической и репаративной регенераций клеток слизистой оболочки тонкого кишечника телят применяли подсчет митозов на разных уровнях крипт и ворсинок.
Для электронно-микроскопического исследования брали соответствующие участки тонкого кишечника около 3-6 см, которые были ли-гированы, и внутрилюминально вводили методом диффузии 2%-ный раствор глютарового альдегида. В последующем ткани помещали в 5%-ный раствор глютарового альдегида на 2 ч. Затем делали вертикальные разрезы по отношению к оси кишки и изготовляли кубики с длиной края 1-1,5 см. После 3-кратной промывки в 0,1М фосфатном буфере материал обрабатывали 2%-ным раствором четырехокиси осмия, дегидрировали в спиртах возрастающей концентрации, контрастировали уранилацетатом и заключали в аралдит. Срезы готовили на
176
ультрамикротоме ЛКБ (Швеция), контрастировали цитратом свинца и просматривали под микроскопом JEM-100B и JEM-100СХ «JEOL» (Япония).
Определение активности лизоцима в сыворотке крови телят проводили нефелометрическим методом по В.Г. Дорофейчук. Бактерицидную активность сыворотки крови телят (БАСК) оценивали по методике Мюнселя и Треффенса в модификации О.В. Смирновой и др. Фагоцитарная активность лейкоцитов выражается процентным отношением активных, участвовавших в фагоцитозе лейкоцитов, к общему числу подсчитанных, которую проводили по методу В.С. Новикова. Определение макро - и микроэлементов в сыворотке крови телят проводили с использованием атомно-абсорбционного спектрометра МГА-915, гематологические исследования - на гематологическом анализаторе MEDONIC CA-620. Результаты исследований приведены к Международной системе единиц (СИ).
Результаты исследований и их обсуждение. У телят до 46-дневного возраста колибактериозная инфекция чаше протекает как моноинфекция, а в более старшем (1,5-4-недельном возрасте) - как смешанная или вторичная инфекция с сочетанием рота- и коронови-русной инфекций. Ротавирусная инфекция способствует заселению тонкого кишечника Е. соИ. Энтеротоксическую форму колибактериоза, по нашему мнению, можно отнести к болезням с фекально-оральным способом передачи.
В период фиксации Е. соИ на микроворсинках тонкого кишечника (главным образом на тощей и подвздошной кишках) и в дальнейшем при выделении бактериями токсинов наблюдается интенсивная гиперсекреция жидкости в просвет кишечника. Это дает основание к использованию интенсивной регидратационной терапии и лекарственных препаратов. Адгезия колибактерий на микроворсинках слизистой оболочки тонкого кишечника приводит к нарушению перистальтики и защитных свойств слизистой оболочки, которые выражаются в разрушении ворсинок, микроворсинок, гликокаликсного слоя, происходят усиленная коллогенизация слоев стенки кишки и развитие воспалительных и ишемических процессов.
Заболевшие телята теряют с фекалиями воду, натрий и бикарбонаты, что приводит к дегидратации организма, обменному ацидозу, ги-перкалиемии, гипохлоремии и уремии. Более глубокие изменения мы наблюдали, когда диагностировалась смешанная патология (колибак-териоз + короновирусная инфекция). При гистологическом исследовании слизистой оболочки тощей кишки было выявлено, что эпителиальные клетки кишечника (энтероциты) замещаются кубовидными, незрелыми клетками, не способными к синтезу пищеварительных ферментов, секреции и всасыванию. Это вызывает расстройство переваривания и всасывания нутриентов в кишечнике больных телят, на-
рушает водный баланс, обуславливает накопление в пищеварительной трубке лактозы и электролитов, что увеличивает осмотическое давление и прилив жидкости в просвет кишечника с последующим развитием диареи.
