CC BY
7изучение иммунного статуса у рабочих сурьмяного производства с использованием моноклональных антител
А.М. Умуралиева Кыргызской Государственной Медицинской Академии
Моноклоналдык антителанын тестин жардамы менен сурманы иштеп чыгаруучу ишканадагы
жумушчулардын иммунитетин изилдоо
Умуралиева А.М.
Корутунду. Кадамжай поселогунун тургундарынын иммунитеттери темен экендиги аныкталып, алардын сурьма чыгаруучу комбинатына ишке киргенде сурьма менен уулануга эки эсеге кеп дуушар болушканы аныкталып, иммунитеттин иштеши ез нугунан чыкты. Иммунитеттин жетишсиз иштешинин, бул шартка ынгай-лашып иштегенге аракет кылганы байкалган - 1-чи группага киргендер болсо, 2 -чи группага - иммунитет эк теменку децгелде иштеп баштаган. Жогорку алынган кортундуларды моноклональдык антителаны изилдее менен, иммунитеттин бардык системаларынын депрессияга дуушар болушун дагы бир жолу аныкталды.
Study of the immune status of antimony workers using monoclonal antibodies
Umuralieva A.M.
Kyrgyz State Medical academy
Abstract. Mean immune parameters in residents of the antimony biogeochemical region are higher than in the population of the city Bishkek indicating toxicological load exerted on residents of the village Kadamzhai. This load is increased in residents of the region who start working at the antimony production plant and their immune system becomes destabilized. Immunodeficiency risk group 1 has adaptive disruption of the immune system. Immunodeficiency risk group 2 undergoes immunity stabilization at a new, qualitatively lower level of functioning. Results of studies using monoclonal antibodies supported these consequences. Immunocompetent cells of all the 3 components of the immune system were significantly decreased reflecting an immunodepressive effect of antimony.
Ведущую роль в регуляции иммунных процессов играют Т-лимфоциты. Многообразие выполняемых ими задач позволяет выделить среди Т-клеток иммунорегуляторные субпопуляции направленного действия: Т-супрессоры, Т-хслпе-ры. Клетки-регуляторы обеспечивают гомеоста-тический контроль функционирования иммунной системы, т.е. адекватную активацию или супрессию клеточного и гуморального иммунитета (1). Оказалось, что во многих случаях количественная характеристика общей популяции Т- и В-лимфоцитов не всегда отражает степень иммунопатологических нарушений в организме (2, 3). В связи с этим представляет интерес изучение отдельных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, выполняющих различные функции.
цель настоящей работы - исследование субпопуляций Т-лимфоцитов у рабочих сурьмяного производства, выявление его зависимости от профессиональной принадлежности и стажа работы во вредном производстве в тестах с использованием моноклональных антител (МКАТ).
Материал и методы
Обследовано 95 рабочих металлургического завода со стажем более 5-ти лет работы, вошедшие в группы риска 1 и 2 по иммунологической
недостаточности (ИН) и 15 человек из контрольной зоны. Проведен сравнительный анализ иммунного статуса у населения и рабочих основных профессий. Используя эритроциты барана, с суспензией мононуклеарных клеток проводили реакцию Е-розеткообразования. Выделяли тео-филлинчувствительные (Е-тфч РОК) и теофил-линрезистентные (Е-тфр РОК) Т-лимфоциты по А. Schorе е1 а1. (1978). Оценка функционального состояния Т-лимфоцитов основывалась на методах учета синтеза реакции бласттрансфор-мации лейкоцитов (РБТЛ). Одновременно определялся субпопуляционный состав лимфоцитов с помощью моноклональных антител (МКАТ) по методу, рекомендованному НПО "Медбиоспектр" (Москва).
