CC BY
13
ПРИМЕНЕНИЕ АЛЛОГЕННЫХ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПЕРЕЛОМОВ КОСТЕЙ ГОЛЕНИ У КОШЕК
Сергеев М.А., Амиров Д.Р.
Резюме
Целью настоящего исследования явилось опробование метода лечения переломов трубчатых костей с дефектом костной ткани у кошек с применением аллогенного остеопластического материала «Лиопласт» (ООО «Лиоселл», Россия) в качестве импланта для замещения дефекта костной ткани и носителя для мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток (ММСК).
В связи с возникшими после операции осложнениями нам не удалось оценить влияние алло-генных ММСК на процессы остеорегенерации у кошек.
APPLICATION OF ALLOGENOUS MULTIPOTENT MESENCHIMAL STEM CELLS IN TREATMENT OF BONE CATHEDRAL RELAXATION.
Sergeev M.A., Amirov D.R.
Summary
The purpose of this study was to test the method of treatment of fractures of tubular bones with bone defects in cats with the use of the alloplastic osteoplastic material "Lioplast" (LLC "Lyocell", Russia) as an implant to replace the defect of bone tissue and the carrier for multipotent mesenchymal stem cells (MMSC).
In connection with the complications that arose in the postoperative period, we were unable to assess the effect of allogenic MMSs on the processes of osteoregeneration in cats.
УДК 619:579.834.115.
ИЗУЧЕНИЕ ОСНОВНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ЭШИРИХИОЗА, ПСЕВДОМОНОЗА И ЭНТЕРОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ ПОРОСЯТ
Скориков А.В. - к.б.н., зам. директора; Федоров Ю.Е. - к.в.н., н.с. Краснодарский НИВИ
Ключевые слова: эшерихиоз, псевдомоноз, энтерококковая инфекция поросят, вакцина, стерильность, стабильность, острая и хроническая токсичность, мыши, кролики, свиньи.
Key words: escherichiosis, pseudomonosis, enterotococcal infection of piglets, vaccine, sterility, stability, acute and chronic toxicity, mice, rabbits, pigs.
Из инфекционной патологии болезней свиней значительное место занимают возбудители эшерихиоза, псевдомоноза и энтерок-ковой инфекции [4]. Особое место в инфекционной патологии принадлежит псевдомонозу.
Псевдомоноз в значительной степени является сдерживающим фактором развития животноводства и свиноводства, приносит значительный экономический ущерб данной отрасли, вызывая заболевания родополовых органов у свиноматок, хряков-производителей, а также значительную смертность у поросят сосунов [1, 3].
Микроорганизм Pseudomanas aeruginosa (синегнойная палочка) вызывающий данное заболевание за счет значительного количества
факторов вирулентности (жгутиковый, адгезии, микополисахарид, экзотоксин, гемолизин, пиоцианин, протеазы и др.) [6], значительным распространением во внешней среде и сохранением вирулентности при росте на питательных средах, антибиотикорезистент-ности являются значительным этиологическим фактором заболеваемости животных и человека [2, 5].
Одной из основных проблем профилактики заболеваний бактериальной этиологии является разработка средств их специфической профилактики.
Целью работы являлось изучение основных показателей инактивированной вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и эн-
терококковой инфекции поросят.
Материалы и методы. Нами были проведены исследования инактивированной вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и эн-терококковой инфекции поросят разработанной при нашем участии на ФКП «Армавирская биофабрика».
Исследования на стабильность вакцины проводились в соответствии с ГОСТ 28085089 «Препараты биологические. Методы бактериологического контроля смертности». На острую и хроническую токсичность на лабораторных животных проводились в лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» с участием сотрудников биофабрики и ГБУ «Краснодарская краевая ветеринарная лаборатория».
Результаты исследований. При изучении стабильности вакцины против эшерихио-за, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) серии №№ 1-3 в условиях хранения в соответствующих температурных режимах в течение наблюдения, вакцина сохраняет свои показатели.
