CC BY
17
УДК 616.36-002.3-005.755-07
МЕХАНИЗМЫ ФИБРОГЕНЕЗА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ С
© 2°13 Мусхаджиев А.А.
Дагестанская государственная медицинская академия
В статье дана характеристика спектра изучаемых цитокинов при хроническом гепатите С, которым отводится одна из ключевых ролей в развитии фиброза печени.
The paper presents the characteristic spectra of the cytokines in chronic hepatitis C, which has a key role in the development of liver fibrosis.
Vstat'e dana harakteristika spektra izuchaemyh citokinovpri hronicheskom gepa-tite S, kotorym otvoditsja odna iz kljuchevyh rolej v razvitii fibroza pecheni.
Ключевые слова: фиброз печени, цитокины, ТИМП-1, трансформирующий фактор роста -1в, фиброэластометрия.
Keywords: fibrosis, cytokines, TIMP-1, transforming growth factor -1fi, fibroelastometry.
Kljuchevye slova: fibroz pecheni, citokiny, TIMP-1, transformirujushhij faktor rosta -1fi, fibrojelastometrija.
Хронический гепатит С (ХГ С) характеризуется различной степенью воспаления и фиброза в ткани печени. Этим заболеванием страдают 2,7 млн человек в США и более 170 млн во всем мире [2]. У части больных, обычно в возрасте 20-40 лет, развивается прогрессирующий фиброз с исходом в цирроз печени, на последних стадиях сопровождающийся развитием
осложнений цирроза и гепатоцеллюлярной карциномой. В ближайшие 10-20 лет экономические и социальные потери от этого заболевания не уменьшатся [4].
Из-за цирроза печени и его осложнений в США ежегодно умирает 40 000 человек. Однако в скором времени следует ожидать рост числа пациентов с тяжелыми стадиями фиброза печени, что связано с наблюдающейся во всем мире тенденцией старения населения, увеличением числа лиц с ожирением и инфицированных гепатотропными вирусами [10].
На сегодняшний день гистологический метод считается «золотым стандартом» в диагностике фиброза печени. Однако высокая стоимость и нежелание больных подвергаться инвазивным процедурам
обусловливают необходимость разработки неинвазивных методов диагностики фиброза печени [3].
Неинвазивные методы, используемые в настоящее время в клинической практике для диагностики фиброза печени, недостаточно чувствительны и
специфичны. Продолжается разработка новых методов инструментальной и серологической диагностики фиброза печени. Одним из таких, наряду с фиброэластометрией, является
исследование сывороточных цитокинов -трансформирующего фактора роста -1р (ТОБ-1Р) и тканевого ингибитора матриксной металлопротеазы-1 (ТИМП-1).
Целью исследования является изучение клинической информативности
сывороточных концентраций
трансформирующего фактора роста -1р и тканевого ингибитора матриксной металлопротеазы -1 типа у больных ХГ С.
Материал и методы исследования. Исследования проведены у 150 больных ХГ С в возрасте от 19 до 59 лет (средний возраст 36,7±9,2), из них 104 (37,2+9,1 лет) мужчины и 46 (35,8+10,6 лет) женщины. Контрольную группу составили 35
здоровых лиц в возрасте от 19 до 46 лет (средний возраст 32,5±10,6).
Диагноз ХГ С устанавливали на основании клинического обследования и результатов лабораторных и
инструментальных методов исследований. Маркеры вируса гепатита С (ВГ С) в сыворотке крови определяли
иммуноферментным методом. У всех больных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени исследовали в крови РНК и генотип ВГС. Стадию фиброза по шкале Metavir оценивали методом
фиброэластометрии на аппарате «Фиброскан» (Echosens, Франция).
Иммуноферментным методом с использованием тест-систем фирмы «Вектор-Бест» (Россия, г. Новосибирск) определяли концентрацию цитокинов TGF-1P и ТИМП-1 в сыворотке крови.
Полученные результаты обработаны статистически по программе «Статистика 6.0» с использованием ^критерия Стьюдента.
Результаты исследования.
Клиническая картина у большей части больных характеризовалась такими проявлениями, как вялость, слабость, быстрая утомляемость, снижение трудоспособности. При осмотре определялась слабо выраженная гепатомегалия, как правило, без увеличения селезенки. Активность трансаминаз была практически нормальной у 49 (32,7%) больных, незначительно повышенной у 54 (36,0%) и умеренной у 47 (31,3%) пациентов.