результаты и обсуждение
Как видно из табл. 1., у населения п.г.т. Кадамжай содержание теофиллинрезистентных Е-РОК - были повышенным. При этом имму-норегуляторный индекс находились на нижней границе нормы. Наряду с этим установлена активация гуморального иммунитета на этапе синтеза иммуноглобулинов ^ - 21,71 ± 0,05 г/л, 1дА - 1,66± 0,07 г/л и 1дМ - 1,26 ± 0,07 г/л, что свидетельствует, по - видимому о постоян-
МЕДИЦИНА
ежемесячный научно-практическии медицинским журнал
ной токсическом нагрузке сурьмы на жителем п.г.т. Кадамжай
У практически здоровых рабочих установлена угнетение Т-клеточного звена иммунитета, где общее количество Т-лимфоцитов было снижено до 42,87 ±3,9% ( в контрольной группе - 47,72 ± 1,01%). Количество теофиллинчувствительных розеткообразующих лимфоцитов было повышено до 18,24 ± 1,06% по сравнению с контролем (12,21 ± 0,58%). У рабочих определяется - лим-фоцитоз относительной (62,31 ± 8,87%). Содержание нейтрофилов постепенно снижается, но поглотительная активность пока сохраняется. Относительное и абсолютное содержание В-лимфоцитов находится в пределах нормы. Уровень сывороточных иммуноглобулинов М и А повышается (1,38 ± 0,08 г/л и 1,35 ± 0,057 г/л соответственно).
Более выраженные изменения Т-клеточного иммунитета установлены у рабочих группа риска - 1 по иммунологической недостаточности (ИН): количество общих Т-лимфоцитов у них состав-
ляло 39,6 ± 0,58% , теофиллинрезистентных Е - РОК - 30,42 ± 1,25 5 (Р < 0,05), иммунорегу-ляторный индекс находится на нижней границе нормы - 2,3 и абсолютное и относительное содержание В-лимфоцитов, уровень 1дМ, особенно 1дА постепенно снижается, при этом иммуноглобулинов ^ стабилизируется на высоком уровне.
При исследовании крови рабочих группа риска 2 по ИН установлена достоверная снижения Т- и В-лимфоцитов, у них же наблюдалось дисбаланс сывороточных иммуноглобулинов за счет снижения концентрации 1дМ и 1д А, фагоцитарная активность клеток также снижается до 50,6 ±2,65% по сравнению с контролем - 64,3 ± 1,01%. Относительная Т-лимфоцитопения была обусловлена развитием субпопуляционного дисбаланса Т-лимфоцитов за счет достоверного снижения Етфр - РОК (23,2 ± 1,85%) и повышения Етфч РОК (19,92 ±1,19%) в периферической крови, это проявлялось снижением иммунорегу-ляторного индекса - до 1,16.
Таблица 1.
показатели иммунитета у различных групп населения
показатели Контрольная группа рабочие К с К
население г.Бишкека население п.г.т. Кадамжай практически здоровые группа риска I ин группа риска II ин
Т-лимфоциты,% 47,72±1,01 49,77± 0,74 42,87± 3,88 39,58 ±0,58 39,94± 1,38
Т-лимфоциты, тыс/мкл 1144,55± 44,16 1098,29± 30,65 1233,31± 28,82 911,52± 32,30 1072,84± 85,35
Е-РОЛ теоф. резист,% 40,97±0,88 33,63±1,10 38,00±1,59 30,42±1,25 23,18±1,84
Е-РОЛ теоф. чувствит,% 12,21±0,58 16,06±0,71 18,24±1,06 13,30±0,41 19,92±1,19
примечание: в группу 1 - вошло население г.Бишкека, в группу 2 - население п.г.т. Кадамжай, в группу 3 - практически здоровые рабочие комбината, в группу 4 - рабочие, вошедшие в первичную группу риска по ИН, в группу 5 - рабочие из группы повышенного риска по ИН.
Снижение содержания Т-лимфоцитов сопровождалось относительно низкой способностью этих клеток трансформироваться в бласты под влиянием ФГА. Особенно низким был этот показатель у аппаратчиков, дробильщиков, шихтов-щиков (1,2+0,02). Индекс на ФГА был понижен у 73,0% обследованных рабочих. К тому же но
мере увеличения стажа работы (10 лет и выше) снижалась способность лимфоцитов к бласт-трансформации. Изменения функционального состояния рецепторного аппарата Т-лимфоци-тов отражали перестройку иммунной системы организма в ответ на хроническое поступление сурьмы в организм в малых дозах (табл.2).
Таблица 2.