При проверке на стерильность в специальных боксах лаборатории контроля качества биофабрики с соблюдение правил асептики из 5 флаконов серии №№ 1 -3 произвели посевы на МПА, агар Сабуро, МПБ и МППБ под вазелиновым маслом в пробирки, по 2 пробирки каждой среды и во флаконы МПБ и МППБ под вазелиновым маслом. Через семь суток из первичных посевов во флаконы произвели пересев на аналогичные среды. Посевы на среде Сабуро выдерживали в термостатах при температуре 240 С, на средах МПА, МПБ, МППБ под вазелиновым маслом, при температуре 370 С в течение 14 суток, пересевы в течение 7 суток.
После окончания термостатирования признаков роста микроорганизмов на пита-ельных средах обнаружено не было. Опытно-
промышленные партии вакцины являлись стерильными.
В лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» было проведено исследование вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) на острую токсичность. В опытах использовали 40 белых мышей живой массой 16-18 г, которых разделили на 4 группы по 10 голов в каждой, а также на 20 кроликах породы шиншилла живой массой 2,5-3 кг, которых также разделили на 4 группы по 5 голов в каждой. Мышам вакцину вводили подкожно в области спины в следующих дозах (мл) - 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0. Кроликам вакцину вводили внутримышечно в области бедра в дозах (мл) - 1,0; 5,0; 10,0 и 20,0. За клиническим состоянием животных производили ежедневно наблюдение в течение 10 суток.
Результаты опыта показали (Табл. 1 и 2), что ни в одной из опытных групп гибели лабораторных животных не было. Однако при введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл, а кроликам 20,0 мл у животных развивалось заметное угнетение с полной потерей аппетита, а у отдельных особей отмечали диарею. На месте введения образовывалась припухлость, а спустя 48 ч появлялось уплотнение подлежащих тканей без образования нагноения и некроза. Общие признаки токсикоза исчезали через 24 ч, а уплотнения рассасывались через 7-8 дней.
При введении мышам вакцины в дозе от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия препарата не наблюдали, все у всех подопытных животных габитус и поведение были физиологичными, припухлости, возникающие после инокуляции жидкости, рассасывались в течение 24 ч без признаков воспаления.
Доза, мл/гол Количество животных Пало Выжило % павших
0,125 10 0 10 0
0,25 10 0 10 0
0,5 10 0 10 0
1,0 10 0 10 0
Таблица 1 - Результаты определения острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомо-ноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при подкожном введении белым
мышам
Таблица 2 - Результаты определения острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при внутримышечном введении кроликам
Доза, мл/гол Количество животных Пало Выжило % павших
1,0 5 0 5 0
5,0 5 0 5 0
10,0 5 0 5 0
20,0 5 0 5 0
Гибели лабораторных животных даже после максимально допустимых объемов, величину и параметры острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, эн-терококковой инфекции поросят (инактиви-рованной) определить не удалось, следовательно исследуемый биопрепарат относится к группе нетоксичных веществ.
В лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» было проведено исследование вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) на хроническую токсичность. В опытах использовали 40 белых мышей живой массой 16-18 г, которых разделили на 4 группы по 10 гол в каждой, а также на 20 кроликах породы шиншилла живой массой 2,5-3 кг, которых также разделили на 4 группы по 5 гол в каждой. Мышам вакцину вводили пятикратно с интервалом в десять дней подкожно в области спины в следующих дозах (мл) - 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0. Кроликам вакцину вводили пятикратно, с интервалом в десять дней внутримышечно в
области бедра в дозах (мл) -1,0; 5,0; 10,0 и 20,0. За клиническим состоянием животных производили ежедневно наблюдение в течение 10 суток.
Результаты опыта показали (табл. 3 и 4), что ни в одной из опытных групп гибели лабораторных животных не было. Однако при 25 введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл, а кроликам 20,0 мл у животных развивалось заметное угнетение с полной потерей аппетита, а у отдельных особей отмечали диарею. На месте введения образовывались припухлость и через 48 ч уплотнение подлежащих тканей без образования нагноения и некроза. Общие признаки токсикоза исчезали через 24 ч, а уплотнения рассасывались через 7-8 дней.
При пятикратном введении мышам вакцины в дозе от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия препарата не наблюдали, все у всех подопытных животных габитус и поведение были физиологичными, припухлости, возникающие после инокуляции жидкости, рассасывались в течение 24 ч без признаков воспаления.