У всех обследованных больных ХГ С в крови обнаружены анти-ВГС и РНК-ВГС. У 98 (65,3%) больных ХГ С установлен 1Ь генотип ВГ С, у 52 (34,7%) пациентов 3а генотип. Высокая вирусная нагрузка (более 800 000 МЕ/мл) выявлена у 33 (41,3%) исследованных больных ХГ С.
При изучении стадии фиброза по данным фиброэластометрии установлено наличие F0 стадии у 52 (34,7%) больных, F1 - у 38 (25,3%), F2 - у 22 (14,7%), F3 - у 18 (12,0%) и F4 - у 20 (13,3%) обследованных больных ХГ С.
Уровни TGF-1P и ТИМП-1 в сыворотке крови у обследованных больных ХГ С показаны в таблице 1. Как видно из
таблицы, у больных ХГ С наблюдалось явное ф<0,001) повышение уровня TGF-1P и ТИМП-1 в сыворотке крови по сравнению с контрольной группой.
При изучении корреляционных взаимосвязей между уровнем цитокинов и активностью цитолитических ферментов выявлена положительная (р<0,01) зависимость между уровнем TGF-1P и ТИМП-1, с одной стороны, и активностью АЛТ/АСТ, с другой (г=0,61, г=0,58 и г=0,68, г=0,62 соответственно).
У больных ХГ С генотипа 3а, высокой вирусной нагрузкой уровни TGF-1P и ТИМП-1 были повышены, по сравнению с таковыми больных генотипом 1Ь и низкой вирусной нагрузкой, но при этом разницы не установлено ф>0,05).
При сопоставлении уровня цитокинов и стадии фиброза печени по данным фиброэластометрии у больных ХГ С установлеш статистически значимая прямая связь ф<0,01) между содержанием TGF-1P и ТИМП-1 в сыворотке крови, с одной стороны, и индексом фиброза, с другой (г =0,76 и г=0,69 соответственно) (рис. 1 и 2).
Таблица Содержание профиброгенных цитокинов в сыворотке крови у больных
ХГ С, (Х±а)
Группа ТОР-1р, ТИМП-1,
обследованных пг/мл нг/мл
Больные ХГ С, п=150 644,3+117,7 856,2+184,4
Контроль, п=35 257,3±58,9 458,6±76,3
Значение, р Р=0,000 Р=0,000
Р0-И Р2 Р3 Р4
Рис. 1. Уровень TGF-lp по стадиям фиброза печени у больных ХГ С (п=150)
ь- ПХГС
Рис. 2. Уровень ТИМП-1 по стадиям фиброза печени у больных ХГ С (п=150)
Обсуждение результатов
исследования. Основными клиническими проявлениями у больных ХГ С были астеноневротический синдром и умеренная гепатомегалия, как правило, без сопутствующего увеличения селезенки. Учитывая, что у данного контингента больных определяется повышенная концентрация цитокинов по сравнению с контролем, можно предположить, что цитокины играют определенную роль в развитии таких проявлений заболевания, как слабость, утомляемость, похудание, субфебрильная лихорадка и др. Подобные предположения высказываются и другими авторами [9].
Достоверно более высокие по сравнению с контролем показатели ТОБ-1Р - одного из важнейших
противовоспалительных цитокинов - у больных ХГ С могут отражать слабую противовирусную активность основных медиаторов воспаления. В качестве противовоспалительных механизмов можно допустить как непосредственное подавление ТОБ-1Р экспрессии генов цитокинов интерлейкина-1, фактора некроза опухоли - альфа, так и индукцию синтеза растворимых рецепторов к ним [5].
Помимо противовоспалительной
активности, ТОБ-1Р является мощным профиброгенным фактором.
Установленная нами корреляционная связь уровня ТОБ-1р с индексом фиброза указывает, что данный цитокин, блокируя воспалительную реакцию, одновременно стимулирует синтез коллагена и
обеспечивает ремоделирование
внеклеточного матрикса [11].
