CC BY
12Цель
Изучение диагностической значимости уровней иРА и иРАЯ в сыворотке крови и ткани опухоли у больных аденокарциномой желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) для создания дифференциально-диагностического алгоритма.
Материалы и методы
В исследование включено 90 пациентов в возрасте от 30 до 85 лет с аденокарциномой ЖКТ и 25 здоровых доноров. Концентрации иРА и иРАЯ в сыворотке определяли методом ИФА. Экспрессию иРА и иРАЯ в опухолевой и нормальной ткани оценивали методом ИГХ-окрашивания у 23 пациентов с наиболее высокими уровнями иРА и иРАЯ в сыворотке. Обработку ИГХ-изображений производили в ПО QuPath версии 0.3.0. по разработанному авторами алгоритму. Для оценки различий между группами с нормальным распределением использовали ^критерий Стьюдента, в иных случаях — тест Манна-Уитни.
Результаты
Показано достоверное повышение концентрации иРА в сыворотке онкобольных в среднем на 3,89 нг/ мл у мужчин и на 3,20 нг/мл у женщин по сравнению со здоровыми донорами (р <0,05). Достоверного
повышения концентрации uPAR в сыворотке онкобольных выявлено не было. Для определения уровня экспрессии uPA и uPAR в ткани нами разработан алгоритм анализа ИГХ-изображений: при помощи алгоритмов машинного обучения произведена тренировка программы, позволяющей отделить опухолевые клетки от стромы, установлены параметры для сепарации ткани от фона на изображении и задана детекция сигнала надпороговой интенсивности в канале DAB. Мы обнаружили, что уровень экспрессии uPA в ткани опухоли на 28% выше по сравнению с нормальной тканью у этих же пациентов, а уровень экспрессии uPAR — на 15% выше (р <0,05). При этом уровень экспрессии uPA и uPAR был достоверно выше в клетках опухоли, чем в окружающей их строме, — в 2,5 и 2,4 раза соответственно (р <0,05).
Выводы
Показана потенциальная диагностическая значимость сочетанной детекции uPA в сыворотке и в ткани первичного опухолевого узла у пациентов с аденокарциномой ЖКТ. В то же время уровень uPAR в крови онкопациентов, несмотря на повешение его экспрессии в ткани, не повышается.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект № 20-015-00186).
Список литературы
1. Duffy M . The urokinase plasminogen activator system: role in malignancy // Curr Pharm Des . Curr Pharm Des . 2004. Vol . 10 . № 1. P 39-49.
2 . Semina E . V. et al . Downregulation of uPAR promotes urokinase translocation into the nucleus and epithelial to mesenchymal transition in neuroblastoma // Journal of Cellular Physiology. John Wiley & Sons, Ltd, 2020 . Vol . 235 . № 9 . P. 6268-6286 .
Изучение возможностей флуоресцентного время-разрешенного макроимиджинга для интраоперационной
диагностики глиом
Авторы
Ширманова Марина Вадимовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Яшин Константин Сергеевич, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Комарова Анастасия Денисовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Южакова Диана Владимировна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Сачкова Дарья Александровна, [email protected], ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», Нижний Новгород
Киселева Елена Борисовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Лукина Мария Максимовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Щеславский Владислав Игоревич, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава РФ, Нижний Новгород
Загайнова Елена Вадимовна, [email protected], ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», Нижний Новгород
Ключевые слова:
глиома, интраоперационная диагностика, автофлуоресценция, оптический имиджинг
Актуальность
В случае глиом ишраоперационный мониторинг процесса удаления опухоли для точной идентификации границ новообразования имеет принципиальное значение, поскольку степень удаления опухоли напрямую коррелирует с продолжительностью жизни пациентов. Существующие методы интраопераци-онной диагностики для уточнения границ опухолей мозга — МРТ и флуоресцентная диагностика — недостаточно эффективны. Поэтому разработка новых, более эффективных подходов к диагностике опухолей мозга не теряет своей актуальности. Одно из перспективных решений — диагностика на основе собственной флуоресценции ткани, спектральные характеристики, интенсивность и время жизни которой зависят от биохимического состава и метаболических процессов клеток и тканей.
Цель
Оценить возможности флуоресцентного время-разрешенного имиджинга (FLIM) для дифференцирования глиом от нормальных тканей мозга по автофлуоресценции в синей области спектра.
Материалы и методы
Работа проводилась на ортотопических моделях глиом мышей и крыс и послеоперационных образцах глиобластом и белого вещества мозга пациентов. Метод FLIM был реализован на лазерном сканирующем микроскопе LSM880 (Carl Zeizz, Германия) с модулем временного разрешения (Becker&Hickl, Германия) и установке для FLIM-макроимиджинга (Becker&Hickl, Германия). Регистрация автофлуоресценции производилась в спектральном канале метаболического
кофактора НАД(Ф)Н: возб. 375 нм, рег. 460/50 нм для макро-FLIM, возб. 750 нм, рег. 450-500 нм для микроскопии. Все опухоли гистологически верифицированы.
Результаты
FLIM-макроимиджинг позволяет получать флуоресцентные изображения тканей без дополнительных красителей с поля зрения 2*2 см за 1-2 минуты, что делает его привлекательным инструментом для интраоперационной диагностики [1]. С помощью данного метода на трех интракраниальных моделях глиом крыс (глиобластома С6, глиобластома 101.8, анапластическая астроцитома 10-17-2) и двух моделях глиобластом у мышей nude (глиобластома U87 и пациент-специфичная глиобластома) выявлены отличия во временах жизни автофлуоресценции опухоли от белого вещества мозга. Глиобластома 101.8 и астроцитома 10-17-2, а также ~40% пациент-специфичных ксенографтов отличались также от коры мозга. Предварительные исследования на образцах тканей пациентов показали отличия глиобластомы от белого вещества без инфильтрации [2]. Опухолевая ткань характеризовалась более коротким временем жизни автофлуоресценции и повышенным вкладом короткой компоненты. Отличия подтверждены с помощью двухфотонной FLIM-микроскопии.
Выводы
Впервые продемонстрирован потенциал нового метода FLIM для интраоперационной идентификации глиом и их дифференцирования от нормальных тканей.
Работа поддержана грантом РНФ № 20-65-46018.
Список литературы
1. Shcheslavskiy V. I . et al . Fluorescence time-resolved microimaging // Opt Lett . 2018. 43 (13) . Р 3152-3155 . 2 . Lukina M . et al . Label-Free Macroscopic Fluorescence Lifetime Imaging of Brain Tumors, Frontiers in Oncology, 11, 2021. 1781. Работа поддержана грантом РНФ № 20-65-46018 .
Исследование переносимости медьсодержащих соединений и восстановителя для разработки модели терапии
опухолевого асцита
Авторы
Цымбал Сергей Алексеевич, [email protected], ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский университет ИТМО», Санкт-Петербург
Штиль Александр Альбертович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
N-ацетилцистеин, восстановление меди, активные формы кислорода, гибель клеток, экспериментальная терапия