Таблица 3 - Результаты определения хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при подкожном введении
белым мышам
Доза, мл/гол Количество животных Пало Выжило % павших
0,125 10 0 10 0
0,25 10 0 10 0
0,5 10 0 10 0
1,0 10 0 10 0
Таблица 4 - Результаты определения хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при внутримышечном введении кроликам
Доза, мл/гол Количество животных Пало Выжило % павших
1,0 5 0 5 0
5,0 5 0 5 0
10,0 5 0 5 0
20,0 5 0 5 0
Гибели лабораторных животных после максимально допустимых объемов введения
нет, величина и параметры хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псев-домоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) проявились незначительно, следовательно исследуемый биопрепарат нетоксичен.
Обсуждение результатов. Анализируя результаты проведенных исследований можно сделать вывод, что опытно-промышленные партии вакцин против эшерихиоза, псевдомо-ноза и энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) стерильны и сохраняют стабильные свойства.
При исследовании на острую токсичность при введении вакцины мышам в дозах от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия не наблюдалось. При введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл и кроликам 20,0 мл у животных отмечались признаки токсикоза и уплотнения тканей без некроза, но они приходили в норму через 7-8 дней. Аналогичные результаты были получены при исследовании на хроническую токсичность при 5-кратном введении с интервалом в 10 дней.
Заключение. Таким образом, проведенные исследования подтвердили стерильность, стабильность и отсутствие острой и хронической токсичности опытно-
промышленных партий вакцины, что позволяет рекомендовать использование вакцины для производственных исследований на свиноматках, поросятах сосунах и хряках-производителях.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Больных, В.Т. Псевдомонозы живот-
ных и их профилактика / В.Т Больных, Е.А. Кирьянов, Н.В. Больных // Под ред. Е.А. Кирьянова. - Владивосток. - Дальневосточное книжн. издат. - 1987. - С. 37-43.
2. Марченко, Т.В. Биологические свойства Pseudomonas aeruginosa выделенной от животных, из кормов и объектов внешней среды в Краснодарском крае: автореферат дис. ... кандидата ветеринарных наук: 16.00.03 / Кубан. гос. аграр. ун-т. - Краснодар, 2006. -25 с.
3. Никогосян, А.В. Патоморфологиче-ские изменения в эндометрии у свиноматок при искусственном осеменении спермой, кон-таминированной Pseudomonas aeruginosa / Профилактика и лечение акушерско-гинеколог. Патологии с.-х. животных.- М., 1990.- С. 82-84.
4. Щербаков, А.В. Этиологическая структура инфекционных болезней свиней в животноводческих хозяйствах России / А.В.Щербаков, В.Ф.Ковалишин, А.С.Яковлев, Е.В.Шабаева // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных: Матер. межд. науч. конф. - Владимир: ИПП "Велес", 2003. -С. 146-150.
5. Jazani, N.H., Babazadeh H., Sabahi Z., Zartoshti M.. The evaluation of antibiotic resistance to cefepime in hospital isolates of Pseudomonas aeruginosa. / N.H. Jazani, H. Babazadeh, Z. Sabahi, M. Zartoshti // J Med Bi-omed Sci. - 2010. - №7. - P. 17-21.
6. Filloux, A. Protein Secretion Systems in Pseudomonas aeruginosa: An Essay on Diversity, Evolution, and Function / A. Filloux // Front microbiol. - 2011. - v.2. - P. 155.
ИЗУЧЕНИЕ ОСНОВНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ЭШИРИХИОЗА, ПСЕВДОМОНОЗА И ЭНТЕРОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ ПОРОСЯТ
Скориков А.В., Федоров Ю.Е.
Резюме
В результате проведенных исследований установлено, что опытно-промышленные партии вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции поросят (инактивирован-ной) стерильны и сохраняют стабильные свойства. При исследовании на острую токсичность при введении вакцины мышам и кроликам побочного действия не наблюдалось. Аналогичные результаты были получены при исследовании на хроническую токсичность. Таким образом, проведенные исследования подтвердили стерильность, стабильность, отсутствие острой и хронической токсичности опытно-промышленных партий вакцины, что позволяет рекомендовать их использование для производственных испытаний.