Функциональная активность т-лимфоцитов у рабочих металлургического завода в зависимости
от стажа работы (М±m)
Группы стаж работы (лет) рбтл
без митогена стимуляция ФГА
Контроль 1.5±0.1
I 0-1 1.02 ± 0,02
II 1-4 2.48 ± 0.07
III 5-9 2.07 ± 0.5
IV 10- 14 1.24 ± 0.12
V 15 лет и более 1.48 ± 0.4
Наглядным подтверждением этого явилось изучение субпопуляций Т-лимфоцитов у рабочих с использованием моноклональных антител. Известно, что моноклональные антитела наиболее чувствительны и адекватно отражают реакцию иммунной системы на влияние ксенобиотиков. Как видно из табл. 3, у рабочих после 10 лет работы на производстве сурьмы появляются признаки депрессии системы иммунитета в виде уменьшения количества клеток, несущих CD3-, СD4-рецепторы (Т-лимфоциты,
Из таблице 3 видно, что у жителей п. Кадам-жай по сравнению с г.Бишкек было достоверно низким содержание клеток, несущих, СД-4, СД-3, что свидетельствует о токсическом действии сурьмы. По количеству иммунокомпетентных клеток между рабочими основных и вспомогательных профессий существенных различий не было. Однако по сравнению с населением пос. Кадамжай и, тем более, г. Бишкек эти показатели были значительно ниже при статистической достоверности по большинству исследованных параметров. Это свидетельствует о поступлении сурьмы в организм работников как основных, так и вспомогательных профессий, и ее токсическом влиянии.
При сравнительном анализе показателей иммунитета у представителей разных профессий сурьмяного производства видно, что особых различий в значении исследованных параметров между ними не наблюдается. Показатели иммунитета у подземных рабочих по сравнению с таковым у жителей п.Кадамжай существенно не отличается, что свидетельствует об одинаковой сурьмяной нагрузке, у обеих категорий обследованных. В целом наблюдается та же картина, что описывалась выше,
Таким образом, средние показатели иммунитета у жителей сурьмяного биогеохимического региона в целом выше, чем у населения
Т-хелперы). При дальнейшем увеличении стажа работы отмечалось снижение исследованных субпопуляций Т-лимфоцитов, причем эти изменения становились в большинстве своем достоверными по сравнению с контрольной группой.
Следовательно, имеются все основания считать, что у работающих в производстве сурьмы формируется выраженный дисбаланс регуля-торных субпопуляций Т-лимфоцитов и изменение их функциональной активности.
г.Бишкек, что свидетельствует о токсической нагрузке сурьмы на жителей п Кадамжай. У лиц, проживающих в сурьмяном регионе, при поступлении на работу на комбинат эта нагрузка возрастает и иммунная система у них дестабилизируется. В группе риска 1 по ИН - начинает происходит срыв адаптационной возможностей иммунной системы. В группе риска 2 по ИН иммунная система выходит на новый, качественно более низкий уровень стабилизации.
Подтверждением сказанному явились результаты, полученные при исследовании моно-клональных антител. Выявленные существенно низкие значения всех трех звеньев иммуноком-петентных клеток, свидетельствуют о депрессивном влиянии сурьмы.
литература
1. Клиническая оценка иммунорегуляторных субпопу-ляцин лимфоцитов (Т-супрессоры, Т-помощники) / Р.В. Петров, Л.В. Ковальчук, А.С. Павлюк и соавт. // Иммунология. -1989.-N5.-С.67-70
2. Шаршенова А.А., Омурзакова К.С., Саипбаев Б.С. и др. // Актуальные аспекты экологического мониторинга ртутно-сурьмяного биогеохимического региона. Бишкек. - 2000. -С. 93-98.
3. Акопова В.А., Акулов В.Д., Алымбаева Д.Б. и др. // Экология человека в сурьмяном биогеохимическомрегионе.-Фрунзе. 1999. - с. 105 - 110.
Таблица 3.
показатели иммунитета у рабочих основных профессий сурьмяного производства с помощью
моноклональных антител
показатели Контроль население г.Бишкек население п.Кадамжай плавиль-шики Anna-ратчики другие основ. проф. подзем-ные рабочие
Т-клетки 56,0 ±4,0 53,0 ±3,0 30,0 ±З,0 Х 27,0±3,0 Х 27,0±3,0Х 30,0 ±4,0 Х
Т-хелперы 39,0 ±4,0 24,0 ±3,0Х 16,0 ±2,0Х 18,0 ±3,0Х 17,0±3,0Х 26,0 ± 3,0 Х
Т-супрессоры 15,0 ±3,0 17,0 ±2,0 9,0 ±3,0 12,0 ±2,0 11,0±3,0 16,0 ±5,0
В-клетки 30,0 ± 4,0 17,0 ±3,0Х 23,0 ±3,0 Х 17,0 ± 2,0 Х 14,0 ±2,0 Х 21,0 ±2,0 Х
примечание: х - изменения достоверны но сравнению с контролем (Р<0.05)