Известно, что в деградации внеклеточного матрикса, особенно его фибриллярных белков, ключевую роль играют особые ферменты - матриксные металлопротеазы. Активность
металлопротеаз подавляется ТИМП. Ключевыми фиброгенными клетками, секретирующими ТИМП и
синтезирующими коллаген, являются звездчатые клетки Ито. При хроническом повреждении печеночной ткани замедляются процессы разрушения экстрацеллюлярного матрикса, что связано с нарушением баланса между уровнем экспрессии металлопротеаз и их ТИМП [7, 8].
Полученные нами результаты о наличии положительной корреляции между уровнем ТИМП-1 и активностью цитолитических ферментов,
свидетельствуют о роли не только ТИМП-1 в синтезе фиброзной ткани, но и разрушении матрикса [1, 6].
Высокий показатель ТИМП-1 в сыворотке крови у больных ХГ С и наличие положительных корреляций его со стадией фиброза печени указывают на нарушение равновесия в реорганизации внеклеточного матрикса в сторону ингибиторов металлопротеаз. Нами результаты подтверждают данные литературы о том, что уровень ТИМП-1 в сыворотке крови может рассматриваться для подтверждения наличия фиброза печени, в том числе и при ХГ С [12].
Выводы. При хроническом гепатите С содержание в сыворотке крови ТОБ-1Р и ТИМП-1 значительно выше, чем у здоровых лиц.
Сывороточное содержание ТОБ-1Р и ТИМП-1 у больных хроническим гепатитом С зависит от степени активности воспаления и фиброза печени.
Полученные результаты
свидетельствуют об участии ТОБ-1Р и ТИМП-1 в иммунопатогенезе
хронического гепатита С.
1000
500
0
F2
F3
F4
Примечания
1. Павлов Ч.С. Фиброз печени при хронических вирусных гепатитах B и C: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. М., 2009. 46 с. 2. Alter M.J. The prevalence of hepatitis C virus infection in the United States, 1988 through 1994 / M.J. Alter, D. Kruszon-Moran, O.V. Nainan // N. Engl. J. Med. 1999. V. 341. P. 556-562. 3. Cholongitas E., Senzolo M., Standish R, et al. A systematic review of the quality of liver biopsy specimens // Am. J. Clin. Pathol. 2006. V. 125. P. 710-721. 4. Davis G.L., Albrigh J.E., Cook S.F. et al. Projecting future complications of chronic hepatitis C in the United States // Liver Transpl. 2003. V. 9. P. 331-333. 5. Dinarello C. Inflammatory Cytokine Antogonist. Philadelfhia, 1994. P. 1-20. 6. Friedman S.L. Molecular regulation of hepatic fibrosis, an integrated cellular response to tissue injure // J. Biol. Chem. 2000. V. 275.
P. 2247-2250. 7. Friedman S. The cellular basis hepatic fibrosis mechanism and treatment strategies // New Eng. J. 1993. V. 328. P. 1828-1835. 8. Gaga M.D., Pickering J.A., Arthur M.J., Benyon R.C. Human and rat hepatic stellate cells produce stem cell factor a possible mechanism for mast cell recruitment in liver fibrosis // J. Hepatol. 1999. V. 30(5). P. 850-858. 9. Kenneth J.S., Nicolas W.L., Lisa C. et al. Cytokines and the liver // J. Hepatology. 1997. V. 27. P. 1120-1132. 10. Kim W.R. The burden of hepatitis C in the United States / W.R. Kim // Hepatology. 2002. V. 36. P. 530-534. 11. Knittel T., Janneck T., Muller L. Transforming growth factor-1 beta-regulated gene expression of Ito cells // Hepatology. 1996. V. 24. N 2. P. 352-360. 12. Reif S. Matrix metalloproteinases 2 and 9 are marker of inflammation but not of the degree of fibrosis in Chronic Hepatitis C / S. Reif [et al.] // Digestion. 2005. V. 71. P. 124-130.