Для изучения влияния дегидратации на изменение живой массы телят проведено взвешивание их при развитии диарейного процесса в сравнительном плане (клинически здоровые и больные телята). Если начальная живая масса телят была в пределах 33,12 - 34,46 кг (в среднем - 33,80 кг), то при развитии патологического процесса живая масса больных телят через 5 дней уменьшилась на 4,3 кг, или 12,7%, по отношению к клинически здоровым телятам. Для восполнения организма теленка электролитами нами предложены нормы использования регидратационных растворов в сутки в зависимости от потери живой массы (табл. 1). Клиническая картина болезни характеризуется тем, что телята больше лежат, принимая неестественное положение тела. Задняя поверхность тела и анальное отверстие испачканы каловыми массами. Усиленное раздражение токсинами, фекальными массами прямой кишки и анального отверстия заставляет теленка принимать «сгорбленную позу» для частого, а иногда «провоцирующего» испражнения. Спазм кровеносных сосудов головного мозга и повышение кровяного давления, снижение чувствительности периферических рефлексов приводят к тому, что теленок принимает позу «ступора» (табл.1).
Таблица 1. Средняя суточная потребность больных телят в регидратационном растворе
Потери живой массы, % Живая масса тела, кг
30 40 50
2 2,0 2,7 3,2
4 2,8 3,8 4,5
6 3,1 4,3 5,5
8 4,0 5,0 6,2
10 4,5 6,0 7,3
При колибактериозе, особенно его кишечных формах (энтероток-сическая и энтеротоксимическая формы) и других заболеваниях, независимо от их этиологии, но сопровождающихся симптомами острых желудочно-кишечных расстройств (диспепсия, рота- и короновирус-ный энтерит, криптоспоридиоз), у новорожденных телят, как правило, нарушаются водный, электролитный обмены и кислотно-щелочное состояние. В организме телят нарушения водно-электролитного обмена и кислотно-щелочного состояния развиваются как одно целое, причем в процесс вовлекаются фактически все органы и системы больного организма (рис. 1).
Отсутствие поступления воды и пищи в организм
Нарушение процесса всасывания в кишечнике
I
■ Дегидратация организма
Большая потеря воды и электролитов с фекалиями
Образование в тканях воды из жиров, белков и углеводов
Метаболический ацидоз и умеренное
повышение мочевинного азота в крови
Уменьшение воды в крови (агидремия)
Уменьшение воды в тканях
Повышение вязкости и уменьшение объема крови (олигемия), гемоконцентрация
1
Уменьшение воды с мочой и потом
1
Ослабление тканевого метаболизма
Почечная ишемия
1
Недостаточное кровоснабжение периферических органов
Мышечная слабость, снижение температуры тела, анорексия
Повышение концентрации и уменьшение выделения мочи (олигурия), обострение ацидоза
Рис. 1. Схема метаболических нарушений в организме теленка при бактериально-вирусной инфекции.
Поэтому понятия нарушения обмена воды, электролитов и кислотно-щелочного состояния часто условны и обычно их применяют для облегчения понимания патологических процессов, развивающихся у телят при заболевании колибактериозом. В зависимости от выраженности обезвоживания у больных телят мы выделили три степени дегидратации: легкую, среднюю и тяжелую. Легкая степень дегидратации характеризуется потерей воды в количестве 4,5 - 5% от массы тела и гематокритным числом (объемное соотношение форменных элементов крови и плазмы), равным 37-42%. Средняя степень соответствует дефициту (6-8,5%) воды и гематокритному числу - 42-50%. При тяжелой степени потеря воды и гематокритное число составляют соответственно 9-12 и 55-60%. Наши данные свидетельствуют о том, что при потере воды свыше 12,5-14,5% и гематокритном числе более 57% шанс на выздоровление больных телят, независимо от вида и интенсивной терапии, минимальный.
В табл. 2 представлены иммунобиологические показатели при смешанной инфекции у телят 25-дневного возраста. Существенное различие было установлено как в общих иммунных глобулинах, так и в отдельных классах иммуноглобулинов.
Активность катаболизма имеет существенные различия. Так, сывороточная концентрация IgG у павших телят была в 2,26 раза меньшей, чем у клинически здоровых, концентрация ^М и ^А у павших телят также была соответственно в 5,74 и 3,44 раза меньшей.