Notes
1. Pavlov Ch.S. Liver Fibrosis in chronic viral hepatitis B and C: Autoref. dis. Doctor of medical science, Moscow. 2009. 46 p. 2. Alter M.J. The prevalence of hepatitis C virus infection in the United States, 1988 through 1994 / Alter M.J., D. Kruszon-Moran, Nainan O.V. // N. Engl. J. Med. 1999. Vol. 341. P. 556-562. 3. Cholongitas E., Senzolo M., Standish R, et al. A systematic review of the quality of liver biopsy specimens // Am. J. Clin. Pathol. 2006. Vol. 125. P. 710-721. 4. Davis G.L., Albrigh J.E., Cook S.F. et al. Projecting future complications of chronic hepatitis C in the United States // Liver Transpl. 2003. Vol. 9. P. 331-333. 5. Dinarello C. Inflammatory Cytokine Antogonist. Philadelfhia, 1994. P. 1-20. 6. Friedman S.L., Molecular regulation of hepatic fibrosis, an integrated cellular response to tissue injure // J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275. P. 2247-2250. 7. Friedman S. The cellular basis hepatic fibrosis mechanism and treatment strategies // New Eng. J. 1993. Vol. 328. P. 1828-1835. 8. Gaga M.D., Pickering J.A., Arthur M.J., Benyon R.C. Human and rat hepatic stellate cells produce stem cell factor a possible mechanism for mast cell recruitment in liver fibrosis // J. Hepatol. 1999. Vol. 30(5). P. 850-858. 9. Kenneth J.S., Nicolas W.L., Lisa C. et al. Cytokines and the liver // J. Hepatology. 1997. Vol. 27. P. 1120-1132. 10. Kim W.R. The burden of hepatitis C in the United States / W.R. Kim // Hepatology. 2002. Vol. 36. P. 530-534. 11. Knittel T., Janneck T., L. Muller. Transforming growth factor-beta 1-regulated gene expression of Ito cells // Hepatology. 1996. Vol. 24, # 2. P. 352-360. 12. Reif S. Matrix metalloproteinases 2 and 9 are marker of inflammation but not of the degree of fibrosis in Chronic Hepatitis C / S. Reif [et al.] // Digestion. 2005. Vol. 71, 2. P. 124-130.
Primechanija
1. Pavlov Ch.S. Fibroz pecheni pri hronicheskih virusnyh gepatitah B i C: Avtoref. diss. ... d-ra med. nauk. M.. 2009. 46 s 2. Alter M.J. The prevalence of hepatitis C virus infection in the United States, 1988 through 1994 / M.J. Alter, D. Kruszon-Moran, O.V. Nainan // N. Engl. J. Med. 1999. V. 341. P. 556-562. 3. Cholongitas E., Senzolo M., Standish R, et al. A systematic review of the quality of liver biopsy specimens // Am. J. Clin. Pathol. 2006. V. 125. P. 710-721. 4. Davis G.L., Albrigh J.E., Cook S.F. et al. Projecting future complications of chronic hepatitis C in the United States // Liver Transpl. 2003. V. 9. P. 331-333. 5. Dinarello C. Inflammatory Cytokine Antogonist. Philadelfhia, 1994. P. 1-20. 6. Friedman S.L. Molecular regulation of hepatic fibrosis, an integrated cellular response to tissue injure // J. Biol. Chem. 2000. V. 275. P. 2247-2250. 7. Friedman S. The cellular basis hepatic fibrosis mechanism and treatment strategies // New Eng. J. 1993. V. 328. P. 1828-1835. 8. Gaga M.D., Pickering J.A., Arthur M.J., Benyon R.C. Human and rat hepatic stellate cells produce stem cell factor a possible mechanism for mast cell recruitment in liver fibrosis // J. Hepatol. 1999. V. 30 (5). P. 850-858. 9. Kenneth J.S., Nicolas W.L., Lisa C. et al. Cytokines and the liver // J. Hepatology. 1997. V. 27. P. 1120-1132. 10. Kim W. R. The burden of hepatitis C in the United States/ W.R. Kim // Hepatology. 2002. V. 36. P. 530-534. 11. Knittel T., Janneck T., Muller L. Transforming growth factor-1 beta-regulated gene expression of Ito cells // Hepatology. 1996. V. 24. N 2. P. 352-360. 12. Reif S. Matrix metalloproteinases 2 and 9 are marker of inflammation but not of the degree of fibrosis in Chronic Hepatitis C / S. Reif [et al.] // Digestion. 2005. V. 71. P. 124-130.
Статья поступила в редакцию 22.05.2013 г.