179
Таблица 2. Уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови и в копрофильтрах телят, больных абомазоэнтеритом бактериально-вирусной природы
Группы Содержание иммуноглобулинов I«]
сыворотка крови копроф )ильтры
Павшие, п=5
№ 6,88±0,19" 5,17±0,03"
1«М 0,31±0,02" 0,27±0,01'
1«А 0,43±0,02'' 0,13±0,01"
Общий I« 7,62±0,023'' 5,57±0,05''
Выжившие, п=25
№ 9,73±0,02'' 7,20±0,02''
1«М 0,75±0,02...... 0,30±0,01......
1«А 0,39±0,01" 0,43±0,01"
Общий I« 11,37±0,05" 7,93±0,04''
Клинически здоровые, п=30
ДО 15,56±0,05' 11,42±0,02'"
1«М 1,78±0,01'" 0,76±0,01'"
1«А 1,48±0,01......... 0,58±0,02.........
Общий 18,82±0,07'" 12,76±0,05'"
*Р1<0,05; **Р1<0,01 (значение павших к выжившим телятам); **Р2<0,01 (значение выживших к клинически здоровым телятам); ***Р3<0,001 (значение клинически здоровых к павшим телятам).
Общий иммуноглобулиновый уровень был выше в контрольной группе в 2,47 раза по сравнению с группой павших телят. Уровень катаболизма IgG, ^М и ^А в группе павших телят составил соответственно 24,86; 12,91 и 69,77%. В группе выживших телят этот показатель равнялся соответственно 26,01; 60,0 и 51,69%. Уровень катаболизма общих иммуноглобулинов в группе выживших телят был в 1,12 раза выше, чем в группе павших телят, а 1£;М - в 4,64 раза.
Для рационального применения лечения нами проведен гематологический анализ клинически здоровых и больных телят с желудочно-кишечной патологией в 30-дневном возрасте (табл. 3).
Таблица 3 . Показатели крови здоровых и больных абомазоэнтеритом телят 30-дневного возраста
Показатели Клиническое состояние телят
здоровые больные
1 2 3
Гемоглобин, г/л 101,2 ± 4,3 120,2 ± 2,1*
Эритроциты, 1012/л 6,4 ± 0,3 7,3 ± 0,2
Лейкоциты, 109/л 10,3 ± 0,3 13,2 ± 0,4'
Лейкограмма, %
- базофилы - эозинофилы - миелоциты - юные - палочкоядерные - сегментоядерные - лимфоциты моноциты - -
5,3 ± 0,1 3,2 ± 0,2
- -
0,3 ± 0,1 1,3 ± 0,1
3,9 ± 0,2 8,7 ± 0,4
25,5 ± 0,3 40,7 ± 0,6'
60,5 ± 0,5 39,4 ± 0,4'
4,7 ± 0,5 7,5 ± 0,3
Окончание табл.3
1 2 3
Общий белок, г/л 75,8 ± 1,2 70,6 ± 0,8*
Альбумины, г/л 36,4 ± 0,5 26,7 ± 1,5*
¡Я М, г/л 1,8 ± 0,1 2,7 ± 0,1
¡Я А + О, г/л 23,6 ± 0,7 30,4 ± 0,8*
*Р<0,05; **Р<0,01.
Из анализа табл. 3 видно, что в крови больных телят абомазоэнте-ритом увеличивается количество лейкоцитов преимущественно за счет нейтрофилов, снижается уровень альбуминов, повышается содержание глобулинов за счет а- и у-глобулинов.
Стойкая нейтрофилия со сдвигом ядра влево, появление патологических форм лейкоцитов на фоне резкого уменьшения числа эозино-филов и лимфоцитов свидетельствуют об истощении иммунных механизмов защиты и являются неблагоприятными признаками. Еще более нежелательной является относительная нейтрофилия при общей лейкопении.
В качестве референтного показателя взят гематокрит, дающий представление о соотношении между объемом плазмы и объемом форменных элементов крови. В опытной группе телят, где применялся биокаротивит, показатель гематокрита на всем протяжении исследований был в пределах 35,0-40,5 %, в контрольной группе - 40,7-47,2 %, что свидетельствует о явлениях дегидратации на почве чередующегося поноса. Фагоцитарная активность лейкоцитов в опытной группе колебалась от 83,33 до 97,42, в контрольной группе - от 83,88 до 85,41. Содержание иммуноглобулинов (^ G+A) было выше контрольных показателей на 47,9% (Р<0,05), а ¡я M - на 11,7% (Р<0,05). Таким образом, использование биокаротивита в качестве стимулирующего и профилактирующего средства является эффективным для телят моло-зивно-молочного периода.
Под влиянием катозала содержание эритроцитов в крови телят увеличилось на 33,7% (Р<0,05), тромбоцитов - на 4,1 (Р<0,05), гемоглобина - на 40,2 (Р<0,05), среднее содержание гемоглобина в эритроците - на 17,8% (Р<0,05) по отношению к контрольным данным.
Значительные изменения установлены по содержанию макро- и микроэлементов: увеличение кальция в опытной группе было на 66,5%, фосфора - на 81,7 и железа - на 58,4% по сравнению с контролем. Следовательно, под влиянием катозала существенные изменения в положительную сторону отмечаются в минеральном обмене.
Заключение. Колибактериозно-вирусная инфекция сопровождается снижением живой массы телят на 12,7% по отношению к клинически здоровым телятам. В зависимости от выраженности обезвоживания выделено три степени дегидратации у телят: легкая, средняя и тяжелая, которые основаны на потере организмом воды и гематокритном числе. При гематокритном числе более 57% прогноз для больного теленка чаще неблагоприятный. У больных телят концентрация сыворо-
181
точных Ig была ниже в среднем на 12,91-24,86% по отношению к клинически здоровым телятам. Применение микробно-витаминного препарата «Биокаротивит» позволяет стимулировать иммунобиологические процессы в организме телят и профилактировать желудочно-кишечную патологию. Введение активатора метаболизма «Катозала» активизирует гемопоэз и минеральный обмен у телят молозивно-молочного периода. Более заметное увеличение глобулинов в опытной группе установлено по отношению к в- и у-глобулинам. Их содержание превышало контрольный уровень на 20,1 и 23,5% (Р<0,05) соответственно. Увеличение фракции в-глобулинов, очевидно, связано с уменьшением доли а-глобулинов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Абрамов, С.С. Использование интерферра-100 в комплексном лечении телят, больных абомазоэнтеритом / С.С. Абрамов, С.В. Засинец // Ветеринарная медицина Беларуси. 2003. №2. С. 27-28.
2. Абрамян, Э.Г. Иммунобиохимические показатели молозива коров и крови новорожденных телят / Э.Г. Абрамян, С.М. Левонян, А.С. Авокян // Совершенствование мер борьбы с незаразными болезнями молодняка сельскохозяйственных животных: межвуз. сб. науч. тр. Омск, 1999. С.35-40.
3. Карпуть, И.М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка / И.М. Карпуть. Минск: Ураджай, 1993. 288 с.
4. Малашко, В.В. Гастроэнтеральная патология и реабилитация больных животных / В.В. Малашко, Е.Л. Микулич, Е.М. Кравцова //Актуальные проблемы животноводства: сб. науч. тр. Горки, 2000. С. 242-245.
5. Плященко, С.И. Получение и выращивание здоровых телят / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, А.Ф. Трофимов. Минск: Ураджай, 1990. 220 с.
6. Самохин, В.Т. Своевременно предупреждать незаразные болезни животных / В.Т. Самохин, А.Г. Шахов // Ветеринария. 2000. №6. С. 3-6.
7. Allison, R.G. Interactions of dietary proteins with the mucosal immune system as a component of safety evaluation / R.G. Allison // J. Protein. Chem. 2004. Vol.3. № 1. P. 5-17.
8. Baldwin, R.L. Manipulating metabolic parameters to improve growth rate and milk secretion / R.L. Baldwin, N.E. Smith, J. Taylor //J. Anim. Sci. 2000. Vol. 51. № 6. P. 14161428.
УДК 619:615.37:636.2.053
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОЙ ДОЗЫ КОМПОЗИЦИОННОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ПРОДУКЦИИ ПЧЕЛОВОДСТВА ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ОБЩЕЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ТЕЛЯТ
Е.С. ЖУК
УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230006
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. В современном животноводстве технологии выращивания, содержания животных не всегда отвечают биологическим особенностям их организма. В этих условиях отмечают значительные эконо-
182
